Caracterização etiológica, epidemiológica e clínico-patológica da meningoencefalite por herpesvírus bovino em bovinos no Estado de Goiás

Etiological, epidemiological, clinical and pathological characterization of meningoencephalitis in cattle by bovine herpesvirus in the State of Goiás, Brazil

Guilherme R. Blume Lorena F. Silva José R.J. Borges Luciano Nakazato Juliano P. Terra Rogério E. Rabelo Valcinir A.S. Vulcani Fabiano J.F. Sant’Ana Sobre os autores

RESUMO:

Foram estudados 26 casos de meningoencefalite por herpesvírus bovino (BoHV) diagnosticados entre 2010-2016, no Estado de Goiás (GO). A doença acometeu principalmente bovinos jovens, entre 60 dias a 18 meses de idade. Não houve associação entre os casos e o sexo dos bovinos e a sazonalidade. A doença foi observada em todas as cinco Mesorregiões do Estado, com uma frequência maior nas Mesorregiões Sul e Centro. Os sinais clínicos mais frequentemente observados incluíram cegueira, incoordenação, sialorreia e ataxia. As principais alterações macroscópicas observadas incluíram congestão com tumefação e achatamento das circunvoluções, amolecimento e amarelamento do córtex telencefálico e focos de hemorragia. Em cinco encéfalos, não foram observadas alterações macroscópicas e em quatro as alterações não foram informadas. As principais alterações histológicas ocorreram no córtex telencefálico, principalmente o córtex frontal e parietal, mas em alguns casos, lesões de menor intensidade foram também observadas no tálamo, núcleos basais, mesencéfalo, ponte, bulbo, cerebelo e hipocampo. Todos os casos apresentaram meningoencefalite linfoplasmocítica e corpúsculos de inclusão intranucleares basofílicos em astrócitos e, eventualmente, em neurônios. Outras lesões frequentes incluíram necrose neuronal laminar segmentar (neurônio vermelho), espongiose, tumefação do núcleo das células endoteliais, gliose focal ou difusa, hipertrofia de astrócitos, infiltração por células gitter, congestão e hemorragia. Lesões menos comuns incluíram astrócitos Alzheimer tipo II, lesão residual e neuronofagia. A necrose neuronal e o edema (espongiose) foram mais acentuados nas camadas granular externa, molecular, de células piramidais e granular interna dos telencéfalos. Tanto os giros quanto os sulcos foram afetados igualmente. Dos 26 casos, o DNA de BoHV-5 foi amplificado em dois (7,69%) casos, enquanto que o de BoHV-1 foi identificado em um caso (3,84%). Nos casos positivos para BoHV-5 foram usadas amostras fixadas em formol a 10% e incluídas em parafina e amostras congeladas foram utilizadas no caso positivo para BoHV-1.

TERMOS DE INDEXAÇÃO:
Meningoencefalite; herpesvírus bovino; bovinos; neuropatologia; distribuição de lesões; viroses

ABSTRACT:

Twenty six cases of bovine herpetic meningoencephalitis diagnosed from 2010-2016 in Goiás state, Brazil, were studied. Affected cattle were mainly 60-day to 18-month-old. There was no association of the disease with sex and seasonality. The disease was found in all five mesoregions with a higher prevalence in southern and central state of Goiás. Clinical signs more frequently observed included blindness, incoordination, circling, excessive salivation, and ataxia. Main gross findings in the brain were congestion with swelling and flattening of gyri, softening and yellow discoloration of cerebral cortex and hemorrhagic foci. In five cases no gross changes were observed in the brain and in four cases there is no information. The main histopathological changes were in the cortex of telencephalic lobes, especially the frontal and parietal; however less prominent and less frequently found lesions occurred in the thalamus, basal nuclei, midbrain, pons, medulla oblongata, cerebellum, and hippocampus. All cases presented lymphoplasmocytic meningoencephalitis and intranuclear basophilic inclusion bodies in astrocytes, less commonly in neurons. Other frequent lesions included segmental laminar neuronal necrosis (red neurons), spongiosis, swollen vascular endothelial nuclei, gliosis (focal and diffuse), hypertrophy of astrocytes, infiltration of gitter cells, congestion, and hemorrhage. Lesions less frequently observed were Alzheimer type II astrocytes, residual lesion and neuronophagia. The most frequently affected cortical layers by neuronal necrosis and edema were external and internal granular, molecular, and pyramidal cell layers. Gyri and sulci were equally affected. Of the 26 cases, in 2 (7.69%) the DNA of BoHV-5 was amplified with samples fixed in 10% formalin and paraffin-embedded. DNA of BoHV-1 was identified in another case (3.84%) where, positive to BoHV-1, fresh samples were used.

INDEX TERMS:
Meningoencephalitis; cattle; bovine herpesvirus; neuropathology; distribution of lesions; viroses

Introdução

Herpesvírus bovino (BoHV) tipo 1 (BoHV-1) e tipo 5 (BoHV-5) são vírus DNA, de cadeia dupla, envelopados, pertencentes a família Herpesviridae, subfamília Alphaherpesvirinae e gênero Varicellovirus (Roizmann et al. 1992Roizmann B., Desrosiers R.C., Fleckenstein B., Lopez C., Minson A.C. & Studdert M.J. 1992. The family Herpesviridae: an update. Arch. Virol. 123(3/4):425-449. http://dx.doi.org/10.1007/BF01317276. PMid:1562239.
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, Gomes et al. 2002Gomes L.I., Rocha M.A., Costa E.A., Lobato Z.I.P., Mendes L.C.N., Borges A.S., Leite R.C. & Barbosa-Stancioli E.F. 2002. Detecção de herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) em bovinos do sudeste brasileiro. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 54(2):217-220. http://dx.doi.org/10.1590/S0102-09352002000200014.
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). Esses agentes estão associados a várias manifestações clínicas que incluem rinotraqueíte infecciosa bovina (IBR), vulvovaginite pustular, balanopostite pustular, abortos, conjuntivite, forma sistêmica neonatal e meningoencefalite (Franco & Roehe 2007Franco A.C. & Roehe P.M. 2007. Herpesviridae, p.433-488. In: Flores E.F. (Ed.), Virologia Veterinária. Editora UFSM, Santa Maria., Halfen & Riet-Correa 2007Halfen D.C. & Riet-Correa F. 2007. Infecções por Herpesvírus Bovino-1 e Herpesvírus Bovino-5, p.126-137. In: Riet-Correa F., Schild A.L., Lemos R.A.A. & Borges J.R.J. (Eds), Doenças de Ruminantes e Equídeos. Vol.1. 3ª ed. Pallotti, Santa Maria, 722p.). Geralmente, a forma neurológica é atribuída ao BoHV-5, enquanto que as demais manifestações costumam ser causadas pelo BoHV-1 (Ely et al. 1996Ely R.W., D’Offay J.M., Ruefer A.H. & Cash C.Y. 1996. Bovine Herpesviral Encephalitis: A Retrospective Study on Archived Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Brain Tissue. J. Vet. Diagn. Invest. 8(4):487-492. http://dx.doi.org/10.1177/104063879600800416. PMid:8953538.
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, Silva et al. 2007Silva M.S., Brum M.C.S., Weiblen R. & Flores E.F. 2007. Identificação e diferenciação de bovino tipos 1 e 5 isolados de amostras clínicas no Centro-Sul do Brasil, Argentina e Uruguai (1987-2006). Pesq. Vet. Bras. 27(10):403-408. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2007001000003.
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, Arruda et al. 2010Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
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), porém ambos podem causar doença neurológica de difícil diferenciação clínica, sendo importante a aplicação de técnicas moleculares como a reação em cadeia de polimerase (PCR) (Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
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). Em um trabalho realizado no Sul do Brasil, constatou-se que casos de meningoencefalite herpética bovina foram causados por ambos BoHV-1 e BoHV-5 (Rissi et al. 2008Rissi D.R. , Pierezan F., Silva M.S., Flores E.F. & Barros C.S. L. 2008. Neurological disease in cattle in southern Brazil associated with Bovine herpesvirus infection. J. Vet. Diagn. Invest. 20(3):346-349. http://dx.doi.org/10.1177/104063870802000315. PMid:18460624.). Os dois vírus apresentam características biológicas, moleculares e estruturais muito similares, porém possuem algumas diferenças genéticas e imunogênicas que estão relacionadas às particularidades de cada tipo viral em relação à sua patogenicidade e epidemiologia (Franco & Roehe 2007Franco A.C. & Roehe P.M. 2007. Herpesviridae, p.433-488. In: Flores E.F. (Ed.), Virologia Veterinária. Editora UFSM, Santa Maria.).

