Potencial evocado visual em cães e ovinos

Visual evoked potential in dogs and sheep

RESUMO:

O potencial evocado visual (PEV) é técnica eletrodiagnóstica que permite avaliação das vias visuais. O PEV de 20 cães e 20 ovinos adultos, de ambos os sexos, foram obtidos para estudo normativo. Foram utilizados eletrodos de agulha monopolar posicionados em O₁ e O₂ (ativos), em F_pz (referência comum) e em C_z (terra). O estímulo foi na forma de flash a 1Hz. Dezessete cães e 17 ovinos foram incluídos no estudo, pois apresentaram potenciais auditivos com boa qualidade técnica. Os resultados da avaliação dos dois olhos foram agrupados, totalizando 34 exames em cada espécie. O achado mais consistente em todos os exames foi uma deflexão eletropositiva, com latência média de 55,4ms em cães (P55) e 63,75ms em ovinos (P63). Outras duas ondas eletronegativas também foram identificadas: N31 e N75 em cães; e N42 e N86 em ovinos. A metodologia utilizada neste estudo permitiu obtenção de potenciais visuais com pequena variabilidade, sendo útil para avaliação de animais com suspeita de alteração nas vias visuais centrais.

TERMOS DE INDEXAÇÃO:
Potencial evocado visual; neurologia; oftalmologia; cão; ovino

ABSTRACT:

The visual evoked potential (VEP) is an electro-diagnostic technique that allows assessment of visual pathways. The VEP from 20 adult dogs and 20 adult sheep of both gender was obtained for normative study. Monopolar electrode needles were placed in O₁ and O₂ (active), F_pz (common reference) and C_z (ground). The stimuli were flash at 1Hz. Seventeen dogs and 17 sheep were included in the study because they had auditory potentials with good technical quality. The results from both eyes were grouped, totaling 34 results in each species. The most consistent result in all tests was an electropositive deflection, with a mean latency 55.4ms in dogs (P55) and 63.75ms in sheep (P63). Two negative deflections were also identified: N31 and N75 in dogs, and N42 and N86 in sheep. The methodology used in this study allowed to obtain potential similar to those described in other studies, with little variability, and is useful for evaluation of animals with suspected changes in the central visual pathways.

INDEX TERMS:
Visual evoked potential; neurology; oftalmology; dog; sheep

Introdução

Potencial evocado visual (PEV) é uma técnica eletrodiagnóstica utilizada para registrar a atividade elétrica das vias visuais após a retina (Kimotsuki et al. 2005). Os registros de PEV são feitos com eletrodos que captam a atividade elétrica gerada após estímulo visual (Sims et al. 1989). Os estímulos podem ser na forma de flash de luz ou padrão reverso alternado, que requer fixação do olhar no centro da tela. O resultado do exame consiste em deflexões positivas (P) e negativas N), com diferentes latências e amplitudes. Aumentos nas latências das ondas registradas no PEV podem indicar lesões nas vias visuais, sendo importantes para complementar o exame neurológico (Strain et al. 1986b).

As ondas registradas podem ser identificadas sequencialmente (P1, N1, P2, N2, P3) ou pelas latências em milissegundos com que aparecem (P40, N70 e P100, por exemplo) (Strain et al. 1986b). É provável que os geradores das atividades elétricas registradas nos potenciais evocados visuais sejam os mesmos em diferentes espécies de mamíferos, mas é necessária a obtenção de dados normativos para cada espécie e em cada laboratório, pois os resultados podem ser influenciados pelo tamanho da cabeça, dos olhos e do encéfalo, orientação dos geradores com relação aos eletrodos, presença ou ausência de chifres e pelo protocolo utilizado para registro (Strain et al. 1991b).

Em medicina humana, os PEV são rotineiramente utilizados e têm inúmeras aplicações clínicas, como para avaliar a evolução de esclerose múltipla, confirmar a condução do estímulo nas vias visuais ou mensurar a acuidade visual. Entretanto, o uso desta técnica em medicina veterinária ainda é pouco difundido (Loew 2005). Outros autores já descreveram a técnica de PEV para uso em cães (Boyer & Kirk 1973, Bichsel et al. 1988, Sims et al. 1989, Kimotsuki et al. 2005, 2006), ovinos (Gregory & Wotton 1983, Strain et al. 1986a, 1991a), suínos (Strain et al. 2006), gatos (Sims & Laratta 1988, Imai et al. 1990), bovinos (Strain et al. 1986b, 1989, Takeuchi et al. 1993), ratos (Creel 1973) e equinos (Ström 2004, Michanek 2013), testando diferentes metodologias para realização do teste em diferentes espécies. O objetivo deste estudo foi registrar o PEV com flash em cães e ovinos clinicamente normais, para normatização da técnica e dos resultados para estas espécies.

