• Técnica de restrição hídrica: efeito sobre Acremonium strictum, protrusão de sementes e obtenção de sementes de milho infetadas Artigos

    Teixeira, Hudson; Machado, José da Cruz; Oride, Denis; Alves, Marcelo C.; Noda, Alexandre

    Abstract in Portuguese:

    Este experimento objetivou a obtenção de sementes de milho (Zea mays) portadoras de Acremonium strictum, utilizando-se técnica de restrição hídrica e visando sua utilização posterior em estudos sobre a interação patógeno - hospedeiro. O trabalho constou de avaliações de efeitos da adição de manitol, NaCl e KCl nos potenciais de -0,48; -0,6; -0,8; -1,0; -1,2 e -1,4 MPa ao meio extrato de malte-ágar (MEA) sobre o crescimento micelial, textura de micélio, forma marginal da colônia, pigmentação e esporulação in vitro de colônias de A. strictum, bem como sobre o percentual de protrusão de radículas de sementes de milho. Foi avaliada também a correlação entre diferentes períodos de exposição das sementes à colônia do fungo e sua incidência em sementes desinfestadas ou não com NaClO 1% por 2 min. A taxa de crescimento micelial de A. strictum foi estimulada em meio MEA + manitol (-0,6 a -1,4 MPa) e a morfologia típica de colônias do patógeno em meio MEA acrescido com manitol, NaCl e KCl diferiu dos padrões apresentados no controle (-0,48 MPa). A esporulação do fungo foi estimulada pelo manitol nos potenciais -0,8 a -1,4 MPa, aplicados ao meio de cultivo padrão. As menores percentagens de protrusão radicular em sementes de milho incubadas por até cinco dias foram observadas em MEA + manitol (-1,4 MPa) e MEA + NaCl (-1,2 e -1,4 MPa). No entanto, verificou-se efeito fitotóxico do NaCl sobre a germinação das sementes. Por meio da técnica de restrição hídrica foi possível obter até 36% de sementes de milho infetadas por A. strictum.

    Abstract in English:

    This work was carried out to obtain maize (Zea mays) seeds with Acremonium strictum, by means of an adapted water restriction technique, in order to use them in pathogen-host studies. An evaluation was made of the effects of mannitol, NaCl and KCl at potentials of -0.48; -0.6; -0.8; -1.0; -1.2 and -1.4 MPa in malt extract agar medium (MEA) on the colony morphology and sporulation of A. strictum, and on radicle protrusion of maize seeds. Also evaluated was the correlation between different exposition periods of the seeds to the fungal colony and its incidence on disinfested and non-disinfested seeds with NaClO 1% (2 min). The micelial growth of A. strictum was stimulated in MEA + mannitol medium at potentials of -0.6 to -1.4 MPa. The morphology of A. strictum colonies in MEA medium for all the solutes used differed from the colonies in the control treatment (-0.48 MPa). Fungal sporulation was stimulated by mannitol on potentials -0.8 to -1.4 MPa in MEA. The lowest percentages of radicle protrusion in maize seeds were observed in cases when seeds were exposed to water restriction induced by MEA + mannitol at potential of -1,4 MPa; MEA + NaCl at -1,2 and -1,4 MPa. The NaCl, however, was verified to cause toxic effects in seed germination. This work shows that it is possible to obtain A. strictum infection in 36% of maize seeds infected by means of water restriction.
  • Development of a scar marker for Pierce's Disease strains of Xylella fastidiosa Articles

    Travensolo, Regiane F.; Ciapina, Luciane P.; Lemos, Eliana G. M.

    Abstract in Portuguese:

    O objetivo deste trabalho foi desenvolver um oligonucleotídeo iniciador para reação em cadeia da polimerase (PCR) específico para as estirpes de Xylella fastidiosa que causam o mal de Pierce (PD) em videira (Vitis vinifera). Amplificações de DNA de 23 diferentes hospedeiros, usando o conjunto de oligonucleotídeos REP1-R (5'-IIIICGICGIATCCIGGC-3') e REP 2 (5'-ICGICTTATCI GGCCTAC-3') utilizando o programa: 94 ºC/2 min; 35 X (94 ºC/1 min, 45 ºC/1 min; 72 ºC/1 min and 30 s) 72 ºC/5 min, produziu um fragmento de 630 pb que diferenciou as estirpes de videiras dos demais. Entretanto, padrões de bandeamento REP não são considerados confiáveis para detecção devido ao par de oligonucleotídeos REP 1 e REP 2 corresponderem a seqüências repetitivas encontradas por todo o genoma bacteriano. Desse modo, o produto amplificado de 630 pb foi eluído do gel de agarose, purificado e seqüenciado. A informação da seqüência nucleotídica foi usada para identificar e sintetizar um oligonucleotídeo específico para o isolado de X. fastidiosa causadora do mal de Pierce denominado Xf-1 (5'-CGGGGGTGTAGGAGGGGTTGT-3'), que foi utilizado juntamente com o oligonucleotídeo REP-2 nas condições 94 ºC/2 min; 35 X (94 ºC/1 min, 62 ºC/1 min; 72 ºC/1 min and 30 s) 72 ºC/10 min. Os DNAs das estirpes de X. fastidiosa de outros hospedeiros [amêndoa (Prumus amygdalus), citros (Citrus spp.), café (Coffea arabica), olmo (Ulmus americana), amora (Morus rubra), carvalho (Quercus rubra), vinca (Catharantus roseus), ameixa (Prunus salicina) e ragweed (Ambrosia artemisiifolia)] e de bactérias Gram negativas e positivas foram submetidos a amplificação com o conjunto de oligonucleotídeos Xf-1/REP 2. Um fragmento, de aproximadamente 350 pb, foi amplificado apenas com o DNA de X. fastidiosa isolada de videira.

