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Aperfeiçoamento da técnica de impregnação pela prata (protargol) para obtenção de caracteres morfológicos de protistas ciliados, flagelados e opalinatas

A pesquisa sobre ciliados, flagelados e opalinatas vem sendo ampliada com utilização da técnica de impregnação pela prata (protargol), modificada por vários autores. Mas, geralmente, estas demoram muito para se desenvolver e os resultados são variados. O presente trabalho é uma variante da técnica descrita por Tuffrau (1964, 1967), mostrando algumas modificações feitas no laboratório. Os organismos podem ser preservados por diferentes fixadores (Bouin alcóolico, solução de Stieves, glutaraldeído a 2,5% e outros), lavados com água destilada e em seguida clarificados com hipoclorito de sódio a 3%. Se o organismo é muito sensível ao hipoclorito, podemos fazer uso do lauril sulfato de sódio a 4% e 3 lavagens com água destilada. Os protistas são aderidos à lâmina com albumina-glicerinada de Mayer (1 vol. glicerina para 1 ou 2 vol. albumina), diluída em água na proporção de 1:10, ou com polilisina a 1%. Depois da preparação e secagem das lâminas, estas são cobertas por uma fina camada de proteinato de prata a 0,8%. Logo após, as lâminas são colocadas em uma tigela retangular contendo, no fundo, papel umidecido e uma tampa para evitar o ressecamento do proteinato. A tigela é posta em uma estufa a 40º-50ºC por 30 min. As lâminas são lavadas por 1 minuto com água destilada morna (35ºC). A revelação do material deve ser feita pela hidroquinona a 0,4% por, no máximo, 1 minuto, controlando gradualmente a intensidade da impregnação pela prata por meio da observação em microscópio óptico. Em seguida, lavar em água destilada por 1 minuto para rapidamente fixar em tiossulfato de sódio a 2,5%, lavar novamente a lâmina por dois minutos antes da desidratação em série alcóolica 50-100º e, finalmente, três banhos em xileno. Montar as lâminas com Entellan MerckTM ou bálsamo do Canadá.

impregnação de protistas; protargol; aperfeiçoamento de técnica


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