Material e Métodos

O Potencial evocado visual (PEV) foi obtido de 20 cães e 20 ovinos sem raça definida, de ambos os sexos, com idade entre 1 e 5 anos, após aprovação pelo Comitê de Ética em Experimentação Animal da FMVZ/Unesp-Botucatu (Processo 263/2011). Todos os animais foram submetidos ao exame oftalmológico, incluindo exames de fundo de olho. Apenas animais sem alterações oftálmicas foram incluídos no estudo.

Os PEV foram realizados no Laboratório de Eletroneurodiagnóstico, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Unesp-Botucatu. Os registros foram realizados sem sedação, sem uso de medicações midriáticas e sem adaptação ao escuro. Eletrodos de agulha monopolar foram posicionados em O₁ e O₂ (ativos), em F_pz (referência comum) e em C_z (terra). O posicionamento dos eletrodos foi baseado em outros estudos já realizados nestas espécies (Strain et al. 1986a, 1991a, Kimotsuki et al. 2005, 2006). A impedância dos eletrodos foi mensurada e mantida menor que 5 kΩ. Foram utilizados filtros com banda passante de 10 a 30 Hz, sensibilidades de 5 μV/divisão e varredura de 20 ms/divisão. Todos os exames foram realizados em sala escura, com estímulo por flashes de luz com 0,5 J de intensidade, emitidos na frequência de 1 Hz. A lâmpada foi mantida a 30 cm de distância dos olhos. O olho contralateral foi coberto por um material opaco, para que a estimulação fosse monocular. Em cada lado testado, foram obtidos dois traçados de no mínimo 100 promediações cada. O equipamento utilizado foi o Synergy Viasys Healthcare^® de dois canais.

Resultados

Não foi possível obtenção de registros de boa qualidade técnica em três cães e em três ovinos, pois eram animais mais agitados, cujos resultados mostraram muita interferência. Assim, os registros de 17 animais de cada espécie foram incluídos nos resultados finais. Não houve diferença significativa quando os resultados obtidos do lado esquerdo foram comparados com o direito (teste t não pareado, Graphpad software, P>0.05). Assim, todos os resultados foram agrupados, totalizando 34 resultados para cada espécie. Em todos os exames o achado mais consistente foi uma onda eletropositiva ocorrendo com média de 55,4 ms em cães e 63,75 ms em ovinos (Fig.1). Também foi possível a identificação da deflexão negativa anterior e posterior à eletropositividade principal. As ondas foram nomeadas segundo a latência média: N31, P55 e N75 para cães e N42, P63 e N86 para ovinos. Também foram mensuradas duas amplitudes de ondas em μV: N31-P55 e P55-N75. Os Quadros 1 e 2 mostram a média, o desvio padrão, os valores mínimo e máximo e intervalo de confiança a 95% para as latências e amplitudes registradas para cães e ovinos, respectivamente.

Fig.1
(A) Potencial evocado visual por flash de cão adulto. (B) Potencial evocado visual por flash de ovino adulto. Notar a identificação dos picos de onda registrados. Divisão vertical: amplitude (5 μV). Divisão horizontal: latência (20 ms).

Quadro 1.
Valores de latência (ms) e amplitudes entre os picos (μV) dos potenciais evocados visuais obtidos de cães (n=34)

Medida	Média	Desvio	Mínimo e Máximo	Intervalo de Confiança 95 %
N31	31,34	4,69	18,6-41,2	29,703-32,979
P55	55,4	5,88	45,8-65,0	53,347-57,453
N75	75,2	13,10	59,8-103,4	70,626-79,774
N31-P55	7,26	3,49	2,0-18,4	6,046-8,483
P55-N75	5,62	3,07	1,3-13,6	4,55-6,691

Quadro 2.
Valores de latência (ms) e amplitudes entre os picos (μV) dos potenciais evocados visuais obtidos de ovinos (n=34)

Medida	Média	Desvio Padrão	Mínimo e Máximo	Intervalo de Confiança 95%
N42	42,3	9,7	26,2-55,2	38,912-45,688
P63	63,75	4,21	56,6-70	62,278-65,216
N86	86,82	9,6	74,8-111,8	83,471-90,176
N42-P63	9,38	3,79	4,1-20,1	8,053-10,70
P63-N86	10,96	4,41	2,7-20,0	9,427-12,503