A meningoencefalite tem sido observada em várias regiões do mundo e, no Brasil, surtos de rinotraqueíte, vulvovaginite e balanopostite são diagnosticados em várias regiões do país. A meningoencefalite associada ao BoHV-5 é uma doença infecto-contagiosa que afeta principalmente bovinos jovens e têm sido reportada em vários estados brasileiros, como Rio Grande do Sul (Riet-Correa et al. 1989Riet-Correa F., Vidor T., Schild A.L. & Méndez M.C. 1989. Meningoencefalite e necrose do córtex cerebral em bovinos causadas por Herpes Vírus Bovino-1. Pesq. Vet. Bras. 9:13-16., Sanches et al. 2000Sanches A.W.D., Langohr I.M., Stigger A.L. & Barros C.S. L. 2000. Doenças do sistema nervoso central em bovinos no Sul do Brasil. Pesq. Vet. Bras. 20(3):113-118. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2000000300005.
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, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
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, Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
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, Silva et al. 2007Silva M.S., Brum M.C.S., Weiblen R. & Flores E.F. 2007. Identificação e diferenciação de bovino tipos 1 e 5 isolados de amostras clínicas no Centro-Sul do Brasil, Argentina e Uruguai (1987-2006). Pesq. Vet. Bras. 27(10):403-408. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2007001000003.
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, Rissi & Barros 2013Rissi D.R. & Barros C.S. 2013. Necrotizing meningoencephalitis in a cow. Vet. Pathol. 50(5):926-929. http://dx.doi.org/10.1177/0300985813478209. PMid:23446433.
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), Paraná (Claus et al. 2007Claus M.P., Alfieri A.F., Médici K.C., Lunardi M. & Alfieri A.A. 2007. Bovine herpesvirus 5 detection by virus isolation in cell culture and multiplex-pcr in central nervous system from cattle with neurological disease in Brazilian herds. Braz. J. Microbiol. 38(3):485-490. http://dx.doi.org/10.1590/S1517-83822007000300019.
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, Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
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, Massitel et al. 2016Massitel J.L., Wesgueber J., Oliveira R.A.M., Queiroz G.R., Fritzen J.T.T., Alfieri A.A. & Lisbôa J.A.N. 2016. Presença do genoma de BoHV-5 no líquido cefalorraquidiano de bovinos com meningoencefalite herpética. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 68(2):548-552. http://dx.doi.org/10.1590/1678-4162-8087.
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), Rio de Janeiro, Minas Gerais (Gomes et al. 2002Gomes L.I., Rocha M.A., Costa E.A., Lobato Z.I.P., Mendes L.C.N., Borges A.S., Leite R.C. & Barbosa-Stancioli E.F. 2002. Detecção de herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) em bovinos do sudeste brasileiro. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 54(2):217-220. http://dx.doi.org/10.1590/S0102-09352002000200014.
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, Claus et al. 2007Claus M.P., Alfieri A.F., Médici K.C., Lunardi M. & Alfieri A.A. 2007. Bovine herpesvirus 5 detection by virus isolation in cell culture and multiplex-pcr in central nervous system from cattle with neurological disease in Brazilian herds. Braz. J. Microbiol. 38(3):485-490. http://dx.doi.org/10.1590/S1517-83822007000300019.
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, Franco & Roehe 2007Franco A.C. & Roehe P.M. 2007. Herpesviridae, p.433-488. In: Flores E.F. (Ed.), Virologia Veterinária. Editora UFSM, Santa Maria., Aquino Neto et al. 2009Aquino Neto H.M., Carvalho A.U., Facury Filho E.J., Ferreira P.M., Barbosa-Stancioli E.F., Lobato Z.I.P., Alvarenga M.R., Serrano A.L., Martins R.A. & Afonso D.A.F. 2009. Meningoencefalite por Herpesvirus bovino 5 em Minas Gerais: relato de caso clínico. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 61(1):1-5. http://dx.doi.org/10.1590/S0102-09352009000100001.
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, Oliveira et al. 2016Oliveira T.S., Bull V., Furtini R., Drummnond S.R.M., Costa E.A., Santos R.L. & Paixão T.A. 2016. Neurological diseases of cattle diagnosed through histopathology in Minas Gerais. Braz. J. Vet. Pathol. 9:62-69.), Mato Grosso (Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
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, Claus et al. 2007Claus M.P., Alfieri A.F., Médici K.C., Lunardi M. & Alfieri A.A. 2007. Bovine herpesvirus 5 detection by virus isolation in cell culture and multiplex-pcr in central nervous system from cattle with neurological disease in Brazilian herds. Braz. J. Microbiol. 38(3):485-490. http://dx.doi.org/10.1590/S1517-83822007000300019.
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, Arruda et al. 2010Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
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), Pernambuco (Oliveira et al. 2014Oliveira J.S., Albuquerque R.F., Aguiar-Filho C.R., Arruda L.P., Colodel E.M., Rocha B.P., Evêncio-Neto J. & Mendonça F.S. 2014. Meningoencefalite necrosante em bovinos associada ao herpesvírus bovino-5 em Pernambuco, Brasil. Acta Scient. Vet. 42(supl. 1):43.), Paraíba, Rio Grande do Norte (Galiza et al. 2010Galiza G.J.N., Silva M.L.C.R., Dantas A.F.M., Simões S.V.D. & Riet-Correa F. 2010. Doenças do sistema nervoso de bovinos no semiárido nordestino. Pesq. Vet. Bras. 30(3):267-276. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000300014.
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), Pará (Riet-Correa et al. 2006Riet-Correa G., Duarte M.D., Barbosa J.D., Oliveira C.M.C., Cerqueira V.D., Brito M.F. & Riet-Correa F. 2006. Meningoencefalite e polioencefalomalacia causada por Herpesvírus bovino-5 no Estado do Pará. Pesq. Vet. Bras. 26(1):44-46. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000100009.
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), São Paulo (Claus et al. 2007Claus M.P., Alfieri A.F., Médici K.C., Lunardi M. & Alfieri A.A. 2007. Bovine herpesvirus 5 detection by virus isolation in cell culture and multiplex-pcr in central nervous system from cattle with neurological disease in Brazilian herds. Braz. J. Microbiol. 38(3):485-490. http://dx.doi.org/10.1590/S1517-83822007000300019.
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, Ferrari et al. 2007Ferrari H.F., Luvizotto M.C.R., Rahal P. & Cardoso T.C. 2007. Detection of bovine Herpesvirus type 5 in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by PCR: a useful adjunct to conventional tissue-based diagnostic test of bovine encephalitis. J. Virol. Methods 146(1-2):335-340. http://dx.doi.org/10.1016/j.jviromet.2007.07.018. PMid:17804088.
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, Cunha et al. 2009Cunha P.H.J., Delfiol D.J.Z., Cagnini D.Q., Badial P.R., Oliveira Filho J.P., Olivo G., Amorim R.M. & Borges A.S. 2009. Identificação molecular do herpesvirus bovino tipo 5 em um bovino confinado associado com diagnóstico diferencial laboratorial de outras causas de polioencefalomalacia. Anais do VIII Congresso Brasileiro de Buiatria, Belo Horizonte, MG. Ciênc. Anim. Bras. (Supl. 1):93-98.) e Mato Grosso do Sul (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
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, Gomes et al. 2002Gomes L.I., Rocha M.A., Costa E.A., Lobato Z.I.P., Mendes L.C.N., Borges A.S., Leite R.C. & Barbosa-Stancioli E.F. 2002. Detecção de herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) em bovinos do sudeste brasileiro. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 54(2):217-220. http://dx.doi.org/10.1590/S0102-09352002000200014.
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, Lemos 2005Lemos R.A.A. 2005. Enfermidades do sistema nervoso de bovinos de corte das regiões Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Tese de Doutorado, Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, SP. 150p., Claus et al. 2007Claus M.P., Alfieri A.F., Médici K.C., Lunardi M. & Alfieri A.A. 2007. Bovine herpesvirus 5 detection by virus isolation in cell culture and multiplex-pcr in central nervous system from cattle with neurological disease in Brazilian herds. Braz. J. Microbiol. 38(3):485-490. http://dx.doi.org/10.1590/S1517-83822007000300019.
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, Silva et al. 2007Silva M.S., Brum M.C.S., Weiblen R. & Flores E.F. 2007. Identificação e diferenciação de bovino tipos 1 e 5 isolados de amostras clínicas no Centro-Sul do Brasil, Argentina e Uruguai (1987-2006). Pesq. Vet. Bras. 27(10):403-408. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2007001000003.
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). Em Goiás, a doença é pouco estudada (De Paula et al. 2005De Paula R.R., Souza M.A., Colodel E.M., Hübner S.O., Brum K.B., Jorge K.B.C. & Damasceno A.D. 2005. Meningoencefalite causada pelo BHV-5 em um bovino no Estado de Goiás. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 57(Supl. 1):2., Silva 2014Silva D.R. 2014. Detecção molecular de herpesvírus bovino tipo-1 e herpesvírus bovino tipo-5 em amostras de encéfalos bovinos incluídos em parafina. Tese de Mestrado. Universidade Federal de Goiás, Goiânia, GO. 48p.) e dois surtos neurológicos da doença foram diagnosticados na região Sudoeste do Estado (Freitas Neto et al. 2010Freitas Neto A.P., Bannwart L.F., Verdejo A.C.F., Rabelo R.E., Garcia E.C. & Sant’ana F.J.F. 2010. Meningoencefalite por herpesvírus bovino no Sudoeste de Goiás. Interbio 4(1):146.). No Rio Grande do Sul, a meningoencefalite por BoHV-5 é considerada a segunda causa mais frequente de infecção viral do sistema nervoso central de bovinos, perdendo apenas para a raiva (Sanches et al. 2000Sanches A.W.D., Langohr I.M., Stigger A.L. & Barros C.S. L. 2000. Doenças do sistema nervoso central em bovinos no Sul do Brasil. Pesq. Vet. Bras. 20(3):113-118. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2000000300005.
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) e no Centro-Oeste é uma das doenças mais importantes em bovinos (Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
). No Brasil, a doença neurológica tem sido observada sob a forma de surtos ou de casos individuais, de forma espontânea ou experimental, apresentando baixa morbidade, mortalidade e alta letalidade (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Meyer et al. 2001Meyer G., Lemaire M., Ros C., Belak K., Gabriel A., Cassart D., Coignoul F., Belak S. & Thiry E. 2001. Comparative pathogenesis of acute and latent infections of calves with bovine herpesvirus types 1 and 5. Arch. Virol. 146(4):633-652. http://dx.doi.org/10.1007/s007050170136. PMid:11402854.
https://doi.org/10.1007/s007050170136...
, Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, De Paula et al. 2005De Paula R.R., Souza M.A., Colodel E.M., Hübner S.O., Brum K.B., Jorge K.B.C. & Damasceno A.D. 2005. Meningoencefalite causada pelo BHV-5 em um bovino no Estado de Goiás. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 57(Supl. 1):2., Riet-Correa et al. 2006Riet-Correa G., Duarte M.D., Barbosa J.D., Oliveira C.M.C., Cerqueira V.D., Brito M.F. & Riet-Correa F. 2006. Meningoencefalite e polioencefalomalacia causada por Herpesvírus bovino-5 no Estado do Pará. Pesq. Vet. Bras. 26(1):44-46. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000100009.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
, Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
, Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
https://doi.org/10.1590/S1516-8913200900...
, Freitas Neto et al. 2010, Cagnini et al. 2015Cagnini D.Q., Cunha P.H.J., Pantoja J.C.F., Badial P.R., Oliveira-Filho J.P., Araújo-Junior J.P., Alfieri A.A. & Borges A.S. 2015. Histopathological, immunohistochemical, and molecular study of BHV-5 infection in the central nervous system of experimentally infected calves. Pesq. Vet. Bras. 35(4):337-343. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2015000400004.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201500...
) e não apresenta sazonalidade (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Barros et al. 2006Barros C.S.L. , Driemeier D., Dutra I.S. & Lemos R.A.A. 2006. Doenças do Sistema Nervoso de Bovinos no Brasil. Agnes, São Paulo, p.166-171. 207p.).

Diante da importância que essa enfermidade possui em várias regiões do Brasil e da escassez de informações relacionadas à forma neurológica da infecção no Estado de Goiás, importante produtor nacional de carne e leite, o presente trabalho tem como objetivo descrever os achados epidemiológicos, moleculares e clínico-patológicos, bem como a distribuição das alterações no encéfalo, de 26 casos naturais de meningoencefalite herpética bovina diagnosticados nesse estado.

Material e Métodos

Foi realizado um estudo retrospectivo de 26 casos naturais de meningoencefalite por BoHV entre março de 2010 a maio de 2016 nos arquivos do Laboratórios de Patologia Veterinária (LPV) da Universidade Federal de Goiás (UFG), Regional Jataí (RJ), e no Laboratório de Diagnóstico Patológico Veterinário (LDPV) da Universidade de Brasília (UnB) entre julho de 2015 a maio de 2016. Grande parte (23/26, 88,46%) das amostras utilizadas no estudo foi de encéfalos fornecidos gentilmente pelo Laboratório de Análise e Diagnóstico Veterinário (LABVET) da Agência Goiana de Defesa Agropecuária (AGRODEFESA), em Goiânia/GO. Foram revisados os protocolos de necropsia e de histopatologia de bovinos do LPV/UFG/RJ e do LDPV/UnB. Partes desses casos foram recebidas sem determinação exata do tempo de fixação em formol a 10%. Os outros casos (3/26 ou 11,53%) foram obtidos de necropsias realizadas pela equipe do LPV/UFG/RJ. Todas as amostras são de bovinos que apresentaram resultado negativo na imunofluorescência direta e na prova biológica para raiva.

Após a necropsia, as amostras de encéfalo foram coletadas e fixadas em formol tamponado a 10%, permanecendo de dias até meses no fixador. Adicionalmente foram colhidos e fixados no mesmo fixador, os complexos gânglio de Gasser, rete mirabile carotídea e hipófise (GRH) de dez casos. Após a fixação, realizaram-se cortes transversais no encéfalo com intervalos de 1-2 cm para avaliação macroscópica. As seguintes seções foram preparadas para avaliação microscópica: cerebelo, bulbo na altura do óbex, ponte com pedúnculos cerebelares, mesencéfalo na altura dos colículos rostrais, tálamo, núcleos basais, hipocampo, telencéfalos frontal, parietal e occipital e o monobloco do complexo GRH (Barros & Marques 2003Barros C.S.L. & Marques G.H.F. 2003. Procedimentos para o diagnóstico das doenças do sistema nervoso central de bovinos. Depto Defesa Animal, Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA), Brasília. 50p. Disponível em <Disponível em http://www.agricultura.gov.br > Acesso em 30 mai. 2016.
http://www.agricultura.gov.br...
). Todos os fragmentos foram processados rotineiramente para histologia, incluídos em parafina e corados pela hematoxilina-eosina (HE).

