Antioxidant action of teas and seasonings more consumed in Brazil

rbfar Revista Brasileira de Farmacognosia Rev. bras. farmacogn. 0102-695X 1981-528X Sociedade Brasileira de Farmacognosia Curitiba, PR, Brazil Antioxidants are compounds that remove free-radicals or minimize their availability to generate oxidative stress. Teas are popular beverages providing a significant source of phenolic compounds, important components of the human diet due to their antioxidant properties. The present work had the objective of evaluate the antioxidant action of teas and seasonings more consumed in Brazil. The analysed teas were from the plants: Pneumus boldus Mold., Matricaria recutita L., Cymbopogon citratus (DC) Stapf, Baccharis trimera (Less.) DC, Camelia sinensis (L) O. Kuntze (fermented), Camelia sinensis (not-fermented), Lippia alba N.E. Brown, Mentha arvensis L. and Pyrus malus L. The studied seasonings were: Eugenia aromatica Baill, Cinnamonum zeylanicum Blume, Laurus nobilis L. and Origanum vulgare L. The antioxidant activity was measured by the DPPH free radical scavenging method. All analysed samples demonstrated antioxidant activities. Camelia sinensis (not-fermented) (IC50= 0.14 mg/mL), was the most active and active principles are epicalocatechins. The stronger antioxidant seasonings were Cinnamonum zeylanicum (IC50 = 0.37 mg/mL), Eugenia aromatica Baill (IC50= 0.46 mg/ mL and Laurus nobilis (IC50 = 0.76 mg/mL), which presented as main antioxidant component eugenol. ARTIGO Ação antioxidante de chás e condimentos de grande consumo no Brasil Antioxidant action of teas and seasonings more consumed in Brazil Selene M. de Morais*; Eveline S. B. Cavalcanti; Sônia Maria O. Costa; Liza A. Aguiar Laboratório de Química de Produtos Naturais, Curso de Química, Universidade Estadual do Ceará, Av. Paranjana, 1700, 60740-000 Fortaleza-CE, Brasil RESUMO Antioxidantes são compostos que atuam inibindo e/ou diminuindo os efeitos desencadeados pelos radicais livres e compostos oxidantes. Os chás são bebidas populares e fontes significativas de compostos fenólicos, sendo considerados importantes integrantes das dietas devido às suas propriedades antioxidantes. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a ação antioxidante de uma variedade de chás e condimentos mais consumidos no Brasil. Os chás analisados foram das plantas: Pneumus boldus Mold., Matricaria recutita L., Cymbopogon citratus (DC) Stapf, Baccharis trimera (Less.) DC, Camelia sinensis (L) O. Kuntze (fermentado), Camelia sinensis (não-fermentado), Lippia alba N.E. Brown,Mentha arvensis L., e Pyrus malus L. Os condimentos analisados foram: Eugenia aromatica Baill, Cinnamonum zeylanicum Blume, Laurus nobilis L. e Origanum vulgare L. O método utilizado para avaliar a ação antioxidante foi o da atividade seqüestradora de radicais livres DPPH em solução metanólica. Todas as amostras analisadas demonstraram atividade em suas diferentes concentrações. Camelia sinensis (não-fermentada) foi a mais ativa com CI50= 0,14 mg/mL, cujos principais compostos antioxidantes são epigalocatequinas. Os condimentos mais ativos foram Cinnamonum zeylanicum (CI50 = 0,37 mg/mL), Eugenia aromatica Baill (CI50 = 0,46 mg/mL) e Laurus nobilis (CI50 = 0,76 mg/mL), cujo principal antioxidante relatado foi o eugenol. Unitermos: Atividade antioxidante, chás, condimentos. ABSTRACT Antioxidants are compounds that remove free-radicals or minimize their availability to generate oxidative stress. Teas are popular beverages providing a significant source of phenolic compounds, important components of the human diet due to their antioxidant properties. The present work had the objective of evaluate the antioxidant action of teas and seasonings more consumed in Brazil. The analysed teas were from the plants: Pneumus boldus Mold., Matricaria recutita L., Cymbopogon citratus (DC) Stapf, Baccharis trimera (Less.) DC, Camelia sinensis (L) O. Kuntze (fermented), Camelia sinensis (not-fermented), Lippia alba N.E. Brown, Mentha arvensis L. and Pyrus malus L. The studied seasonings were: Eugenia aromatica Baill, Cinnamonum zeylanicum Blume, Laurus nobilis L. and Origanum vulgare L. The antioxidant activity was measured by the DPPH free radical scavenging method. All analysed samples demonstrated antioxidant activities. Camelia sinensis (not-fermented) (IC50= 0.14 mg/mL), was the most active and active principles are epicalocatechins. The stronger antioxidant seasonings were Cinnamonum zeylanicum (IC50 = 0.37 mg/mL), Eugenia aromatica Baill (IC50= 0.46 mg/ mL and Laurus nobilis (IC50 = 0.76 mg/mL), which presented as main antioxidant component eugenol. Keywords: Antioxidant action, teas, seasonings. INTRODUÇÃO Os antioxidantes podem ser definidos como substâncias capazes de retardar ou inibir a oxidação de substratos oxidáveis, podendo estes serem enzimáticos ou não enzimáticos, tais como: α-tocoferol (vitamina E), β-caroteno, ascorbato (vitamina C) e os compostos fenólicos (flavonóides) (Haliwell, 2001; Sousa et al., 2007). O consumo de antioxidantes naturais, como os compostos fenólicos presentes na maioria das plantas que inibem a formação de radicais livres, também chamados de substâncias reativas, tem sido