    Abstract in English:

    The objective of this research was to develop a primer for a polymerase chain reaction specific for Xylella fastidiosa strains that cause Pierce's Disease (PD) in grapes (Vitis vinifera). The DNA amplification of 23 different strains of X. fastidiosa, using a set of primers REP1-R (5'-IIIICGICGIATCCIGGC-3') and REP 2 (5'-ICGICTTATCIGGCCTAC-3') using the following program: 94 ºC/2 min; 35 X (94 ºC/1 min, 45 ºC/1 min and 72 ºC/1 min and 30 s) 72 ºC/5 min, produced a fragment of 630 bp that differentiated the strains that cause disease in grapes from the other strains. However, REP banding patterns could not be considered reliable for detection because the REP1-R and REP 2 primers correspond to repetitive sequences, which are found throughout the bacterial genome. The amplified product of 630 bp was eluted from the agarose gel, purified and sequenced. The nucleotide sequence information was used to identify and synthesize an specific oligonucleotide for X. fastidiosa strains that cause Pierce's Disease denominated Xf-1 (5'-CGGGGGTGTAGGAGGGGTTGT-3') which was used jointly with the REP-2 primer at the following conditions: 94 ºC/2 min; 35 X (94 ºC/1 min, 62 ºC/1 min; 72 ºC/1 min and 30 s) 72 ºC/10 min. The DNAs isolated from strains of X. fastidiosa from other hosts [almond (Prumus amygdalus), citrus (Citrus spp.), coffee (Coffea arabica), elm (Ulmus americana), mulberry (Morus rubra), oak (Quercus rubra), periwinkle wilt (Catharantus roseus), plums (Prunus salicina) and ragweed (Ambrosia artemisiifolia)] and also from other Gram negative and positive bacteria were submitted to amplification with a pair of primers Xf-1/REP 2 to verify its specificity. A fragment, about 350 bp, was amplified only when the DNA from strains of X. fastidiosa isolated from grapes was employed.
  • Reação do trigo à Magnaporthe grisea nos diferentes estádios de desenvolvimento Artigos

    Arruda, Mauricio A.; Bueno, Cassiara R. N. C.; Zamprogno, Karina C.; Lavorenti, Norberto A.; Urashima, Alfredo S.

    Abstract in Portuguese:

    A brusone em trigo (Triticum aestivum), causada por Magnaporthe grisea, foi relatada pela primeira vez no Paraná em meados da década de 80, estando atualmente disseminada nos principais estados produtores do país. A relação da resistência à brusone nas folhas e espigas de trigo foi estudada utilizando-se 15 variedades de trigo e três diferentes isolados do fungo. Foram empregados cinco variedades e três isolados de M. grisea para estudar a relação entre resistência de espigas e percentagem de infecção das sementes colhidas. Os resultados demonstraram que houve correlação positiva entre suscetibilidade nas folhas no estádio vegetativo e nas espigas. A variedade BH1146 foi a única que apresentou correlação positiva da resistência, pois foi a única a apresentar plântulas resistentes que posteriormente se refletiu numa menor incidência de espigas doentes com menor severidade da doença. Detectou-se correlação altamente significativa entre incidência e severidade da doença nas espigas. As percentagens de sementes infetadas foram menores nas variedades que apresentaram reação resistente nas espigas do que nas variedades suscetíveis.

    Abstract in English:

    The blast of wheat (Triticum aestivum) was first reported in the State of Paraná in 1986 and has now spread to all the major wheat growing areas of Brazil. The relation between leaf and neck blast resistance was studied utilizing three isolates and 15 wheat varieties. The relationship between incidence of blast in wheat spikes and infection of harvested seeds was examined using inoculation tests with three fungal isolates on five wheat cultivars. The varieties showing susceptible reaction at seedling stage were also susceptible to spike infection. The BH1146 was the sole variety resistant at seedling stage, which subsequently produced a significantly lower the incidence and severity of blast. A high positive correlation was observed between incidence and severity of diseased heads. The percentage of infected seeds was less in varieties exhibiting a resistant reaction to spike infection than in susceptible varieties.
  • Fungos antagonistas a Sclerotinia sclerotiorum em pepineiro cultivado em estufa Artigos

    Ethur, Luciana Z.; Blume, Elena; Muniz, Marlove; Silva, Antonio Carlos F. da; Stefanelo, Daniela R.; Rocha, Edileusa K. da

    Abstract in Portuguese:

    O mofo branco causado por Sclerotinia sclerotiorum pode inviabilizar o cultivo de olerícolas em ambiente protegido. Para elaborar-se um programa de controle biológico desse patógeno, necessita-se de antagonistas adequados. Este trabalho objetivou selecionar antagonistas fúngicos eficazes no controle de S. sclerotiorum em pepineiro (Cucumis sativus) cultivado em estufa, bem como, analisar a interferência dos antagonistas no crescimento vegetal. Foram utilizados um isolado de S. sclerotiorum obtido de pepineiro e 112 isolados fúngicos de quatro gêneros: Trichoderma, Fusarium, Penicillium e Aspergillus. Em experimento in vitro, foi utilizada a técnica do papel celofane e selecionados oito isolados de Trichoderma virens, os quais promoveram maior inibição no crescimento do patógeno (94 a 100%). Dois experimentos in vivo foram desenvolvidos em estufa utilizando-se substrato autoclavado e não autoclavado, em copos plásticos, e substrato não autoclavado, em sacos plásticos; o substrato foi infestado com S. sclerotiorum e foram utilizados oito isolados de T. virens como antagonistas. Todos os isolados testados controlaram o tombamento de mudas, mas o efeito sobre o crescimento vegetal variou de acordo com os isolados e o tratamento do substrato.

    Abstract in English:

    White mold caused by Sclerotinia sclerotiorum may severely damage vegetables grown in greenhouses. To develop a biological control program for this pathogen proper antagonists are needed. This work aimed to select efficient fungi antagonists for controlling S. sclerotiorum on cucumber (Cucumis sativus) grown in greenhouses, and to evaluate the effect of the antagonist on the growth of the vegetable. An isolate of S. sclerotiorum obtained from cucumber and 112 fungi isolates belonging to four genera were used: Trichoderma, Fusarium, Penicillium, and Aspergillus. For the in vitro experiment, the cellophane method was used and eight Trichoderma virens isolates were selected that had inhibited the pathogen growth by 94 to 100%. Greenhouse experiments used sterilized and non-sterilized substrate in plastic cups and non-sterilized substrate in plastic bags. The substrate was inoculated with S. sclerotiorum and the eight isolates of T. virens were used as antagonists. All eight isolates controlled damping-off of plants caused by S. sclerotiorum, but the effect on cucumber growth varied according to the isolate and the substrate treatment.
  • Expansão de lesão por manchas foliares em cevada e sua interação com a aplicação foliar de fungicidas Artigos

    Menegon, Ana P.; Forcelini, Carlos A.; Fernandes, José M.C.

