Anatomy and essential oil analysis of the leaves from Hennecartia omphalandra J. Poisson (Monimiaceae)

rbfar Revista Brasileira de Farmacognosia Rev. bras. farmacogn. 0102-695X 1981-528X Sociedade Brasileira de Farmacognosia Curitiba, PR, Brazil This paper describes the morphological and anatomical aspects and the essential oil analysis of the leaves from Hennecartia omphalandra J. Poisson (Monimiaceae), a toxic plant. The presence of trichomes formed by a single cell, paracitic stomata, groups of braquisclereids in the petiole and leaf blade; vermiform and ramiform sclereids, vascular system in arc softly invaginated at ends in the petiole, and in a flat arc in the middle vein, being the venation pattern a variation of craspedodromous-semicraspedodromous type, and essential oil stored in oil idioblasts in the mesophyll were the most important characters that can help the morphological diagnosis. The analysis of essential oil of the leaves showed the presence of monoterpenes, as well as sesquiterpenes hydrocarbons and alcohols, being the latter the most significant group. The major identified compounds were β-phelandrene (24.0%), germacrene D (10.5%), sabinene (9.3%), bicyclogermacrene (8.4%) and β-elemene (5.3%). ARTIGO Anatomia e análise de óleo essencial das folhas de Hennecartia omphalandra J. Poisson (Monimiaceae) Anatomy and essential oil analysis of the leaves from Hennecartia omphalandra J. Poisson (Monimiaceae) Carlos A. MarquesI, II,*; Gilda G. LeitãoIII; Humberto R. BizzoIV; Ariane L. PeixotoV; Ricardo C. VieiraI ILaboratório de Morfologia Vegetal, Departamento de Botânica, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Av. Brigadeiro Trompowsky, s/n, Ilha do Fundão, 21941-590 Rio de Janeiro-RJ, Brasil IICentro Federal de Educação Tecnológica de Química de Nilópolis, R. Lúcio Tavares, 1045, Centro, 26530-060 Nilópolis-RJ, Brasil IIINúcleo de Pesquisas de Produtos Naturais, Universidade Federal do Rio de Janeiro, Av. Brigadeiro Trompowsky, s/n, Ilha do Fundão, 21941-590, Rio de Janeiro-RJ, Brasil IVEMBRAPA, Agroindústria de Alimentos, Av. das Américas, 29501, Guaratiba, 23020-470 Rio de Janeiro-RJ, Brasil VInstituto de Pesquisas Jardim Botânico do Rio de Janeiro, Rua Jardim Botânico, 1008, Jardim Botânico, 22460-070 Rio de Janeiro-RJ, Brasil RESUMO Descreve-se a morfo-anatomia e a análise de óleo essencial das folhas de Hennecartia omphalandra J. Poisson (Monimiaceae), uma planta tóxica. A ocorrência de tricomas unicelulares, estômatos paracíticos; braquiesclereídes em grupos no pecíolo e na lâmina foliar, além de esclereídes vermiformes e ramiformes; sistema vascular em arco, com extremidades voltadas para o centro no pecíolo e na forma de arco atenuado na lâmina foliar, sendo o padrão de venação uma variação do tipo craspedódromo-semicraspedódromo, além de óleo essencial armazenado em idioblastos oleíferos não especializados no mesofilo, foram considerados caracteres importantes que podem auxiliar na sua morfo-diagnose. A análise do óleo essencial das folhas revelou a presença de monoterpenos, sesquiterpenos e álcoois sesquiterpênicos, sendo este o grupo mais significativo. Os componentes majoritários identificados foram β-felandreno (24,0%), seguido por germacreno D (10,5%), sabineno (9,3%), biciclogermacreno (8,4%) e β-elemeno (5,3%). Unitermos:Hennecartia omphalandra, Monimiaceae, plantas tóxicas, anatomia foliar, óleo essencial. ABSTRACT This paper describes the morphological and anatomical aspects and the essential oil analysis of the leaves from Hennecartia omphalandra J. Poisson (Monimiaceae), a toxic plant. The presence of trichomes formed by a single cell, paracitic stomata, groups of braquisclereids in the petiole and leaf blade; vermiform and ramiform sclereids, vascular system in arc softly invaginated at ends in the petiole, and in