Microscopicamente, as lesões foram avaliadas qualitativa e quantitativamente. No primeiro caso, foram anotados a intensidade de necrose neuronal, edema, os tipos celulares predominantes nos manguitos perivasculares, o tipo de reação glial (gliose focal/difusa), congestão, hemorragia, separação entre as substâncias branca e cinzenta, lesão residual, neuronofagia, infiltração por células gitter e tumefação de núcleos de células endoteliais. As lesões encontradas foram classificadas quanto à intensidade em ausente (0), leve (1), moderada (2) ou acentuada (3), sendo leve com cerca de 0-25%, moderado 25-50% e acentuado mais de 50% do tecido afetado. Os manguitos também foram classificados com relação ao número de camadas de células inflamatórias em leve (até 2 camadas), moderado (de 3 a 5 camadas) e acentuado (com mais de 6 camadas). Foi avaliada também a distribuição de necrose neuronal e edema nas seis camadas de neurônios (molecular, granular externa, células piramidais, granular interna, ganglionar e de células polimórficas) dos telencéfalos frontal, parietal e occipital.

Para a determinação do tipo do herpesvírus bovino (BoHV-1 ou BoHV-5) envolvido nos casos, foram realizadas análises moleculares, através da reação em cadeia da polimerase (PCR) para extração de DNA das amostras de encéfalo (telencéfalo e tronco encefálico) congeladas a -80ºC em um caso e dos blocos de parafina dos outros 25 casos (Claus et al. 2005Claus M.P., Alfieri A.F., Folgueras-Flatschart A.V., Wosiacki S.R., Medici K.C. & Alfieri A.A. 2005. Rapid detection and differentiation of bovine herpesvírus 1 and 5 glycoprotein C gene in clinical specimens by multiplex-PCR. J. Virol. Methods. 128(1-2):183-188. http://dx.doi.org/10.1016/j.jviromet.2005.05.001. PMid:15939490.
https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2005....
, Arruda et al. 2010Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201000...
). A reação de PCR foi realizada conforme descrito por Claus et al (2005)Claus M.P., Alfieri A.F., Folgueras-Flatschart A.V., Wosiacki S.R., Medici K.C. & Alfieri A.A. 2005. Rapid detection and differentiation of bovine herpesvírus 1 and 5 glycoprotein C gene in clinical specimens by multiplex-PCR. J. Virol. Methods. 128(1-2):183-188. http://dx.doi.org/10.1016/j.jviromet.2005.05.001. PMid:15939490.
https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2005....
e a leitura foi realizada por eletroforese em gel de agarose a 2% corado com GelRed (Biotium) em transluminador (UV-300nm). Como controle negativo foi utilizado agua ultrapura. DNA de isolados de BHV-1 e BHV-5 foram gentilmente cedidos pelo Prof. Rudi Weiblein (UFSM) e foram utilizados como controles postivos.

Resultados

Os principais dados epidemiológicos dos casos de meningoencefalite herpética observados encontram-se no Quadro 1. A maioria (22/26, 84,61%) dos casos diagnosticados ocorreu em bovinos de dois anos de idade ou menos. Um animal foi informado como adulto, sem descriminar precisamente a idade. Foi observada predominância da raça Nelore, sendo mais da metade dos bovinos (14/26, 53,84%). Não houve preferência por sexo, sendo acometidos 13 machos, 11 fêmeas e dois animais sem sexo informado. Não se observou sazonalidade na ocorrência da doença.

Quadro 1.
Dados epidemiológicos de 26 casos de meningoencefalite herpética diagnosticados em bovinos no Estado de Goiás (2010-2016)

A distribuição geográfica foi uniforme e está representada no Quadro 1 e Figura 1. Houve concentração maior de casos nas Mesorregiões Sul (10/26, 38,46%) e Centro (7/26, 26,92%). Não foi possível avaliar a evolução, morbidade, mortalidade e letalidade da doença devido à indisponibilidade dos dados necessários para essas avaliações nas fichas.

Fig.1.
Mapa de Goiás com a localização dos municípios onde ocorreram os casos de meningoencefalite por herpesvírus bovino (BoHV) descritos neste estudo: Mineiros (1), Serranópolis (2), Pontalina (3), Aragarças (4), Simolândia (5), Mundo Novo (6) Baliza (7), Jataí (8), Itarumã (9), Nova América (10), Ceres (11), Goiânia (12), Aparecida do Rio Doce (13), Inaciolândia (14), Orizona (15), Israelândia (16), Flores de Goiás (17), Posse (18), Rubiataba (19), Goiatuba (20), Minaçu (21), Bonópolis (22).

O Quadro 2 mostra a frequência de sinais clínicos descritos nos 26 casos relatados. Os principais sinais observados foram cegueira, incoordenação, sialorreia e ataxia.

Quadro 2.
Frequência de sinais clínicos em 26 casos de meningoencefalite herpética em bovinos diagnosticados no Estado de Goiás (2010-2016)

Os principais achados macroscópicos descritos no encéfalo consistiam de congestão (15/26, 57,69%) e tumefação com achatamento das circunvoluções cerebrais (10/26, 38,46%). Em oito casos (30,76%), foram observadas áreas de amolecimento ou amarelamento telencefálico, sendo um com depressão acentuada bilateral e simétrica do córtex frontal (Fig.2), características de malacia. Adicionalmente, focos de hemorragia foram visualizados em sete casos (26,92%) afetando o telencéfalo e o cerebelo. Cinco casos (19,23%) não apresentaram alterações macroscópicas e em quatro (15,38%) as alterações não foram informadas. Três casos (11,53%) apresentaram linhas com separação entre as substâncias branca e cinzenta (Fig.3).

Fig.2.
Encéfalo de um bovino com meningoencefalite herpética. Córtex frontal apresenta área focalmente extensa bilateral simétrica de malácia.

Fig.3.
Encéfalo de um bovino com meningoencefalite herpética. Linhas de separação entre a substância cinzenta a branca do telencéfalo frontal (setas).

A Figura 4 mostra que as principais alterações microscópicas predominaram no córtex frontal e parietal, com menor intensidade nas outras seções avaliadas do encéfalo. Em nenhum dos casos foram observadas alterações histológicas no complexo GRH. Todos os animais apresentaram corpúsculos de inclusão intranucleares basofílicos em astrócitos (Fig.5) e, eventualmente, em neurônios. As principais alterações microscópicas incluíam meningoencefalite linfoplasmocítica (Fig.6), ocasionalmente com macrófagos e neutrófilos, tumefação do núcleo de células endoteliais dos vasos, necrose neuronal segmentar e laminar (Fig.7), edema (espongiose) perineuronal, perivascular e no neurópilo (Fig.8), gliose focal, hipertrofia de astrócitos, congestão e hemorragia. Ocasionalmente eram observados grupos de dois ou três astrócitos com núcleos vesiculosos e tumefeitos, morfologia compatível com astrócitos Alzheimer tipo II (Fig.9); nos casos com lesões mais avançadas, numerosos macrófagos tumefeitos com citoplasma espumoso (células gitter) eram observados principalmente no espaço perivascular e no neurópilo e sob as leptomeninges (Fig.10). Os neurônios necróticos eram caracterizados por encarquilhamento e hipereosinofilia citoplasmáticas, picnose nuclear sem evidenciação nucleolar e desaparecimento da substância de Nissl. A necrose neuronal ocorreu tanto nos topos quanto nos sulcos das circunvoluções cerebrais. O edema na substância cinzenta era acentuado e, em três casos, deixava o neurópilo com aspecto esponjoso, separando a substância cinzenta da branca ou as camadas de neurônios da substância cinzenta (Fig.11). Lesão residual, caracterizada por áreas cavitárias com perda dos componentes neuroectodérmicos, associado à preservação de estruturas vasculares e células gitter (Fig.12), além de gliose difusa e neuronofagia foram observadas com pouca frequência. A distribuição da necrose neuronal e do edema nas lâminas de neurônios do córtex frontal, parietal e occipital encontra-se ilustrada nas Figuras 13 e 14, respectivamente. As principais regiões afetadas foram as camadas granular externa, molecular, de células piramidais e granular interna.

Fig.4.
Distribuição e intensidade das lesões histológicas no encéfalo em 26 casos de meningoencefalite herpética em bovinos. Graus de intensidade de 0 (ausência de lesão) a 3 (lesão acentuada) foram atribuídos. C = córtex, NB = núcleos basais, GF = gliose focal, EN = edema de neurópilo, NV = neurônios vermelhos (necrose neuronal), TNCE = tumefação de núcleos de células endoteliais.

Fig.5.
Aspecto histológico do córtex telencefálico de um bovino com meningoencefalite herpética mostrando corpúsculos de inclusão intranucleares basofílicos em astrócitos. HE, obj.40x.

Fig.6.
Aspecto histológico do córtex telencefálico de um bovino com meningoencefalite herpética mostrando manguitos perivasculares com linfócitos, plasmócitos e macrófagos. HE, obj.40x.

Fig.7.
Aspecto histológico do córtex telencefálico de um bovino com meningoencefalite herpética mostrando necrose neuronal. O citoplasma dos neurônios necróticos está encarquilhado e fortemente eosinofílico (neurônios vermelhos). Nota-se ainda edema perineuronal e perivascular. HE, obj.40x.

Fig.8.
Aspecto histológico do córtex telencefálico de um bovino com meningoencefalite herpética mostrando vacuolização perineuronal, perivascular e no neurópilo (edema). HE, obj.10x.

Fig.9.
Aspecto histológico do córtex telencefálico de um bovino com meningoencefalite herpética mostrando grupos de dois a quatro astrócitos com núcleos vesiculosos e tumefeitos (astrócitos Alzheimer tipo II). HE, obj.40x.

Fig.10.
Aspecto histológico do córtex telencefálico de um bovino com meningoencefalite herpética avançada mostrando infiltração de macrófagos tumefeitos com citoplasma espumoso (células gitter), caracterizando malacia. HE, obj.40x.

Fig.11.
Aspecto histológico do córtex telencefálico de um bovino com meningoencefalite herpética mostrando linhas de separação entre camadas de neurônios da substância cinzenta devido ao edema acentuado. HE, obj.10x.

Fig.12.
Aspecto histológico do córtex telencefálico de um bovino com meningoencefalite herpética com lesão residual, caracterizada por perda dos componentes neuroectodérmicos com preservação de es

Fig.13.
Distribuição de necrose neuronal (neurônios vermelhos) nas lâminas de neurônios do córtex frontal, parietal e occipital em 26 casos de meningoencefalite herpética em bovinos. C = camada, gran. = granular, céls = células.

Fig.14.
Distribuição de edema no córtex frontal, parietal e occipital em 26 casos de meningoencefalite herpética em bovinos. C = camada, gran. = granular, céls = células.

Das 26 amostras, o DNA de BoHV-5 foi amplificado em 7,69% (2/26) e o BoHV-1 em 3,84% (1/26), totalizando 11,53% de positividade ao BoHV. Desses casos, em dois, utilizou-se amostras fixadas em formol a 10% e incluídas em parafina e amostras congeladas de encéfalo foram usadas em apenas um caso.