    Abstract in Portuguese:

    A mancha-marrom (MM) e a mancha-reticular (MR), causadas pelos fungos Bipolaris sorokiniana e Pyrenophora teres, respectivamente, são as principais doenças foliares da cevada (Hordeum vulgare). A taxa de expansão da lesão pode ser um componente importante do progresso destas doenças. Em casa de vegetação e em campo, avaliou-se a expansão de lesão em cultivares de cevada, diante da aplicação preventiva ou curativa de um fungicida triazol (ciproconazole + propiconazole) e uma estrobilurina (azoxistrobim). O tamanho médio das lesões (MM) aumentou de 2,2 a 4,9 mm², com maior incremento entre 14 e 30 dias após a inoculação. As cultivares MN 698 e EMB 128 apresentaram taxas de expansão de lesão maiores que os demais. O tratamento preventivo com fungicida protegeu as plantas de infecção por B. sorokiniana por até 21 dias. Aplicações curativas, realizadas um, dois, quatro, seis, oito, dez ou 12 dias após a inoculação, determinaram lesões iniciais maiores (até 0,68 mm²) e mais numerosas (até 3,9 por folha), com ação apenas sobre a esporulação do fungo. Em campo, somente as primeiras aplicações, iniciadas entre 46 e 60 dias após a emergência das plantas, reduziram o tamanho das lesões de MR e a área abaixo da curva de progresso da doença (AACPD), com aumento no rendimento de grãos. Como os fungicidas apresentaram pouco ou nenhum efeito curativo sobre a expansão da lesão, sugere-se reavaliar as recomendações de controle baseadas em severidade de doença.

    Abstract in English:

    Brown spot and net blotch, caused by the fungi Bipolaris sorokiniana and Pyrenophora teres, respectively, are the main leaf spots of barley (Hordeum vulgare). The rate of lesion expansion is an important epidemiological component of leaf spots and should be taken into account for disease management. Through greenhouse and field trials, lesion expansion was assessed in barley cultivars, under preventive and curative sprays of triazol (cyproconazole + propiconazole) and strobylurin (azoxystrobin) fungicides. In the greenhouse, the average area of brown spot lesions increased from 2.2 to 4.9 mm², most of which occurred between 14 and 30 days after inoculation. The cultivars MN 698 and EMB 128 showed a higher rate of lesion expansion than BR 2, EMB 127, EMB 129, and MN 684. A single preventive spray of fungicide averted infection by B. sorokiniana for over 21 days. In contrast, curative sprays carried out at one, two, four, six, eight, ten, or 12 days after inoculation, although inhibiting fungus sporulation, also resulted in initial lesions that were larger (up to 0.68 mm²) and more numerous (up to 3.9 per leaf). In the field, only the spray programs initiated at 46 to 60 days after plant emergence were able to reduce lesion size and the area under the disease progress curve (AACPD) for net blotch, which increased grain yield. Because fungicides had little or no curative effect on lesion expansion, fungicidal sprays based on disease severity should be reevaluated.
  • Expansão de lesão da mancha-reticular da cevada e sua interação com o tratamento de sementes Artigos

    Menegon, Ana P.; Forcelini, Carlos A.; Fernandes, José M. C.

    Abstract in Portuguese:

    Experimentos foram conduzidos na FAMV/UPF, em 2002, com o objetivo de avaliar a influência do tratamento de sementes no processo de expansão de lesão pela mancha-reticular da cevada (Hordeum vulgare). Utilizaram-se as cultivares BR 2 e MN 698, com e sem tratamento de sementes com o fungicida triadimenol (40 g i.a./100 kg sementes), combinado com aplicações foliares de um fungicida triazol (tebuconazole) e uma combinação de triazól e estrobirulina (epoxiconazole + piraclostrobim), sob uma ou duas aplicações, em diferentes estádios fenológicos da planta. O tamanho das lesões e a severidade da doença foram avaliadas aos 62, 79, 88, 95, 103 e 111 dias após a semeadura. O tamanho da lesão foi significativamente menor nas plantas a partir de sementes com baixa incidência do patógeno, de sementes tratadas e plantas pulverizadas com fungicidas foliares. O número de aplicações, se uma ou duas, e o tipo de fungicida não influenciaram o tamanho das lesões. A severidade da mancha-reticular foi pequena, especialmente sob tratamento de sementes. Evidenciou-se o efeito restritivo do tratamento de sementes sobre o crescimento das lesões, o qual é um componente importante de epidemias por manchas foliares em cevada.

    Abstract in English:

    Field experiments were carried out at the FAMV/UPF, in 2002, to evaluate whether seed treatment with fungicides was able to influence the process of lesion expansion by barley (Hordeum vulgare) net blotch. Barley seeds of the cultivars BR 2 and MN 698 were treated with triadimenol at 40 g i.a./100 kg seeds. The seed treatment was combined with single or double sprays of a triazol fungicide (tebuconazole), or a triazol + strobyrulin (epoxiconazole + pyraclostrobin), at different plant growth stages. Lesion size and disease severity were assessed at 62, 79, 88, 95, 103, and 111 days after planting. The use of seeds with a low incidence of infection, seeds treated with fungicide, and foliar sprays significantly reduced the process of lesion expansion. The number of sprays, wheter one or two, and the type of fungicide did not influence lesion expansion. The severity of net blotch was low, especially under seed treatment, which reduced the process of lesion expansion, an important component of barley leaf spot epidemics.
  • Análise comparativa da variabilidade patogênica de Uromyces appendiculatus em algumas regiões brasileiras Artigos

    Souza, Thiago Lívio P. O. de; Alzate-Marin, Ana Lília; Moreira, Maurilio A.; Barros, Everaldo G. de

    Abstract in Portuguese:

    A ferrugem do feijoeiro comum (Phaseolus vulgaris), incitada pelo fungo Uromyces appendiculatus, é uma das mais importantes doenças que afetam essa cultura. Trabalhos anteriores demonstraram a ampla variabilidade patogênica de U. appendiculatus no Brasil. No entanto, o uso de distintos grupos de cultivares diferenciadoras em tais trabalhos dificulta a análise comparativa e a identificação de fontes de resistência de amplo espectro. Assim, os objetivos deste trabalho foram: 1) caracterizar sete isolados de U. appendiculatus, coletados em diferentes regiões do estado de Minas Gerais, frente às 19 cultivares diferenciadoras para ferrugem, adotadas no "The Bean Rust Workshop", realizado em 1983, em Porto Rico, e 2) comparar os padrões de resistência/suscetibilidade obtidos, com aqueles apresentados frente a patótipos isolados nos estados de Santa Catarina, Rio Grande do Sul e Goiás, visando identificar fontes de resistência de amplo espectro. Os sete isolados coletados em Minas Gerais foram classificados com sete patótipos distintos. As cultivares diferenciadoras com os maiores espectros de resistência foram 'Redlands Pioneer', 'California Small White 643', 'Brown Beauty', 'AxS 37' e 'Compuesto Negro Chimaltenango'. Portanto, apesar da exclusão das cultivares California Small White 643, AxS 37 e Brown Beauty da nova série diferenciadora internacional proposta em 2002, na África do Sul, recomenda-se adicionar estas cultivares nas futuras caracterizações de patótipos a serem realizadas no Brasil, como um modo de monitorar a variabilidade patogênica de populações de U. appendiculatus nas regiões produtoras.

    Abstract in English:

    Common bean (Phaseolus vulgaris) rust, incited by Uromyces appendiculatus, is among the most important diseases affecting this culture. Several works have demonstrated the extensive pathogenic variability of U. appendiculatus in Brazil. However, the use of distinct sets of differential cultivars prevents the comparison among the data obtained and the identification of sources with ample resistance spectra. The objectives of this work were: 1) to characterize seven U. appendiculatus isolates collected in different regions of the state of Minas Gerais in relation to the 19 rust differential cultivars defined in the "The Bean Rust Workshop" in 1983, in Porto Rico, and 2) to compare the resistance/susceptibility patterns obtained with those reported with isolates collected in Santa Catarina, Rio Grande do Sul and Goiás, to identify sources with ample resistance spectra. The seven isolates collected in the state of Minas Gerais were classified as seven different pathotypes. The differential cultivars with the largest resistance spectra were 'Redlands Pioneer', 'California Small White 643', 'Brown Beauty', 'AxS 37' and 'Compuesto Negro Chimaltenango'. Despite the fact that the cultivars California Small White 643, AxS 37 and Brown Beauty have been excluded from the new differential series proposed in 2002, in South Africa, we strongly recommend that these three cultivars should also be characterized in future studies in Brazil as a mean of monitoring the pathogenic variability of U. apppendiculatus populations in bean growing regions.
  • Dispersão anemófila do fungo Lasiodiplodia theobromae em plantações de coqueiro Artigos

    Correia, Maiko S.; Costa, Jefferson L. da S.

    Abstract in Portuguese:

    Neste trabalho determinou-se a dispersão anemófila de conídios de Lasiodiplodia theobromae, agente causal da queima das folhas do coqueiro (Cocos nucifera), e sua relação com a precipitação pluviométrica. Para tanto, cinco armadilhas cata-vento e uma armadilha tipo Burkard, coletoras de esporos, foram instaladas nas entrelinhas de um coqueiral, a 1,80 m de altura do solo. Os conídios foram capturados em fitas transparentes, untadas com solução adesiva de gelvatol e vaselina. Semanalmente, as fitas foram retiradas das armadilhas e remontadas em lâminas para microscopia, onde era contado o número de conídios capturados, com auxilio de um microscópio. Esses dados foram coletados durante um ano e relacionados com dados pluviométricos obtidos na área experimental. Para as armadilhas cata-vento, a maior quantidade de conídios foi de 231 unidades, no mês de outubro. Para a armadilha Burkard, a maior quantidade capturada foi de 3.072 conídios, no mês de junho. Em geral, durante todo o ano, houve predominância na liberação de esporos no período diurno, ocorrendo maior captura entre 6:00 e 10:00 h. O número de conídios capturados pelos dois tipos de armadilhas relacionou-se com a precipitação de forma positiva entre 25 e 80 mm, e após 80 mm, negativamente. Foram estabelecidas curvas de tendências da quantidade de conídios capturados nos dois tipos de armadilhas, em função da pluviosidade mensal, através de equações de regressões cúbicas. As curvas apresentaram formatos semelhantes. A liberação dos conídios foi estimulada sempre que a pluviosidade mensal atingia o mínimo de 25 mm. O ponto de máxima da curva, correspondente a 80 mm de chuva, indica que acima deste volume os conídios são precipitados do ar.

    Abstract in English:

    The objective of this research was to study the aerial dispersion of Lasiodiplodia theobromae, the causal agent of coconut (Cocos nucifera) leaf blight, and its relationship with pluviometric precipitation. Five wind catcher spore traps and one Burkard spore trap were installed in a coconut plantation, at a height of 1.80 m from the ground. The conidia were captured in transparent tapes covered with gelvatol and vaseline. Every week, the tapes were retrieved and mounted on slides for microscopy, where the number of trapped conidia was determinated. For the wind catcher trap, the highest amount of trapped conidia was 231 units in the month of October. For the Burkard spore trap the highest amount of captured conidia was 3072 units achieved in June. In general, during a-year-round sampling, there was a predominance of conidia liberation during the diurnal period. The highest amount of conidia was captured from 6:00 to 10:00 a.m. The number of conidia trapped by the two types of devices correlated positively with the amount of precipitation ranging from 25 to 80 mm. Above 80 mm of rain, the correlation was negative. Curves of tendency were established indicating that the amount of conidia captured by the two types of spore traps is a function of monthly precipitation and that both devices showed similar curves of tendency. The liberation of conidia was stimulated whenever precipitation reached a minimum of 25 mm. The curves maximum point, correspond to 80 mm of rain, indicating that above this volume the conidia were precipitated.
  • Controle químico do crestamento gomoso do caule em melancia Artigos

    Santos, Gil R.; Café-Filho, Adalberto C.; Saboya, Luciano M. F.