a flat arc in the middle vein, being the venation pattern a variation of craspedodromous-semicraspedodromous type, and essential oil stored in oil idioblasts in the mesophyll were the most important characters that can help the morphological diagnosis. The analysis of essential oil of the leaves showed the presence of monoterpenes, as well as sesquiterpenes hydrocarbons and alcohols, being the latter the most significant group. The major identified compounds were β-phelandrene (24.0%), germacrene D (10.5%), sabinene (9.3%), bicyclogermacrene (8.4%) and β-elemene (5.3%). Keywords:Hennecartia omphalandra, Monimiaceae, toxic plants, leaf anatomy, essential oil. INTRODUÇÃO Desde épocas remotas as plantas tóxicas exercem um papel importante, seja através do uso como veneno de flechas ou como recurso em envenenamentos intencionais com fins políticos, militares ou pessoais (Schenkel et al., 2002). O estudo dessas plantas vem ganhando importância, pois, além de esclarecer diferentes aspectos relativos aos casos de intoxicações e de identificar constituintes químicos capazes de exercer ação tóxica, pode ainda fornecer substâncias ativas para o desenvolvimento de fármacos e inseticidas (Vieira et al., 2002; Amaral et al., 2006; Barbosa-Filho et al., 2007; Saúde-Guimarães & Faria, 2007; Barbosa-Filho et al., 2008a; Corrêa et al., 2008; Sousa et al., 2008). Neste contexto, a anatomia vegetal constitui-se em um instrumento eficaz, pois, além do aspecto descritivo, também contribui através dos dados fornecidos pelo estudo de estruturas secretoras, possibilitando elucidar aspectos relativos ao armazenamento e secreção de metabólitos secundários. Contudo, os estudos sobre anatomia de plantas tóxicas ainda são escassos. Mencionam-se os trabalhos de Panizza et al. (1982), sobre os elementos histológicos mais importantes para o diagnóstico de Cannabis sativa L. (Cannabinaceae); de Milanez & Monteiro-Neto (1956) sobre os laticíferos de Euphorbia pulcherrima Willd. (Euphorbiaceae) e de Dieffenbachia picta Schott (Araceae), onde o estudo das células secretoras foi determinante no esclarecimento do seu mecanismo de ação (Carneiro et al., 1989; Ferreira et al., 2006). Em espécies de Monimiaceae os estudos anatômicos também são restritos e privilegiam a descrição dos órgãos vegetativos aéreos (Metcalfe, 1987; Callado et al., 1997; Fischer et al., 1998; Palma et al., 2002; Callado et al., 2006). No Brasil, a descrição da morfologia externa e interna de espécies vegetais que servem como base para o desenvolvimento de fármacos, é determinada pela RDC nº 48 da Anvisa, de 16/03/2004 (Anvisa, 2005). Espécies pertencentes às famílias Monimiaceae ou de famílias próximas como Siparunaceae, são citadas pelo seu uso em medicina popular, como Siparuna apiosyce (Mart. ex Tul.) A.DC., utilizada no tratamento de distúrbios gastrointestinais, febres, gripes e outras afecções. Mollinedia brasiliensis Schott ex Tul. é considerada um forte antiespasmódico (Leitão et al., 1999) e em Siparuna pauciflora (Beurl.) A. DC. foi verificada atividade contra Plasmodium falciparum (Jenett-Siems et al., 2003). Estudos fitoquímicos têm destacado a presença de uma grande variedade de constituintes químicos, justificando o uso dessas espécies na medicina popular. Peumus boldus Molina é a espécie mais conhecida, sendo mencionada em diversas farmacopéias pelo seu uso contra dispepsias, náuseas e constipação intestinal (Brandão et al., 2006; Agra et al., 2007; Ruiz et al., 2008). Nessa espécie, encontram-se alcalóides benzilisoquinolínicos como boldina, isocordina e N-metillaurotetanina (Pietta et al., 1988). Não obstante, Hennecartia omphalandra J. Poisson. (Monimiaceae), popularmente conhecida como "canemeira", "pimenteira-do-mato" ou "arreganha" é considerada uma espécie tóxica, segundo o Centro de Investigações