Pesquisa Veterinária Brasileira, Volume: 36, Issue: 12, Published: 2016
  • Epidemiology of rabies in large animals of Parana, Brazil, from 1977 to 2012 Animais De Produção

    Dognani, Romerson; Pierre, Elzira J.; Silva, Maria do Carmo P.; Patrício, Maria A.C.; Costa, Silvano C. da; Prado, Jair R. do; Lisbôa, Júlio A.N.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: Realizou-se estudo epidemiológico descritivo da raiva dos herbívoros no estado do Paraná entre os anos de 1977 e 2012. Os casos confirmados de raiva e o total de amostras de encéfalo encaminhadas para o diagnóstico foram distribuídos por espécie, por ano, por meses, por mesorregião geográfica e por municípios, aplicando-se o teste de Qui-quadrado para verificar se havia associação com esses fatores. Modelo probabilístico foi ajustado à série histórica para verificação de padrões cíclico ou sazonal. Comprovou-se que a raiva é uma doença endêmica no PR, com ocorrência variável entre os anos, sem padrão sazonal e com ciclicidade aparente a cada 18 anos, acometendo, sobretudo, bovinos (86,9%) e equídeos (11,3%). Verificou-se grande difusão no estado (47,6% dos municípios), e a maior expansão geográfica aconteceu na última década. As áreas de ocorrência maior foram as mesorregiões Centro Oriental e de Curitiba, seguidas por Norte Pioneiro e Oeste. O número de casos de raiva por município se correlacionou, ainda que fracamente, com o número de abrigos de Desmodus rotundus (r=0,469; p<0,0001). Sugere-se que a imunização anual de bovinos e equídeos passe a ser adotada nas áreas de maior ocorrência (mesorregiões Centro Oriental e de Curitiba) e encorajada nas de ocorrência intermediária (mesorregiões Norte Pioneiro e Oeste).

    Abstract in English:

    ABSTRACT: A descriptive epidemiological survey of rabies in herbivorous reared in the state of Parana, Brazil, was carried out from 1977 to 2012. The positive cases and the total number of brain samples processed for diagnostic purposes were distributed according to species, year, month, geographical region and municipality. Chi-square test was used to verify if rabies was associated to these factors. Probabilistic model was applied to historical series in order to verify cyclic and seasonal patterns. In Parana, rabies is an endemic disease with variable yearly occurrence, without seasonal pattern and with a possible cyclic pattern every 18 years. Cattle (86.9%) and equides (11.3%) were mainly affected. Rabies was registered in 47.6% of all municipalities, indicating a great spread of this disease in Parana, mainly during the last decade. Middlewest and Curitiba regions, followed by Pioneer North and West regions, were the areas of most occurrence. The number of cases per municipality was weakly correlated with the number of shelters for Desmodus rotundus (r=0.469; p<0.0001). Therefore, we suggest that annual immunization of cattle and equides should be applied in the high occurrence areas (Middlewest and Curitiba regions) and encouraged in intermediate occurrence areas (Pioneer North and West regions).
  • Effects of polysaccharide from Ophiopogon japonicus on immune response to Newcastle disease vaccine in chicken Livestock Diseases

    Song, Xu; Cao, Mei; Yin, Zhongqiong; Jia, Renyong; Zou, Yuanfeng; Li, Lixia; Yue, Guizhou; Liang, Xiaoxia; Yin, Lizi; He, Changliang

    Abstract in English:

    ABSTRACT: In order to investigate the immune enhancement effects of Ophiopogon japonicus polysaccharide Ophiopogon japonicus (OJPS) on Newcastle disease (ND) live vaccine, chickens vaccinated against ND live vaccine was orally administered with the OJPS at high, medium and low concentrations respectively. In negative control group, chickens were given orally equal volume of physiological saline. On day 14, 21 and 28, the serum antibody titer, erythrocyte-C3b receptor rosette rate (E-C3bRR), erythrocyte-C3b immune complex rosette rate (E-ICRR) and peripheral lymphocyte proliferation were measured. The results showed that at most time points, the antibody titer, peripheral lymphocyte proliferation, E-C3bRR and elimination rate of immune complex of three OJPS administrating groups were significantly higher (P<0.05) than those in negative control group. It indicated that OJPS could significantly improve the immune efficacy of Newcastle disease live vaccine, Ophiopogon japonicus polysaccharide possessed synergistical immunoenhancement.
  • Comparison phenotypic and genotypic identification of Staphylococcus species isolated from bovine mastitis Livestock Diseases

    Guimarães, Felipe Freitas; Joaquim, Samea Fernandes; Manzi, Marcela Pinho; Silva, Rodrigo Costa da; Bruder-Nascimento, Ariane Cristina Mendes de Oliveira; Costa, Elizabeth Oliveira; Langoni, Hélio

