Misturas de enantiômeros de alanina, serina, threonina, valina, metionina, leucina e norleucina foram resolvidas cromatograficamente (e reprodutivelmente), através de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com fase reversa, por troca de ligantes, utilizando-se L-prolina, L-hidroxiprolina ou N,N-dimetil-L-fenilalanina (2 mmol L-1) e Cu(CH3COO)2 (1 mmol L-1) em água ou em água/metanol. A utilização de água/metanol leva a uma grande diminuição dos tempos de retenção dos α-amino ácidos mais hidrofóbicos, preservando a separação enantiomérica. O pH precisa ser alto o bastante para permitir a presença de grupos –NH2 livres, o que torna a complexação com Cu(II) mais fácil. α-Amino ácidos conformacionalmente mais restritos, como a L-prolina e a L-hidroxiprolina, conduziram a separações enantioméricas menores. A formação de complexos pseudo-homoquirais e pseudo-heteroquirais, por troca de ligantes, que é cinética e termodinamicamente controlada, desempenha um papel fundamental para a separação enantiomérica desejada. Esta metodologia simples e barata pode ser usada em qualquer laboratório envolvido em síntese de α-amino ácidos.