Toxicológicas/ SC, por ter causado grave intoxicação em crianças na cidade de Cândido de Abreu, PR, após a ingestão de sementes, segundo Schenkel et al. (2002). Este fato motivou o estudo morfológico e anatômico dos frutos (Marques, 2007; Marques et al., 2008) e das folhas de H. omphalandra J. Poisson., a fim de fornecer dados para a sua morfo-diagnose; além da análise do óleo essencial, como parte integrante do estudo fitoquímico e de atividade biológica, ainda em desenvolvimento. MATERIAL E MÉTODOS Estudo morfo-anatômico - Foram coletadas folhas de três espécimes ocorrentes na Chácara Recanto Beija-Flor, uma propriedade particular localizada no bairro Aviação Velha em Londrina, PR que apresenta latitude entre 23º 08' 47'' e 23º 55' 46''S e longitude 50º 52' 23'' e 51º 19' 11''W. A altitude média da cidade é de 576 m e o clima é subtropical, sendo a temperatura média anual de 21,4 ºC (Nimer, 1989). A propriedade contém um fragmento remanescente de mata úmida, onde os três indivíduos femininos, coletados para este estudo, compõem o sub-bosque. Após coleta e identificação, o material botânico foi depositado e registrado no Herbário do Departamento de Botânica da Universidade Federal do Rio de Janeiro (RFA), sob o número 30.840. Para análise anatômica foram coletadas somente folhas completamente expandidas do 4º ao 6º nós, localizadas nos ramos mais basais. Foram posteriormente processadas amostras da região mediana da lâmina foliar e o pecíolo foi fragmentado nas regiões proximal, mediana e distal. As amostras, após coleta e processamento, foram fixadas em FPA 50% e os fragmentos emblocados em Historesina Leica, segundo recomendações do fabricante, sendo posteriormente seccionados transversalmente ao micrótomo rotativo com espessura de 6-10 μm. A coloração dos cortes foi feita utilizando-se Azul de toluidina 0,05%, sendo montados em lâminas permanentes (Ruzin, 1999). Os testes histoquímicos foram feitos em cortes de material recém-coletado, utilizando-se Floroglucina para identificação de lignina; Lugol para identificar amido e Sudan IV para substâncias lipofílicas (Johansen, 1940). Para a detecção de taninos, foi utilizada a mistura ácido acético glacial/ formaldeído/ FeSO4 (Ruzin, 1999). Os cristais foram reconhecidos pelo teste de solubilidade em ácido clorídrico 10% e insolubilidade em ácido acético 10% e, para a dissociação da folha, foi utilizada a mistura de Jeffrey por 48-72 horas - solução aquosa de Ácido nítrico 10% e solução aquosa de Àcido crômico 10%, na proporção 1:1 (Johansen, 1940). As observações relativas à morfologia externa foram feitas ao microscópio estereoscópico Nikon SMZ 800. As fotomicrografias foram obtidas ao Fotomicroscópio III da Zeiss e os esquemas foram feitos ao microscópio Zeiss Axiolab equipado com câmara clara. Para determinação do tipo de estômato, seguiu-se a nomenclatura proposta por Wilkinson (1979) e para determinação do padrão de venação seguiu-se Hickey (1979). Extração e análise do óleo essencial - A coleta de folhas para extração do óleo essencial foi realizada no verão (23/02/2006), numa época onde nenhum indivíduo apresentou floração nem frutificação, tendo sido usados 150 g de folhas frescas sem sintomas de necrose, clorose ou contaminação por fungos. As folhas foram fragmentadas e submetidas à hidrodestilação em um aparelho do tipo Clevenger por 1 hora e 30 minutos, de onde se obteve 0,1 mL de óleo. O óleo essencial de H. omphalandra J. Poisson foi analisado no dia subseqüente por cromatografia gasosa (CG) em um equipamento Agilent HP 5890, série II, equipado com um detector de ionização de chama, mantido a 280 ºC e uma coluna capilar Ultra 2 (25 m x 0,20 mm x 0,33 μm), utilizando hidrogênio (1,0 mL.min-1) como gás carreador. A programação de temperatura do forno foi de 60 a 240 ºC, com incremento de 3 ºC min-1. A amostra, 