Discussão

Dados epidemiológicos semelhantes aos observados neste estudo foram mencionados por outros autores, indicando que a meningoencefalite herpética pode ocorrer na forma de surtos (Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
https://doi.org/10.1590/S1516-8913200900...
, Freitas Neto et al. 2010Freitas Neto A.P., Bannwart L.F., Verdejo A.C.F., Rabelo R.E., Garcia E.C. & Sant’ana F.J.F. 2010. Meningoencefalite por herpesvírus bovino no Sudoeste de Goiás. Interbio 4(1):146., Oliveira et al. 2014Oliveira J.S., Albuquerque R.F., Aguiar-Filho C.R., Arruda L.P., Colodel E.M., Rocha B.P., Evêncio-Neto J. & Mendonça F.S. 2014. Meningoencefalite necrosante em bovinos associada ao herpesvírus bovino-5 em Pernambuco, Brasil. Acta Scient. Vet. 42(supl. 1):43.) ou como casos isolados (De Paula et al. 2005De Paula R.R., Souza M.A., Colodel E.M., Hübner S.O., Brum K.B., Jorge K.B.C. & Damasceno A.D. 2005. Meningoencefalite causada pelo BHV-5 em um bovino no Estado de Goiás. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 57(Supl. 1):2., Riet-Correa et al. 2006Riet-Correa G., Duarte M.D., Barbosa J.D., Oliveira C.M.C., Cerqueira V.D., Brito M.F. & Riet-Correa F. 2006. Meningoencefalite e polioencefalomalacia causada por Herpesvírus bovino-5 no Estado do Pará. Pesq. Vet. Bras. 26(1):44-46. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000100009.
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, Cunha et al. 2009Cunha P.H.J., Delfiol D.J.Z., Cagnini D.Q., Badial P.R., Oliveira Filho J.P., Olivo G., Amorim R.M. & Borges A.S. 2009. Identificação molecular do herpesvirus bovino tipo 5 em um bovino confinado associado com diagnóstico diferencial laboratorial de outras causas de polioencefalomalacia. Anais do VIII Congresso Brasileiro de Buiatria, Belo Horizonte, MG. Ciênc. Anim. Bras. (Supl. 1):93-98., Galiza et al. 2010Galiza G.J.N., Silva M.L.C.R., Dantas A.F.M., Simões S.V.D. & Riet-Correa F. 2010. Doenças do sistema nervoso de bovinos no semiárido nordestino. Pesq. Vet. Bras. 30(3):267-276. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000300014.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201000...
). Essa neuropatia acomete principalmente bovinos jovens, entre 60 dias e 18 meses de idade (Rissi et al. 2007Rissi D.R. , Rech R.R., Flores E.F., Kommers G.D. & Barros C.S. L. 2007. Meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 27(7):251-260. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2007000700001.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200700...
, Massitel et al. 2016Massitel J.L., Wesgueber J., Oliveira R.A.M., Queiroz G.R., Fritzen J.T.T., Alfieri A.A. & Lisbôa J.A.N. 2016. Presença do genoma de BoHV-5 no líquido cefalorraquidiano de bovinos com meningoencefalite herpética. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 68(2):548-552. http://dx.doi.org/10.1590/1678-4162-8087.
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), semelhante a faixa etária dos animais acometidos no presente estudo, em que 22 dos 26 (84,61%) casos diagnosticados apresentavam dois anos de idade ou menos. Porém, foram observados três casos em bovinos com idade entre 7-10 anos e em um animal adulto, o que reforça a importância de incluir a meningoencefalite por BoHV no diagnóstico diferencial de neuropatias centrais em bovinos adultos.

A doença é comumente relatada em bovinos de corte, afetando taurinos (Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
https://doi.org/10.1590/S1516-8913200900...
) e zebuínos (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
, Pedraza et al. 2010Pedraza F.J., Alessi A.C. & Barbosa-Stancioli E.F. 2010. Detection of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by nested PCR in Colombian cattle. Revta Colomb. Cienc. Pecuarias 23:292-298.). O fato de um maior número de bovinos Nelore nesse estudo serem afetados deve-se provavelmente a predominância dessa raça no Estado de Goiás. Fato semelhante ocorreu em casos descritos no Paraná (Massitel et al. 2016Massitel J.L., Wesgueber J., Oliveira R.A.M., Queiroz G.R., Fritzen J.T.T., Alfieri A.A. & Lisbôa J.A.N. 2016. Presença do genoma de BoHV-5 no líquido cefalorraquidiano de bovinos com meningoencefalite herpética. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 68(2):548-552. http://dx.doi.org/10.1590/1678-4162-8087.
https://doi.org/10.1590/1678-4162-8087...
) e em Mato Grosso (Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
). Alguns autores relataram casos da doença em animais manejados em sistema de criação extensivo (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
), semi-intensivo (Barros et al. 2006Barros C.S.L. , Driemeier D., Dutra I.S. & Lemos R.A.A. 2006. Doenças do Sistema Nervoso de Bovinos no Brasil. Agnes, São Paulo, p.166-171. 207p., Aquino Neto et al. 2009Aquino Neto H.M., Carvalho A.U., Facury Filho E.J., Ferreira P.M., Barbosa-Stancioli E.F., Lobato Z.I.P., Alvarenga M.R., Serrano A.L., Martins R.A. & Afonso D.A.F. 2009. Meningoencefalite por Herpesvirus bovino 5 em Minas Gerais: relato de caso clínico. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 61(1):1-5. http://dx.doi.org/10.1590/S0102-09352009000100001.
https://doi.org/10.1590/S0102-0935200900...
) e intensivo (Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Cunha et al. 2009Cunha P.H.J., Delfiol D.J.Z., Cagnini D.Q., Badial P.R., Oliveira Filho J.P., Olivo G., Amorim R.M. & Borges A.S. 2009. Identificação molecular do herpesvirus bovino tipo 5 em um bovino confinado associado com diagnóstico diferencial laboratorial de outras causas de polioencefalomalacia. Anais do VIII Congresso Brasileiro de Buiatria, Belo Horizonte, MG. Ciênc. Anim. Bras. (Supl. 1):93-98., Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
https://doi.org/10.1590/S1516-8913200900...
), submetidos a situações de estresse, principalmente desmama precoce (Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
).

O Estado de Goiás tem cinco Mesorregiões (Norte, Noroeste, Leste, Centro e Sul). No presente estudo, casos de meningoencefalite herpética foram diagnosticados em todas as Mesorregiões, com uma concentração maior de casos na Sul (10/26, 38,46%) e Centro (7/26, 26,92%), o que demonstra a importância epidemiológica da doença em todo o Estado. É possível que a maior concentração de casos nessas duas regiões supracitadas seja atribuída a proximidade dos municípios com dois laboratórios de diagnóstico que receberam as amostras (LPV/UFG/RJ e LABVET). Dos poucos casos descritos previamente na literatura dessa infecção neurológica em Goiás, dois surtos ocorreram no Sudoeste (Freitas Neto et al. 2010Freitas Neto A.P., Bannwart L.F., Verdejo A.C.F., Rabelo R.E., Garcia E.C. & Sant’ana F.J.F. 2010. Meningoencefalite por herpesvírus bovino no Sudoeste de Goiás. Interbio 4(1):146.) e em outros casos não houve citação da região afetada (De Paula et al. 2005De Paula R.R., Souza M.A., Colodel E.M., Hübner S.O., Brum K.B., Jorge K.B.C. & Damasceno A.D. 2005. Meningoencefalite causada pelo BHV-5 em um bovino no Estado de Goiás. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 57(Supl. 1):2., Silva 2014Silva D.R. 2014. Detecção molecular de herpesvírus bovino tipo-1 e herpesvírus bovino tipo-5 em amostras de encéfalos bovinos incluídos em parafina. Tese de Mestrado. Universidade Federal de Goiás, Goiânia, GO. 48p.).

Neste estudo, notou-se que a doença ocorreu em praticamente todos os meses do ano, não apresentando sazonalidade, semelhante ao observado por outros autores em outras regiões do Brasil (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
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, Lemos 2005Lemos R.A.A. 2005. Enfermidades do sistema nervoso de bovinos de corte das regiões Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Tese de Doutorado, Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, SP. 150p., Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
, Massitel et al. 2016Massitel J.L., Wesgueber J., Oliveira R.A.M., Queiroz G.R., Fritzen J.T.T., Alfieri A.A. & Lisbôa J.A.N. 2016. Presença do genoma de BoHV-5 no líquido cefalorraquidiano de bovinos com meningoencefalite herpética. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 68(2):548-552. http://dx.doi.org/10.1590/1678-4162-8087.
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). Também não houve preferência por sexo, semelhante aos achados de outros autores (Ely et al. 1996Ely R.W., D’Offay J.M., Ruefer A.H. & Cash C.Y. 1996. Bovine Herpesviral Encephalitis: A Retrospective Study on Archived Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Brain Tissue. J. Vet. Diagn. Invest. 8(4):487-492. http://dx.doi.org/10.1177/104063879600800416. PMid:8953538.
https://doi.org/10.1177/1040638796008004...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
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, Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
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), porém diferente de outros estudos que detectaram maior prevalência em machos (Lemos 2005Lemos R.A.A. 2005. Enfermidades do sistema nervoso de bovinos de corte das regiões Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Tese de Doutorado, Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, SP. 150p., Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
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, Pedraza et al. 2010Pedraza F.J., Alessi A.C. & Barbosa-Stancioli E.F. 2010. Detection of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by nested PCR in Colombian cattle. Revta Colomb. Cienc. Pecuarias 23:292-298., Massitel et al. 2016Massitel J.L., Wesgueber J., Oliveira R.A.M., Queiroz G.R., Fritzen J.T.T., Alfieri A.A. & Lisbôa J.A.N. 2016. Presença do genoma de BoHV-5 no líquido cefalorraquidiano de bovinos com meningoencefalite herpética. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 68(2):548-552. http://dx.doi.org/10.1590/1678-4162-8087.
https://doi.org/10.1590/1678-4162-8087...
).

