Um novo método para quantificação de glicerol em aguardentes de cana de açúcar (cachaças) foi proposto baseado na derivatização das amostras com cloreto de benzoíla seguido por extração em fase sólida e análise via cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos. Os limites de detecção e de quantificação para a análise de glicerol são de 0,25 e 0,74 mg L−1, respectivamente. A exatidão é de 97,5%, a precisão de 93,5% e a linearidade r2 = 0,998 para o intervalo de 0,56 mg L−1 a 112,0 mg L−1 de glicerol. Experimentos com quarenta e oito amostras de cachaças envelhecidas e não envelhecidas e sete extratos etanólicos de madeira mostraram que o processo de envelhecimento contribui para o aumento da concentração de glicerol. A concentração média de glicerol nas amostras de cachaças envelhecidas foi cerca de 10 vezes maior em relação às das cachaças não envelhecidas.