RESUMO
Os inibidores de protease (IPs) fazem parte do sistema de defesa da planta e reduzem a atividade proteolítica das enzimas digestivas de insetos-praga. O presente estudo teve como objetivo isolar e caracterizar um inibidor de tripsina (AmTI) na semente de Anadenanthera macrocarpa (Benth) (Leguminosae-Mimosoideae). Além disso, tentamos avaliar o mecanismo de defesa das larvas de Anagasta kuehniella contra esse inibidor. Os extratos de sementes de proteína foram purificados usando colunas de Sephadex G-50 e tripsina-Sepharose. A eletroforese revelou que o peso molecular do inibidor era de 25 kDa. A avaliação da estabilidade demonstrou que o inibidor não foi desnaturado em temperaturas de até 60 °C, pH 2-10 e concentrações de até 100 mM de ditiotreitol por uma hora. O inibidor reagiu na proporção de 1:1 com tripsina bovina com uma constante de inibição [Ki] = 2,517 x 10-8. A incorporação do inibidor na proporção de 1 mg por 100 mg da dieta artificial oferecida às larvas de A. kuehniella levou a uma diferença significativa no peso e na sobrevivência das larvas do quarto ínstar em relação ao controle. O AmTI atuou sobre as atividades enzimáticas da tripsina e quimotripsina, não permitindo até o quarto ínstar larval, A. kuehniella, criar adaptações contra o inibidor, pois teve efeito simultâneo no peso e mortalidade larval. Portanto, um novo inibidor de tripsina apresentando atividade inibitória contra as enzimas digestivas tripsina e quimotripsina de A. kuehniella foi isolado, indicando que essas atividades estão correlacionadas com os efeitos deletérios desse inseto.
Termos para indexação:
Bioinseticida; inseto-praga; inibidor de peptidase; interação planta-inseto.
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
Thumbnail