Os sinais clínicos apresentados pelos bovinos deste estudo foram semelhantes aos relatados em outras descrições de meningoencefalite herpética bovina (Ely et al. 1996Ely R.W., D’Offay J.M., Ruefer A.H. & Cash C.Y. 1996. Bovine Herpesviral Encephalitis: A Retrospective Study on Archived Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Brain Tissue. J. Vet. Diagn. Invest. 8(4):487-492. http://dx.doi.org/10.1177/104063879600800416. PMid:8953538.
https://doi.org/10.1177/1040638796008004...
, Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Lemos 2005Lemos R.A.A. 2005. Enfermidades do sistema nervoso de bovinos de corte das regiões Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Tese de Doutorado, Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, SP. 150p., Rissi & Barros 2013Rissi D.R. & Barros C.S. 2013. Necrotizing meningoencephalitis in a cow. Vet. Pathol. 50(5):926-929. http://dx.doi.org/10.1177/0300985813478209. PMid:23446433.
https://doi.org/10.1177/0300985813478209...
). Os principais sinais observados foram cegueira, incoordenação, sialorreia e ataxia. A cegueira e sialorreia indicam lesões em porções rostrais do telencéfalo, principalmente do córtex frontal e a alta taxa de replicação viral em mucosa oral, encontrados frequentemente em animais onde a viremia e transmissão ocorreram via bulbo olfatório (Meyer et al. 2001Meyer G., Lemaire M., Ros C., Belak K., Gabriel A., Cassart D., Coignoul F., Belak S. & Thiry E. 2001. Comparative pathogenesis of acute and latent infections of calves with bovine herpesvirus types 1 and 5. Arch. Virol. 146(4):633-652. http://dx.doi.org/10.1007/s007050170136. PMid:11402854.
https://doi.org/10.1007/s007050170136...
, Vogel et al. 2003Vogel F.S.F., Caron L., Flores E.F., Weiblen R., Winkelmann E.R., Mayer S.V. & Bastos R.G. 2003. Distribution of bovine herpesvirus type 5 DNA in the central nervous systems of latently, experimentally infected calves. J. Clin. Microbiol. 41(10):4512-4520. http://dx.doi.org/10.1128/JCM.41.10.4512-4520.2003. PMid:14532175.
https://doi.org/10.1128/JCM.41.10.4512-4...
, Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
). A ataxia e incoordenação podem ser explicadas pelo edema e compressão cerebelar. A diversidade de sinais clínicos apresentados por animais doentes se deve à localização variável do vírus, que pode causar lesões desde o telencéfalos frontal até a medula espinhal (Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
). Alguns autores citam que sinais clínicos de disfunção de nervos cranianos e de tronco encefálico são observados em casos agudos e crônicos da doença, respectivamente (Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
, Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
https://doi.org/10.1590/S1516-8913200900...
). Bovinos infectados pelos vírus podem não apresentar sinais clínicos da enfermidade e representar importante fonte de disseminação para outros bovinos susceptíveis do rebanho (Isernhagen et al. 2011Isernhagen A.J., Cosenza M., Costa M.C.C., Médici K.C., Balarin M.R.S., Bracarense A.P.F.R.L., Alfieri A.A. & Lisbôa J.A.N. 2011. Asymtomatic encephalitis in calves experimentally infected with bovine herpesvirus-5. Can. Vet. J. 52(12):1312-1318. PMid:22654135.). Esse fato é explicado, pois os herpesvírus bovinos possuem a capacidade de realizar latência após a infecção aguda, que pode ser reativada periodicamente, especialmente em situações de estresse como desmama, castrações, assinalação, vacinações, transporte, troca de pasto, introdução de novos animais no rebanho, mudanças bruscas na dieta ou tratamento com corticosteroides (Meyer et al. 2001Meyer G., Lemaire M., Ros C., Belak K., Gabriel A., Cassart D., Coignoul F., Belak S. & Thiry E. 2001. Comparative pathogenesis of acute and latent infections of calves with bovine herpesvirus types 1 and 5. Arch. Virol. 146(4):633-652. http://dx.doi.org/10.1007/s007050170136. PMid:11402854.
https://doi.org/10.1007/s007050170136...
, Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
, Vogel et al. 2003Vogel F.S.F., Caron L., Flores E.F., Weiblen R., Winkelmann E.R., Mayer S.V. & Bastos R.G. 2003. Distribution of bovine herpesvirus type 5 DNA in the central nervous systems of latently, experimentally infected calves. J. Clin. Microbiol. 41(10):4512-4520. http://dx.doi.org/10.1128/JCM.41.10.4512-4520.2003. PMid:14532175.
https://doi.org/10.1128/JCM.41.10.4512-4...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Lemos 2005Lemos R.A.A. 2005. Enfermidades do sistema nervoso de bovinos de corte das regiões Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Tese de Doutorado, Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, SP. 150p., Barros et al. 2006Barros C.S.L. , Driemeier D., Dutra I.S. & Lemos R.A.A. 2006. Doenças do Sistema Nervoso de Bovinos no Brasil. Agnes, São Paulo, p.166-171. 207p., Halfen & Riet-Correa 2007Halfen D.C. & Riet-Correa F. 2007. Infecções por Herpesvírus Bovino-1 e Herpesvírus Bovino-5, p.126-137. In: Riet-Correa F., Schild A.L., Lemos R.A.A. & Borges J.R.J. (Eds), Doenças de Ruminantes e Equídeos. Vol.1. 3ª ed. Pallotti, Santa Maria, 722p., Rissi et al. 2007Rissi D.R. , Rech R.R., Flores E.F., Kommers G.D. & Barros C.S. L. 2007. Meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 27(7):251-260. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2007000700001.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200700...
). Esse fato demonstra a importância da associação dos achados anatomopatológicos e etiológicos nos casos de herpesvírus em geral, pois a detecção viral não necessariamente indica a doença, podendo sugerir latência do vírus. Em bovinos, o vírus pode permanecer em latência não só em gânglios de nervos sensoriais, mas também em córtex telencefálico, mesencéfalo, ponte, cerebelo e medula espinhal (Vogel et al. 2003Vogel F.S.F., Caron L., Flores E.F., Weiblen R., Winkelmann E.R., Mayer S.V. & Bastos R.G. 2003. Distribution of bovine herpesvirus type 5 DNA in the central nervous systems of latently, experimentally infected calves. J. Clin. Microbiol. 41(10):4512-4520. http://dx.doi.org/10.1128/JCM.41.10.4512-4520.2003. PMid:14532175.
https://doi.org/10.1128/JCM.41.10.4512-4...
). Mesmo com altos índices de letalidade, há relatos de animais doentes que se recuperaram completamente da enfermidade, espontaneamente ou após a administração de tiamina e corticosteroides (Riet-Correa et al. 1989Riet-Correa F., Vidor T., Schild A.L. & Méndez M.C. 1989. Meningoencefalite e necrose do córtex cerebral em bovinos causadas por Herpes Vírus Bovino-1. Pesq. Vet. Bras. 9:13-16., Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Lemos 2005Lemos R.A.A. 2005. Enfermidades do sistema nervoso de bovinos de corte das regiões Centro-Oeste e Sudeste do Brasil. Tese de Doutorado, Universidade Estadual Paulista, Jaboticabal, SP. 150p., Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
).

As alterações macroscópicas observadas no encéfalo neste estudo foram muito semelhantes aos achados de outros autores (Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Riet-Correa et al. 2006Riet-Correa G., Duarte M.D., Barbosa J.D., Oliveira C.M.C., Cerqueira V.D., Brito M.F. & Riet-Correa F. 2006. Meningoencefalite e polioencefalomalacia causada por Herpesvírus bovino-5 no Estado do Pará. Pesq. Vet. Bras. 26(1):44-46. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000100009.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
, Rissi & Barros 2013Rissi D.R. & Barros C.S. 2013. Necrotizing meningoencephalitis in a cow. Vet. Pathol. 50(5):926-929. http://dx.doi.org/10.1177/0300985813478209. PMid:23446433.
https://doi.org/10.1177/0300985813478209...
). As alterações afetam geralmente todo o telencéfalo, mas, nos casos mais crônicos, elas são mais marcadas e graves na substância cinzenta do córtex frontal (Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
), podendo ser simétricas e bilaterais (Perez et al. 2002Perez S.E., Bretschneider G., Leunda M.R., Osório F.A., Flores E.F. & Odeón A.C. 2002. Primary infection, latency, and reactivation of Bovine Herpesvirus type 5 in the bovine nervous system. Vet. Pathol. 39(4):437-444. http://dx.doi.org/10.1354/vp.39-4-437. PMid:12126146.
https://doi.org/10.1354/vp.39-4-437...
). Lesões semelhantes podem ser observadas no tálamo e núcleos basais (Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
). Em cinco casos do presente estudo, não foram observadas lesões macroscópicas e, em quatro, não havia informações sobre qualquer alteração. Há relatos de meningoencefalite por BoHV sem lesões macroscópicas (Rissi et al. 2008Rissi D.R. , Pierezan F., Silva M.S., Flores E.F. & Barros C.S. L. 2008. Neurological disease in cattle in southern Brazil associated with Bovine herpesvirus infection. J. Vet. Diagn. Invest. 20(3):346-349. http://dx.doi.org/10.1177/104063870802000315. PMid:18460624.). Isso provavelmente está relacionado a casos com curso clínico agudo, baixa neurovirulência ou susceptibilidade do animal, em que as lesões não se desenvolveram a ponto de serem observadas na necropsia, ou se desenvolveram a um ponto que, embora possíveis de serem observadas, são facilmente negligenciáveis (Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
). O diagnóstico diferencial macroscópico com polioencefalomalacia de origem nutricional (Sant’Ana et al. 2009Sant’Ana F.J.F. , Rissi D.R. , Lucena R.B., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A. & Barros C.S. L. 2009. Polioencefalomalacia em bovinos: epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões no encéfalo. Pesq. Vet. Bras. 29(7):487-497. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2009000700002.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200900...
, Sant’Ana & Barros 2010Sant’Ana F.J.F. & Barros C.S. L. 2010. Polioencephalomalacia in ruminants in Brazil. Braz. J. Vet. Pathol. 3:70-79.) pode ser feito com o auxílio de aplicação de luz ultravioleta sobre as áreas de malacia que não reagem nos casos de meningoencefalite por BoHV (Jackman & Edwin 1983Jackman R. & Edwin E.E. 1983. Cerebral autofluorescence and thiaminase deficiency in cerebrocortical necrosis. Vet. Rec. 112(23):548-550. http://dx.doi.org/10.1136/vr.112.23.548. PMid:6879970.
https://doi.org/10.1136/vr.112.23.548...
).

Os achados microscópicos são qualitativamente semelhantes aos descritos em várias publicações anteriores (Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Riet-Correa et al. 2006Riet-Correa G., Duarte M.D., Barbosa J.D., Oliveira C.M.C., Cerqueira V.D., Brito M.F. & Riet-Correa F. 2006. Meningoencefalite e polioencefalomalacia causada por Herpesvírus bovino-5 no Estado do Pará. Pesq. Vet. Bras. 26(1):44-46. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000100009.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
, Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
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, Freitas Neto et al. 2010Freitas Neto A.P., Bannwart L.F., Verdejo A.C.F., Rabelo R.E., Garcia E.C. & Sant’ana F.J.F. 2010. Meningoencefalite por herpesvírus bovino no Sudoeste de Goiás. Interbio 4(1):146., Pedraza et al. 2010Pedraza F.J., Alessi A.C. & Barbosa-Stancioli E.F. 2010. Detection of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by nested PCR in Colombian cattle. Revta Colomb. Cienc. Pecuarias 23:292-298., Rissi & Barros 2013Rissi D.R. & Barros C.S. 2013. Necrotizing meningoencephalitis in a cow. Vet. Pathol. 50(5):926-929. http://dx.doi.org/10.1177/0300985813478209. PMid:23446433.
https://doi.org/10.1177/0300985813478209...
, Oliveira et al. 2016Oliveira T.S., Bull V., Furtini R., Drummnond S.R.M., Costa E.A., Santos R.L. & Paixão T.A. 2016. Neurological diseases of cattle diagnosed through histopathology in Minas Gerais. Braz. J. Vet. Pathol. 9:62-69.). Em todos os casos, as alterações histológicas predominaram no córtex telencefálico, principalmente o córtex frontal e parietal, mas em alguns casos, lesões de menor intensidade foram também observadas no tálamo, núcleos basais, mesencéfalo, ponte, bulbo, cerebelo e hipocampo, semelhante aos achados de outros autores que também estudaram a distribuição das lesões no encéfalo (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
). Em alguns casos, vasculite tem sido descrita na meningoencefalite por BoHV (Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
, Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
https://doi.org/10.1590/S1516-8913200900...
), alteração essa não encontrada no presente estudo. Todos os animais apresentaram lesão inflamatória e corpúsculos de inclusão intranucleares basofílicos em astrócitos e/ou neurônios, porém há relatos da doença sem inflamação e/ou sem o corpúsculo de inclusão, podendo ser confundida com polioencefalomalacia nutricional (Ely et al. 1996Ely R.W., D’Offay J.M., Ruefer A.H. & Cash C.Y. 1996. Bovine Herpesviral Encephalitis: A Retrospective Study on Archived Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Brain Tissue. J. Vet. Diagn. Invest. 8(4):487-492. http://dx.doi.org/10.1177/104063879600800416. PMid:8953538.
https://doi.org/10.1177/1040638796008004...
, Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
, Perez et al. 2002Perez S.E., Bretschneider G., Leunda M.R., Osório F.A., Flores E.F. & Odeón A.C. 2002. Primary infection, latency, and reactivation of Bovine Herpesvirus type 5 in the bovine nervous system. Vet. Pathol. 39(4):437-444. http://dx.doi.org/10.1354/vp.39-4-437. PMid:12126146.
https://doi.org/10.1354/vp.39-4-437...
, Pedraza et al. 2010Pedraza F.J., Alessi A.C. & Barbosa-Stancioli E.F. 2010. Detection of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by nested PCR in Colombian cattle. Revta Colomb. Cienc. Pecuarias 23:292-298., Isernhagen et al. 2011Isernhagen A.J., Cosenza M., Costa M.C.C., Médici K.C., Balarin M.R.S., Bracarense A.P.F.R.L., Alfieri A.A. & Lisbôa J.A.N. 2011. Asymtomatic encephalitis in calves experimentally infected with bovine herpesvirus-5. Can. Vet. J. 52(12):1312-1318. PMid:22654135., Oliveira et al. 2014Oliveira J.S., Albuquerque R.F., Aguiar-Filho C.R., Arruda L.P., Colodel E.M., Rocha B.P., Evêncio-Neto J. & Mendonça F.S. 2014. Meningoencefalite necrosante em bovinos associada ao herpesvírus bovino-5 em Pernambuco, Brasil. Acta Scient. Vet. 42(supl. 1):43.). A não visualização de corpúsculos de inclusão foi associada a amostras autolisadas (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
) e previamente refrigeradas (Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
). A presença e quantidade de corpúsculos de inclusão foram proporcionais as áreas de inflamação, gliose e malacia, corroborando com outros autores (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
) e diferente de outros estudos (Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
). A localização das células gitter foi maior nas regiões superficiais dos telencéfalos, semelhante ao descrito por Salvador et al. (1998)Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
. Em seis casos desta investigação, os manguitos perivasculares continham alguns neutrófilos, sugerindo quadro agudo da doença, conforme visualizado em outros estudos (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Colodel et al. 2002Colodel E.M., Nakazato L., Weiblen R., Mello R.M., Silva R.R.P., Souza M.A., Oliveira Filho J.A. & Caron L. 2002. Meningoencefalite necrosante em bovinos causada por herpesvírus bovino no estado de Mato Groso do Sul, Brasil. Ciência Rural 32(2):293-298. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782002000200018.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200200...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
).