    Abstract in Portuguese:

    O objetivo deste trabalho foi estudar o efeito de fungicidas e da adubação de cobertura na severidade do crestamento gomoso do caule, em melancia (Citrullus lanatus). Foram conduzidos dois ensaios fatoriais em campo, no Projeto Formoso, Tocantins, em delineamento de blocos ao acaso com quatro repetições, e parcelas experimentais de 30 x 10 m. Para o ensaio I, os tratamentos (fator a) constaram dos seguintes ingredientes ativos de fungicidas/100 l de água ou ha: (1) mancozeb (MANC)-160,2 ml, (2) tiofanato metílico (TM)-49 g, (3) carbendazim-500 ml, (4) tebuconazole-20 g, (5) difenoconazole (DIFE)-75 ml, (6) tiofanato metílico-40 g + clorotalonil-100 g, (7) oxicloreto de cobre-168 g, (8) trifloxistrobina-87,5 g + propiconazole-87,5 g, (9) mancozeb-80 ml + difenoconazole-37,2 ml e (10) testemunha. No fator b, estudou-se a adubação de cobertura (N-K) nos níveis de 30-20 e 90-60 kg/ha. A severidade da doença nas folhas foi avaliada com uma escala de notas de 0 a 9. Para o ensaio II, repetiram-se os tratamentos do fator a, enquanto o fator b (níveis de adubação), foram: 60-40 e 120-80 kg/ha de N-K. Nos dois ensaios as menores Áreas Abaixo da Curva de Progresso de Doença (AACPD) foram obtidas com MANC + DIFE, TM + clorothalonil, MANC, trifloxistrobina + propiconazole e oxicloreto de cobre. A adubação de cobertura não influenciou a severidade da doença. As produtividades mais altas foram obtidas com TM + clorotalonil, MANC + DIFE e MANC que diferiram estatisticamente do DIFE, testemunha e trifloxistrobina + propiconazole.

    Abstract in English:

    This work reports the results of the effects of chemical control and nitrogen-potassium fertilization on gummy stem blight, one of the most important watermelon (Citrullus lanatus) diseases. Two factorial field assays were conducted in Projeto Formoso, Tocantins, in a randomized block design with four replicates. Experimental plots measured 30 x 10 m. Treatments for assay I were (factor a - active ingredients/100 l water or ha): (1) mancozeb (MANC)-160.2 ml, (2) methyl thiophanate (TM)-49 g, (3) carbendazin-500 ml, (4) tebuconazole-20 g, (5) difenoconazole (DIFE)-75 ml, (6) methyl thiophanate-40 g + chlorothalonil -100 g, (7) copper oxychlorate-168 g, (8) trifloxistrobina-87.5 g + propiconazole-87.5 g, (9) mancozeb-80 ml + difenoconazole-37.2 ml, and (10) control. Treatments for factor b were two levels of N-K fertilization: (1) 30-20, and (2) 90-60 kg/ha. Disease severity on leaves was evaluated on a 0 to 9 scale. For the assay II, treatments for factor a were repeated, while treatments for factor b were N-K fertilization levels (kg/ha) 60-40 and 120-80. On both assays, lowest Areas Under Disease Progress Curves (AUDPD), were obtained with MANC + DIFE, TM + chlorothalonil, MANC, trifloxistrobina + propiconazole and copper oxychlorate. Fertilization did not affect disease severity. Larger yields were obtained with TM + chlorothalonil, MANC + DIFE and MANC.
  • Sobrevivência de micélio e escleródios de Rhizoctonia solani tratados com Trichoderma spp., em restos de cultura de Eucalyptus sp. Comunicações

    Kunieda-Alonso, Sandra; Alfenas, Acelino C.; Maffia, Luiz A.

    Abstract in Portuguese:

    Este trabalho objetivou estudar a sobrevivência de micélio e escleródios de Rhizoctonia solani AG1-1C, em restos de cultura de eucalipto (Eucalyptus spp.) e avaliar a eficiência dos isolados Trichoderma longibrachiatum (UFV-1) e T. inhamatum (UFV-2 e UFV-3), comprovadamente antagônicos a R. solani, em reduzir a sobrevivência do patógeno, em condições de campo. Ao longo de 12 meses de avaliação, a sobrevivência de R. solani em folhas de eucalipto infetadas não foi afetada por fatores ambientes e tampouco por possíveis antagonistas de ocorrência natural. Por outro lado, a sobrevivência dos escleródios decresceu progressivamente, atingindo cerca de 26%. Não se constatou influência dos isolados de Trichoderma spp. na sobrevivência de R. solani em folhas infetadas de eucalipto. Entretanto, redução significativa e contínua na viabilidade de escleródios, foi observada, equiparando-se ao tratamento com fungicida, aos 25 dias após inoculação dos antagonistas, sendo os três isolados igualmente efetivos. Já, a sobrevivência no tratamento com fungicida, atingiu níveis significativamente baixos na primeira avaliação, mas sua eficiência foi reduzida ao longo do período experimental. Redução progressiva e contínua na sobrevivência de escleródios da testemunha foi também constatada, mas inferior a quaisquer dos tratamentos.

    Abstract in English:

    The survival of mycelium and sclerotia of Rhizoctonia solani AG1-1C was studied in Eucalyptus sp. litter treated with the antagonists Trichoderma longibrachiatum (UFV-1) and T. inhamatum (UFV-2 and UFV-3) isolates. For 12 months, R. solani survival in Rhizoctonia infected eucalypt leaves, was apparently not affected by environmental factors, nor by possible naturally occurring antagonists. On the other hand, the sclerotial rate survival decreased progressively reaching 26%. The influence of Trichoderma spp. isolates did not affect R. solani survival in eucalypt-infected leaves, but significant and continuous reduction of sclerotia viability was observed when compared to captan treatment, 25 days after treatment with the antagonists. The survival in the fungicide treatment reached significantly low levels in the first evaluation, but its efficiency decreased with time. Progressive reduction and continuous survival of sclerotia was detected in the control as well, but significantly less than any other treatment.
  • AFLP markers differentiate isolates of Colletotrichum gossypii from C. gossypii var. cephalosporioides Communications

    Silva-Mann, Renata; Vieira, Maria G. G. Carvalho; Machado, José C.; Bernardino Filho, José Roberto; Salgado, Kalinka C. C.; Stevens, Mikel R.

