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Brazilian Journal of Microbiology, Volume: 37, Número: 2, Publicado: 2006
  • Surtos associados a infecções sanguíneas por Staphylococcus aureus e Staphylococcus spp coagulase-negativa em neonatos prematuros em um hospital universitário do Brasil Medical Microbiology

    Brito, Denise Von Dolinger de; Oliveira, Elias Jose; Darini, Ana Lúcia da Costa; Abdallah, Vânia Olivetti Steffen; Gontijo Filho, Paulo P.

    Resumo em Português:

    Staphylococcus aureus e Estafilococos coagulase-negativa (ECN) estão entre os patógenos hospitalares mais importantes em pacientes de unidades de terapia intensiva neonatal, principalmente em infecções da corrente sanguínea. O principal objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de infecções hospitalares por estes microrganismos usando dois sistemas de vigilância (laboratorial e "National Nosocomial Infection Surveillance" - NNIS) e determinar os fatores de risco mais importantes durante o período de dois anos (2001-2002). Dois surtos por ambos S. aureus suscetível a meticilina (1.5%) e ECN resistente à meticilina (1.0%) foram observados, de janeiro a fevereiro/02 e agosto a setembro/02. Taxas de incidência endêmica de 3.77% e 5.16% para S.aureus e ECN foram detectadas respectivamente. Fatores de risco incluíram idade <=7 dias, hospitalização > ou = 7 dias e utilização de cateter vascular central (CVC) de polietileno através de dissecação de veia (flebotomia), mas, nenhum desses fatores independentes foram confirmados pela análise multivariada. Por outro lado, ECN resistente à oxacilina prevaleceu (66.0%) nos episódios epidêmicos. Análise molecular através de gel de eletroforese em campo pulsátil mostrou a natureza policlonal das amostras de S. aureus. Em conclusão, nós identificamos dois surtos de etiologia mista por S. aureus suscetível à meticilina e ECN resistente à meticilina associados à falta de material adequado (cateter vascular central) para neonatos, relacionados a procedimento invasivo. Os dois surtos foram controlados com a substituição de CVC de polietileno pelo cateter central de inserção periférica.

    Resumo em Inglês:

    Staphylococcus aureus and coagulase-negative staphylococci (CoNS) are among the most important nosocomial pathogens in patients from neonatal intensive care units, mainly in bloodstream infections. The main objective of this study is to determine the occurrence of nosocomial infections by these microorganisms using two surveillance systems (Laboratorial Surveillance and National Nosocomial Infection Surveillance System) and to determine the most important risk factors during a two-year period (2001-2002). Two outbreaks by both methicillin susceptible S. aureus (MSSA) (1.5%) and methicillin resistant CoNS (MRCoNS) (1.0%) were observed, from January to February/02 and August to September/02. Endemic incidence rates of 3.77% and 5.16% of S. aureus and CoNS, respectively were detected. Risk factors included age <=7 days, hospitalization > or = 7 days and utilization of polietilene central vascular catheter (CVC) through vein dissection (phlebotomy), but none of these independent factors were confirmed by the multivariate analysis. However, oxacillin resistant CoNS prevailed (66.0%) in the epidemic episodes. Molecular analysis by pulsed field gel electrophoresis showed the polyclonal nature of S. aureus isolates. In conclusion, two outbreaks were identified of mixed etiology by MSSA and MRCoNS associated to the lack of an adequate material (central venous catheter) for neonates, related invasive procedure. The outbreaks were controlled with the substitution of polietilene CVC for peripherally inserted central catheter.
  • Efeito sinérgico da própolis e antibióticos sobre Salmonella Typhi Medical Microbiology

    Orsi, Ricardo de Oliveira; Sforcin, José Maurício; Funari, Silvia Regina Cunha; Fernandes Junior, Ary; Bankova, Vassya

    Resumo em Português:

    O objetivo do presente trabalho foi investigar um possível efeito sinérgico entre extrato alcoólico de própolis do Brasil e Bulgária com alguns antibióticos (Amoxilina, Ampicilina e Cefalexina) utilizados contra Salmonella Typhi. Própolis do Brasil e Bulgária mostraram uma atividade antibacteriana, embora a amostra da Bulgária tenha sido mais eficiente. Ambas as amostras apresentaram um efeito sinérgico com os antibióticos estudados. Pode-se concluir que as amostras de própolis possuem atividade antibacteriana, bem como apresentam efeito sinérgico com antibióticos utilizados contra Salmonella Typhi.

    Resumo em Inglês:

    The goal of this work was to investigate a possible synergistic effect between ethanolic extracts of propolis from Brazil and Bulgaria and some antibiotics (Amoxicillin, Ampicillin and Cefalexin) against Salmonella Typhi. Brazilian and Bulgarian propolis showed an antibacterial action, but the sample from Bulgaria was shown to be more efficient. Both samples showed a similar synergistic effect with these antibiotics. One may conclude that the propolis samples show an important antibacterial action, as well as a synergistic effect with antibiotics against Salmonella Typhi.
  • Avaliação do uso e reuso de tecido de algodão como embalagem de artigos médico-hospitalares Medical Microbiology

    Rodrigues, Edna; Levin, Anna S.; Sinto, Sumiko Ikura; Mendes, Caio Figueiredo; Barbosa, Benedito; Graziano, Kazuko Uchikawa

    Resumo em Português:

    O objetivo deste estudo foi verificar a efetividade do tecido de ligamento sarja 2 x 1, usado na confecção de campos duplos de algodão para a embalagem de artigos médico-hospitalares como barreira microbiana eficaz, enquanto novos e após múltiplas lavagens e autoclavações e correlacionar a quebra do poder de barreira microbiana com as alterações das características físicas do tecido. Foram utilizados métodos de testes padronizados tanto para a avaliação das características físicas para a determinação da gramatura, resistência a ruptura, resistência a tração e alongamento quanto para as microbiológicas. Os resultados microbiológicos demonstraram a efetividade da barreira microbiana da embalagem em estudo enquanto novos e, na determinação do número máximo de reprocessamentos, indicaram o número limite de 65. Quanto às alterações das características físicas do tecido reprocessado, a diminuição da gramatura foi o acontecimento que sustentou a quebra da barreira microbiana. O momento da alteração constatada nas medidas físicas de estouro, tração e alongamento no urdume e na trama dos tecidos reprocessados não coincidiu com o da quebra de barreira microbiana. A presente investigação sustenta a segurança do uso do tecido de algodão como embalagem de artigos médico hospitalares na esterilização por calor úmido. O número de reusos deverá ser controlado, não excedendo o de 65 vezes.