Um achado relevante nessa doença é a malacia, que foi observada em 13 casos. Essa lesão pode ser atribuída à isquemia secundária ao edema (Rissi et al. 2008Rissi D.R. , Pierezan F., Silva M.S., Flores E.F. & Barros C.S. L. 2008. Neurological disease in cattle in southern Brazil associated with Bovine herpesvirus infection. J. Vet. Diagn. Invest. 20(3):346-349. http://dx.doi.org/10.1177/104063870802000315. PMid:18460624.), acometendo todas as regiões do encéfalo, principalmente o córtex frontal (Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
). Salvador et al. (1998)Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
e Elias et al. (2004)Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
observaram microscopicamente malacia em animais com evolução igual ou superior a três dias de infecção. No presente estudo, um caso apresentou infiltração de células gitter no mesencéfalo. Malacia em tronco encefálico foi observada em animais com reativação viral por polioencefalomalacia experimental causada por ingestão de sulfato de amônia (David et al. 2007David N., Hübner S.O., Riet-Correa F., Halfen D. & Lemos R.A.A. 2007. Reactivation of latent bovine herpesvirus type 5 in cattle with polioencephalomalacia induced by ammonium sulphate. Pesq. Vet. Bras. 27(10):435-441. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2007001000009.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200700...
) e em casos naturais de meningoencefalite herpética (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
). Lesão no tronco encefálico pode ser resultado da disseminação centrípeta viral via nervo trigêmeo (Perez et al. 2002Perez S.E., Bretschneider G., Leunda M.R., Osório F.A., Flores E.F. & Odeón A.C. 2002. Primary infection, latency, and reactivation of Bovine Herpesvirus type 5 in the bovine nervous system. Vet. Pathol. 39(4):437-444. http://dx.doi.org/10.1354/vp.39-4-437. PMid:12126146.
https://doi.org/10.1354/vp.39-4-437...
).

Lesões atribuídas a BoHV não costumam ser observadas na medula espinhal, cerebelo e no gânglio trigêmio (Rissi et al. 2008Rissi D.R. , Pierezan F., Silva M.S., Flores E.F. & Barros C.S. L. 2008. Neurological disease in cattle in southern Brazil associated with Bovine herpesvirus infection. J. Vet. Diagn. Invest. 20(3):346-349. http://dx.doi.org/10.1177/104063870802000315. PMid:18460624., Oliveira et al. 2014Oliveira J.S., Albuquerque R.F., Aguiar-Filho C.R., Arruda L.P., Colodel E.M., Rocha B.P., Evêncio-Neto J. & Mendonça F.S. 2014. Meningoencefalite necrosante em bovinos associada ao herpesvírus bovino-5 em Pernambuco, Brasil. Acta Scient. Vet. 42(supl. 1):43., Cagnini et al. 2015Cagnini D.Q., Cunha P.H.J., Pantoja J.C.F., Badial P.R., Oliveira-Filho J.P., Araújo-Junior J.P., Alfieri A.A. & Borges A.S. 2015. Histopathological, immunohistochemical, and molecular study of BHV-5 infection in the central nervous system of experimentally infected calves. Pesq. Vet. Bras. 35(4):337-343. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2015000400004.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201500...
). Neste estudo, não foi detectada nenhuma alteração no complexo GRH, porém alguns casos apresentaram lesões, geralmente inflamatórias, no cerebelo. Alguns autores citam que ausência de lesão no gânglio do nervo trigêmeo pode estar relacionada à via de infecção do vírus, geralmente por via olfatória (Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
). Um caso apresentou necrose neuronal e edema perineuronal em neurônios de Purkinje, provavelmente secundário à compressão do telencéfalo com edema e isquemia sobre o cerebelo durante a herniação pelo forame magno. Esse achado foi semelhante ao descrito em outros relatos de infecção por BoHV (Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Rissi et al. 2008Rissi D.R. , Pierezan F., Silva M.S., Flores E.F. & Barros C.S. L. 2008. Neurological disease in cattle in southern Brazil associated with Bovine herpesvirus infection. J. Vet. Diagn. Invest. 20(3):346-349. http://dx.doi.org/10.1177/104063870802000315. PMid:18460624.) e em bovinos com polioencefalomalacia nutricional (Sant’Ana et al. 2009Sant’Ana F.J.F. , Rissi D.R. , Lucena R.B., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A. & Barros C.S. L. 2009. Polioencefalomalacia em bovinos: epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões no encéfalo. Pesq. Vet. Bras. 29(7):487-497. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2009000700002.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200900...
), porém Elias et al. (2004)Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
observaram áreas de malacia na substância branca cerebelar sem lesões macroscópicas de edema telencefálico, sugerindo que essa lesão foi causada pelo próprio vírus.

A necrose neuronal e o edema (espongiose) corticais foram mais acentuados nas camadas granular externa, molecular, de células piramidais e granular interna. Achados similares foram identificados em casos de polioencefalomalacia nutricional em bovinos (Hamlen et al. 1993Hamlen H., Clark E. & Janzen E. 1993. Polioencephalomalacia in cattle consuming water with elevated sodium sulfate levels: a herd investigation. Can. Vet. J. 34(3):153-158. PMid:17424182., Jeffrey et al. 1994Jeffrey M., Duff J.P., Higgins R.J., Simpson V.R., Jackman R. , Jones T.O., Mechie S.C. & Liversey C.T. 1994. Polioencephalomalacia associated with the ingestion of ammonium sulphate by sheep and cattle. Vet. Rec. 134(14):343-348. http://dx.doi.org/10.1136/vr.134.14.343. PMid:8017015.
https://doi.org/10.1136/vr.134.14.343...
, Sant’Ana et al. 2009Sant’Ana F.J.F. , Rissi D.R. , Lucena R.B., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A. & Barros C.S. L. 2009. Polioencefalomalacia em bovinos: epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões no encéfalo. Pesq. Vet. Bras. 29(7):487-497. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2009000700002.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200900...
). Em poucas investigações, a distribuição dessas lesões foi estudada em casos de meningoencefalite por BoHV. Salvador et al. (1998)Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
observaram necrose cortical maciça, envolvendo todas as camadas corticais em casos de meningoencefalite por BoHV-5.

Quatro casos do presente estudo apresentaram astrócitos Alzheimer tipo II. Esses astrócitos são frequentemente encontrados no encéfalo em casos de encefalopatia hepática ou renal (Summers et al. 1995Summers B.A., Cummings J.F. & De Lahunta A. 1995. Veterinary neuropathology, Mosby, St Louis. 527p.) e já foram relatados em animais com polioencefalomalacia nutricional (Sant’Ana et al. 2009Sant’Ana F.J.F. , Rissi D.R. , Lucena R.B., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A. & Barros C.S. L. 2009. Polioencefalomalacia em bovinos: epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões no encéfalo. Pesq. Vet. Bras. 29(7):487-497. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2009000700002.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200900...
). Embora nenhuma patogênese foi ainda proposta até o momento para a formação desses astrócitos na meningoencefalite herpética, na presente investigação, estes foram encontrados na substância cinzenta dos telencéfalos frontal e parietal associadas à necrose neuronal e espongiose do neurópilo. Sabe-se que essas células são mais resistentes que os neurônios a efeitos deletérios de neurotransmissores aminoácidos excitatórios em casos de necrose neuronal (Farooqui & Horrocks 1991Farooqui A.A. & Horrocks L.A. 1991. Excitatory amino acid receptors, neural membrane phospholipid metabolism and neurological disorders. Brain Res. Rev. 16(2):171-191. http://dx.doi.org/10.1016/0165-0173(91)90004-R. PMid:1662102.
https://doi.org/10.1016/0165-0173(91)900...
) e da amônia e outras toxinas na encefalopatia hepática (Norenberg 1987Norenberg M.D. 1987. The role of astrocytes in hepatic encephalopathy. Neurochem. Pathol. 6(1/2):13-33. http://dx.doi.org/10.1007/BF02833599. PMid:3306480.
https://doi.org/10.1007/BF02833599...
). A tumefação dessas células ocorre por acúmulo intracelular de ácido láctico e diminuição de pH intracelular (Staub et al. 1990Staub F., Baethmann A., Peters J., Weigt H. & Kempski O. 1990. Effects of lactacidosis on glial cell volume and viability. J. Cereb. Blood Flow Metab. 10(6):866-876. https://doi.org/10.1038/jcbfm.1990.143. PMID: 2211880.
https://doi.org/10.1038/jcbfm.1990.143...
).