    Abstract in Portuguese:

    Doenças fúngicas em algodoeiro (Gossypium hirsutum), tais como antracnose causada por Colletotrichum gossypii e ramulose causada por C. gossypii var. cephalosporioides, levam a grandes perdas em produtividade. Estes microrganismos são patógenos veiculados por sementes e morfologicamente similares apesar deles induzirem sintomas diferentes, que podem levar a um erro no diagnóstico usando o teste de sanidade com sementes em rolo de papel. O presente estudo foi realizado para acessar a viabilidade do uso de marcadores Amplified Fragment Length Polymorphism (AFLP) para diferenciar estes patógenos. Cinco isolados, para cada patógeno, foram classificados de acordo com a patogenicidade e morfologia de crescimento micelial. As suspensões de conídios foram pulverizadas em plantas de algodoeiro com 30 dias e os sintomas avaliados aos dez e 40 dias após a inoculação. Para a morfologia de crescimento micelial, 200 sementes foram inoculadas com culturas puras com sete dias, e as características miceliais observadas sob microscópio esterioscópico sete dias após a inoculação. O DNA para a análise de AFLP foi obtido de micélio fúngico com sete dias, crescido em meio líquido, usando o protocolo Dneasy Qiagen. A técnica AFLP produziu 318 bandas polimórficas que foram selecionadas para calcular as similaridades usando o Coeficiente de Dice. Os resultados claramente distinguiram os isolados causadores de ramulose dos de antracnose, os quais concordam, com dados morfológicos e de patogenicidade.

    Abstract in English:

    Fungal diseases in cotton (Gossypium hirsutum), such as anthracnose caused by Colletotrichum gossypii and ramulose caused by C. gossypii var. cephalosporioides, are responsible for large yield losses. These pathogens are seed borne and morphologically similar although they induce different symptoms, which can lead to misdiagnosis using the blotter testing method. The present study was carried out to assess the viability of using Amplified Fragment Length Polymorphism (AFLP) markers to differentiate these pathogens. Five isolates, for each pathogen, were classified according to pathogenicity on cotton plants, and mycelial growth morphology. Conidial suspensions were sprayed on 30-day-old cotton plants and the symptoms assessed ten and 40 days after inoculation. For growth morphology 200 cottonseeds were inoculated with seven-day-old pure cultures, and the mycelial traits observed under a stereoscopic microscope seven days after inoculation. The DNA for AFLP analysis was obtained from seven-day-old fungal mycelia grown in liquid medium, using the Dneasy Qiagen protocol. Using the AFLP technique 318 polymorphic bands were selected to estimate similarities using Dice's Coefficient. The results clearly distinguished between ramulose and anthracnose isolates, which agreed with morphological and pathogenicity testing.
  • Variability of the 3' terminal of the polymerase gene of Grapevine leafroll-associated virus 3 isolates from Vale do São Francisco, Brazil Communications

    Dianese, Érico de C.; Ramalho, Eduardo D.; Cerqueira, Daniela M.; Lopes, Daniela B.; Fajardo, Thor V.M.; Ferreira, Marisa A.S.V.; Martins, Cláudia R.F.

    Abstract in Portuguese:

    A videira (Vitis spp.) é afetada por diversas viroses, dentre essas, o enrolamento da folha se destaca pela importância econômica. A doença é causada por um complexo formado por até oito vírus [Grapevine leafroll-associated virus (GLRaV) -1 ao -8]. O objetivo desse trabalho foi comparar a variabilidade da extremidade 3' do gene da polimerase de isolados de GLRaV-3, provenientes do Submédio do Vale do Rio São Francisco (Petrolina, PE) com a de outros isolados disponíveis no GenBank, incluindo um isolado da América do Norte e um da região sul do Brasil. O RNA viral foi extraído de três amostras infetadas, reagentes em teste de ELISA, e um fragmento de 340 pb foi amplificado por RT-PCR, utilizando-se oligonucleotídeos para a região do gene da polimerase viral compreendida entre os nucleotídeos 8267 a 8606. Observou-se que os três isolados da região do São Francisco, denominados Pet-1, Pet-2 e Pet-3, apresentaram 98% e 94% de similaridade com o isolado norte-americano (AF037268) com aquele do sul do Brasil (AF438411), respectivamente. A principal variação observada foi uma troca de um aminoácido da posição 2766 (F2766Y), considerando-se o genoma completo. Esses dados preliminares indicam a existência de uma variabilidade natural entre isolados de GLRaV-3 em videiras. Isso pode ser explicado pela propagação vegetativa e pelo longo ciclo da planta associados à propensão ao erro da RNA polimerase dependente de RNA.

    Abstract in English:

    Many viral diseases, including leafroll, which is of great economic importance, affect grapevines (Vitis spp.). A complex of eight viruses [Grapevine leafroll-associated virus (GLRaV) -1 to 8] is associated with this disease. The objective of this study was to compare the variability of the 3' terminal region of the polymerase gene of three isolates of GLRaV-3 (Grapevine leafroll-associated virus-3), from Submédio do Vale do Rio São Francisco (Petrolina-PE) with that of other isolates available at the GenBank, including an isolate from North America and another from Southern Brazil. The viral RNA was extracted from three infected ELISA reactive plants and a fragment of 340 bp was amplified, by RT-PCR, using primers that recognize that portion of the polymerase gene found between nucleotides 8267 and 8606. The three isolates from Vale do Rio São Francisco named Pet-1, Pet-2 and Pet-3, showed similarities ranging from 98% and 94%, respectively to the isolates from North America (AF037268) and Southern Brazilian (AF438411). Considering the whole genome, the main variation found was one amino acid change at position 2766 (F2766Y). These preliminary data indicate the existence of a natural variation among GLRaV-3 isolates from grapevines. This could be due to the vegetative propagation and long cycle of the plant, associated with the error-prone nature of RNA-dependent RNA polymerase.
  • Avaliação da variabilidade do Grapevine leafroll-associated virus 1 e 3 por análise de seqüências de nucleotídeos e polimorfismo conformacional de fita simples Comunicações

    Fajardo, Thor V.M.; Eiras, Marcelo; Schenato, Paula G.; Nickel, Osmar; Kuhn, Gilmar B.