    Resumo em Inglês:

    The objective of this study was to verify the efficacy of cotton fabric, made of serge bonding 2 x 1, as microbial barrier, when new and after multiple laundering and steam sterilization procedures. The power of the microbial barrier was correlated with physical characteristics of the fabric, using standard test methods for evaluation of weight, traction, stretching tearing resistance and microbiological characteristics. The microbiological results evidenced that the microbial barrier was effective when the wrapping material was new or went through a maximum of new 65 reprocessing procedures. As for the alterations in the physical characteristics of the reprocessed material, the decrease in weight seemed to be the event responsible for microbial barrier breaking. The timing of detected alterations in bursting, traction and stretching in the wrap and the reprocessed fabrics did not coincide with the moment of bacterial barrier breaking. The present investigation corroborates that the use double cotton fabric, for wrapping medical and hospital items for steam sterilization, is safe. Re-use number must be controlled, not exceeding 65 times.
  • Emergência de enterococos resistentes à vancomicina com fenótipo VanB e genótipo vanA em hospital brasileiro Medical Microbiology

    Zanella, Rosemeire Cobo; Lima, Marisa de Jesus Castro; Tegani, Luciana Soares; Hitomi, Adriana; Brandileone, Maria Cristina de Cunto; Palazzo, Izabel Cristina V.; Darini, Ana Lúcia da Costa

    Resumo em Português:

    No Brasil, enterococos resistente à vancomicina (VRE) têm sido descritos como patógenos hospitalares, desde 1998. Durante um monitoramento de VRE em um hospital, foram detectadas duas cepas de Enterococcus faecalis com genótipo vanA, e sensibilidade à teicoplanina. Este é o primeiro relato do isolamento de enterococo fenótipo VanB e genótipo vanA de amostra clínica no Brasil.

    Resumo em Inglês:

    In Brazil, vancomycin-resistant enterococci (VRE) have been reported as nosocomial pathogens since 1998. Recently, in a VRE surveillance in a hospital, we detected two Enterococcus faecalis isolates with vanA genotype and susceptible to teicoplanin. This is the first report of VanB phenotype-vanA genotype enterococci isolated from humans in Brazil.
  • Caracterização biológica e molecular de linhagens de Streptococcus crista isoladas do biofilme dental de seres humanos através de iniciadores arbitrários - PCR (AP-PCR) Medical Microbiology

    Angelini, Michelle; Silveira, Wanderley Dias da; Campos, Tatiana Amabile de; Cai, Silvana; Castro, Antonio Fernando Pestana de

    Resumo em Português:

    Streptococcus spp são importantes componentes do biofilme dental sendo Streptococus crista considerado um interessante modelo de interações bacterianas que nele ocorrem. No presente trabalho linhagens de S. crista, foram isoladas do biofilme dental de indivíduos brasileiros, e estudadas em relação a suas características biológicas e ao seu perfil molecular através da técnica do AP-PCR, usando-se os iniciadores RR2, 434, OPR2, OPR8 e OPR13. Os resultados nos permitiram construir um dendrograma de similaridade. A análise do dendrograma de similaridade permitiu a separação das linhagens estudadas em grupos de similaridade. Todos os isolados apresentaram tufo de fibrilas, quando estudados por Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET). Estes isolados foram capazes de se ligar à amilase salivar e de se aderir a células epiteliais bucais. Algumas linhagens, que apresentam tufo de fibrilas e aderência positiva, não foram capazes de coagregar com a Fusobacterium nucleatum, sugerindo que diferentes grupos de adesinas estão presentes nestas amostras.

    Resumo em Inglês:

    Streptococcus ssp are important components of the dental biofilm and Streptococcus crista is considered to be an interesting model of bacterial interactions taking place in this biofilm. In the present work, S. crista strains were isolated from the dental biofilm of Brazilian individuals and studied with respect to their biological characteristics and their molecular profile by means of AP-PCR techniques, using the RR2, 434, OPR2, OPR8, and OPR13 primers. Results allowed us to build a similarity dendrogram. Analysis of the similarity dendrogram allowed the separation of the studied strains into similarity groups. All isolates presented fibril tufts by Transmission Electron Microscopy (TEM). These isolates were able to bind to salivary amylase and to adhere to mouth epithelial cells. Some strains displaying fibril tufts and positive adherence were not able to co-aggregate with Fusobacterium nucleatum, suggesting that different adhesin groups are present in these strains.
  • Análise de genes da leucotoxina de Actinobacillus actinomycetemcomitans em brasileiros com periodontite agressiva Medical Microbiology

    Rosalem Junior, Wilson; Souza, Rodrigo Carvalho de; Andrade, Arnaldo Feitosa Braga de; Colombo, Ana Paula Vieira

    Resumo em Português:

    Actinobacillus actinomycetemcomitans (Aa) tem sido associado com diferentes formas de doenças periodontais, mas tal espécie é considerada o principal agente etiológico da doença periodontal agressiva. Algumas cepas de Aa apresentam uma deleção de 530 pb na região promotora do operon do gene da leucotoxina, produzindo assim maiores quantidades de leucotoxina. Tal fato pode ter um importante papel na patogênese das doenças periodontais. A proposta do presente estudo foi determinar a prevalência do Aa e a ocorrência da deleção genética da leucotoxina em pacientes com periodontite agressiva generalizada (PAG) de uma amostra da população brasileira. Trinta indivíduos com saúde periodontal e 29 pacientes com PAG participaram do estudo. Profundidade de bolsa à sondagem (PBS), nível clínico de inserção (NCI), presença de placa supragengival (PL) e sangramento à sondagem (SAS) foram avaliados em 6 sítios/dente de todos os pacientes. Amostras de saliva foram coletadas para isolamento do DNA bacteriano. A detecção do Aa e a ocorrência da deleção genética foram realizadas através da técnica de PCR diretamente nas amostras. Diferenças nos parâmetros clínicos e microbiológicos entre os grupos foram avaliadas através dos testes de Mann-Whitney, Fisher e Qui-quadrado. Associações entre os parâmetros clínicos e microbiológicos foram testadas através do teste de Pearson. Aa foi detectado com maior frequência em pacientes com PAG (96,6%) do que pacientes saudáveis (76,7%) (chi2 = 4,9; p < 0,05). A deleção genética foi observada em 16 dos 28 (57,1%) pacientes com PAG que foram positivos para Aa. Porém, nenhuma das amostras de indivíduos com saúde periodontal apresentaram a deleção (chi2 = 19,15; p < 0,001). Correlações significantes entre a presença da deleção e os parâmetros clínicos PBS (r=0,312, p<0,05), NCI (r=0,406, p<0,01), PL (r=0,278, p<0,05) e SAS (r=0,409, p<0,01) foram observadas. Uma alta prevalência de Aa foi observada em brasileiros com PAG e saúde periodontal, entretanto o genótipo altamente leucotóxico foi detectado somente em pacientes com doença agressiva.

    Resumo em Inglês:

    Actinobacillus actinomycetemcomitans (Aa) is considered a major etiologic agent of aggressive periodontitis but this species has also been associated with other forms of periodontal disease. Further, highly leukotoxic strains are related to severity of disease. The purpose of this study was to determine the prevalence of Aa and the occurrence of the leukotoxin gene 530-bp deletion in patients with generalized aggressive periodontitis (GAP) from a Brazilian population. Thirty periodontally healthy and 29 GAP subjects participated in the study. Full-mouth periodontal examination including probing pocket depth (PPD), clinical attachment level (CAL), supragingival biofilm (SB) and bleeding on probing (BOP) was carried out at 6 sites/tooth for all subjects. Whole saliva samples were collected for bacterial DNA isolation. The detection of Aa and the presence of the 530-bp genetic deletion were determined directly in the samples by polimerase chain reaction. Differences on clinical and microbiological parameters between the two groups were sought using the Mann-Whitney, Fisher´s exact and Chi-square tests. Associations between clinical and microbiological parameters were tested using the Pearson correlation coefficient. Aa was detected significantly more often in GAP patients (96.6%) than healthy subjects (76.7%) (chi2 = 4.9; p < 0.05). The genetic deletion was observed in 16 of the 28 (57.1%) GAP patients who were positive for Aa. However, none of the samples from individuals with periodontal health presented this deletion (chi2 = 19.15; p < 0.001). Strong correlations between the presence of the deletion and PPD (r=0.312, p<0.05), CAL (r=0.409, p<0.01), SB (r=0.278, p<0.05) and BOP (r=0.406, p<0.01) were found. A high frequency of Aa was observed in Brazilians with GAP and periodontal health. However, the highly leukotoxic genotype was observed only in subjects with generalized aggressive disease.
  • Distribuição de genes de virulência sefC, pefA e spvC em cepas de Salmonella Enteritidis fago tipo 4 isoladas no Brasil Veterinary Microbiology

    Castilla, Karina Salvagni; Ferreira, Claudete Serrano Astolfi; Moreno, Andrea Micke; Nunes, Iolanda Aparecida; Ferreira, Antônio José Piantino

    Resumo em Português:

    A distribuição dos genes de virulência sefC, pefA e spvC foi investigada em 110 amostras de Salmonella Enteritidis pertencentes ao fagotipo 4 através da reação em cadeia da polimerase. A influência destes genes na colonização do ceco e invasão do fígado e baço em pintinhos de um dia de idade foi avaliada. Oito amostras foram negativas para o gene spvC, três para o gene pefA e uma amostra para o gene sefC. Estes resultados permitiram a classificação das amostras em quatro genótipos. A presença destes genes não influenciou a invasão da bactéria no fígado e baço das aves dez dias após a infecção, entretanto, a presença de mais de um gene fimbrial pode ter relação com a colonização cecal.

    Resumo em Inglês:

    The distribution of virulence genes, sefC, pefA and spvC, was investigated in 110 Salmonella Enteritidis phage type 4 strains by polymerase chain reaction. Their influence in the caecal colonization and invasion of liver and spleen of one-day-old chickens was studied. Eight isolates were negative for the spvC gene, three for the pefA gene and one, for the sefC gene. These results allowed grouping the strains into four genotypes. Presence of these genes did not influence bacteria invasion in the liver and spleen of the chickens ten days after infection, although the presence of more than one fimbrial gene can be related to caecal colonization.
  • Ocorrência de operons codificadores de adesinas em Escherichia coli isolada de aves reprodutoras com salpingite e de pintinhos com onfalite Veterinary Microbiology

    Knöbl, Terezinha; Gomes, Tânia A. Tardelli; Vieira, Mônica A. Midolli; Bottino, José A.; Ferreira, Antonio J. Piantino

    Resumo em Português:

    Ocorrência dos operons fim, pap e sfa em amostras de Escherichia coli isoladas de reprodutoras com salpingite e pintinhos com onfalite foi avaliada. A análise de 100 amostras através dos testes de hibridização de colônia mostrou que 78 (78%) amostras eram fim+, uma (1%) era sfa+, sete (7%) eram fim+ associada a pap+, oito (8%) eram fim+ e uma (1%) era fim+pap+sfa+ e cinco (5%) amostras não hibridizaram com nenhuma sonda. Estes resultados sugerem que o operon fim pode ter um importante papel na patogenia da infecção de Escherichia coli em reprodutoras com salpingite e pintinhos com onfalite.

    Resumo em Inglês:

    The occurrence of fim, pap and sfa operons in Escherichia coli isolated from breeders with salpingitis and chicks with omphalitis was evaluated. Analysis of 100 E. coli isolates, by colony hybridization tests, showed that 78 (78%) were fim+, one (1%) was sfa+, seven (7%) were fim+ associated with pap+, eigth (8%) were fim+ and sfa+, one (1%) was fim+pap+sfa+ and five (5%) isolates did not hybridize with any probe. These results suggest that fim adhesion-encoding operon plays an important role in pathogenesis of E. coli infection in chickens with salpingitis and omphalitis.
  • Etiologia da otite média canina e susceptibilidade a antimicrobianos de Staphylococcus coagulase-positiva em Fortaleza, Brasil Veterinary Microbiology

    Oliveira, Lis Christina de; Leite, Carlos Artur Lopes; Brilhante, Raimunda Sâmia N.; Carvalho, Cibele Barreto M.