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: Além de Staphylococcus aureus atualmente outros estafilococos coagulase positiva (SCP) e estafilococos coagulase-negativos (SCN), anteriormente considerados de menor relevância, são reconhecidos como importantes patógenos para humanos e animais. O envolvimento desses micro-organismos na etiologia da mastite bovina e a possibilidade da sua transmissão através do leite aos humanos justifica a utilização de métodos confiáveis para a identificação das espécies mais frequentes. O objetivo deste estudo foi comparar as técnicas fenotípicas com o método genotípico realizada por sequenciamento do gene rpoB na identificação de espécies do gênero Staphylococcus spp. isolados de mastite bovina. Um total de 300 estafilococos isolados de casos de mastite bovina em diferentes rebanhos leiteiros brasileiros foram estudados por técnicas fenotípicas e genotípicas, respectivamente: 150 linhagens de SCP e 150 linhagens de SCN. Foram identificados um total de 18 espécies de SCN e 4 espécies SCP. Entre os SCN as seguintes espécies identificadas: 48 (32%) Staphylococcus warneri, 22 (15%) S. epidermidis, 20 (13%) S. hyicus, 10 (7%) S. xylosus, 7 (5%) S. haemolyticus, 6 (4%) S. simulans, 6 (4%) S. schleiferi subsp schleiferi, 6 (4%) S. hominis, 5 (3%) S. pasteuri, 4 (2,7%) S. cohnii, 3 (2%) S. saprophyticus subsp. saprophyticus, 3 (2%) S. chromogenes, 3 (2%) S. sciuri, 2 (1%) S. saccharolyticus, 2 (1%) S. lugdunensi, 1 (0,7%) S. auricularis, 1 (70 %) S. saprophyticus subsp. bovis, 1 (0,7%) S. capitis. E entre as 150 SCP foram identificados, 105 (70%) S. aureus, 21 (14%), S. hyicus, 19 (13%) S. intermedius e 5 (3%) S. schleiferi subsp coagulans. Considerando-se os 150 SCN isolados, as identificações realizadas por testes fenotípicos e genotípicos apresentaram 96,7% de concordância, coeficiente de concordância kappa = 0,933, SE (erro padrão) de kappa = 0,021 (95% intervalo de confiança: 0,893-0,974), coeficiente de correlação de Pearson (r) = 0,9977, (intervalo de confiança de 95%: 0,9938 a 0,9992) e em relação a 150 SCP isolados foi observado uma concordância de 98,7%, kappa = 0,960, sE de kappa = 0,016, (95% de intervalo de confiança: 0,929 a 0,992) coeficiente de correlação de Pearson (r) = 0,9994 (95% intervalo de confiança: 0,9681-1,0000). A correlação entre os métodos de identificação pode ser considerada como excelente. Esses resultados demonstraram que de acordo com os recursos disponíveis no laboratório, poderia ser utilizada qualquer uma das metodologias.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: In addition to Staphylococcus aureus nowadays other coagulase-positive staphylococci (CoPS) and coagulase-negative staphylococci (CoNS), earlier considered of minor importance, are now accepted as relevant pathogens for humans and animals. The involvement of these microorganisms in bovine mastitis etiology and the possibility their transmission through milk to humans justify the requirement of developing reliable methods for identification of the most frequent species among them. The purpose of this study was to compare the phenotypic techniques with the genotypic method carried out by sequencing of the rpoB gene in identification of several species of the genus Staphylococcus isolated from bovine mastitis. A total of 300 staphylococci isolates of bovine mastitis cases from several Brazilian dairy herds were studied by phenotypic and genotypic techniques, respectively: 150 CoPS and 150 CoNS strains. A total of 18 CoNS different species and 4 CoPS species were identified. Among the CoNS the following species were recognized: 48 (32%) Staphylococcus warneri, 22(15%) S. epidermidis, 20(13%) S. hyicus, 10(7%) S. xylosus, 7(5%) S. haemolyticus, 6(4%) S. simulans, 6(4%) S. schleiferi subsp schleiferi, 6(4%) S. hominis, 5(3%) S. pasteuri, 4(2.7%) S. cohnii, 3(2%) S. saprophyticus subsp. saprophyticus 3(2%) S. chromogenes 3(2%) S. sciuri, 2(1%) S. saccharolyticus, 2(1%) S. lugdunensi, 1(0,7%) S. auricularis, 1(70%) S. saprophyticus subsp. bovis, 1(0.7%) S. capitis. And among the 150 CoPS were identified respectively: 105 (70%) S. aureus, 21(14%), S. hyicus, 19(13%) S. intermedius e 5(3%) S. schleiferi subsp coagulans. Considering the 150 CoNS isolates, the identifications performed by phenotypic and genotypic tests presented 96.7% of concordance, kappa coefficient of agreement = 0.933, SE (standard error) of kappa=0.021 (95% confidence interval: 0.893 to 0.974), Pearson’s correlation coefficient (r) = 0.9977, (confidence interval 95%: 0.9938 a 0.9992) and in relation to 150 CPS isolates it was detected an agreement of 98.7%, kappa = 0.960, SE of kappa = 0.016, (95% confidence interval: 0.929 to 0.992) Pearson’s correlation coefficient (r) = 0.9994 (95% confidence interval: 0.9681 to 1.0000). The verified agreement strength between the identification methods can be considered as excellent. These results assure that according to laboratory resources any of them will be suitable to perform the staphylococci identification.
  • Frequency, serotyping and antimicrobial resistance pattern of Salmonella from feces and lymph nodes of pigs Livestock Diseases