    Abstract in Portuguese:

    As principais espécies de vírus envolvidas na etiologia do enrolamento da folha da videira (Vitis spp.) são Grapevine leafroll-associated virus 1 e 3 (GLRaV-1 e -3). Neste estudo da variabilidade desses vírus, foram amplificados dois fragmentos de DNA (396 bp do GLRaV-1 e 602 bp do GLRaV-3) por RT-PCR, a partir de RNA total extraído de nervuras e pecíolos de videiras infetadas, utilizando-se dois pares de oligonucleotídeos. Os DNAs amplificados foram clonados e reamplificados, a partir dos clones recombinantes, e comparados quanto às diferenças conformacionais das fitas simples desnaturadas (SSCP). Foram observados dois padrões distintos de perfis eletroforéticos para cada vírus, tendo sido seqüenciado pelo menos um clone viral correspondente a cada padrão. As duas seqüências de nucleotídeos obtidas para o GLRaV-1 apresentaram maior homologia (79,8% e 87,4%) com um isolado australiano e as duas seqüências relativas ao GLRaV-3 exibiram maior homologia (75,1% e 81,8%) com um isolado norte-americano. Os resultados demonstraram a ocorrência de seqüências variantes destes vírus nas videiras analisadas.

    Abstract in English:

    The main viral species associated with grapevine (Vitis spp.) leafroll etiology are Grapevine leafroll-associated virus 1 and 3 (GLRaV-1 and -3). To partially evaluate the variability of these viruses, two DNA fragments (396 bp of GLRaV-1 and 602 bp of GLRaV-3) were amplified by RT-PCR using two sets of primers after total RNA extraction from veins and petioles of infected grapevines. The amplified DNA fragments were cloned and the reamplified viral DNAs, obtained from the recombinant clones, were studied with regard to denatured single-strand DNA conformational differences. Two different electrophoretic profiles were observed for each virus species. At least one viral clone representing each mobility profile was sequenced. The two nucleotide sequences obtained for GLRaV-1 showed the highest homologies (79,8% and 87,4%) with an Australian isolate, whereas the two nucleotide sequences of GLRaV-3 exhibited the highest homologies (75,1% and 81,8%) with a North American isolate. These results demonstrated the occurrence of GLRaV-1 and -3 sequence variants infecting the analysed grapevines.
  • Influence of internal seedborne Fusarium semitectum on cotton seedlings Communications

    Costa, Maria L. N.; Dhingra, Onkar D.; Silva, Janaina L. da

    Abstract in Portuguese:

    Fusarium semitectum foi o principal fungo colonizador de sementes de algodão (Gossypium hirsutum) nos lotes comerciais deslintados com acido, mas não havia nenhuma correlação entre sua incidência e porcentagem de emergência de plântulas e sintomas de doença nas plântulas emergidas. Técnicas de inoculação simulando infecção interna das sementes pelo fungo mostraram que a ausência de correlação observada pode estar relacionada ao limiar da colonização no tegumento da semente. O inóculo interno nas sementes, além de reduzir a emergência de plântulas, produz um conjunto de sintomas nas plântulas emergidas, que vão do geotropismo negativo, dilaceração de folhas primaria, podridão do colo levando à podridão seca de raízes e mortalidade de plântulas. A podridão de raízes continuou se desenvolvendo nas plântulas sobreviventes resultando em mortalidade na fase pós-plântula.

    Abstract in English:

    Fusarium semitectum was found to be the major seed colonizing fungus in the commercial acid delinted cotton (Gossypium hirsutum) seed lots. There was no correlation, however, between its incidence and seedling emergence and disease symptoms on the emerged seedlings in autoclaved sand. Inoculation technique simulating internally seedborne nature of the fungus showed that the observed non-correlation might be related to the threshold level of seed coat colonization. The internally seedborne inoculum besides reducing seedling emergence, incited an array of symptoms on the emerged seedlings, which ranged from negative geotropism, leaf tearing, collar rot leading to dry root rot and seedling mortality. The dry root rot continued to develop on the plants surviving the seedling phase. The collar rot symptoms can be confused with those caused by Rhizoctonia solani.
  • Germinação e penetração de Stenocarpella macrospora em folhas de milho Comunicações

    Brunelli, Kátia R.; Athayde Sobrinho, Cândido; Cavalcanti, Leonardo S.; Ferreira, Paulo T. O.; Camargo, Luis E. A.

    Abstract in Portuguese:

    O sucesso do estabelecimento de uma relação parasitária entre fungos e plantas, em muitos casos, depende de eventos que antecedem à infecção. Neste trabalho, as fases compreendidas entre a germinação e a penetração do fungo Stenocarpella macrospora foram analisadas por meio de microscópio eletrônico de varredura. Para tanto, plantas de milho (Zea mays) híbrido Das-8492, suscetível à mancha foliar de diplodia, foram cultivadas em casa de vegetação e inoculadas com 300 µl de uma suspensão de 10(5) conídios/ml ao atingirem cinco-seis folhas expandidas. As amostras foram obtidas a partir de discos foliares coletados em vários momentos após a inoculação e preparadas para análise ao microscópio eletrônico de varredura. Oitenta e seis por cento dos conídios germinaram entre 12 e 15 h após a inoculação, ao passo que a formação dos apressórios ocorreu 18 h após a inoculação. A presença de uma matriz extracelular também foi observada desde a germinação até a penetração do patógeno, sugerindo a participação da mesma nos processos relacionados à patogênese.