    Resumo em Português:

    O presente trabalho avaliou a microbiota do ouvido médio e os perfis de susceptibilidade a antimicrobianos de cepas isoladas de cães com otite média. Um total de 62 cães obtidos no Centro de Controle de Zoonoses de Fortaleza Ceará / Brasil foram estudados no período de 10 meses (agosto/2003 a junho/2004). Do total de animais, 46.8% (n=30) foram positivos para otite media e a infecção envolvida era monomicrobiana em 76,6% dos casos. Os agentes isolados com maior frequência foram Staphylococcus coagulase-positiva (CPS-55%) e Pseudomonas sp (10%). Considerando-se S. intermedius (n=13) e S. aureus subsp aureus (n=9), respectivamente, as mais elevadas taxas resistência foram observadas frente a: penicilina G (30,76% e 44,44%), ampicilina (7,69% e 44,44%), eritromicina (23,07% e 44,44%), clindamicina (23,07% e 44,44%) e trimetropim/sulfametoxazol (15,38% e 33,33%).

    Resumo em Inglês:

    This study evaluated the middle ear microbiota and antimicrobial susceptibility patterns from strains isolated from dogs with otitis media. A total of 62 dogs obtained from Zoonoses Control Center of Fortaleza City Ceará State / Brazil were studied over a 10-month period (August/2003 to June/2004). Of the total, 46.8% (n=30) of the animals were positive for otitis media and the infection was monomicrobial in 76.6% of them. The most frequent isolated agents were coagulase-positive Staphylococci (CPS-55%) and Pseudomonas sp (10%). For S. intermedius (n=13) and S. aureus subsp aureus (n=9), respectively, the greater resistance rates were observed using penicillin G (30.76% and 44.44%), ampicillin (7.69% and 44.44%), erythromycin (23.07% and 44.44%), clindamycin (23.07% and 44.44%) and thrimethropim/sulfamethoxazol (15.38% and 33.33%).
  • Isolamento de Microsporum gypseum do pelame de felídeos selvagens sadios mantidos em cativeiro no Brasil Veterinary Microbiology

    Bentubo, Henri Donnarumma Levy; Fedullo, José Daniel Luzes; Corrêa, Sandra Helena Ramiro; Teixeira, Rodrigo Hidalgo Friciello; Coutinho, Selene Dall' Acqua

    Resumo em Português:

    Os dermatófitos são os fungos mais comumente associados às micoses superficiais em animais e homem. O estado de portador assintomático do gato doméstico o caracteriza como importante fonte de infecção, entretanto, até então, tal aspecto não foi pesquisado em relação a seus parentes selvagens. O objetivo desta pesquisa foi determinar a presença de dermatófitos no pelame de felídeos selvagens sadios, mantidos em cativeiro na Fundação Parque Zoológico de São Paulo. A amostragem foi constituída de 130 animais adultos de ambos os sexos, sendo 25 leões (Panthera leo), 12 tigres (Panthera tigris), 6 onças-pintadas (Panthera onca), 4 leopardos (Panthera pardus), 2 leopardos-das-neves (Panthera uncia), 2 suçuaranas (Puma concolor), 2 guepardos (Acinonyx jubatus), 1 jaguatirica (Leopardus pardalis), 28 gatos-do-mato-pequenos (Leopardus tigrinus), 10 gatos-maracajás (Leopardus wiedii), 8 gatos-do-mato-grandes (Leopardus geoffroyi), 22 gatos-mouriscos (Herpaylurus yaguaroundii) e 8 gatos-palheiros (Oncifelis colocolo). As amostras foram obtidas a partir da fricção de quadrados de carpete estéreis no pelame dos animais. Os carpetes foram então semeados em placas de Petri contendo ágar Mycobiotic (Difco®) e incubadas a 25°C por 4 semanas. As colônias obtidas foram repicadas em tubos contendo ágar Sabouraud dextrose com cloranfenicol (100mg/L) e submetidas a microcultivo em lâmina, para posterior identificação através de suas características macro e microscópicas. Microsporum gypseum foi isolado de duas leoas (1,6%) aparentemente saudáveis, ambas mantidas em terrários. Os contaminantes mais prevalentes foram dos gêneros Penicillium (27,9%); Cladosporium (24,5%); Acremonium (12,1%); Scopulariopsis e Chrysosporium (9,8%); e Aspergillus (5,3%). A ocorrência de dermatófitos no pelame de felídeos selvagens sadios, mantidos em cativeiro, confirma seu estado de portador assintomático e os caracteriza como fontes de infecção para outros animais e para os seres humanos.

    Resumo em Inglês:

    Dermatophytes are fungi that cause superficial mycoses in animals and humans. While studies have shown that domestic cats (Felis catus) are often asymptomatic carriers of dermatophytes, and thus a significant source of infection, this aspect has not been studied in relation to their wild relatives. The present study was aimed at determining the presence of dermatophytes on the haircoat of healthy wild felids, kept in captivity at "Fundação Parque Zoológico de São Paulo". Samples were taken from 130 adult animals of both sexes: 25 lions (Panthera leo), 12 tigers (Panthera tigris), 6 jaguars (Panthera onca), 4 leopards (Panthera pardus), 2 snow leopards (Panthera uncia), 2 pumas (Puma concolor), 2 cheetahs (Acinonyx jubatus), 1 ocelot (Leopardus pardalis), 28 tiger cats (Leopardus tigrinus), 10 margays (Leopardus wiedii), 8 geoffroy's cats (Leopardus geoffroyi), 22 jaguarundis (Herpailurus yagouaroundi) and 8 pampas cats (Oncifelis colocolo). The samples were obtained by rubbing the haircoat of the animals with squares of sterile carpet, and then seeded onto Petri dishes containing Mycobiotic agar (Difco™). The plates were incubated at 25°C for 4 weeks. The isolates were subcultured in Sabouraud dextrose agar supplemented with chloramphenicol (100mg/L) and cultured on slides for posterior identification by their macro- and microscopic characteristics. Microsporum gypseum was isolated from two apparently healthy lionesses (1.6%), both kept in terrariums. The most prevalent contaminants were of the genera Penicillium (27.9%); Cladosporium (24.5%); Acremonium (12.1%); Scopulariopsis and Chrysosporium (9.8%); and Aspergillus (5.3%). The occurrence of dermatophytes in the haircoat of healthy wild felids, maintained in captivity, confirms their status as asymptomatic carriers and characterizes them as sources of infection for other animals and for humans.
  • Atividade antimicrobiana de condimentos do sul da India sobre Escherichia coli, Salmonella, Listeria monocytogenes e Aeromonas hydrophila Food Microbiology

