EFFECT OF FREQUENCY OF IMMERSION AND AIR INJECTION ON IN VITRO MULTIPLICATION OF Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla IN TEMPORARY IMMERSION BIOREACTOR

The objectives of this study were to evaluate different immersion frequencies (2, 4, 8 and 16 h) and explants supports (filter paper and foam) of a Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla clone inside RITA(r) bioreactors; and a ventilation system with additional air input coupled to the bioreactor containers. It was evaluated the explants fresh weight, number of shoots and hyperhydricity and in vitro axillary bud multiplication. The immersions every two and four hours and the filter paper showed higher growth and number of shoots, but caused a greater percentage of hyperhydric shoots. Under the conditions and system tested, the additional air injection in the RITA(r) bioreactor did not influence the culture growth.

Keywords:
In vitro propagation; cloning; gaseous atmosphere; hyperhydricity

Authorship

Mila Liparize de Oliveira

Engenheira Florestal, Msc., Líder Técnica de Pesquisa da Empresa Fibria Celulose S/A, Rod. Euryale de Jesus Zerbine, s/n, Km 84, CEP 12340-010, Jacareí (SP), Brasil. mila.liparize@fibria.com.brFibria Celulose S/ABrasilJacareí, SP, BrasilEngenheira Florestal, Msc., Líder Técnica de Pesquisa da Empresa Fibria Celulose S/A, Rod. Euryale de Jesus Zerbine, s/n, Km 84, CEP 12340-010, Jacareí (SP), Brasil. mila.liparize@fibria.com.br

Aloisio Xavier

Engenheiro Florestal, Dr., Professor Adjunto do Departamento de Engenharia Florestal, Universidade Federal de Viçosa, Av. Ph. Rolfs, s/n, CEP 36571-000, Viçosa (MG), Brasil. xavier@ufv.brUniversidade Federal de ViçosaBrazilViçosa, MG, BrazilEngenheiro Florestal, Dr., Professor Adjunto do Departamento de Engenharia Florestal, Universidade Federal de Viçosa, Av. Ph. Rolfs, s/n, CEP 36571-000, Viçosa (MG), Brasil. xavier@ufv.br

Ricardo Miguel Penchel Filho

Engenheiro Agrônomo, PhD., Pesquisador Sênior da Empresa Fibria Celulose S/A, Empresa Fibria Celulose S/A, Rod. Euryale de Jesus Zerbine, s/n, Km 84, CEP 12340-010, Jacareí (SP), Brasil. rp@fibria.com.brFibria Celulose S/ABrasilJacareí, SP, BrasilEngenheiro Agrônomo, PhD., Pesquisador Sênior da Empresa Fibria Celulose S/A, Empresa Fibria Celulose S/A, Rod. Euryale de Jesus Zerbine, s/n, Km 84, CEP 12340-010, Jacareí (SP), Brasil. rp@fibria.com.br

Jocemar Palauro dos Reis

Biólogo, Ténico de Pesquisa de Laboratório da Empresa Fibria Celulose S/A, Empresa Fibria Celulose S/A, Rod. Euryale de Jesus Zerbine, s/n, Km 84, CEP 12340-010, Jacareí (SP), Brasil. jpdreis@fibria.com.brFibria Celulose S/ABrasilJacareí, SP, BrasilBiólogo, Ténico de Pesquisa de Laboratório da Empresa Fibria Celulose S/A, Empresa Fibria Celulose S/A, Rod. Euryale de Jesus Zerbine, s/n, Km 84, CEP 12340-010, Jacareí (SP), Brasil. jpdreis@fibria.com.br

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FIGURA 1:
Curvas de tendência para massa fresca (MF) e número de brotos (NB) aos 21 (A e B) e 28 dias (C e D), para dois suportes de apoio dos explantes (papel-filtro e espuma), em quatro intervalos de imersão (2, 4, 8 e 12 h), em biorreatores de imersão temporária RITA(r), em cultura clonal de Eucalyptus grandisxEucalyptus urophylla.

FIGURE 1:
Tendency curves for fresh weight (MF) and number of shoots (NB) at 21 (A and B) and 28 days (C and D) for two explant supports (filter paper and foam), at four immersion intervals (2, 4, 8 and 12 h) in RITA(r) temporary immersion bioreactors for clonal culture of Eucalyptus grandisxEucalyptus urophylla.

