Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial, Volume: 40, Issue: 1, Published: 2004
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  • Novos desafios para o JBPML

  • Infectivity of wild-type rubella virus in fibrochondrocyte cells Laboratory Medicine

    Figueiredo, Cristina A; Oliveira, Maria I; Afonso, Ana M. S; Curti, Suely P

    Abstract in Portuguese:

    Este trabalho descreve o rápido crescimento do vírus da rubéola em amostras clínicas em cultura primária de fibrocondrócitos com desenvolvimento de efeito citopático em resposta a infecção pelo vírus da rubéola. As células foram isoladas do menisco do joelho do coelho após extração enzimática e incubadas a 37°C em meio DMEM suplementado com 10% de soro fetal bovino. Seis amostras clínicas de urina, sangue e liquor foram inoculadas na cultura primária de fibrocondrócitos e na linhagem Vero. As células de fibrocondrócitos apresentaram efeito citopático após 24 horas de incubação e o vírus foi detectado por imunoistoquímica e Nested PCR. As células infectadas apresentaram aspecto arredondado, com formação de alguns prolongamentos citoplasmáticos e sincícios, produzindo células multinucleadas. A curva de crescimento da infecciosidade do vírus foi mais alta quando comparada com a linhagem celular Vero.

    Abstract in English:

    This study describes the rapid growth of the rubella virus in samples of a primary fibrochondrocyte cell culture with the development of a cytopathic effect (CPE), in response to infection by the rubella virus. The cells were isolated from the meniscus joint of a rabbit after enzymatic extraction and incubated at 37°C with a Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM), supplemented with 10% fetal calf serum. A total of six clinical samples from urine, blood and cerebrospinal fluid were inoculated in the fibrochondrocyte and the cell lines of the African green monkey kidney - ATCC CCL-81 (Vero). The fibrochondrocyte cell showed CPE after 24 hours and virus growth was confirmed by immunohistochemistry and Nested PCR. The cells inoculated with samples were examined by phase contrast microscopy and showed characteristic rounding, along with bipolar and multipolar cells. The infection curve increased during the five days of observation, showing that the titers in fibrochondrocyte cells were then higher than those observed in Vero cell lines.
  • Vasculite necrosante na glomerulonefrite difusa aguda pós-infecciosa Medicina Laboratorial

    Riyuso, Márcia C; Carvalho, Maria Fernanda C; Trindade, Amélia A. T; Mendonça, Luciana B; Saggioro, Fabiano P; Viero, Rosa M

    Abstract in Portuguese:

    Os autores relatam dois casos de glomerulonefrite difusa aguda pós-infecciosa com evolução clinicomorfológica incomum. As biópsias renais mostraram alterações características de glomerulonefrite difusa aguda associada à extensa necrose fibrinóide e infiltrado inflamatório leucocitário na parede de arteríolas e artérias interlobulares. Foram também observadas crescentes. Ambos os pacientes cursaram com insuficiência renal aguda severa, sendo que um dos pacientes recuperou a função renal e outro evoluiu para insuficiência renal crônica e óbito.

    Abstract in English:

    The authors report two cases of postinfectious acute diffuse glomerulonephritis with uncommon followup. The kidney biopsies showed characteristic features of postinfectious acute glomerulonephritis with extensive fibrinoid necrosis and polymorphonuclear inflammatory infiltrate in the walls of arterioles and interlobular arteries. Celular crescents were also seen. The patients follow with severe acute renal failure; one patient improved the renal function and one progressed to chronic renal failure and died.
  • Genotipagem do citomegalovírus humano para pesquisa de resistência primária aos antivirais em transplantados renais Medicina Laboratorial

    Carraro, Emerson; Granato, Celso Fransisco Hernandes

    Abstract in Portuguese:

    O objetivo do estudo foi investigar a ocorrência de cepas de citomegalovírus humano (HCMV) com resistência primária aos antivirais utilizados na terapêutica de pacientes transplantados renais. Para isso empregou-se um método de triagem por reação em cadeia de polimerase (PCR) e polimorfismo de tamanho de fragmentos de restrição (RFLP) capaz de detectar mutações específicas nos genes UL97 e UL54 relacionadas com resistência antiviral. Foram coletadas amostras (sangue, saliva e urina) de 20 pacientes transplantados renais no momento do diagnóstico da infecção pelo HCMV e sem terapia antiviral prévia. Embora não tenham sido encontradas cepas de HCMV com nenhuma das mutações estudadas, a metodologia empregada demonstrou-se rápida e eficaz na análise dos genes virais das diferentes amostras testadas. A ausência de resistência primária no presente estudo não descarta a possibilidade de esse evento ocorrer futuramente no Brasil, uma vez que o emprego das drogas antivirais tem se disseminado em todo o mundo. Sugerimos, então, a aplicação da metodologia de PCR/RFLP na investigação de resistência do HCMV aos antivirais.

    Abstract in English:

    The aim of this study was to detect by PCR/RFLP HCMV strains containing specific UL97 or UL54 mutation in patients without previous therapy. Samples from 20 renal transplant recipients with HCMV infection at the moment of the diagnosis. From all the patients blood, saliva and urine samples were collected to investigate the possible occurrence of distinct mutations in different body sites. Although no HCMV strains with mutations conferring drug resistance were detected, the PCR/RFLP methodology was considered an adequate and practical tool to detect alterations in viral genes from different body fluids. The absence of drug resistant viral strains in the analyzed samples do not preclude its appearance in the near future, since the use of antiviral drugs in this setting is more widespread in the recent years. We suggest a periodic evaluation of the sensitivity pattern to antiviral drugs in order to monitor its occurrence.
  • A importância da contra-imunoeletroforese na detecção de antígenos nucleares extraíveis para o diagnóstico de doenças reumáticas sistêmicas Medicina Laboratorial

    Bruder, Rita de Cassia Siqueira; Prudente, Izaíra Máximo de Carvalho; Silva, Maria Isabel Corrêa da; Defaveri, Julio

    Abstract in Portuguese:

    Os antígenos nucleares extraíveis (ENAs) são encontrados no soro da maioria dos pacientes com doença reumática sistêmica. Os principais ENAs estudados são SS-A/Ro, SS-B/La, RNP, Sm, Scl-70 e Jo-1. Objeti-vou-se neste trabalho: a) padronizar a técnica de contra-imunoeletroforese (CIE) para a detecção de ENAs; b) padronizar o substrato antigênico (ENAs) para a CIE a partir de baço de cão; c) comparar os resultados da CIE com as técnicas de imunofluorescência indireta (IFI) e Elisa para esses antígenos. Para tal foram estudados 40 soros de pacientes com doença reumática sistêmica confirmada por exames clínico e laboratorial (sorológico e biópsia). Como controle negativo foram utilizados dez soros de doadores de sangue normais, e, como controles positivos, seis soros-padrão anti-Ro, anti-La, anti-RNP, anti-Sm, anti-Scl-70, anti-Jo-1, para caracterizar os antígenos presentes no extrato de baço. Neste último foram detectados vários ENAs, exceto RNP e Scl-70. A técnica de CIE apresentou boas sensibilidade (70%) e especificidade (100%) em relação às outras técnicas (IFI e Elisa). A titulação dos soros pela CIE revelou positividade até diluições de 1:16 em 32,5% dos casos. Concluímos que a CIE e os antígenos extraídos de baço de cão podem ser utilizados na rotina laboratorial para triagem destes ENAs, com a vantagem, em relação à IFI, de poderem ser titulados.