    Indu, M.N.; Hatha, A.A.M.; Abirosh, C.; Harsha, U.; Vivekanandan, G.

    Resumo em Português:

    Avaliou-se a atividade antimicrobiana de extratos de alho (Allium sativum), noz-moscada (Mysritica frangrans), gengibre (Zingiber officinale) cebola (Allium cepa) e pimenta do reino (Piper nigrum) sobre 20 sorotipos de Escherichia coli, 8 sorotipos de Salmonella, Listeria monocytogenes e Aeromonas hydrophila. O alho apresentou atividade antimicrobiana excelente sobre todos os microrganismos testados, excepto L. monocytogenes. A noz-moscada apresentou boa atividade antilisteria, emboara atividade sobre E. coli e Salmonella tenha sido sorotipo-dependente. Tanto alho como noz-moscada foram eficientes contra A. hydrophila. O extrato de gengibre apresentou atividade inibitória sobre dois sorotipos de E. coli: 08 (enterotoxigenico) e 088. Os extratos de cebola e pimenta do reino não apresentaram nenhuma atividade contra os microrganismos testados.

    Resumo em Inglês:

    Antibacterial activity of extracts of Allium sativum (garlic), Myristica fragrans (nutmeg), Zingiber officinale (ginger), Allium cepa (onion) and Piper nigrum (pepper) has been evaluated against 20 different serogroups of Escherichia coli, 8 serotypes of Salmonella, Listeria monocytogenes and Aeromonas hydrophila. Garlic extract showed excellent antibacterial activity against all the test organisms, except L. monocytogenes. Nutmeg showed good anti-listerial activity, although activity against E. coli and Salmonella were serotype dependent. Both garlic and nutmeg extracts were effective against A. hydrophila. Extracts of ginger showed inhibitory activity against two serogroups of E. coli: as O8 (enterotoxigenic E. coli) and O88 only. Extracts of onion and pepper did not show any antibacterial activity against the test organisms.
  • Qualidade microbiológica de ostras (Crassostrea gigas) produzidas e comercializadas na região litorânea de Florianópolis - Brazil Food Microbiology

    Pereira, Murilo Anderson; Nunes, Márcia Menezes; Nuernberg, Leonardo; Schulz, Denys; Batista, Cleide Rosana Vieira

    Resumo em Português:

    A ostra é um filtrador capaz de ingerir partículas em suspensão, as quais podem carrear microrganismos patogênicos. Desta forma, o hábito de consumir ostras cruas pode causar toxinfecções alimentares em humanos. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade microbiológica de ostras da espécie Crassostrea gigas cultivadas e comercializadas na região litorânea de Florianópolis, através da contagem de coliformes a 35ºC e 45ºC, Escherichia coli e estafilococos coagulase positiva e da pesquisa de Salmonella sp, Víbrio cholerae e Víbrio parahaemolyticus. Foram analisadas 90 (noventa) amostras das quais 45 foram coletadas em estabelecimentos comerciais destinados à venda de frutos do mar e 45 coletadas diretamente do local de cultivo. Todas as análises foram realizadas de acordo com métodos da American Public Health Association. Vibrio cholerae, Víbrio parahaemolyticus e Salmonella sp. não foram encontrados em nenhuma das amostras. Apenas uma amostra apresentou 80 UFC/g de estafilococos coagulase positiva, as demais amostras apresentaram <10 UFC/g. Com o resultado das contagens de coliformes a 35ºC e a 45ºC, evidencia-se contaminação tanto no local de cultivo quanto no local de venda. Escherichia coli foi encontrada em 4 (9 %) das amostras provenientes do local de cultivo e em 16 (35,5 %) amostras coletadas nos estabelecimentos comerciais. Estes resultados indicam a necessidade de se monitorar a qualidade de ostras cruas, com a implantação de programas de boas práticas de manipulação e manejo dos moluscos.

    Resumo em Inglês:

    Oysters are filter feeders able to ingest particles in suspension that may carry pathogenic microorganisms. In this respect, the consumption of raw oysters can cause foodborne diseases in humans. The aim of the present study was to evaluate the microbiological quality of Crassostrea gigas oysters cultivated and commercialized in the coastal region of Florianópolis, SC, Brazil. The study comprised counts of coliforms at 35ºC and at 45ºC, Escherichia coli and coagulase-positive staphylococci, and detection of Salmonella sp, Vibrio cholerae and Vibrio parahaemolyticus. Ninety samples were analyzed, 45 of them collected at seafood commercial establishments and the other 45 were collected in the cultivation area. All analyses were performed according to methods of the American Public Health Association. Vibrio cholerae, V. parahaemolyticus and Salmonella sp. were not detected in any of the samples. Coagulase-positive staphylococci were observed in only one sample (80 CFU/g). The counts of coliforms at 35 and 45ºC indicated that samples obtained from both the cultivation area and place of sale were contaminated. E. coli was detected in 4 (9%) samples collected in the cultivation area and in 16 (35.5%) samples obtained from commercial establishments. These results indicate the need for monitoring the quality of raw oysters, including the implantation of programs for good mollusk manipulation and management practices.
  • Determinação da aflatoxina M1 em leite por coluna de imunoafinidade, CCD/CLAE Food Microbiology

    Shundo, Luzia; Sabino, Myrna

    Resumo em Português:

    No período de 2002 e 2003, cento e sete amostras de leite cru, pasteurizado e UHT (ultrahigh treated temperature) comercializadas nas cidades de São Paulo e Marília (SP) foram analisadas para determinar Aflatoxina M1 (AFM1). A aflatoxina M1 foi detectada em 79 (73,8%) amostras, variando de 0,02 0,26 mig/L. As amostras foram analisadas utilizando coluna de imunoafinidade para limpeza e cromatografia em camada delgada para determinação da AFM1. Para a otimização do método, os parâmetros avaliados foram: recuperação, repetitividade, limite de detecção e limite de quantificação. Baseado em adição de padrão nas amostras, os valores das recuperações variaram de 85,83% e 73,86% em níveis de 0,01-0,5 mig/L, respectivamente, e o desvio padrão relativo para repetitividade variou de 7,73-2,08%. O limite de quantificação foi de 0,02 mig/L. Os resultados das amostras analisadas por este método tiveram boa correlação quando comparadas com a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Concluindo, a utilização de coluna de imunoafinidade fornece excelentes resultados na recuperação, sensibilidade e apresenta fácil operacionalidade. Apesar da alta incidência de aflatoxina M1 em amostras em ambas as cidades, o nível de contaminação pode não ser considerado um sério problema de saúde pública, de acordo com a legislação brasileira.

    Resumo em Inglês:

    During 2002 and 2003, a total of 107 samples of raw, pasteurized and ultrahigh treated temperature (UHT) milk commercialized in the cities of São Paulo and Marília (SP) were analyzed for the presence of aflatoxin M1 (AFM1). AFM1 was detected in 79 (73.8%) of milk samples, ranging from <0.02 to 0.26 mug/L.The samples were analyzed using an immunoaffinity column for cleanup and a thin layer chromatography for determining AFM1. The parameters, such as recovery, repeatibility, detection and quantification limit were evaluated to optimize this method (in-house). Based on spiked samples, the recovery values ranged from 85.83 to 73.86% at levels of 0.010-0.50 mug/L, respectively, and the relative standard deviation for repeatibility ranged from 7.73 to 2.08%. The quantification limit was 0.02 mug/L. The results of some samples analyzed by this method demonstrated a satisfatory correlation when compared with High Performance Liquid Chromatography (HPLC). In conclusion, immunoaffinity column cleanup gave excellent results for recovery, sensibility and sample through put. Despite the high rate of occurrence of AFM1 in samples in both cities, the contamination level could not be considered a serious public health hazard, according to Brazilian legislation.
  • Gordonia polyisoprenivorans de águas subterrâneas contaminadas por chorume, em região subtropical: caracterização da linhagem e produção de exopolissacarídeos Environmental And Soil Microbiology

    Fusconi, Roberta; Godinho, Mirna Januária Leal; Hernández, Isara Lourdes Cruz; Bossolan, Nelma Regina Segnini

    Resumo em Português:

    Uma linahgem de Gordonia sp. (linhagem Lc), proveniente de águas subterrâneas contaminadas por chorume, foi caracterizada por taxonomia polifásica e estudada quanto à produção de exopolissacarídeos (EPS). As células, bastonetes agregados, isolados ou aos pares em formato de V, típico de bactérias corineformes, apresentaram reação Gram positiva, catalase positiva, oxidase negativa, não apresentaram motilidade. O organismo cresceu em aerobiose e em ambiente anóxico na presença de NaNO3. A linhagem apresentou características morfológicas, bioquímicas e propriedades quimiotaxônomicas típicas do gênero Gordonia e perfil de ácidos micólicos e ácidos graxos correspondentes aos de G. polyisoprenivorans DSM44302T. A análise do seqüenciamento dos primeiros 500 pares de bases do rDNA16S da linhagem mostrou 100% de similaridade com Gordonia polyisoprenivorans DSM44302T. Experimentos conduzidos em condições anaeróbias em meio E com sacarose ou glicose como principal fonte de carbono, mostraram que a linhagem não cresceu quando cultivada com sacarose. Entretanto, utilizando-se glicose, a velocidade específica máxima de crescimento foi 0,17h-1, o tempo de geração de aproximadamente 4 horas e o máximo de produção de EPS total ocorreu durante a fase exponencial (126,17 ± 15,63 g l-1). A produção de EPS livre excedeu à de capsular e a relação EPS livre/EPS capsular aumentou de 1,9, durante a fase exponencial para 7,8 durante a fase estacionária. Até então, foram isoladas seis linhagens de G. polyisoprenivorans de diferentes ambientes. A linhagem Lc é a sexta linhagem de G. polyisoprenivorans descrita, a segunda detectada nas águas subterrâneas em questão e a primeira cuja produção de EPS está sendo estudada.

    Resumo em Inglês:

    A strain of Gordonia sp. (strain Lc), from landfill leachate-contaminated groundwater was characterized by polyphasic taxonomy and studied for exopolysaccharide (EPS) production. The cells were Gram-positive, catalase-positive, oxidase-negative and non-motile. The organism grew both aerobically and, in anoxic environment, in the presence of NaNO3. Rods occured singly, in pairs or in a typical coryneform V-shaped. The organism had morphological, physiological and chemical properties consistent with its assignment to the genus Gordonia and mycolic and fatty acid pattern that corresponded to those of G. polyisoprenivorans DSM 44302T. The comparison of the sequence of the first 500 bases of the 16S rDNA of strain Lc gave 100% similarity with the type strain of Gordonia polyisoprenivorans DSM 44302T. Experiments conducted in anaerobic conditions in liquid E medium with either glucose or sucrose as the main carbon source showed that sucrose did not support the growth of Lc strain and that on glucose the maximum specific growth rate was 0.17h-1, representing a generation time of approximately 4 hours. On glucose, a maximum of total EPS was produced during the exponential phase (126.17 ± 15.63 g l-1). The production of free EPS exceeded that of capsular and the free/capsular EPS ratio increased from 1.9 during the exponential phase to 7.8 during the stationary phase. At present, six strains of G. polyisoprenivorans have been isolated from various environments. Lc is the sixth strain of G. polyisoprenivorans described, the second strain detected in the landfill leachate-contaminated groundwater and the first that is being studied for EPS production.
  • Purificação parcial de elicitores a partir de basidiocarpos de Lentinula edodes protegendo plântulas de pepino contra Colletotrichum lagenarium Environmental And Soil Microbiology

    Di Piero, Robson M.; Wulff, Nelson A.; Pascholati, Sérgio F.