    Guerra Filho, João B.P.; Yamatogi, Ricardo S.; Possebon, Fábio S.; Fernandes, Sueli A.; Tiba-Casas, Monique R.; Lara, Gustavo H.B.; Ribeiro, Márcio G.; Pinto, José P.A.N.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: Nas últimas décadas, o aumento de cepas circulante de Salmonella concomitantemente a resistência microbiana tem despertado a preocupação dos órgãos de Saúde Pública. Deste modo, o objetivo do presente trabalho foi pesquisar a presença de Salmonella a partir de fezes (n=50), linfonodos mediastinos (n=50), mesentéricos (n=50) e submandibular (n=50) oriundos de um abatedouro suíno. As cepas isoladas foram sorotipadas e testadas quanto a resistência antimicrobiana. A presença de Salmonella isolada foram em 10% (20/200) do total de amostras, sendo 20% dos linfonodos submandibulares, 18% dos linfonodos mesentéricos e 2% das fezes. Os sorotipos encontrados foram S. Typhimurium (55%), S. enterica subsp. enterica 4,5,12: i: - (35%), S. Brandenburg (5%) e S. Derby (5%). Todas a cepas apresentaram resistência a pelo menos um antimicrobiano testado, sendo 90% resistente pelo menos quatro antimicrobianos. Destes, 15% foram classificadas como multidrogas resistentes. Os antimicrobianos mais resistentes entre os sorovares isolados foram a ciprofloxacina, tetraciclina e o ácido nalidixico. A presença de cepas de Salmonella resistente a antimicrobianos na espécie suína tem gerado um grande impacto epidemiológico entre homem e animal, reforçando cada vez mais a necessidade do uso adequado de drogas principalmente relacionado com o tema “One Health”.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: Salmonellosis is a foodborne disease caused by bacteria of the genus Salmonella, being pigs and pork-products potentially important for its occurrence. In recent decades, some serovars of Salmonella have shown increase of resistance to conventional antimicrobials used in human and animal therapy, with serious risks for public health. The aim of this study was to evaluate feces (n=50), mediastinal (n=50), mesenteric (n=50) and mandibular (n=50) lymph nodes obtained from slaughter houses for Salmonella spp. Positive samples were serotyped and subjected to an in vitro antimicrobial susceptibility test, including the extended-spectrum beta-lactamase (ESBL) production. Salmonella species were identified in 10% (20/200) of total samples. From these, 20% (10/50) were identified in the submandibular lymph nodes, 18% (9/50) in the mesenteric lymph nodes, 2% (1/50) in feces and 0% (0/50) in the mediastinal lymph nodes. The serotypes found were Salonella Typhimurium (55%), S. enterica subsp. enterica 4,5,12: i: - (35%), S. Brandenburg and S. Derby with 5% (5% each). All strains showed resistance to at least one antimicrobial; 90% were resistant to four or more antimicrobials, and 15% were multidrug-resistant. Resistance to ciprofloxacin, tetracycline and nalidixic acid was particularly prevalent amongst the tested serovars. Here, we highlighted the impact of pigs in the epidemiological chain of salmonellosis in domestic animals and humans, as well as the high antimicrobial resistance rates of Salmonella strains, reinforcing the necessity for responsible use of antimicrobials for animals as an emergent One Health issue, and to keep these drugs for human therapy approaches.
  • A double-antibody sandwich ELISA based on the porcine circovirus type 2 (PCV2) propagated in cell culture for antibody detection Livestock Diseases

    Cruz, Taís F.; Kanashiro, Tatiana M.; Castro, Alessandra M.M.G. de; Baldin, Cintia M.; Richtzenhain, Leonardo J.; Araujo Jr, João P.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: Há poucos relatos na literatura de métodos de ELISA (Enzyme-linked immunosorbent assay), para a detecção de anticorpos contra o circovírus suíno tipo 2 (PCV2), baseados em antígenos produzidos em cultivo celular, bem como uma escassez de trabalhos descrevendo técnicas de purificação viral para os membros da família Circoviridae. Isso ocorre, pois os circovírus são de difícil isolamento, não causam efeito citopático e produzem um baixo título viral em cultivo celular. Assim, para superar essas dificuldades encontradas no cultivo do PCV2, este estudo objetivou desenvolver um sandwich ELISA com duplo anticorpo, baseado no antígeno de PCV2 produzido em cultivo celular, para a quantificação de anticorpos anti-PCV2. Um colchão de sacarose descontínuo a 20% e 50% foi utilizado para a purificação viral, o qual possibilitou a separação das proteínas oriundas do cultivo celular no colchão de sacarose a 20% e uma maior concentração viral no colchão de sacarose a 50%. Com a ultracentrifugação isopícnica, o PCV2 ficou mais concentrado na banda com valores de densidade de 1,330 a 1,395g/cm3. A purificação viral foi avaliada pelas técnicas de SDS-PAGE, ELISA indireto e microscopia eletrônica. Assim, o método de ELISA padronizado revelou uma forte correlação linear (r = 0,826, p <0,001) quando comparado com um kit de ELISA comercial. O ensaio demonstrou baixa variabilidade (coeficientes de variação inter-teste de 4,24% e intra-teste de 1,80%) e uma excelente especificidade analítica conferida pelo anticorpo de captura produzido em coelho. Portanto, o método de ELISA demonstrou ser rápido, específico e conveniente para a detecção de anticorpos contra o PCV2 em estudos de infecção natural e experimental, além da monitoria da resposta à vacinação contra o PCV2 em granjas comerciais.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: Few studies have described enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs) for the detection of antibodies against porcine circovirus type 2 (PCV2) based on antigens produced in cell culture. Furthermore, few articles have described viral purification techniques for members of the family Circoviridae. This occurs because circoviruses are difficult to isolate, noncytopathogenic, and produce low viral titres in cell culture. Thus, for overcoming these difficulties in the cultivation of PCV2, this study aimed to develop a double-antibody sandwich ELISA based on the cell culture antigen PCV2b for the quantification of anti-PCV2 antibodies. A 20% and 50% discontinuous sucrose cushion was used for viral purification, which enabled the separation of cell culture proteins in the 20% sucrose cushion and a greater viral concentration in the 50% sucrose cushion. Following isopycnic centrifugation, PCV2 was concentrated in the band with density values from 1.330 to 1.395g/cm3. Viral purification was assessed using SDS-PAGE, indirect ELISA and electron microscopy. The standardised ELISA revealed a strong linear correlation (r= 0.826, p<0.001) when compared with a commercial ELISA kit. The assay exhibited low variability (inter-assay coefficient of variation of 4.24% and intra-assay of 1.80%) and excellent analytical specificity conferred by the capture antibody produced in rabbit. Thus, this ELISA is a rapid, specific and convenient method for the detection of antibodies against PCV2 in studies of experimental and natural infection, and in monitoring the response to vaccination on commercial farms.
  • Prevalence and in vitro susceptibility of methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius (MRSP) from skin and nostrils of dogs with superficial pyoderma Small Animal Diseases