Utilizou-se amostras congeladas de encéfalo de um bovino deste estudo para amplificação do DNA, com positividade para BoHV-1. Em tecido encefálico fixado em formol e incluído em parafina (FFIP) de 25 bovinos, apenas dois casos o DNA de BoHV-5 foi amplificado. Embora todos os casos fossem de infecção por BoHV, confirmados pela histopatologia, o tipo de vírus envolvido foi confirmado em 11,53% dos casos (3/26). Em casos naturais da doença, o DNA para BoHV-5 foi detectado em amostras FFIP, em 21,8% (Ely et al. 1996Ely R.W., D’Offay J.M., Ruefer A.H. & Cash C.Y. 1996. Bovine Herpesviral Encephalitis: A Retrospective Study on Archived Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Brain Tissue. J. Vet. Diagn. Invest. 8(4):487-492. http://dx.doi.org/10.1177/104063879600800416. PMid:8953538.
https://doi.org/10.1177/1040638796008004...
), 28% (Silva 2014Silva D.R. 2014. Detecção molecular de herpesvírus bovino tipo-1 e herpesvírus bovino tipo-5 em amostras de encéfalos bovinos incluídos em parafina. Tese de Mestrado. Universidade Federal de Goiás, Goiânia, GO. 48p.), 33,3% (Pedraza et al. 2010Pedraza F.J., Alessi A.C. & Barbosa-Stancioli E.F. 2010. Detection of bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by nested PCR in Colombian cattle. Revta Colomb. Cienc. Pecuarias 23:292-298.), 40% (Arruda et al. 2010Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201000...
), 66,6% (Gomes et al. 2002Gomes L.I., Rocha M.A., Costa E.A., Lobato Z.I.P., Mendes L.C.N., Borges A.S., Leite R.C. & Barbosa-Stancioli E.F. 2002. Detecção de herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) em bovinos do sudeste brasileiro. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 54(2):217-220. http://dx.doi.org/10.1590/S0102-09352002000200014.
https://doi.org/10.1590/S0102-0935200200...
), 75% (Ferrari et al. 2007Ferrari H.F., Luvizotto M.C.R., Rahal P. & Cardoso T.C. 2007. Detection of bovine Herpesvirus type 5 in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by PCR: a useful adjunct to conventional tissue-based diagnostic test of bovine encephalitis. J. Virol. Methods 146(1-2):335-340. http://dx.doi.org/10.1016/j.jviromet.2007.07.018. PMid:17804088.
https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2007....
) e 100% (Cunha et al., 2009Cunha P.H.J., Delfiol D.J.Z., Cagnini D.Q., Badial P.R., Oliveira Filho J.P., Olivo G., Amorim R.M. & Borges A.S. 2009. Identificação molecular do herpesvirus bovino tipo 5 em um bovino confinado associado com diagnóstico diferencial laboratorial de outras causas de polioencefalomalacia. Anais do VIII Congresso Brasileiro de Buiatria, Belo Horizonte, MG. Ciênc. Anim. Bras. (Supl. 1):93-98.) dos casos. Em tecidos frescos e congelados, outros autores obtiveram 15,78% (Gomes et al. 2002Gomes L.I., Rocha M.A., Costa E.A., Lobato Z.I.P., Mendes L.C.N., Borges A.S., Leite R.C. & Barbosa-Stancioli E.F. 2002. Detecção de herpesvírus bovino 5 (BoHV-5) em bovinos do sudeste brasileiro. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 54(2):217-220. http://dx.doi.org/10.1590/S0102-09352002000200014.
https://doi.org/10.1590/S0102-0935200200...
), 63,8% (Claus et al. 2007Claus M.P., Alfieri A.F., Médici K.C., Lunardi M. & Alfieri A.A. 2007. Bovine herpesvirus 5 detection by virus isolation in cell culture and multiplex-pcr in central nervous system from cattle with neurological disease in Brazilian herds. Braz. J. Microbiol. 38(3):485-490. http://dx.doi.org/10.1590/S1517-83822007000300019.
https://doi.org/10.1590/S1517-8382200700...
), 66,66% (Arruda et al. 2010Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201000...
) e 100% de extração (Ferrari et al. 2007Ferrari H.F., Luvizotto M.C.R., Rahal P. & Cardoso T.C. 2007. Detection of bovine Herpesvirus type 5 in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by PCR: a useful adjunct to conventional tissue-based diagnostic test of bovine encephalitis. J. Virol. Methods 146(1-2):335-340. http://dx.doi.org/10.1016/j.jviromet.2007.07.018. PMid:17804088.
https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2007....
, Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
https://doi.org/10.1590/S1516-8913200900...
, Massitel et al. 2016Massitel J.L., Wesgueber J., Oliveira R.A.M., Queiroz G.R., Fritzen J.T.T., Alfieri A.A. & Lisbôa J.A.N. 2016. Presença do genoma de BoHV-5 no líquido cefalorraquidiano de bovinos com meningoencefalite herpética. Arq. Bras. Med. Vet. Zootec. 68(2):548-552. http://dx.doi.org/10.1590/1678-4162-8087.
https://doi.org/10.1590/1678-4162-8087...
), utilizando PCR, PCR multiplex ou nested PCR. Experimentalmente o percentual aumentou, com 100% de extração em parafina (Cagnini et al. 2015Cagnini D.Q., Cunha P.H.J., Pantoja J.C.F., Badial P.R., Oliveira-Filho J.P., Araújo-Junior J.P., Alfieri A.A. & Borges A.S. 2015. Histopathological, immunohistochemical, and molecular study of BHV-5 infection in the central nervous system of experimentally infected calves. Pesq. Vet. Bras. 35(4):337-343. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2015000400004.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201500...
) e tecido fresco (Vogel et al. 2003Vogel F.S.F., Caron L., Flores E.F., Weiblen R., Winkelmann E.R., Mayer S.V. & Bastos R.G. 2003. Distribution of bovine herpesvirus type 5 DNA in the central nervous systems of latently, experimentally infected calves. J. Clin. Microbiol. 41(10):4512-4520. http://dx.doi.org/10.1128/JCM.41.10.4512-4520.2003. PMid:14532175.
https://doi.org/10.1128/JCM.41.10.4512-4...
, Isernhagen et al. 2011Isernhagen A.J., Cosenza M., Costa M.C.C., Médici K.C., Balarin M.R.S., Bracarense A.P.F.R.L., Alfieri A.A. & Lisbôa J.A.N. 2011. Asymtomatic encephalitis in calves experimentally infected with bovine herpesvirus-5. Can. Vet. J. 52(12):1312-1318. PMid:22654135.).

Bovinos com sinais neurológicos apresentaram mais lesões e maior porcentagem de áreas positivas para o BoHV em PCR e imuno-histoquímica (Cagnini et al. 2015Cagnini D.Q., Cunha P.H.J., Pantoja J.C.F., Badial P.R., Oliveira-Filho J.P., Araújo-Junior J.P., Alfieri A.A. & Borges A.S. 2015. Histopathological, immunohistochemical, and molecular study of BHV-5 infection in the central nervous system of experimentally infected calves. Pesq. Vet. Bras. 35(4):337-343. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2015000400004.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201500...
). A maior concentração viral ocorreu no telencéfalos e no diencéfalo e, menos frequente, no cerebelo e bulbo em bovinos experimentalmente infectados (Isernhagen et al. 2011Isernhagen A.J., Cosenza M., Costa M.C.C., Médici K.C., Balarin M.R.S., Bracarense A.P.F.R.L., Alfieri A.A. & Lisbôa J.A.N. 2011. Asymtomatic encephalitis in calves experimentally infected with bovine herpesvirus-5. Can. Vet. J. 52(12):1312-1318. PMid:22654135., Cagnini et al. 2015Cagnini D.Q., Cunha P.H.J., Pantoja J.C.F., Badial P.R., Oliveira-Filho J.P., Araújo-Junior J.P., Alfieri A.A. & Borges A.S. 2015. Histopathological, immunohistochemical, and molecular study of BHV-5 infection in the central nervous system of experimentally infected calves. Pesq. Vet. Bras. 35(4):337-343. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2015000400004.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201500...
), reforçando a distribuição viral e a importância da análise dos telencéfalos para o diagnóstico da doença.

Em alguns estudos de casos brasileiros da doença, o DNA de BoHV-1 não foi amplificado utilizando-se amostras FFIP (Arruda et al. 2010Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201000...
, Silva 2014Silva D.R. 2014. Detecção molecular de herpesvírus bovino tipo-1 e herpesvírus bovino tipo-5 em amostras de encéfalos bovinos incluídos em parafina. Tese de Mestrado. Universidade Federal de Goiás, Goiânia, GO. 48p.) e frescas de encéfalo (Claus et al. 2007Claus M.P., Alfieri A.F., Médici K.C., Lunardi M. & Alfieri A.A. 2007. Bovine herpesvirus 5 detection by virus isolation in cell culture and multiplex-pcr in central nervous system from cattle with neurological disease in Brazilian herds. Braz. J. Microbiol. 38(3):485-490. http://dx.doi.org/10.1590/S1517-83822007000300019.
https://doi.org/10.1590/S1517-8382200700...
, Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
https://doi.org/10.1590/S1516-8913200900...
). Embora haja indícios da circulação do BoHV-1 no Estado de Goiás por estudos sorológicos (Vieira et al. 2003Vieira S., Brito W.M.E.D., Souza W.J., Alfaia B.T. & Linhares C.L. 2003. Anticorpos para o herpesvírus bovino 1 (BHV-1) em bovinos do Estado de Goiás. Ciênc. Anim. Bras. 4:131-137., Barbosa et al. 2005Barbosa A.C.V.C., Brito W.M.E.D. & Alfaia B.T. 2005. Soroprevalência e fatores de risco para a infecção pelo herpesvírus bovino tipo 1 (BHV-1) no Estado de Goiás, Brasil. Ciência Rural 35(6):1368-1373. http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782005000600022.
https://doi.org/10.1590/S0103-8478200500...
, Affonso et al. 2010Affonso I.B., Amoril J.B., Alexandrino B., Buzinaro M.G., Medeiros A.S.R. & Samara S.I. 2010. Anticorpos contra o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) nas dez regiões de planejamento do estado de Goiás, Brasil. Ciênc. Anim. Bras. 11(4):892-898. http://dx.doi.org/10.5216/cab.v11i4.6318.
https://doi.org/10.5216/cab.v11i4.6318...
), os dados do presente trabalho sugerem que, pela primeira vez, no Centro-Oeste brasileiro, o BoHV-1 foi confirmado como causa de meningoencefalite viral. Entretanto, esse vírus já foi isolado em bovinos com meningoencefalite em outras regiões do Brasil, especialmente no Sul (Riet-Correa et al. 1989Riet-Correa F., Vidor T., Schild A.L. & Méndez M.C. 1989. Meningoencefalite e necrose do córtex cerebral em bovinos causadas por Herpes Vírus Bovino-1. Pesq. Vet. Bras. 9:13-16., Silva et al. 2007Silva M.S., Brum M.C.S., Weiblen R. & Flores E.F. 2007. Identificação e diferenciação de bovino tipos 1 e 5 isolados de amostras clínicas no Centro-Sul do Brasil, Argentina e Uruguai (1987-2006). Pesq. Vet. Bras. 27(10):403-408. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2007001000003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200700...
, Rissi et al. 2008Rissi D.R. , Pierezan F., Silva M.S., Flores E.F. & Barros C.S. L. 2008. Neurological disease in cattle in southern Brazil associated with Bovine herpesvirus infection. J. Vet. Diagn. Invest. 20(3):346-349. http://dx.doi.org/10.1177/104063870802000315. PMid:18460624., Rissi & Barros 2013Rissi D.R. & Barros C.S. 2013. Necrotizing meningoencephalitis in a cow. Vet. Pathol. 50(5):926-929. http://dx.doi.org/10.1177/0300985813478209. PMid:23446433.
https://doi.org/10.1177/0300985813478209...
) e em outros países (Ely et al. 1996Ely R.W., D’Offay J.M., Ruefer A.H. & Cash C.Y. 1996. Bovine Herpesviral Encephalitis: A Retrospective Study on Archived Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Brain Tissue. J. Vet. Diagn. Invest. 8(4):487-492. http://dx.doi.org/10.1177/104063879600800416. PMid:8953538.
https://doi.org/10.1177/1040638796008004...
, Roels et al. 2000Roels S., Charlier G., Vanopdenbosch E., Letellier C., Kerkhofs P., Meyer G., Schynts F. & Thiry E. 2000. Natural case of bovine herpesvirus 1 meningoencephalitis in an adult cow. Vet. Rec. 146(20):586-588. http://dx.doi.org/10.1136/vr.146.20.586. PMid:10839237.
https://doi.org/10.1136/vr.146.20.586...
, Penny et al. 2002Penny C.D., Sargison N.D., Howie F., Nettleton P.F. & Schock A. 2002. Upper respiratory disease and encephalitis in neonatal beef calves caused by bovine herpesvirus type 1. Vet. Rec. 151(3):89-91. http://dx.doi.org/10.1136/vr.151.3.89. PMid:12164227.
https://doi.org/10.1136/vr.151.3.89...
). Assim, ressalta-se a importância de diferenciar BoHV-5 e BoHV-1 por técnicas moleculares, como PCR, pois a doença clínica e as lesões causadas por esses agentes são muito semelhantes, senão idênticas (Lunardi et al. 2009Lunardi M., Claus M.P., Lisbôa J.A.N., Amude A.M., Headley S.A., Alfieri A.F. & Alfieri A.A. 2009. Neurological and epidemiological aspects of BoHV-5 meningoencephalitis outbreak. Braz. Arch. Biol. Technol. 52(spec.):77-85. http://dx.doi.org/10.1590/S1516-89132009000700011.
https://doi.org/10.1590/S1516-8913200900...
).