    Abstract in English:

    Extractable nuclear antigens (ENAs) are detected in the sera of the majority of patients with rheumatic systemic disease. The main ENAs studied are SS-A/Ro, SS-B/La, RNP, Sm, Scl-70 and Jo-1. The aim of this work was: a) to standardize the counterimmunoelectrophoresis technique (CIE) to detect ENAs; b) to standardize the extration of ENAs from dog spleen as a substract for CIE test; c) to compare the results obtained by CIE with those of indirect immunofluorescence (IFI) and Elisa for these antigens. Forty sera from individuals with rheumatic systemic disease confirmed by clinical and serological tests and by skin and/or kidney biopsies were tested. Ten normal sera from blood donors were used as negative control, and as positive control to check for ENAs in the spleen extract, six positive sera for anti-Ro, anti-La, anti-RNP, anti-Sm, anti-Scl-70, anti-Jo-1 were tested. The spleen extract contained many of the ENAs antigens, except RNP and Scl-70. CIE showed good sensitivy (70%) and specificity (100%) in relation to IFI and Elisa. Also, by CIE the positive sera could be diluted up to 16 dilution (32.5%). We concluded that CIE, together with antigens extracted from dog spleen, could be used in the laboratorial routine to detect ENAs, and compared to IFI, with the advantage that sera can be titulated.
  • HPV detection in oral carcinomas Laboratory Medicine

    Vidal, Aurora Karla de Lacerda; Caldas Júnior, Arnaldo de França; Mello, Roberto José Vieira de; Brandão, Virgínia Ribes A.; Rocha, Getúlio Isidoro da; Taromaru, Eliane

    Abstract in Portuguese:

    Os autores buscaram verificar, neste estudo, a presença do papilomavírus humano (HPV) de baixo e de alto risco em carcinomas orais através do teste de captura híbrida Digene® (São Paulo-SP, Brasil) em amostras colhidas pela citologia esfoliativa bucal e, ainda, avaliar comparativamente as referidas leituras com alterações celulares indicativas deste vírus obtidas com a interpretação citológica óptica convencional (hematoxilina-eosina (HE)/Papanicolaou). Quarenta indivíduos concordaram, espontaneamente, através de assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido, em participar da pesquisa, e seus dados clínicos foram analisados. Entre as 40 amostras provenientes da citologia esfoliativa 29 (72,5%) mostraram-se negativas para presença de HPV-DNA de baixo e de alto risco; nove (22,5%) foram positivas para o HPV-DNA de baixo e de alto risco; uma (2,5%) foi positiva apenas para o HPV de baixo risco; e também uma (2,5%) foi positiva apenas para o HPV de alto risco. Houve concordância entre todos os resultados positivos para presença de HPV-DNA nas amostras citológicas submetidas ao teste de captura híbrida Digene® e na leitura de esfregaço citológico ao microscópio óptico convencional. Desta forma, conclui-se que o vírus HPV pode comportar-se como mais um co-carcinógeno para o câncer de boca, à semelhança do carcinoma uterino.

    Abstract in English:

    The authors set out in this study to verify the presence of low- and high-risk DNA of human papillomavirus (HPV) in oral cancer by means of the hybrid capture Digene® test (São Paulo-SP, Brazil) in smears from exfoliative cytology and also to compare the findings with those of conventional light microscopy (hematoxylin-eosin (HE)/Papanicolaou). Forty individuals gave their written informed consent to participate in the study and also had their clinical data analyzed. The 40 exfoliative cytology examinations performed to date produced the following results: 29 (72.5%) negative for low- and high-risk HPV-DNA; nine (22.5%) positive for low- and high-risk HPV-DNA; one (2.5%) positive for low-risk HPV-DNA; and one (2.5%) positive for high-risk HPV-DNA. There was agreement among the findings for the presence of DNA-HPV for both exfoliative cytology (smear to hybrid capture Digene® test and the cytological smear readings made by conventional light microscopy). It was therefore concluded that the HPV virus may be a cocarcinogen of the mouth cancer as it is in the cervix cancer.
  • HER-2/neu immunoreactivity in invasive mammary carcinomas: a comparative study using monoclonal and polyclonal antibodies including the HercepTestTM Pathology

    Gouvêa, Agostinho Pinto; Fernandes, José Roberto Maggi; Olson, Sandra Jean; Brandão, Eduardo de Carvalho; Leite, Miguel Torres; Gobbi, Helenice

    Abstract in Portuguese:

    INTRODUÇÃO: A superexpressão de HER-2/neu tem sido testada por imunoistoquímica como um método seguro e de baixo custo para selecionar pacientes com carcinoma mamário invasivo (CMI) para tratamento com trastuzumab, entretanto não há consenso sobre qual o melhor anticorpo a ser utilizado. O objetivo deste trabalho foi testar cinco diferentes anticorpos para determinar a superexpressão do HER-2/neu em CMI. MATERIAL E MÉTODOS: Sessenta e seis casos de CMI fixados em formalina e incluídos em parafina foram submetidos a imunoistoquímica, utilizando-se dois anticorpos policlonais: HercepTestTM (Dako) e A0485 (Dako), e três anticorpos monoclonais: CB11 de Novocastra Laboratories e da Biogenex e 4D5 (Genentech). Todas as reações imunoistoquímicas foram interpretadas de acordo com as instruções do HercepTestTM. RESULTADOS: O A0485 foi positivo em 25/66 casos (37,9%). O HercepTestTM foi positivo em 14/66 casos (21,2%). Houve concordância integral nos casos corados com CB11 de ambos os fabricantes: 9/66 (13,7%). O 4D5 foi positivo em somente 4/66 casos (6,1%). Todos os casos positivos para CB11 e 4D5 foram positivos para o HercepTestTM. Todos os casos HercepTestTM foram positivos para o A0485. A maioria dos casos 2+ para o HercepTestTM e A0485 foi negativa com os outros anticorpos. DISCUSSÃO: Houve maior incidência de superexpressão do HER-2/neu com o HercepTestTM e o A0485 do que com os anticorpos monoclonais, principalmente nos casos classificados como 2+. Não houve diferença na imunorreatividade usando-se o anticorpo CB11 dos dois diferentes fabricantes. CONCLUSÃO: O uso clínico da imunoistoquímica para determinar a superexpressão do HER-2/neu necessita ainda de validações prospectivas.

    Abstract in English:

    INTRODUCTION: HER-2/neu overexpression has been tested using immunohistochemistry as a reliable and cost-effective method to select patients with invasive mammary carcinomas (IMC) for trastuzumab treatment, but there is no consensus regarding the best antibody to be used. The aim of the present study was to test five different antibodies for determining the status of HER-2/neu overexpression in IMC. MATERIAL AND METHODS: Sixty-six formalin-fixed, paraffin-embedded IMC were investigated by immunohistochemistry, using two polyclonal antibodies, HercepTestTM (Dako) and A0485 (Dako), and three monoclonal antibodies, the clone CB11, from both Novocastra Laboratories and from Biogenex, and the clone 4D5 (Genentech). All immunostainings were scored according to the guidelines for the HercepTestTM. RESULTS: The A0485 was positive in 25 cases (37.9%). The HercepTestTM was positive in 14/66 cases (21.2%). Both CB11 antibodies yielded a positive reaction in the same nine patients (13.6%). The 4D5 was positive in only 4/66 cases (6.1%). All positive cases for CB11 or 4D5 were HercepTestTMpositive. All cases positive for HercepTestTM were positive for A0485. Most of the HercepTestTM and A0485 2+ cases were negative when using the other antibodies. DISCUSSION: There was a higher number of cases presenting HER-2/neu positivity with the A0485 and HercepTestTM than with the other antibodies, primarily in cases scored as 2+. There was no difference in positivity when the CB11Ab was used, regardless of company. CONCLUSION: The use of immunohistochemistry for the clinical assessment of HER-2/neu overexpression still needs prospective validation.
  • Simultaneous occurrence of follicular lymphoma and mixed-cellularity Hodgkin's lymphoma: lymph node and extranodal involvement Pathology

    Grangeiro, Maria do Patrocínio F.; Magalhães, Sílvia Maria M.; Ferreira, Francisco Valdeci A.; Rocha Filho, Francisco Dário

    Abstract in Portuguese:

    Os autores apresentam um caso raro e bem caracterizado de linfoma composto no baço e linfonodos. A ocorrência simultânea de um linfoma de Hodgkin e um linfoma não-Hodgkin foi demonstrada em um homem de 66 anos admitido com anemia, hepatosplenomegalia e múltiplos linfonodos abdominais. O estudo morfológico do baço e linfonodo do hilo esplênico mostrou infiltração por duas neoplasias distintas. O fígado estava envolvido por linfoma não-Hodgkin e o linfonodo peripancreático mostrava um linfoma de Hodgkin. As células de Reed-Sternberg (RS) expressaram CD 15 e CD 30, enquanto as células do linfoma não-Hodgkin apresentaram os aspectos imunoistoquímicos clássicos do linfoma folicular. Na literatura médica, este é o quinto caso descrito de envolvimento do baço por linfoma composto. A incidência, aspectos clínicos e imunoistoquímicos desta rara associação são discutidos.

    Abstract in English:

    An unusual and well-characterised case of composite lymphoma in the spleen and lymph node is presented. The simultaneous occurrence of mixed-cellularity Hodgkin's lymphoma (HL) and follicular non-Hodgkin's lymphoma (NHL) was demonstrated in a 66-year-old man admitted in our Service with anaemia, hepatosplenomegaly and multiple abdominal lymph nodes. The morphological study of the spleen and lymph node of the splenic hilum showed an infiltrate composed of two distinct neoplasias. The liver was involved by NHL infiltrate and the peripancreatic lymph node exhibited HL. The Reed-Sternberg (RS) cells expressed CD 15 and CD 30, whereas the NHL cells presented standard immunohistochemical features of follicular lymphoma. To our knowledge, this is the fifth case report of concurrent spleen involvement by composite lymphoma. The incidence, clinicopathological and immunohistochemical features of this rare association are discussed.
  • Expression of Epstein-Barr virus in patients with Hodgkin's disease: report of 64 cases from Rio de Janeiro, Brazil Pathology

    Loureiro, Monique Morgado; Morais, José Carlos; Milito, Cristiane Bedran; Portugal, Rodrigo Doyle; Pulcheri, Wolmar; Spector, Nelson

    Abstract in Portuguese:

    O vírus Epstein-Barr (EBV) tem sido implicado na fisiopatogenia da doença de Hodgkin (DH) e a associação deste vírus com a DH está relacionada com as condições socioeconômicas da população estudada, com a idade e com o subtipo histológico celularidade mista (CM). A prevalência do EBV na DH é muito variável. Este estudo foi realizado com o objetivo de determinar a prevalência do EBV na DH em uma população brasileira. Foram estudados 64 casos de DH oriundos do Hospital Universitário utilizando-se o método de imunoistoquímica com anticorpo monoclonal contra a proteína latente da membrana (LMP1). O vírus foi encontrado em 35 dos 64 casos estudados (55%) e sua presença correlacionou-se de maneira significativa com o subtipo histológico CM (OR = 9; IC 95% = 1,66 - 66; p = 0,0015). Estes resultados confirmam que o EBV está relacionado com a DH em uma população brasileira.

    Abstract in English:

    Epstein-Barr virus (EBV) has been implicated in the pathogenesis of Hodgkin's disease (HD), and the association between EBV and HD is influenced by the patients' socioeconomic status, age and the presence of mixed cellularity (MC) histological subtype. The prevalence of EBV in HD varies widely. This study was undertaken to determine the prevalence of EBV in HD in a Brazilian population. We studied 64 cases with a monoclonal antibody to the EBV latent membrane protein-1 (LMP1). EBV was detected in 35 of the 64 cases (55%) and its presence was significantly correlated with the MC subtype (OR = 9; IC 95% = 1.66 - 66; p = 0,0015). These results support that EBV is related to HD in a Brazilian population.
  • Estudo morfométrico e morfológico da cicatrização após uso do laser erbium: YAG em tecidos cutâneos de ratos Patologia

    Noronha, Lúcia de; Chin, Eduardo Wei Kin; Kimura, Letícia Yurie; Graf, Ruth

    Abstract in Portuguese:

    Este trabalho analisa o efeito da reparação cutânea do laser erbium:yttrium aluminunn garnet (YAG) (Er:YAG) em pele de ratos através de estudo histológico e morfométrico. Tatuaram-se duas figuras no dorso de cada animal (n = 35), denominadas controle e experimento. Na figura experimento, aplicaram-se três passadas de laser Er:YAG com parâmetros padronizados. Cinco animais foram eutanasiados nos dias 0, 7, 14, 28, 56, 84 e 112 de pós-operatório. O estudo histológico demonstrou no dia 0 dano de ablação médio de 215,24 micrômetros (mm), sendo homogêneo com vaporização da epiderme e porções superficiais da derme. O dano térmico residual foi pequeno (média de 41,45mm), observando-se áreas onde estava praticamente ausente. A fibroplasia cicatricial já estava presente no dia 7 (média de 55,58mm), aumentando rapidamente até o dia 28 (média de 209,49mm), quando atingiu um platô e se manteve até o dia 112. Não houve sinais de processo inflamatório agudo no dia 7 e a reepitelização já estava completa. Concluiu-se que a aplicação de laser na pele de ratos induz reparação cutânea ao longo de 112 dias nas condições do experimento.

    Abstract in English:

    This study analyses the skin contracture effect of the erbium:YAG (Er:YAG) laser on the skin of rats by light microscopic histological and morphometrical evaluations. Two squares of back skin were precision tattooed on each of the animals (n = 35), that were termed control and experimental skin. The experimental skin was treated with three passes of the Er:YAG laser with standardized parameters. Five animals were killed and skin specimens were analyzed at 00, 07, 14, 28, 56, 84 and 112 days. Histologic examination demonstrated a mean of 215.24 micrometers ablative damage that was homogeneous with complete vaporization of the epidermis and superficial dermis. The residual thermal damage was small (mean of 41.45 micrometers) observing areas where it was absent. The cicatritial fibroplasy was present at day 07 (mean 55.58 micrometers) rising quickly until day 28 (mean of 209.49 micrometers) when it reaches a plateau and maintaining it until day 112. There are no signs of acute inflammatory process at day 07 and the reepithealization was complete at this day. This study revealed that the laser had induced shortening of the treated areas which persisted beyond the 112 days.
  • Consultoria em patologia de partes moles: visão crítica de um consultor Patologia

    Ellinger, Fred; Franco, Marcello

    Abstract in Portuguese:

    OBJETIVOS: Os autores revisaram 500 casos de lesões mesenquimais do arquivo de consultas da Faculdade de Medicina de Marília enviados a um deles (F. E., patologista consultor) para avaliar a adequabilidade do envio de consultas. PROCEDIMENTOS: Foram avaliadas as informações contidas nos documentos que solicitavam as consultas, bem como o tipo de material enviado. RESULTADOS: Observou-se que há alto percentual de ausência de informações importantes, tais como nome do paciente, aspecto macroscópico da lesão, localização da lesão quanto à profundidade, informações clínicas, cirúrgicas e de exames complementares pertinentes, hipótese diagnóstica do patologista consultante e formulação de questões, dúvidas pelo mesmo. CONCLUSÕES: Concluiu-se que os patologistas consultantes podem melhorar muito a adequação do envio de suas consultas, e para tanto os autores propõem uma série de itens a serem transmitidos ao consultor, por ocasião do envio da consulta, para que esta possa ser realizada da melhor maneira possível, com real benefício para os pacientes.

    Abstract in English:

    OBJECTIVE: The authors reviewed 500 cases of mesenchymal lesions from the private consultation files of one of them (F. E.) to evaluate the adequacy of sending of consultations by referring pathologists. METHODOLOGY: The information contained in the documents requesting the consultation as well as the material sent were evaluated. RESULTS: It was observed that in high percentage of cases, there is absence of important information in the request such as: name of the patient, gross appearance of the lesion; depth of the lesion; clinical, surgical and pertinent laboratorial information; diagnosis of the referring pathologist and questions and doubts made by the referring pathologist. CONCLUSION: It was concluded that the referring pathologists could improve significantly the submission of the cases. To achieve this goal the authors propose a series of items in the form of a checklist to be verified by the referring pathologist when a case will be sent in consultation.
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