    Resumo em Português:

    O cogumelo shiitake (Lentinula edodes) vem sendo utilizado com objetivos de prevenir e controlar doenças em humanos e em vegetais. O tratamento com o extrato aquoso de basidiocarpos do cogumelo propiciou uma redução significativa na severidade da antracnose em plantas de pepino, provocada por Colletotrichum lagenarium, e um aumento na atividade de peroxidases nos tecidos foliares. Desse modo, com o objetivo de obter moléculas de interesse agronômico destinadas à proteção de plantas, o extrato aquoso bruto de basidiocarpos de L. edodes foi fracionado inicialmente com sulfato de amônio. A fração correspondente a 40-80% de saturação (p40-80) foi a mais efetiva em reduzir a antracnose em cotilédones de pepino, sendo então submetida à cromatografia de troca aniônica (CTA). Após a CTA, seis picos protéicos foram obtidos, e o pico V, contendo em média 34% das proteínas presentes em p40-80, provocou o acúmulo de peroxidases nos cotilédones de pepino, bem como reduziu a antracnose. A separação eletroforética das proteínas do pico V revelou a presença de mais de uma banda no gel de poliacrilamida. Portanto, estes procedimentos resultaram na purificação parcial de elicitores presentes no basidiocarpo de L. edodes.

    Resumo em Inglês:

    The shiitake mushroom (Lentinula edodes) has been used in research involving the prevention and the control of human and plant diseases. In cucumber plants, treated with aqueous extracts from mushroom basidiocarps, there was a reduction in anthracnose severity caused by Colletotrichum lagenarium, and an increase in peroxidase activity in the leaves. With the aim of obtaining molecules of agronomic interest, the crude aqueous extract from L. edodes basidiocarp was fractioned with ammonium sulfate. The fraction corresponding to 40-80% of saturation (p40-80), the most effective in reducing anthracnose on cucumber cotyledons, was submitted to anion exchange chromatography (AEC). After AEC, six protein peaks were obtained and the peak V, containing 34% of the proteins present in p40-80, induced peroxidase increase in the cucumber cotyledons besides reducing anthracnose severity. Separation of peak V proteins by SDS-gel electrophoresis revealed the presence of more than one band in the gel. Thus, a partial purification of elicitors present in the L. edodes basidiocarp was achieved.
  • Potencial de biocontrole de mutantes sal-tolerantes de Trichoderma harzianum contra Fusarium oxysporum Environmental And Soil Microbiology

    Mohamed, Hassan Abdel-Latif A.; Haggag, Wafaa Mohamed

    Resumo em Português:

    A exposição de uma cepa selvagem de Trichoderma harzianum à irradiação gama induziu dois mutantes tolerantes a sal (Th50M6 e Th50M11). Em condições salinas, os dois mutantes foram muito superiores à cepa selvagem em relação à velocidade de multiplicação, esporulação e eficiência contra Fusarium oxysporum, o agente causador da doença wilt do tomate. Os mutantes tolerantes foram capazes de multiplicação e esporulação em meio de cultura contendo NaCl até 69 mM. Em comparação à cepa selvagem, os dois mutantes possuíam conteúdo mais elevado de prolina e hidroxiprolina, conteúdo de sódio superior ao de potássio, cálcio ou magnésio e conteúdo elevado de fenóis totais. A análise eletroforética das proteínas totais solúveis no mutante Th50M6 apresentou bandas diferentes acumuladas em resposta a NaCl 69 mM. Os resultados também indicaram que os mutantes produzem alguns metabólitos ativos como quitinases, celulases, beta-galactosidades e antibióticos como tricodermina, gliotoxina e gliovirina. Os mutantes de Trichoderma reduziram significativamente a incidência da doença e melhoraram o rendimento e o conteúdo de minerais do tomate tanto em condições salinas como não-salinas e também em condições naturais e de infestação. Quando comparados à cepa selvagem, os mutantes de Trichoderma foram também mais eficientes em diminuir o crescimento de F. oxysporum na rizosfera.A densidade populacional de ambos mutantes na rizosfera excedeu muito a da cepa selvagem.

    Resumo em Inglês:

    Exposing a wild-type culture of Trichoderma harzianum to gamma irradiation induced two stable salt-tolerant mutants (Th50M6 and Th50M11). Under saline conditions, both mutants greatly surpassed their wild type strain in growth rate, sporulation and biological proficiency against Fusarium oxysporum, the causal agent of tomato wilt disease. Tolerant T. harzianum mutants detained a capability to grow and convinced sporulation in growth media containing up to 69 mM NaCl. In comparison with their parent strain, characterization of both mutants confirmed that they have reinforced contents of proline and hydroxyproline, relatively higher sodium content compared to potassium, calcium or magnesium contents, higher level of total phenols. Electrophoretic analysis of total soluble proteins in the salt tolerance mutant Th50M6 showed different bands accumulated in response to 69 mM NaCl. Data also showed that mutants produce certain active metabolites, such as chitinases, cellulases, beta-galactosidases, as well as, some antibiotics i.e., trichodermin, gliotoxin and gliovirin. Trichoderma mutants significantly reduced wilt disease incidence and improved yield and mineral contents of tomato plants under both saline and non-saline soil conditions, as well as, under infested and natural conditions. T. harzianum mutants were also more efficient in dropping the F. oxysporum growth in rhizosphere compared to the wild type strain. Population density of both mutants in rhizosphere far exceeded that of T. harzianum wild type strain.
  • Teste colorimétrico usado para o monitoramento de microcistina em cultivo de cianobactérias e em amostras de florações ambientais do sudeste do Brasil Industrial Microbiology

    Almeida, Vanessa P.S.; Cogo, Karina; Tsai, Siu M.; Moon, David H.