    Botoni, Larissa S.; Scherer, Carolina B.; Silva, Rodrigo O.; Coura, Fernanda M.; Heinemann, Marcos B.; Paes-Leme, Fabiola O.; Costa-Val, Adriane P.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: Para acessar a prevalência de MRSP na pele e nas narinas de cães com piodermite superficial, determinar a suscetibilidade in vitro, e correlacionar estes dados com a presença do gene mecA, foram selecionados 43 cães. Amostras de lesões de pele e narinas foram coletadas, cultivadas, e analisadas fenotipica e genotipicamente. Em 62 amostras (91%), os microrganismos foram classificados como Staphylococcus pseudintermedius. A taxa de resistência a antibióticos variou entre 7% (amicacina; 4/62) e 77% (sulfamethoxazol + trimetoprim; 48/62). Resistência a oxacilina foi observada em 34% das amostras (21/62). Vinte e cinco amostras (37%), eram cepas portadoras do gene mecA. Correlação significativa (P<0,01) foi observada entre a presença do gene mecA e a resistência à oxacilina. Considerando os cães, 17 eram portadores de cepas com gene mecA e 8(47%) delas carreavam este gene nas amostras de lesão de pele e nas narinas. Correlação significativa (P>0,01) foi observada entre a presença do gene mecA nas lesões de pele e nas narinas. Sendo assim, resistência à oxacilina in vitro pode ser aferida com segurança para indicar a presença do gene mecA em amostras de MRSP, e as narinas podem constituir em um reservatório dos microorganismos em cães.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: In order to assess the prevalence of Methicillin-resistant Staphylococcus pseudintermedius from skin and nostrils of dogs with pyoderma, to determine its in vitro susceptibility, and to correlate these data with the presence of the mecA gene, 43 dogs were selected. Samples were collected from secretion of their skin lesions and right nostril, cultured, and analyzed for phenotypic and genotypic characteristics of the bacteria studied. In 62 samples (91%) the microorganism was classified as S. pseudintermedius. The rate of resistance against antibiotics ranged from 7% (amikacin; 4/62) to 77% (sulfamethoxazole + trimethoprim; 48/62). Resistance against oxacillin was found in 34% of the samples (21/62). Twenty-five samples (37%) were strains that carried the mecA gene. A significant correlation (P<0.01) was found between presence of the mecA gene and oxacillin resistance. Seventeen dogs were mecA gene carriers, and 8 (47%) of them had the gene in the skin lesions and nostril. A significant correlation (P<0.01) was also observed between the presence of mecA gene in the skin lesions and nostrils. Oxacillin resistance in vitro can be safely used to indicate the presence of mecA gene in MRSP samples. The nostrils can be a reservoir of MRSP in dogs.
  • Viral type characterization and clinical aspects of canine parvovirus in naturally infected dogs in São Paulo State, Brazil Small Animal Diseases

    Monteiro, Kyssia; Allendorf, Susan D.; Vicente, Acácia F.; Appolinário, Camila M.; Peres, Marina G.; Cortez, Adriana; Heinemann, Marcos B.; Megid, Jane