Discussão

As deflexões positivas, identificadas como P55 em cães e P63 em ovinos, são equivalentes ao pico P100 registrado em PEV de humanos. A P100 humana representa, provavelmente, a atividade elétrica cortical e é o principal achado utilizado para detecção de anormalidades nesta via sensorial (Chiappa 1990). Em outros estudos realizados em cães e ovinos, os autores identificaram três deflexões positivas e três negativas. Nos traçados do presente estudo também seria possível a identificação de 6 ondas, mas optou-se por considerar apenas as que têm significado clínico, ou seja, a onda positiva mais evidente e as negativas anterior e posterior. As deflexões P55 e P63, respectivamente em cães e ovinos, registradas neste estudo possuem latência muito semelhante à P2, identificada por outros autores em cães (Strain et al. 1991b, Kimotsuki et al. 2005) e ovinos (Strain et al. 1991a). As latências médias da onda P2 registradas por Strain et al. (1991b) e por Kimotsuki et al. (2005) em cães foram de 54,5±7,4 e 52,9±6,0ms, respectivamente. A latência de P2 observada em ovinos por Strain et al. (1991a) foi de 52,8±2,0ms, um pouco menor que o valor observado neste estudo.

A idade do animal é um fator não patológico a ser levado em consideração na interpretação dos resultados (Kimotsuki et al. 2006, Strain et al. 2006). Estudos mostraram diferenças na amplitude, morfologia e latência dos potenciais quando compararam resultados de animais recém-nascidos, jovens e adultos (Boyer & Kirk 1973, Strain et al. 1991b, Takeuchi et al. 1993). Alterações no PEV também foram observadas em cães idosos (Kimotsuki et al. 2006). Por este motivo, apenas animais adultos foram incluídos neste estudo de normatização.

Outro fator que influencia diretamente o PEV, é o tamanho da cabeça (Strain et al. 2006). A variabilidade dos resultados desta padronização pode ser justificada pelo fato de os animais serem sem raça definida e, consequentemente, com diferentes tamanhos de cabeça. A variabilidade da amplitude das ondas também foi observada por outros autores, mas esta medida não tem significado clínico na interpretação do PEV (Sato et al. 1982, Strain et al. 1986b).

Neste estudo, os exames foram realizados apenas com contenção física dos animais. Alguns autores não conseguiram registrar o PEV de animais sem anestesia, devido à movimentação dos animais e presença de artefatos musculares (Bichsel et al. 1988). Diferentes anestésicos estão sendo utilizados para registro do PEV de animais, incluindo tiopental e halotano (Bichsel et al. 1988), metoxiflurano (Boyer & Kirk 1973), xilazina (Kimotsuki et al. 2006) e isofluorano (Sims et al. 1989). No presente trabalho, não foi utilizada anestesia, porém, dos 20 cães e 20 ovinos testados, apenas 17 de cada grupo foram utilizados no estudo normativo, pois o registro de três animais ficou com qualidade técnica ruim. Ao interpretar o resultado do PEV, é importante considerar se houve uso de anestésicos, pois a anestesia pode alterar os resultados de potenciais evocados (Chiappa 1990), principalmente causando prolongamento das latências registradas (Sims et al. 1989).

Muitos estudos de PEV em animais usam flashes como estímulo (Boyer & Kirk 1973, Bichsel et al. 1988, Strain et al. 1991a, 2006, Kimotsuki et al. 2006). Este tipo de estímulo tem sido utilizado em medicina veterinária, pois requer menor cooperação do animal e não há necessidade de fixar a visão em um ponto específico, como é necessário com uso do estímulo com padrão reverso (Sims & Laratta 1988).

Este estudo normativo é fundamental para comparação com PEV de animais com diferentes enfermidades que afetem a via visual central. O PEV já foi utilizado em medicina veterinária para avaliar a toxicidade de medicamentos (Sato 1985, Imai et al. 1990) e para diagnosticar alterações centrais em cães com distúrbios eletrolíticos (Lee et al. 1969). Alterações no PEV obtido de ovinos com scrapie já foram relatadas, incluindo diminuição significativa na amplitude das ondas (Strain et al. 1986a). Outro estudo também registrou alterações no PEV em ovinos com listeriose e em ruminantes com polioencefalomalácia (Strain et al. 1990).

Conclusões

Pode se concluir que é possível a obtenção de Potencial evocado visual (PEV) de cães e ovinos sem uso de sedação ou anestesia.

O achado mais consistente em todos os exames foi uma deflexão eletropositiva, com latência média de 55,4ms em cães (P55) e 63,75ms em ovinos (P63).

Outras duas ondas eletronegativas também foram identificadas: N31 e N75 em cães; e N42 e N86 em ovinos.

Os valores de latência e amplitudes observados podem ser utilizados como referência para comparação com resultados obtidos de animais com diferentes doenças acometendo o sistema nervoso central, particularmente as vias visuais centrais.

Agradecimentos

À Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) pelo suporte financeiro na forma de bolsa (Processo 2011/22769-9)

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Abr 2017

Histórico

• Recebido
  02 Abr 2015
• Aceito
  10 Mar 2016