    Resumo em Português:

    Microcistinas (MC) são heptapeptídeos de ação neuro e hepatotóxica produzidas por alguns gêneros de cianobactérias em determinadas condições físico-químicas do ambiente e são responsáveis pela morte e intoxicação de animais e humanos. A detecção de MC em água destinada ao consumo no Brasil ainda não é realizada na maioria dos estados brasileiros. O teste de inibição de proteína fosfatase tipo 1 (PP1) por MC é um método colorimétrico simples, rápido e de boa reprodutibilidade. Para testar a aplicação do teste PP1 foram realizados estudos de crescimento de cianobactérias em bioreator com meio ASM-1 dentro de condições controladas de crescimento (12/12h luz/escuro usando 30 miE.m².s-1 de intensidade luminosa e temperatura constante de 23C) utilizando Microcystis aeruginosa (estirpe 1., UFRJ- produtor de MC). Variaram-se as concentrações de fósforo (P) em 24, 6 e 4 miM e de ferro (Fe) em 4 e 1mM. Uma curva padrão de inibição de PP1 pela MC-LR foi construída, tendo como limite de detecção 0.01 ng.mL-1. Em meio normal de crescimento (24 miM P e 4 miM Fe) para Microcystis aeruginosa, a produção de MC foi detectada continuamente durante o crescimento da cultura. A maior concentração de MC foi observada na concentração de 6 miM P e não foi detectada na concentração de 1 miM Fe. Amostras de florações ambientais, da região sudeste do Brasil (Belo Horizonte/MG), coletadas em corpos d'água utilizados para abastecimento e consumo humano, foram testadas e quantificadas para a presença de microcistina pelo teste colorimétrico PP1. A concentração de microcistina variou entre quantidades não detectáveis pelo método até 100 ng.mL-1 em amostras de floração da espécie Microcistis flos-aquae.

    Resumo em Inglês:

    Microcystins are hepatotoxic heptapeptides produced by some cyanobacterial genera under determined physico-chemical conditions in the environment, which are responsible for the intoxication and death of animals and humans. The detection of microcystins in potable water or recreational water is not carried out routinely in the majority of Brazilian states. The protein phosphatase 1 (PP1) inhibition test is a simple, rapid and reproducible colorimetric method. The applicability of the PP1 inhibition test was tested using Microcystis aeruginosa (strain 1, UFRJ- toxin producer) grown under controlled light and temperature condition (12/12h light/dark using 30 muE.m².s-1 at 23ºC) in a bioreactor. The total concentrations of P (24, 6 and 4 muM) and Fe (4 and 1 muM) were varied in ASM-1medium and their effects on the growth rates and toxin production were analyzed. A standard curve of PP1 inhibition by microcystin-LR reached detection limit of 0.01 ng.mL-1. Under the highest concentrations of P (24 muM) and Fe (4 muM), the production of microcystin was detected throughout the growth experiment. The highest concentration of microcystin was observed at 6 muM P while at 1 muM Fe, PP1 inhibition was not detected. Samples from environmental blooms in water reservoirs used for human and animal consumption, from southeast Brazil (Belo Horizonte/MG), were tested and quantified for microcystin presence by the PP1 colorimetric test. The concentration of microcystin varied from undetectable to 100 ng.mL-1 in the environmental samples with Microcistis flos-aquae as the predominant cyanobacterial strain.
  • Produção de aflatoxina por Aspergillus flavus é inibida por compostos isolados de Polymnia sonchifolia General Microbiology

    Pak, Adriana; Gonçalez, Edlayne; Felicio, Joana D'arc; Pinto, Marina Mori; Rossi, Maria Helena; Simoni, Isabela Cristina; Lopes, Márcia Nasser

    Resumo em Português:

    Polymnia sonchifolia, conhecida como "Yacon", e originária da cordilheira dos Andes, sendo muito conhecida devido ao uso de seu tubérculo no controle da Diabetes melitus. Suas folhas podem conter compostos com atividade antifúngica e pesticida, pois não é necessário o uso destes produtos no seu cultivo. Neste trabalho descrevemos a identificação da estrutura química de dois flavonóides isolados das folhas de Polymnia sonchifolia: 3', 5, 7 trihydroxy-3, 4'-dimethoxyflavone (composto 1) e 3',4',5-trihidroxi-7-metoxiflavanona (composto 2) e de duas lactonas sesquiterpenicas: enidrina (composto 3) e uma mistura de enidrina e uvedalina (composto 4), bem como seus efeitos na produção de aflatoxinas por Aspergillus flavus. A identificação dos compostos foi realizada por RMN 13C e ¹H. Todos os compostos foram testados em diversas concentrações em cultura de Aspergillus flavus para avaliar o crescimento e a produção de aflatoxina. O composto 1 na concentração de 15 mig/mL inibiu 25% da produção de aflatoxina B1 (p<0,01). O composto 4 inibiu o crescimento do fungo e a produção da aflatoxina B1 em 34% e 76%, respectivamente. Os resultados mostraram a possibilidade do uso de Polymnia sonchifolia no controle alternativo da producao de aflatoxina B1 pelo fungo Aspergillus flavus.

    Resumo em Inglês:

    Polymnia sonchifolia, commonly known as ";yacon";, was originally cultivated at Andes moutains in South America. Recently, the specie attracted worldwide attention because of its wide range of uses, for example in the control of diabetes melitus, besides the antifungal and pesticidal compounds were found in the leaves. This study describes the identification of two flavonoids: 3', 5, 7 trihydroxy-3, 4'-dimethoxyflavone (compound 1) and 3', 4', 5- trihydroxy-7-methoxy flavanone (compound 2) and two sesquiterpenes lactones: enhydrin (compound 3) and a mixture of enhydrin and uvedalin (compound 4) isolated from Polymnia sonchifolia leaves and their effects on the aflatoxin production by Aspergillus flavus. The identification of the compounds were achieved by ¹H and 13C NMR. All compounds were tested in different concentration, to evaluate the growth of Aspergillus flavus culture and the production of aflatoxin. The compound 1, at the concentration 15 mug/mL, inhibited 25% of the aflatoxin B1 production (p<0.01). The compound 4 inhibited 34% and 76% of the fungal growth and AFB1 production respectively. These results show that Polymnia sonchifolia can be used for the development of agents to control aflatoxin B1 production by Aspergillus flavus.
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