1,0 μL de uma solução a 1% do óleo eseencial em hexano, foi injetada no modo com divisão de fluxo (1:100) em injetor mantido a 250 ºC. A quantificação foi realizada por normalização de área. A análise por espectrometria de massas foi realizada em sistema Agilent 5973N, acoplado a um cromatógrafo à gás Agilent 6890, equipado com uma coluna capilar HP5MS (30m x 0,25mm x 0,25 μm), utilizando hélio como gás carreador a 1,0 mL.min-1. O detector de massas foi operado no modo impacto de elétrons com energia de 70 eV. Os demais parâmetros de operação foram os mesmos acima. Os espectros de massas foram comparados com aqueles da biblioteca do espectrômetro (Wiley 6th ed.) e com espectros disponíveis na literatura (MacLafferty & Stanffer, 1989; Adams, 1995; 2001). Para a identificação também foi calculado o índice de Kovats, utilizando-se os dados de uma série homóloga de hidrocarbonetos alifáticos saturados (C7 a C26) na mesma coluna e condições da análise de CG do óleo. Os índices de Kovats calculados foram comparados com índices da literatura (Adams, 1995; 2001) e a identificação dos componentes do óleo foi efetuada com dados de espectrometria de massas e do índice de Kovats. RESULTADOS E DISCUSSÃO A folha apresenta pecíolo curto, lâmina foliar simétrica, de consistência membranácea, com ápice cuspidado, base aguda e margem dentada, com nervuras reticuladas, proeminentes na face abaxial (Fig. 1). O padrão de venação apresenta uma variação do tipo craspedódromo-semicraspedódromo, onde uma das ramificações de cada nervura secundária prolonga-se em direção à margem, formando uma área pontiaguda, dando o aspecto cassidato ao bordo foliar. A outra ramificação vai se anastomosar com a ramificação proveniente da outra nervura secundária. Dessa maneira, formam-se grandes aréolas reticuladas e ortogonais (Fig. 1) com nervuras que vão se ramificando (Fig. 2) até a 7ª ordem, sendo as terminações vasculares livres, simples ou ramificadas, margeadas por células parenquimáticas que contém pequenos cristais cúbicos ou romboédricos em grande quantidade (Fig. 3). A diferença observada em relação ao padrão semicraspedódromo típico é que, por vezes, as nervuras terciárias também se anastomosam e, nesse caso, são os prolongamentos das nervuras terciárias que se estendem para formar as terminações vasculares (Fig. 1). Hickey (1979) menciona a família Monimiaceae como exemplo de folhas com terminações marginais cassidatas. H. omphalandra segue, portanto, o padrão encontrado em outros gêneros da família. A venação marginal se forma pela anastomose das nervuras de menor calibre, de onde partem terminações livres, simples ou ramificadas, caracterizando como "incompleta" a venação marginal nas regiões de contorno regular, compreendidas como as áreas entre 2 terminações pontiagudas (Fig. 2). Estas áreas pontiagudas são formadas pelo prolongamento de uma nervura secundária ou terciária, o que confere rigidez a essa região (Fig. 4). Contudo, Peixoto (1976), ao descrever a morfologia externa de H. omphalandra, classificou o padrão de venação foliar como broquidódromo. Posteriormente, Peixoto (1979) descreveu, em Mollinedia, padrão de venação broquidódromo, mas quando a margem é dentada, o padrão assemelha-se ao padrão semicraspedódromo, onde as nervuras terciárias formam arcos próximos aos bordos, às vezes unindo duas nervuras secundárias. Segundo Rury & Dickson (1977), o padrão de venação craspedódromo aparece, em diversas espécies, como resultado da modificação ontogenética do padrão broquidódromo e Lorence (1985) encontrou essa transição entre os padrões broquidódromo e craspedódromo em Ephippiandra madagascarensis (Cav.) Lorence. Optou-se por manter a definição do padrão de venação de H. omphalandra como uma variação do tipo craspedódromo-semicraspedódromo, baseando-se nas definições de Hickey (1979), para os espécimes coletados em Londrina-PR. Maiores detalhes acerca das definições dos padrões, bem como a comparação com o material estudado podem ser encontrados em Marques (2007). O pecíolo nos 3 indivíduos estudados apresentou contorno plano ou levemente côncavo na face adaxial e convexo na face abaxial (Fig. 5). A epiderme é unisseriada, com paredes retas em corte transversal e cutícula delgada que reage positivamente ao Sudan IV. Observaram-se também alguns raros tricomas tectores unicelulares. Subjacente à epiderme na face adaxial, ocorre um colênquima discreto constituído por 1-3 estratos, sendo seguido pelo parênquima fundamental. Em meio a essas células parenquimáticas, ocorrem braquiesclereides em grupos, dispersas aleatoriamente (Fig. 5, 6 e 7). Da mesma forma, foi possível notar que algumas células parenquimáticas armazenam conteúdo que reage positivamente ao Sudan IV, o que os caracteriza como idioblastos oleíferos (Fig. 6). Outras células parenquimáticas armazenam cristais romboédricos, cúbicos ou estilóides de pequenas dimensões (Fig. 6). O sistema vascular possui forma de arco, com extremidades levemente voltadas para o centro, circundado por células parenquimáticas em grupos, formando uma bainha (Fig. 5 e 7). Na porção distal as mesmas características são mantidas, à exceção da presença de fibras perivasculares que envolvem as células parenquimáticas e que, por sua vez, envolvem o feixe vascular. Muitas vezes o pecíolo apresenta caracteres diagnósticos. Esses dados não devem ser desprezados na análise anatômica, já que a lâmina foliar e o pecíolo são muitas vezes macerados, moídos ou pulverizados juntos, principalmente em espécies em que o pecíolo é curto, como Peumus boldus. Palma et al. (2002) não descreveram anatomicamente o pecíolo em P. boldus. Por outro lado, em Siparuna apiosyce, caracteres ocorrentes no pecíolo e na lâmina foliar como tricomas tectores, cristais aciculares e células oleíferas foram usados no reconhecimento da droga (Fischer et al., 1998). Portanto, a utilização de características do pecíolo observadas em H. omphalandra, como a conformação do sistema vascular, os tipos de cristais e a presença de idioblastos oleíferos, como caracteres diagnósticos, são válidas. Em H.omphalandra a lâmina foliar é hipostomática e os estômatos são paracíticos (Fig. 8), sendo possível observar a ocorrência de estômatos contíguos (Fig. 8). Diferentes autores afirmam que em Monimiaceae os estômatos são paracíticos ou anomocíticos (Solereder, 1908; Money et al., 1950; Metcalfe, 1987). H. omphalandra segue o padrão referido para a família, tendo-se observado somente estômatos paracíticos. A epiderme é formada por células poliédricas de tamanho muito reduzido (Fig. 9 e 11), paredes anticlinais retas, por vezes levemente curvas (Fig. 8) com tricomas tectores eretos e unicelulares (Fig. 8), observados em ambas as faces, inclusive sobre as nervuras, raramente visualizados na epiderme adaxial. Estes tricomas, quando caem, deixam cicatriz. Segundo Solereder (1908) e Metcalfe (1987), em Monimiaceae (incluindo Siparuna), os tricomas são exclusivamente tectores, a maioria unicelulares, estando presentes em todos os gêneros, à exceção de Macropeplus, Macrotorus, Schrameckia e Xymalos. Tendem a estar dispostos em tufos em Daphnandra, Doryphora e Laurelia, em longos tufos com base esclerificada em Peumus e Siparuna, unicelulares bifurcados em Atherospermum, Matthaea e Mollinedia e peltados em Monimia, Hortonia e Palmeria. A forma dos tricomas, bem como o tipo de estômato foram considerados caracteres diagnósticos que facilitaram o reconhecimento de folhas pulverizadas de Siparuna apiosyce (Mart.) A. DC. (Siparunaceae) e do extrato fluido ou seco por compressão direta de Peumus boldus Molina (Fischer et al., 1998; Palma et al., 2002). O mesofilo