O tempo de permanência dos tecidos no formol 10% variou de acordo com a procedência da amostra, permanecendo entre dias até meses no fixador. Provavelmente, esse foi o principal fator responsável pela baixa porcentagem de casos positivos no PCR nas amostras emblocadas. Em outro estudo brasileiro, detectou-se 40% de positividade em amostras emblocadas sem tempo variável de permanência do tecido em formol 10%, variando de dias até pouco mais de um ano, sendo afirmado que quanto maior o tempo do tecido no fixador, menor é a chance da detecção viral, principalmente por períodos maiores de 40 dias (Arruda et al. 2010Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201000...
). O percentual aumenta (75%) na detecção de DNA viral por PCR em amostras que permaneceram apenas um dia (Ferrari et al. 2007Ferrari H.F., Luvizotto M.C.R., Rahal P. & Cardoso T.C. 2007. Detection of bovine Herpesvirus type 5 in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by PCR: a useful adjunct to conventional tissue-based diagnostic test of bovine encephalitis. J. Virol. Methods 146(1-2):335-340. http://dx.doi.org/10.1016/j.jviromet.2007.07.018. PMid:17804088.
https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2007....
), o que reforça que o tempo de fixação influencia acentuadamente na amplificação viral. Esses resultados podem ser explicados pela alteração da estrutura do DNA viral, desnaturação e modificação do mesmo em tecidos fixados pelo formaldeído (Karlsen et al. 1994Karlsen F., Kalantari M., Chitemerere M., Johansson B. & Hagmar B. 1994. Modifications of human and viral deoxyribonucleic acid by formaldehyde fixation. Lab. Invest. 71(4):604-611. PMid:7967515.). Resultados negativos em amostras emblocadas em parafina podem ser explicados também pela falha na extração de DNA, ausência ou baixa quantidade de DNA viral nas amostras (Arruda et al. 2010Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201000...
), o que provavelmente não aconteceu no presente estudo, visto que as técnicas moleculares utilizadas foram as mesmas utilizadas previamente (Arruda et al. 2010Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
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) e as lesões histológicas observadas são características de infecção pelo BoHV, incluindo corpúsculos de inclusão basofílicos intranucleares. Arruda et al. (2010)Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201000...
observaram um decréscimo de 50% na positividade para BoHV-5 por PCR em amostras incluídas em parafina em comparação as mesmas amostras testadas frescas e congeladas. A origem e qualidade do material (fresco ou bloco de parafina), distribuição do vírus na amostra, idade e raça dos animais, estágio da doença, severidade das lesões e o tempo até ser feita a necropsia podem comprometer e explicar a diferença entre a variação dos resultados de detecção viral por PCR (Ely et al. 1996Ely R.W., D’Offay J.M., Ruefer A.H. & Cash C.Y. 1996. Bovine Herpesviral Encephalitis: A Retrospective Study on Archived Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Brain Tissue. J. Vet. Diagn. Invest. 8(4):487-492. http://dx.doi.org/10.1177/104063879600800416. PMid:8953538.
https://doi.org/10.1177/1040638796008004...
, Ferrari et al. 2007Ferrari H.F., Luvizotto M.C.R., Rahal P. & Cardoso T.C. 2007. Detection of bovine Herpesvirus type 5 in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by PCR: a useful adjunct to conventional tissue-based diagnostic test of bovine encephalitis. J. Virol. Methods 146(1-2):335-340. http://dx.doi.org/10.1016/j.jviromet.2007.07.018. PMid:17804088.
https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2007....
, Cagnini et al. 2015Cagnini D.Q., Cunha P.H.J., Pantoja J.C.F., Badial P.R., Oliveira-Filho J.P., Araújo-Junior J.P., Alfieri A.A. & Borges A.S. 2015. Histopathological, immunohistochemical, and molecular study of BHV-5 infection in the central nervous system of experimentally infected calves. Pesq. Vet. Bras. 35(4):337-343. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2015000400004.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201500...
).

Com base nos resultados obtidos nesse estudo e corroborando com outro autores (Ferrari et al. 2007Ferrari H.F., Luvizotto M.C.R., Rahal P. & Cardoso T.C. 2007. Detection of bovine Herpesvirus type 5 in formalin-fixed, paraffin-embedded bovine brain by PCR: a useful adjunct to conventional tissue-based diagnostic test of bovine encephalitis. J. Virol. Methods 146(1-2):335-340. http://dx.doi.org/10.1016/j.jviromet.2007.07.018. PMid:17804088.
https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2007....
), a utilização de amostras frescas para PCR apresenta resultados mais satisfatórios para extração de DNA em comparação com amostras FFIP. Mesmo com baixas porcentagens de extração viral, as amostras emblocadas em parafina permitem estudos retrospectivos de casos com doença neurológica, semelhante à metodologia aplicada nesse trabalho (Ely et al. 1996Ely R.W., D’Offay J.M., Ruefer A.H. & Cash C.Y. 1996. Bovine Herpesviral Encephalitis: A Retrospective Study on Archived Formalin-Fixed, Paraffin-Embedded Brain Tissue. J. Vet. Diagn. Invest. 8(4):487-492. http://dx.doi.org/10.1177/104063879600800416. PMid:8953538.
https://doi.org/10.1177/1040638796008004...
, Claus et al. 2005Claus M.P., Alfieri A.F., Folgueras-Flatschart A.V., Wosiacki S.R., Medici K.C. & Alfieri A.A. 2005. Rapid detection and differentiation of bovine herpesvírus 1 and 5 glycoprotein C gene in clinical specimens by multiplex-PCR. J. Virol. Methods. 128(1-2):183-188. http://dx.doi.org/10.1016/j.jviromet.2005.05.001. PMid:15939490.
https://doi.org/10.1016/j.jviromet.2005....
, Arruda et al. 2010Arruda L.P., Nakazato L., Dutra V., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A., Cruz R.A.S., Pescador C.A. & Colodel E.M. 2010. Detecção molecular de herpesvírus bovino 1 e 5 em amostras de encéfalo conservadas em formol e emblocadas em parafina provenientes de bovinos com doença neurológica. Pesq. Vet. Bras. 30(8):646-650. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2010000800007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X201000...
, Silva 2014Silva D.R. 2014. Detecção molecular de herpesvírus bovino tipo-1 e herpesvírus bovino tipo-5 em amostras de encéfalos bovinos incluídos em parafina. Tese de Mestrado. Universidade Federal de Goiás, Goiânia, GO. 48p.).

Quando se encontra resultados negativos na PCR e no isolamento viral, deve-se diferenciar a meningoencefalite herpética de outras afecções que cursam com quadro clínico neurológico, principalmente a polioencefalomalacia nutricional e a raiva (Sanches et al. 2000Sanches A.W.D., Langohr I.M., Stigger A.L. & Barros C.S. L. 2000. Doenças do sistema nervoso central em bovinos no Sul do Brasil. Pesq. Vet. Bras. 20(3):113-118. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2000000300005.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200000...
, Claus et al. 2007Claus M.P., Alfieri A.F., Médici K.C., Lunardi M. & Alfieri A.A. 2007. Bovine herpesvirus 5 detection by virus isolation in cell culture and multiplex-pcr in central nervous system from cattle with neurological disease in Brazilian herds. Braz. J. Microbiol. 38(3):485-490. http://dx.doi.org/10.1590/S1517-83822007000300019.
https://doi.org/10.1590/S1517-8382200700...
, Sant’Ana et al. 2009Sant’Ana F.J.F. , Rissi D.R. , Lucena R.B., Lemos R.A.A., Nogueira A.P.A. & Barros C.S. L. 2009. Polioencefalomalacia em bovinos: epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões no encéfalo. Pesq. Vet. Bras. 29(7):487-497. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2009000700002.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200900...
). No presente estudo, todos os casos foram negativos para raiva na imunofluorescência direita e, na microscopia, todos apresentaram corpúsculos de inclusão intranucleares em neurônios ou astrócitos, o que é importante na caracterização etiológica da doença e na diferenciação da polioencefalomalacia nutricional (Riet-Correa et al. 1989Riet-Correa F., Vidor T., Schild A.L. & Méndez M.C. 1989. Meningoencefalite e necrose do córtex cerebral em bovinos causadas por Herpes Vírus Bovino-1. Pesq. Vet. Bras. 9:13-16., Salvador et al. 1998Salvador S.W.C., Lemos R.A.A., Riet-Correa F., Roehe P.M. & Osório A.L.A.R. 1998. Meningoencefalite em bovinos causada por herpesvírus bovino-5 no Mato Grosso do Sul e São Paulo. Pesq. Vet. Bras. 18(2):76-83. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X1998000200007.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X199800...
, Elias et al. 2004Elias F., Schild A.L. & Riet-Correa F. 2004. Meningoencefalite e encefalomalacia por herpesvírus bovino-5: distribuição das lesões no sistema nervoso central de bovinos naturalmente infectados. Pesq. Vet. Bras. 24(3):123-131. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2004000300003.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200400...
, Rissi et al. 2006Rissi D.R. , Oliveira F.N., Rech R.R., Pierezan F., Lemos R.A.A. & Barros C.S. L. 2006. Epidemiologia, sinais clínicos e distribuição das lesões encefálicas em bovinos afetados por meningoencefalite por herpesvírus bovino-5. Pesq. Vet. Bras. 26(2):123-132. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2006000200010.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200600...
). Há relatos na literatura de infecção concomitante do BoHV-5 com o vírus da raiva, porém sem a confirmação exata se o BoHV-5 foi responsável pelas lesões detectadas ou se o BoHV-5 encontrava-se apenas em latência (Spilki et al. 2003Spilki F.R., Franco A.C., Teixeira M.B., Esteves P.A., Schaefer R., Schmidt E., Lemos R.A. & Roehe P.M. 2003. Bovine herpesvirus type 5 (BHV-5) in a calf with rabies. Pesq. Vet. Bras. 23(1):1-4. http://dx.doi.org/10.1590/S0100-736X2003000100001.
https://doi.org/10.1590/S0100-736X200300...
, Silva 2014Silva D.R. 2014. Detecção molecular de herpesvírus bovino tipo-1 e herpesvírus bovino tipo-5 em amostras de encéfalos bovinos incluídos em parafina. Tese de Mestrado. Universidade Federal de Goiás, Goiânia, GO. 48p.).

Agradecimentos

Os autores agradecem ao LABVET/AGRODEFESA pelo fornecimento de muitas amostras utilizadas no presente estudo, bem como a Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) pelas bolsas de pós-graduação de dois autores (GRB, LFS) e ao Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) pelo apoio financeiro ao projeto (Processo 471837/2013-0) e pela bolsa de pós-graduação de um autor (JPT).

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Datas de Publicação

  • Publicação nesta coleção
    Maio 2018

Histórico

  • Recebido
    23 Mar 2017
  • Aceito
    15 Abr 2017
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