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FIGURA 2:
Aspecto do clone de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla cultivado em biorreatores de imersão temporária RITA® aos 28 dias, com intervalo de imersão de 2 (A) e 16 horas (B).

FIGURE 2:
Aspect of the culture of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla shoots grown in RITA® temporary immersion bioreactor for 28 days, under immersion interval of 2 (A) and 16 hours (B).

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FIGURA 3:
Curvas de tendência para as características massa fresca (A), número de brotos (B) e hiperhidricidade (C) dos explantes, nos dois tratamentos de manejo do ar estudados (sem e com injeção de ar ao recipiente RITA®), durante 28 dias de cultivo do clone de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla em biorreatores de imersão temporária RITA®.

FIGURE 3:
Tendency curves for the characteristics fresh weight (A), number of shoots (B) and hyperhydricity (C) of explants in both air management treatments studied (with or without air additional injection in RITA®), during 28 days of culture of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla shoots in RITA® bioreactors.

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TABELA 1:
Percentual de hiper-hidricidade para os dois suportes de apoio dos explantes em quatro intervalos de imersão, aos 21 e 28 dias de cultivo em biorreatores de imersão temporária RITA®, em culturas clonais de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla. Tratamentos com letras iguais não diferiram significativamente a 5% de probabilidade pelo Teste Tukey.

TABLE 1
Percentage of hyperhydricity for two explant supports in four immersion intervals, at 21 and 28 days of culture in RITA® temporary immersion bioreactor in clonal cultures of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla. Treatments with same letters are not significantly different at 5% probability by Tukey test.

FIGURA 1: Curvas de tendência para massa fresca (MF) e número de brotos (NB) aos 21 (A e B) e 28 dias (C e D), para dois suportes de apoio dos explantes (papel-filtro e espuma), em quatro intervalos de imersão (2, 4, 8 e 12 h), em biorreatores de imersão temporária RITA(r), em cultura clonal de Eucalyptus grandisxEucalyptus urophylla.
FIGURE 1: Tendency curves for fresh weight (MF) and number of shoots (NB) at 21 (A and B) and 28 days (C and D) for two explant supports (filter paper and foam), at four immersion intervals (2, 4, 8 and 12 h) in RITA(r) temporary immersion bioreactors for clonal culture of Eucalyptus grandisxEucalyptus urophylla.

FIGURA 2: Aspecto do clone de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla cultivado em biorreatores de imersão temporária RITA® aos 28 dias, com intervalo de imersão de 2 (A) e 16 horas (B).
FIGURE 2: Aspect of the culture of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla shoots grown in RITA® temporary immersion bioreactor for 28 days, under immersion interval of 2 (A) and 16 hours (B).

FIGURA 3: Curvas de tendência para as características massa fresca (A), número de brotos (B) e hiperhidricidade (C) dos explantes, nos dois tratamentos de manejo do ar estudados (sem e com injeção de ar ao recipiente RITA®), durante 28 dias de cultivo do clone de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla em biorreatores de imersão temporária RITA®.
FIGURE 3: Tendency curves for the characteristics fresh weight (A), number of shoots (B) and hyperhydricity (C) of explants in both air management treatments studied (with or without air additional injection in RITA®), during 28 days of culture of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla shoots in RITA® bioreactors.

TABELA 1: Percentual de hiper-hidricidade para os dois suportes de apoio dos explantes em quatro intervalos de imersão, aos 21 e 28 dias de cultivo em biorreatores de imersão temporária RITA®, em culturas clonais de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla. Tratamentos com letras iguais não diferiram significativamente a 5% de probabilidade pelo Teste Tukey.
TABLE 1 Percentage of hyperhydricity for two explant supports in four immersion intervals, at 21 and 28 days of culture in RITA® temporary immersion bioreactor in clonal cultures of Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla. Treatments with same letters are not significantly different at 5% probability by Tukey test.

TABELA 1: Percentual de hiper-hidricidade para os dois suportes de apoio dos explantes em quatro intervalos de imersão, aos 21 e 28 dias de cultivo em biorreatores de imersão temporária RITA®, em culturas clonais de Eucalyptus grandis x Eucalyptus urophylla. Tratamentos com letras iguais não diferiram significativamente a 5% de probabilidade pelo Teste Tukey.

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