apresentou 1-2 estratos subepidérmicos na face adaxial, sendo o segundo estrato descontínuo e apenas 1 estrato por vezes observado na face abaxial. Essas células possuem grandes dimensões (Fig. 9). Segundo Money et al. (1950), a hipoderme está presente na maioria dos gêneros de Monimiaceae. H. omphalandra, por apresentar esses estratos, caracterizados como hipoderme por esses autores, segue o padrão referido para a maioria dos gêneros da família. A lâmina foliar é dorsiventral (Fig. 9 e 10). O parênquima paliçádico ocorre em 1 estrato, seguido por um estrato de transição e pelo parênquima lacunoso em 8-10 camadas, com lacunas de consideráveis dimensões (Fig. 9). No parênquima lacunoso, algumas células reagem positivamente ao Sudan IV (Fig. 9 e 10). Ou seja, o conteúdo é armazenado no vacúolo de células ordinárias do parênquima lacunoso que constituem idioblastos oleíferos. Tal fato já não é observado no fruto (Marques et al., 2007), onde o conteúdo fica armazenado em células secretoras especializadas no mesocarpo. Tanto nas folhas quanto nos frutos extraiu-se óleo essencial. Famílias basais de angiospermas, como Monimiaceae e Lauraceae são conhecidas pela presença de células oleíferas em órgãos vegetativos (Gottlieb & Salatino, 1987). Em S. apiosyce (Siparunaceae), são descritas células oleíferas no mesofilo e no caule (Fischer et al., 1998) e em Peumus boldus, foram observadas células oleíferas em meio ao parênquima lacunoso (Palma et al., 2002). Money et al. (1950) citam a ocorrência de células oleíferas na folha em muitos gêneros de Monimiaceae e mencionam a ausência dessas células em Macropeplus. Em todas as regiões do mesofilo, à exceção dos elementos vasculares, também foi observada a presença de uma grande quantidade de pequenos cristais cúbicos e romboédricos, de tamanho reduzido, sendo que nas nervuras secundárias e nas de menor calibre, a bainha de células parenquimáticas que as envolvem contém grande quantidade desses cristais ( Fig. 10). Segundo Solereder (1908), esses cristais são típicos da família Monimiaceae e recentemente foram considerados um caráter diagnóstico em Peumus boldus por Palma et al. (2002). Já S. apiosyce possui cristais aciculares (Fischer et al., 1998). Apesar de possuir cristais com tamanho e formas típicos da família, sua presença abundante em toda a lâmina foliar, especialmente na bainha em torno do feixe, também pode auxiliar no reconhecimento de Hennecartia. Além da bainha de células parenquimáticas repletas de cristais, foram encontradas esclereídes e fibras acompanhando as nervuras. No material macerado, identificou-se esclereídes que foram reunidas em grupos distintos (Fig. 13 e 14). Segundo Rao & Bhupal (1973), esclereídes como as da Fig. 13 podem ser classificadas como "vermiformes curtos". Segundo estes autores tratam-se de variações de macroesclereídes. Já as esclereídes da Fig. 14 são definidas como "ramiformes". Segundo esses autores, esse tipo de esclereíde pode possuir terminações ramificadas na forma de T, I ou Y (Fig. 14 a-c). Na região da nervura mediana observou-se sistema vascular na forma de arco atenuado, seguido por células parenquimáticas e, estas, por fibras perivasculares que podem formar um anel (Fig. 12). Voltado para a face adaxial, ocorrem ainda 2 pequenos feixes, localizados acima do feixe maior (Fig. 12). Subjacente à epiderme adaxial, ocorre um colênquima angular em 3-4 estratos que, na verdade, corresponde à continuidade da hipoderme, encontrada ao longo da lâmina foliar. Na região do parênquima fundamental, também ocorrem células parenquimáticas de conteúdo oleífero (Fig. 12). Money et al. (1950) afirmam que o padrão de vascularização do pecíolo e da lâmina foliar varia consideravelmente em muitos gêneros e espécies, às vezes em folhas que estão em lados diferentes da mesma planta. Em espécies de