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: Desde o primeiro isolamento do parvovirus canino tipo 2 (CPV-2) no final dos anos 70 novos subtipos virais como CPV-2a e CPV-2b surgiram e foram se tornando prevalentes na população canina; posteriormente um terceiro subtipo foi identificado, CPV- 2-C. O principal objetivo deste estudo foi detectar e caracterizar os subtipos de parvovírus canino atualmente presente na região Centro-Oeste do Estado de São Paulo-Brasil. Amostras de fezes foram coletadas de cães vacinados e não vacinados, atendidos no Serviço de Enfermidades Infecciosas dos Animais, Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, com suspeita clínica parvovirose . Todas as amostras (n = 30) foram submetidas teste de hemaglutinação para parvovirus canino e as positivas (n = 20) submetidas a PCR; os produtos amplificados foram subsequentemente sequenciados para caracterização do subtipo viral. Os resultados foram associados com a idade, os valores hematológicos, os títulos de hemaglutinação viral nas fezes, estado de vacinação e sobrevivência. A leucopenia foi encontrada em todos os animais; Obito foi observado em 30% dos cães não vacinados e 42% dos vacinados. Em um total de 20 amostras positivas sequenciadas, 18 foram classificadas como CPV-2b, uma como CPV-2c, e uma como CPV-2a. CPV 2a e CPV2c foram detectados em filhotes não vacinados. Em comparação com a amostra de referência foi evidenciada uma mudança de aminoácido na posição 426 nas amostras virais circulantes. Os resultados do estudo demonstram a predominância de CPV-2b e a presença de CPV-2a e CPV-2c em cães naturalmente infectados, vacinados e não vacinados na região de São Paulo.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: Since the first isolation of canine parvovirus type 2 (CPV-2) in late 70’s new virus types as CPV-2a and CPV-2b have been emerged and becoming prevalent in natural canine population and more recently, a third subtype was identified , CPV-2c. The main purpose of this study was to detect and characterize canine parvovirus currently present in Central-West region of São Paulo state, in Brazil. Fecal samples were collected of vaccinated and non-vaccinated dogs, clinically suspected of having CPV infection brought to the Infectious Diseases Service, Veterinary Hospital of FMVZ-UNESP. All samples (n=30) were screening for canine parvovirus through hemagglutination test and those resulting as positive (n=20) were submitted to PCR and the products were subsequently sequenced for subtype characterization. Results were tested for association with age, hematological values, viral hemagglutination titers in the feces, vaccination status and survival. Leukopenia was found in all animals, death occurred in 30% of unvaccinated dogs and in 42% of vaccinated ones. In a total of 20 positive sequenced samples, 18 were classified as CPV-2b, one as CPV-2c, and one as CPV-2a, being CPV2a and CPV2c detected in unvaccinated puppies. Compared to the reference samples amino acid change at position 426 in those circling virus was identified. The study results demonstrate the predominance of CPV-2b and the presence of CPV-2a and CPV-2c in naturally infected, vaccinated and unvaccinated dogs in in São Paulo region.
  • Evaluation of serum biochemical parameters in Amazon turtles (Podocnemis expansa) hatchlings kept in captivity Animais Selvagens

    Fonseca, Leandro A.; Maia, Natasha L.; Girardi, Fabrícia M.; Carvalho Filho, Wilson P.; Pimentel, Filippe G.; Braga, Fábio R.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: Amostras de sangue de Tartaruga-da-Amazônia mantidas em cativeiro foram analisadas com o propósito de avaliar os constituintes bioquímicos séricos e de relacionar ao que já foi relatado por outros pesquisadores, além de gerar mais informações, tendo em vista a escassez de dados envolvendo a espécie estudada. Foram utilizados 35 animais, com idade entre 3 e 7 meses, os quais foram contidos fisicamente para coleta de sangue em tubo sem anticoagulante. As análises bioquímicas foram processadas através de métodos cinéticos (enzimas) e colorimétricos (demais análises), e os valores médios obtidos foram: cálcio 7,0±1,9mg/dL, fóforo 2,8±1,2mg/dL, ácido úrico 1,8±0,8mg/dL, uréia 10,4±3,9mg/dL, alanina aminotransferase (AST) 75,5±33,6 UI/L, proteína total 1,9±0,8g/dL, triglicerídeos 22,9±9,8mg/dL e colesterol 45,3±19,7mg/dL. Observou-se que os valores dos componentes séricos avaliados assemelham-se aos que foram encontrados por outros pesquisadores em estudos bioquímicos séricos com Podocnemis expansa e outras tartarugas de água doce. Importante ressaltar que, no decorrer deste estudo observou-se a escassez de dados publicados sobre parâmetros sanguíneos de tartarugas do gênero Podocnemis, especialmente a espécie Podocnemis expansa, o que corroborou a alta relevância do desenvolvimento de mais pesquisas que envolvam a questão.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: Blood samples from the giant river turtle kept in captivity were analyzed in order to evaluate the serum biochemical constituents and relate to what has been reported by other researchers, beyond the purpose of generating further information, given the paucity of data involving this species. The turtle eggs were from the state of Tocantins and were obtained from direct sampling in their natural habitat. After being collected the eggs were kept in incubators and then the puppies were kept in tanks. Samples were collected after chemical restraint of these animals by intracardiac puncture or cardiocentesis. The samples were centrifuged to obtain serum. Biochemical analyzes were processed by kinetic and colorimetric methods, as described by the manufacturer, and the values obtained were: calcium 7.0±1.9mg/dL, phosphorus 2.8±1.2mg/dL, uric acid 1.8±0.8mg/dL, BUN 10.4±3.9mg/dL, alanine aminotransferase (AST) 75.5±33.6 IU/L, total protein 1.9±0.8g/dL, triglycerides 22.9±9.8mg/dL and cholesterol 45.3±19.7mg/dL. It was observed that the values of the evaluated blood components are similar to those found by other researchers in serum biochemical studies with samples of Podocnemis expansa. During this study we observed the paucity of published data on blood parameters of Podocnemis genus, especially P. expansa species, which confirmed the high relevance of the development of further research involving this topic.
  • Bullous keratopathy in a yellow-headed caracara (Milvago chimachima) treated with a modified third eyelid flap Wildlife Medicine