    Abstract in English:

    The success of a parasitic relationship between fungal pathogens and their host plants depends on pre-infectional events. In this work scanning electron microscopy was used to study the events that occur between germination and penetration of the fungus Stenocarpella macrospora on maize (Zea mays) leaves. Plants of the hybrid Das-8492 were cultivated in greenhouse, and inoculated at the five-six leaves stage with 300 µl of a conidial suspension of 10(5) conidia/ml. Disk samples of leaf tissue were collected at different times after inoculation and prepared for analysis by scanning electron microscopy. It was verified that 86% of the conidia germinated between 12-15 h whereas apressoria formation occurred 18 h after inoculation. The presence of an extra cellular matrix also was observed during germination and penetration, suggesting that it may have a role in pathogenesis.
  • Detection and partial characterization of a carlavirus causing stem necrosis of soybean in Brazil Communications

    Almeida, Álvaro M. R.; Piuga, Fernanda F.; Marin, Silvana R.R.; Kitajima, Elliot W.; Gaspar, José O.; Oliveira, Thalita G. de; Moraes, Tanara G. de

    Abstract in Portuguese:

    No ano agrícola de 2000/2001, ocorreu um surto de nanismo e necrose da haste em soja (Glycine max) plantada em duas áreas do Brasil Central e na safra seguinte, esta anomalia foi constatada em outras regiões produtoras, mesmo distantes mais de 2.000 km de onde fora inicialmente constatada. Estudos envolvendo ensaios de transmissão (enxertia, mecânica e insetos vetores), microscopia eletrônica, purificação, sorologia e ensaios moleculares indicaram que a enfermidade foi causada por um carlavirus transmitido por mosca branca, possivelmente relacionado ao Cowpea mild mottle virus (CpMMV).

    Abstract in English:

    Stunting and stem necrosis were noticed in soybeans (Glycine max) grown in 2000/2001 in West Central Brazil the same condition was also observed in the following year in plantations as far as 2,000 km from the initial area. Based on transmission (mechanical, graft, insect vector), purification and serology, electron microscopy and molecular studies the causal agent was determined to be a whitefly-borne carlavirus which is possibly related to Cowpea mild mottle virus (CpMMV).
  • New hosts of Oidiopsis haplophylli in the solanaceae family in Brazil Communications

    Reis, Ailton; Boiteux, Leonardo S.; Paz-Lima, Milton L.; Silva, Patrícia P.; Lopes, Carlos A.

    Abstract in Portuguese:

    A ocorrência natural de oídio foi observada em plantas de jiló (Solanum gilo), berinjela (S. melongena), batata (S. tuberosum), batata silvestre (S. chacoense) e em duas espécies de fumo (Nicotiana rustica e N. tabacum) em Brasília, Distrito Federal. Os sintomas iniciais da doença incluíam manchas amarelas na face superior do limbo foliar correspondendo a colônias fúngicas, esbranquiçadas com abundante produção de conídios, na superfície inferior. Com o desenvolvimento da doença, as manchas amarelas passaram a necróticas com coloração marrom clara. Observações em lupa revelaram a presença de conidióforos emergindo através dos estômatos e alguns apresentavam duas a três ramificações. Conídios hialinos e com evidente dimorfismo foram observados, sendo os conídios primários de formato lanceolado e os secundários subcilindricos. As características morfológicas e morfométricas dos dois tipos de conídios apresentaram um padrão similar àqueles descritos para Oidiopsis haplophylli. A forma perfeita do fungo (Leveillula taurica) não foi encontrada em nenhuma das hospedeiras examinadas. Este é o primeiro relato destas seis espécies de solanáceas como hospedeiras naturais de O. haplophylli no Brasil. Inoculações controladas empregando os isolados de O. haplophylli obtidos destas hospedeiras indicaram que estes são também patogênicos ao pimentão (Capsicum annuum) e tomate (Lycopersicon esculentum). Esta doença pode se tornar um problema para estas novas hospedeiras especialmente em condições de cultivo protegido ou em áreas de clima seco com irrigação localizada via gotejamento.

    Abstract in English:

    A powdery mildew disease was observed on leaves of Solanum gilo, S. melongena, S. tuberosum S. chacoense, Nicotiana rustica and N. tabacum in Brasília (Federal District), Brazil. Symptoms were mainly characterized by adaxial yellow areas in the leaves corresponding to white fungal colonies on the abaxial surface. Profuse sporulation was often observed. Light microscopy of the fungal colonies revealed the presence of conidiophores emerging through stomata with some having two or three branches. Ellipsoidal, subhyaline conidia were predominantly born singly and terminally on the conidiophore. All morphometrical characteristics agreed with those of Oidiopsis haplophylli (Syn. O. sicula). The teleomorph (Leveillula taurica) was not observed. Inoculation tests indicated that O. haplophylli isolates obtained from S. gilo, S. melongena, S. tuberosum, S. chacoense, Nicotiana rustica and N. tabacum were also pathogenic to sweet pepper (Capsicum annuum) and tomato (Lycopersicon esculentum). This is apparently the first report of these Solanaceae species as hosts of O. haplophylli in Brazil. This disease may become important in these crops, especially in greenhouses, and in hot and dry areas where drip irrigation is employed.
  • Detecção molecular de Xylella fastidiosa em citros no Estado do Pará Notas Fitopatológicas

    Poltronieri, Luiz S.; Cunha Junior, Jadier O.; Trindade, Dinaldo R.; Cardoso, Shirley S.; Brioso, Paulo S.T.
  • Ocorrência da lixa-grande do coqueiro no Estado do Ceará Notas Fitopatológicas

    Viana, Francisco Marto P.; Uchôa, Cleilson N.; Freire, Francisco C. O.; Vidal, Júlio C.
  • Mortalidade de estacas enraizadas de Pinus spp. causada por Rhizoctonia solani Notas Fitopatológicas

    Ferreira, Francisco A.; Mendes, José Eduardo P.; Maia, José Luis
  • Não transmissibilidade do vírus do amarelão do meloeiro por sementes Notas Fitopatológicas

    Santos, Antonio A. dos; Viana, Francisco M. P.; Cardoso, José E.; Vidal, Julio C.
  • Queda de frutos em coqueiro causada por Lasiodiplodia theobromae em Roraima Notas Fitopatológicas

    Halfeld-Vieira, Bernardo A.; Nechet, Kátia de Lima
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