Monimia, Hortonia e Palmeria, o sistema vascular pode se fechar em um cilindro pela concrescência das margens na face adaxial, mas em espécies de Matthaea e Steganthera, partes do arco atenuado podem se desprender na face adaxial, formando feixes menores, tal como foi observado em H. omphalandra. O bordo foliar, nas áreas de contorno regular, é preenchido por 1 estrato de hipoderme. Subjacentes a este estrato ocorrem células parenquimáticas provenientes tanto do parênquima paliçádico quanto do lacunoso que, inclusive, podem armazenar conteúdo que reage ao Sudan IV, além de pequenos feixes vasculares (Fig. 11). Análise do óleo essencial A composição química do óleo essencial é mostrada na Tabela 1. O óleo essencial de H. omphalandra é constituído por cerca de 35 constituintes químicos monoterpênicos e sesquiterpênicos, incluindo terpenos oxigenados. A identificação das substâncias presentes no óleo essencial foi feita através da comparação dos seus índices de Kovats calculados com os da literatura (Adams, 1995; 2001) e pela comparação de seus espectros de massas com os da literatura especializada (MacLafferty & Stanffer, 1989). Dessa forma, identificou-se 31 constituintes químicos, correspondendo a 88,6 % do total. A presença de 19 sesquiterpenos caracteriza este grupo como o mais significativo dentre as substâncias encontradas, sendo que 6 dos constituintes identificados são sesquiterpenos oxigenados: nerolidol, germacreno-D-4-ol, óxido de cariofileno, epi-α-muurolol, α-muurolol e α-cadinol (Tabela 1). Com isso, a soma de todos os sesquiterpenos corresponde a 54,3% do total da composição do óleo essencial. Observou-se ainda a ocorrência de 16 monoterpenos, o que corresponde a 45,7% do total. O constituinte químico majoritário deste óleo é um monoterpeno, o β-felandreno (24,0%), seguido por germacreno D (10,5%), sabineno (9,3%), biciclogermacreno (8,4%) e β-elemeno (5,3%) (Tabela 1). Na região dos monoterpenos, a presença deβ-felandreno como constituinte mais abundante no óleo essencial das folhas (24,0%) merece destaque, devendo-se considerar ainda a presença deβ-felandreno (2,0%) (Tabela 1). Quando somados, os teores de felandreno no óleo obtido das folhas alcançam 26%. Tal fato chama atenção pelo fato de existirem referências que consideram indesejável a presença de teores de felandreno superiores a 5% pela ação cardíaca que provocam (Simões & Spitzer, 2002). Portanto, a ocorrência dessa substância em altos teores nas folhas sugere que este fator que possa contribuir para a toxidez de H. omphalandra. Em óleos essenciais onde a quantidade de sabineno é significativa, como em Clausena anisata (Willd.) J.D. Hook ex benth. (Rutaceae) (33.0%), verificou-se atividade antimicrobiana (Gundidza et al., 1994). Na espécie estudada, sabineno (9,3%) e germacreno D (10,5%) também ocorrem em proporções significativas. Terpenos oxigenados como linalol (1,2%) e terpin-4-ol (1,1%) também foram encontrados entre os constituintes do óleo essencial das folhas. Em Peumus boldus Mol., esses álcoois terpênicos também compõem o óleo essencial das folhas (Jorge-Neto et al., 1989; Bruneton, 1991). O linalol também é o componente principal do óleo essencial de Aniba rosaeodora Ducke e Ocotea duckei Kosterm. (Lauraceae) (Gottlieb, 1972; Barbosa-Filho et al., 2008b) que alcança alto valor comercial pelo seu uso na indústria de perfumaria (Rizzini & Mors, 1976). Contudo, na espécie estudada, esse constituinte químico não figura entre os majoritários. O óxido de cariofileno (2,0%), presente somente nas folhas de H. omphalandra, também foi encontrado em Mollinedia gilgiana, M. schottiana, M. glaziovii, e M. salicifolia, sendo o constituinte principal do óleo essencial de M. glaziovii, e M. salicifolia (Moreira et al., 2001). Segundo Harborne (1991), a presença de derivados do cariofileno tem