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Immunofluorescence in cytogenetic analysis: method and applications

O controle da informação genética codificada pelo DNA em cromossomos de mamíferos é mediado por proteínas, algumas das quais estão apenas temporariamente ligadas enquanto que outras estão intrinsecamente associadas com ácido nucléico na mistura complexa conhecida por cromatina. Proteínas associadas com cromatina variam desde as ubíquas e abundantes histonas até os mais específicos e raros entre os fatores de transcrição. Embora muitas proteínas de cromatina sejam provavelmente excluídas dos cromossomos mitóticos altamente condensados, muitas delas são retidas durante todo o ciclo celular e podem ser detectadas nos cromossomos em esfregaços de metáfase. Comparando a distribuição de uma proteína cromossômica com marcadores citogenéticos conhecidos em cromossomos em metáfase, pode-se obter uma primeira fonte de dados importante e potencialmente muito informativa a respeito da função da proteína em estudo. O objetivo do presente estudo é resumir alguns dos princípios envolvidos na obtenção de preparações cromossômicas adequadas para subseqüente imunolocalização dos antígenos protéicos. Algumas aplicações do método serão incluídas para ilustrar como esta abordagem aumentou nossa compreensão da estrutura cromossômica e da regulação genética.


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