    Oriá, Arianne P.; Gomes Junior, Deusdete C.; Raposo, Ana Cláudia S.; Libório, Fernanda A.; Schäffer, Débora P.H.; Dórea Neto, Francisco A.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: Um gavião carrapateiro (Milvago chimachima) foi encaminhado ao Serviço de Oftalmologia Veterinária da Universidade Federal da Bahia com alteração em córnea. Durante a avaliação oftálmica a prova da fluoresceína foi positiva no olho direito e foi observado lesão bolhosa de aspecto irregular, compatível com o diagnóstico de ceratopatia bolhosa. Esta é uma alteração rara em aves e no presente caso foi tratada através de “flap” modificado de terceira pálpebra associado a utilização de colírio antibiótico e ácido hialurônico. A terapêutica adotada foi de fácil implementação e viável no reparo da ceratopatia bolhosa em gavião carrapateiro.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: A Yellow-headed Caracara (Milvago chimachima) was submitted to the Ophthalmology Service of the Federal University of Bahia with a corneal abnormality. During ophthalmic evaluation the right cornea was stained positively with fluorescein; a blurred bullous lesion, with irregular surface, compatible with the diagnosis of bullous keratopathy was found. This is a rare condition in a bird which was treated successfully with a modified third eyelid flap associated with antibiotic and hyaluronic acid eye drops. The adopted therapeutic proved to be simple to implement and viable for repair of the bullous keratopathy in the Yellow-headed caracara.
  • In vitro culture of somatic cells derived from ear tissue of collared peccary (Pecari tajacu Linnaeus, 1758) in medium with different requirements Animal Morphophysiology

    Santos, Magda L.T.; Borges, Alana A.; Neta, Luiza B. Queiroz; Santos, Maria V.O.; Oliveira, Moacir F.; Silva, Alexandre R.; Pereira, Alexsandra F.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: A manutenção das atividades metabólicas durante o cultivo in vitro de células somáticas de animais silvestres, especialmente cateto (Pecari tajacu), é uma etapa interessante na conservação dessas células para o uso na transferência nuclear. Nesse contexto, é necessário aperfeiçoar as condições de cultivo de células somáticas pelo estabelecimento de suplementações apropriadas aos meios. Portanto, este estudo objetivou analisar a composição dos meios de cultivo de células somáticas derivadas de tecido auricular de catetos, avaliando concentrações de soro fetal bovino (SFB; 10% vs. 20%) e fator de crescimento epidermal (EGF; 5 ng/mL vs. 10 ng/mL). Para tanto, tecidos foram submetidos ao cultivo primário e subcultivos por 40 dias e células foram analisadas por morfologia, adesão, subconfluência, e atividade proliferativa pelo desenvolvimento da curva de crescimento e determinação do time de duplicação da população (PDT), viabilidade, e atividade funcional/metabólica. Nenhuma diferença foi observada entre as concentrações de SFB para os vários parâmetros, exceto para viabilidade [SFB10: 85,6% vs. SFB20: 98,2%], PDT [SFB10: 155,4 h vs. 77,2 h], e atividade funcional/metabólica [SFB10: 0,57-0,55 vs. SFB20: 0,82-0,99 (D5-D7)]. Para o EGF em cultivo, nenhuma diferença foi observada nos parâmetros avaliados. Em todos os experimentos, as curvas de crescimento foram típicas de forma S e as células passaram por uma fase lag, logarítmica e platô. Em conclusão, 20% de SFB é adequado para a recuperação de células somáticas; contudo, EGF não melhora a qualidade de crescimento dessas células. Ao nosso conhecimento, este é o primeiro estudo cultivando células somáticas de catetos.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: The maintenance of metabolic activities during the in vitro culture of somatic cells of wild animals, especially collared peccary (Pecari tajacu), is an interesting step in conservation of these cells for the use in nuclear transfer. In this context, it is necessary to optimize the culture conditions of somatic cells by the establishment of appropriate supplementation to the media. Therefore, this study aimed to analyze the composition of the culture means of somatic cell derived from ear tissue of collared peccaries, evaluating concentrations of fetal bovine serum (FBS; 10% vs. 20%) and epidermal growth factor (EGF; 5ng/mL vs. 10ng/mL). Tissues were submitted to primary culture and subcultures for 40 days and cells were analyzed for morphology, adhesion, subconfluence, and proliferative activity to develop the growth curve and to determine the population doubling time (PDT), viability, and functional/metabolic activity. No difference was observed between the concentrations of FBS for several parameters, except for viability [FBS10: 85.6% vs. FBS20: 98.2%], PDT [FBS10: 155.4h vs. 77.2h], and functional/metabolic assay [FBS10: 0.57-0.55 vs. FBS20: 0.82-0.99 (D5-D7)]. For the EGF in culture, no difference was observed in the evaluated parameters. In all experiments, the growth curves were typical S-shape and the cells passed through a lag, logarithmic, and plateau phase. In conclusion, 20% FBS is suitable for the recovery of somatic cells; nevertheless, EGF does not improve the quality of growing these cells. To our knowledge, this is the first study culturing somatic cells of collared peccaries.
  • Computerized electrocardiography in healthy conscious guinea pigs (Cavia porcellus) Animal Morphophysiology