importância ecológica, pois são repelentes naturais contra formigas-cortadeiras, sendo o óxido de cariofileno mais efetivo. Tal fato explica sua ausência nos frutos e presença nas folhas da espécie estudada. A presença de sesquiterpenos, como constituintes majoritários do óleo essencial, pode ser observada, não só na espécie estudada, mas em espécies dos gêneros Mollinedia, bem como em famílias próximas como Siparunaceae e Lauraceae, onde sesquiterpenos interrelacionados ao eudesmano e germacrano foram localizados nos gêneros Lindera e Neolitsea (Lauraceae) (Gottlieb, 1972). Em Aristolochiaceae, o biciclogermacreno é o constituinte principal de espécies como Aristolochia argentina (Priestap et al., 2003). Cabe lembrar que o biciclogermacreno corresponde ao quarto constituinte mais abundante no óleo essencial obtido das folhas (8,4%). Já o germacreno D é o segundo constituinte mais representativo (10,5%). Sesquiterpenos como o β-elemeno estão presentes em proporção significativa nas folhas. Em H. omphalandra, o β-elemeno (5,0%) também pode ser encontrado em espécies como S. guianensis (Siparunaceae) (Antonio et al., 1984), Mollinedia gilgiana, M. schottiana, M. glaziovii, e M. salicifolia (Moreira et al., 2001). Em Aristolochia triangularis e A. rodriguesia (Aristolochiaceae),o β-elemeno também figura entre os constituintes majoritários do óleo essencial (Leitão et al., 1991). Já na família Lauraceae, faz-se menção à ocorrência desse sesquiterpeno na concentração de 1-5% em Laurus nobilis (Hokwerda et al., 1982). A atividade anticancerígena do β-elemeno também tem sido bem estudada. Wu et al. (1999), Zou et al. (2001) e Wang et al. (2005) descreveram a atividade dessa substância contra células que formam diferentes tipos de câncer, como células leucêmicas e do "câncer de Lung", através da indução de apoptose nessas células tumorais. Desta forma, a identificação de constituintes do óleo essencial nas folhas revela características que se assemelham a outros gêneros de Monimiaceae, bem como de famílias relacionadas à mesma ordem. Além disso, a presença de constituintes químicos mencionados pela sua atividade biológica desperta o interesse sobre a espécie estudada, no que diz respeito à realização de ensaios de atividade biológica. Com base nos resultados obtidos, pode-se destacar como caracteres farmacognósticos mais relevantes: A ocorrência de tricomas tectores unicelulares, estômatos paracíticos; braquiesclereídes em grupos no pecíolo e na lâmina foliar, além de esclereídes vermiformes e ramiformes; sistema vascular em arco, com extremidades voltadas para o centro no pecíolo e na forma de arco atenuado na lâmina foliar, sendo o padrão de venação uma variação do tipo craspedódromo-semicraspedódromo, além de óleo essencial armazenado em idioblastos oleíferos do parênquima lacunoso. A identificação do β-felandreno (24,0%), seguido por germacreno D (10,5%), sabineno (9,3%), biciclogermacreno (8,4%) e β-elemeno (5,3%) como componentes majoritários, destacando-se que teores de felandrenos superiores a 5% são mencionados na literatura como indesejáveis pela sua ação tóxica. AGRADECIMENTOS À CAPES pela bolsa concedida e ao pesquisador Walter M. Kranz do Instituto Agronômico do Paraná pelo valioso auxílio na coleta e envio de material botânico. Received 5 January 2009 Accepted 2 March 2009 * E-mail: [e-mail] Adams RP 1995. Identification of essential oil components by gas chromatography/ mass spectroscopy. Carol Stream, Illinois: Allured Publishing Corporation. Identification of essential oil components by gas chromatography/ mass spectroscopy 1995 Adams RP Adams RP 2001. Identification of essential oil components by gas chromatography/ mass spectroscopy. 2nd edition, Carol Stream, Illinois: Allured Publishing Corporation. 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