    Botelho, Ana F.M.; Oliveira, Maira S. de; Soto-Blanco, Benito; Melo, Marília M.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: O objetivo desse estudo foi avaliar cobaios hígidos e conscientes como modelos para estudos de eletrofisiologia e descrever os padrões eletrocardiográficos normais em ambiente laboratorial controlado, estabelecendo a melhor fórmula QT para esse método. Gravações eletrocardiográficas de cinquenta cobaios adultos conscientes foram obtidas usando eletrocardiografia computadorizada. As medidas eletrocardiográficas de três trechos diferentes foram analisadas. Os resultados estabeleceram média e desvio padrão para os parâmetros: frequência cardíaca, ondas e intervalos P-QRS-T, assim como o eixo cardíaco médio. Grupos foram separados de acordo com o peso: grupo 1 incluiu animais com 500-699g e o grupo 2 animais de 700-900g. Nenhuma diferença foi encontrada quando as medidas foram comparadas entre os grupos, mostrando que não há diferença significativa entre peso/tamanho corporal com os parâmetros eletrocardiográficos (p<0.05). As médias corrigidas dos valores do QT (QTc) obtidas usando diferentes fórmulas foram significativamente diferentes (p<0.05), sendo a mais consistente a de Van der Water (QTcV). Valores de QTcV fortemente correlacionam com o QT (r=98), com intervalo de confiança a 95% de 185.7 a 195.2 ms. Considerando a simplicidade e confiabilidade, o QTcV foi considerado apropriado para correção do intervalo QT em cobaios conscientes. Os resultados do presente estudo também sugerem que os valores encontrados possam ser utilizados como referência para essa espécie.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: The purpose of this study is to evaluate healthy conscious guinea pigs as a model for electrophysiology assessment and to describe normal electrocardiographic patterns in controlled laboratory environment, establishing the best QT formula for this method. Electrocardiographic recordings of fifty adult conscious guinea pigs were obtained using a computerized electrocardiography. The electrocardiographic measurements of three different tracings were analyzed. The results obtained established normal mean and range values for the parameters: heart rate, waves and intervals of P-QRS-T deflections, as well as the mean cardiac axis. Groups were separated by body weight: group 1 gathered animals with 500-699g and group 2 with animals 700-900g. No differences were found when measurements were compared between groups, showing no significant difference between weight/body sizes to the electrocardiographic parameters (P<0.05). The mean corrected QT values (QTc) obtained using diverse formulae were significantly different (P<0.05), were the most consistent was Van der Water (QTcV). QTcV values were strongly correlated (r=98) and 95% confidence interval 185.7 to 195.2ms.Considering its simplicity and reliability, the QTcV was deemed the most appropriate to be used for the correction of QT interval in conscious guinea pigs.The results of this study also suggest that the values found can be used as reference for the species.
  • Evaluation of physiological parameters of dogs submitted to uterine lymphatic mapping using patent blue V dye for anaphylaxis detection Animal Morphophysiology

    Justino, Rebeca C.; Cardoso, Guilherme S.; Trautwein, Luiz G.C.; Alves, Rubens I.A.; Flaiban, Karina K.M.C.; Martins, Maria Isabel M.

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: O mapeamento linfático tem sido realizado em humanos e cães. Embora inúmeros casos de anafilaxia já tenham sido relatados em humanos, não existem tais relatos em cães. O objetivo deste estudo foi identificar a ocorrência de reações adversas ao corante azul patente V em cadelas submetidas ao mapeamento linfático uterino, usando avaliações cardiovasculares e hematológicas. O experimento foi realizado em 14 cadelas mestiças, divididas igualmente em dois grupos (PBV- mapeamento linfático uterino e OEH; Controle - apenas OEH). Os animais foram submetidos a exames hematológicos e bioquímicos séricos no pré e pós-operatório (7 dias). O protocolo anestésico foi: sedação (morfina e acepromazina), indução (propofol), manutenção (isoflurano), analgesia trans-operatória (fentanil). A pressão arterial sistólica foi monitorada durante todo o procedimento e hemogasometria arterial no pré e pós-operatório imediato. Para o mapeamento linfático foi injetado azul patente V na parede uterina, 10 minutos antes de realizar a OEH. Comparações entre os valores do pré e pós-operatório do mesmo animal foram realizados pelo teste Wilcoxon-Mann-Whitney. Para a comparação dos valores entre Controle e PBV foi realizado a obtenção da diferença entre os valores pré e pós de cada grupo, submetidas ao teste de Mann-Whitney (significância de 5%). Diferenças foram observadas (p<0,05) entre as avaliações pré e pós-operatórias no PBV (proteína total e albumina), ambos os grupos (pressão parcial de oxigênio arterial) e no Controle (saturação de oxigênio arterial). Não houve sinais de reação adversa ao corante azul patente V em cadelas saudáveis submetidas ao mapeamento linfático uterino.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: Lymphatic mapping has been performed in humans and dogs. Although several cases of anaphylaxis have been reported in humans, there are no such reports in dogs. The objective of this study was to identify the occurrence of adverse reactions to patent blue V dye in bitches undergoing uterine lymphatic mapping procedures using cardiovascular and hematological evaluations. The experiment was performed in 14 mongrel bitches without any reproductive disease, randomly assigned into two equal groups (PBV- uterine lynphatic mapping and OHE; Control - OHE only). The animals were submitted to pre- and postoperative hematological and serum biochemistry exams (7 days). The anesthetic protocol was: sedation (morphine and acepromazine), induction (propofol), maintenance (isoflurane), transoperative analgesia (fentanyl). Systolic blood pressure was monitored throughout the procedure and arterial blood gas analysis was performed immediate pre and postoperatively. For lymphatic mapping was injected patent blue V in the uterine wall, 10 minutes before OEH. Comparisons between the pre- and postoperative parameters within the same animal were performed using the Wilcoxon-Mann-Whitney test. To compare the values between control and PBV group was obtaining the difference between the pre and post of each group, subjected to the Mann-Whitney test (significance of 5%). Differences were observed (P<0.05) between the pre- and postoperative evaluations in the PBV (total protein and the albumin serum), in both groups (arterial partial pressure of oxygen) and in the Control (arterial oxygen saturation). There were no signs of adverse reactions to the patent blue V dye in the healthy bitches submitted to lymphatic uterine mapping.
  • Sexual dimorphism and perineal structure in Coendou prehensilis (Prehensile-tailed porcupine) Morfofisiologia

    Cury, Fabio Sergio; Ambrósio, Carlos Eduardo

    Abstract in Portuguese:

    RESUMO: Coendou prehensilis é um mamífero da ordem Rodentia, que é composta por cinco subordens: Sciuromorfos, a qual pertencem os esquilos; Castorimorfos, onde encontramos os castores; Myomorfos, a qual encontramos os ratos; Anomaluromorfos, Lebre-saltadora, e os Histricomorfos, onde observamos a capivara. Utilizamos nesta pesquisa o ouriço-cacheiro (Coendou prehensilis) sendo um macho e uma fêmea, ambos adultos. Estes animais foram encontrados em óbito por atropelamento nas rodovias da região de Pirassununga-SP e cedidos para o Laboratório de Anatomia do Departamento de Medicina Veterinária da Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos da Universidade de São Paulo FZEA/USP devido a permissão do Ibama para estudar os animais (Registro SISBIO no. 43274-1), os quais foram fixados com formaldeído a 10% e dissecados na região do períneo. Os resultados mostraram que a única característica que nos permite diferenciar machos de fêmeas, é o espaço entre o ânus e as genitais dos animais, sendo que o macho apresenta essa distância maior que a fêmea. O períneo é uma região extra cavitária de delimitação losangular, sendo essa delimitação feita pelos ossos interpubiano, púbico e pelos processos do púbis e ísquio. O períneo do Coendou prehensílis macho é composto por cinco principais músculos, sendo três encontrados dispostos no diafragma urogenital superficial, (Músculos isquiocavernosos, M. bulbocavernoso e Mm. Bulboesponjosos) e dois no diafragma pélvico (M. levantador do ânus e M. retrator do pênis). O períneo da fêmea é composto pelos músculos (isquiocavernoso, o bulboesponjoso, levantador do ânus e esfíncter anal externo). Conclui-se que ambos os sexos possuem os músculos isquiocavernosos, Mm. Bulboesponjosos, M. levantador do ânus e esfíncter anal externo, além de que o estudo da região perineal dos animais é de grande importância, pois através do entendimento da função e localização de cada músculo, podemos contribuir para futuras pesquisas sobre reprodução e comportamento animal durante a cópula auxiliando para um melhor entendimento do potencial reprodutivo de roedores da família Erethizontidae, além de contribuir na base do desenvolvimento da biotecnologia aplicada à reprodução visando até mesmo à reprodução desses animais em cativeiro além do meio ambiente livre.

    Abstract in English:

    ABSTRACT: Coendou prehensilis is a mammal that belongs to the Rodentia order, which consists of five suborders: Sciuromorfos, to which the squirrels belongs; Castorimorfos where we have the beavers; Myomorfos, which include the mice; Anomaluromorfos, Hare jumper, and Hystricomorfos, where we have the capybara. We used the porcupine clerk in the research (Coendou prehensilis), one male and one female, both adults. These animals were transferred to the Laboratory of Anatomy, Department of Veterinary Medicine, Faculty of Animal Science and Food Engineering, University of São Paulo (FZEA/USP), originating from roadaccidents in Pirassununga, SP (Registration n. 43274-1 SISBIO). The animals were fixed with 10% formaldehyde and dissected in the perineum region. The results showed that the only feature which allows us to differentiate males from females is the space between anus and the genitals of the animals; the male has a larger space than the female. The perineum is an extra cavity region with lozenge definition, and this definition is formed by interpubic bones, the pubic and processes of the pubic and ischium. The male Coendou prehensilis perineum consists of five major muscles, three arranged on the urogenital diaphragm surface (ischiocavernosus muscles, M. bulbocavernosus and Mm. bulboesponjosos) and two in the pelvic diaphragm (M. levator ani and M. penis retractor). The female’s perineum is composed by ischiocavernosus, bulbospongiosus, levator ani and external anal sphincter muscles. We conclude that both sexes have the ischiocavernosus muscles, Mm. bulboesponjosos, M. levator ani and external anal sphincter, and it is very important to study the perineal region of the animals, because understanding the function and location of each muscle we can contribute to future research on reproduction and animal behavior during copulation, helping to a better knowledge about reproductive potential of Erethizontidae rodents, and to contribute in the applied biotechnology development of reproduction, what can be helpful even in captivity reproduction of these animals besides the ones in free environment.
  • Quantification of collagen fibers in canine uteri treated with medroxyprogesterone acetate Animal Morphophysiology

    Salinas, Paulo; Miglino, Maria A.; Sol, Mariano del

    Abstract in English:

    ABSTRACT: Collagen plays essential roles in remodeling uterine tissue during decidualization, implantation, pregnancy and involution. To understand whether the progestational agent medroxyprogesterone acetate (MPA) can modify the organization and deposit of collagen in the uteri of normal bitches (Canis Tlupus familiaris), we assessed uterine tissues by histochemistry. Uteri were grouped as: nulliparous (n=11), multiparous (n=11) and treated with MPA (n=11; nulliparous with two treatments; 5mg/kg; i.m.). The amount, location and birefringence of interstitial collagen types I and III in the fold and base of the endometrial stroma and the myometrial muscular layers were studied on sections stained with Picrosirius Red by polarized light microscopy and evaluated by ANOVA. No differences were observed in the endometrium. In the myometrium, differences were observed in collagen type I between MPA-treated and nulliparous uteri vs. multiparous (p<0.05), and differences in collagen type III between nulliparous and multiparous uteri vs. MPA-treated (p=0.0001). In conclusion, two doses of MPA had no significant effect on the investigated collagens in the extracellular matrix.
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