associado a uma menor incidência de doenças relacionadas com o estresse oxidativo (Droge, 2002). O estresse oxidativo ocorre como um desequilíbrio entre o balanço pró-oxidante/antioxidante, em favor da situação pró-oxidante, promovendo um dano potencial. O dano oxidativo que as biomoléculas sofrem está relacionado com as patologias de um grande número de doenças crônicas, incluindo doenças cardiovasculares, câncer e doenças neurodegenerativas (Wiseman et al., 2001; Liao et al., 2001; Javanmardi et al., 2002; Lu & Yeap, 2002; Kim et al., 2003; Mendel & Youdim, 2004). Nos últimos anos, têm-se investigado os efeitos dos antioxidantes em relação às enfermidades, principalmente nos paises desenvolvidos do ocidente. As pesquisas têm tentado explicar os benefícios dos antioxidantes nas enfermidades cardiovasculares, em numerosos tipos de câncer, na AIDS, e inclusive em outros diretamente associados com o processo de envelhecimento, como o das cataratas, doença de Alzheimer e outras alterações do sistema nervoso (Cai et al., 2004; Netzel et al., 2007; Jayaprakasha et al. 2007). Tanto óleos essenciais (Baratta et al., 1998; Ruberto & Baratta, 2000; Morais et al., 2006; Souza et al., 2007) como componentes não voláteis (extratos), extraídos de plantas (Weng & Wang, 2000; Fenglin et al., 2004; Miliauskas et al., 2004; Andrade et al., 2007; Sousa et al., 2007; Balestrin et al., 2008; Nunes et al., 2008), têm sido estudados quanto à avaliação do seu potencial antioxidante, demonstrando alta eficiência. As atividades antioxidantes dos fenóis são devidas às suas propriedades de oxirredução, que permitem agirem como agentes redutores, doadores de hidrogênio e eliminadores de oxigênio singlete (Sousa et al., 2007; Guerra, 2001). Atribui-se o efeito antioxidante das plantas aromáticas à presença de grupamentos hidroxilas em seus compostos fenólicos (Shahidi et al., 1992). Das classes de compostos químicos que são responsáveis pela inibição da peroxidação lipídica, presentes na maioria dos produtos naturais, estão os polifenóis, flavonóides e taninos. Os flavonóides são também responsáveis pela inibição de oxidação do ácido linolêico, oxidação de LDL, peroxidação de fosfolipídeos da membrana, peroxidação lipídica microssomal e mitocondrial, peroxidação de eritrócitos e fotoxidação e peroxidação de cloroplastos (Anila & Vijayalakshmi, 2003; Santanam et al., 2004). Nas pesquisas bibliográficas realizadas por Heim et al., (2002) são citadas diversas ações de flavonóides como antioxidantes, relacionando a química, metabolismo e a relação estrutura atividade. O chá é uma das bebidas mais consumidas e mais antigas do mundo, sendo na literatura referido como uma das melhores fontes de compostos fenólicos (Lima et al., 2004). Os primeiros relatos de seu uso datam do século 27 a.C., sendo considerado como uma das mais antigas bebidas produzidas por via biotecnológica e praticada pelo ser humano. Os chás têm atraído muita atenção nos últimos anos devido a sua capacidade antioxidante e sua abundância na dieta de milhares de pessoas em todo o mundo. São ricos em catequinas, flavonóides que apresentam propriedades biológicas como atividade antioxidante e seqüestradoras de radicais livres. Os chás ingeridos na forma de infusão contribuem para a extração dos compostos fenólicos, considerados benéficos à saúde (Higdon & Frei, 2003; Mendel & Youdim, 2004; Bunkova et al., 2005). Os condimentos são mundialmente utilizados para aumentar e/ou acrescentar sabor ao alimento, e, secundariamente, com finalidade de conservação, devido às suas propriedades antimicrobianas e antioxidantes. Os condimentos, por exemplo, da família Lamiaceae têm sido extensivamente estudados devido ao caráter antioxidante de seus compostos fenólicos, porém apenas o alecrim tem sido mais amplamente utilizado em produtos alimentícios. Mariutti & Bragagnolo (2007) em sua revisão sobre os principais antioxidantes naturais da família Laminaceae abordam os compostos responsáveis pela atividade antioxidante e suas aplicações em produtos alimentícios. Vários estudos relatam a presença de antioxidantes em chás, mas a metodologia utiliza extratos obtidos por solventes orgânicos das folhas secas. Há poucos relatos sobre os compostos fenólicos e atividade antioxidante em infusões de ervas. Assim como os chás, várias espécies de condimentos demonstram interesse quanto à avaliação do potencial antioxidante devido seu uso comum na culinária brasileira. Neste trabalho foram avaliados, quanto a sua atividade antioxidante, vários chás e condimentos que são largamente consumidos pela população brasileira para os mais diversos fins (Tabela 1). MATERIAL E MÉTODOS Material vegetal As amostras de chás e de condimentos utilizadas foram obtidas em redes de supermercado da cidade de Fortaleza (Ceará). Os chás utilizados foram: boldo (Peumus boldus Mold.,), camomila (Matricaria recutita L.), capim santo (Cymbopogon citratus (DC) Stapf), carqueja (Baccharis trimera (Less.) DC), chá preto (Camelia sinensis (fermentado)), chá verde (Camelia sinensis (L) O. Kuntze (não-fermentado)), cidreira (Lippia alba N.E. Brown), hortelã (Mentha arvensis L.), e maçã (Pyrus malus L.). Os condimentos utilizados foram: cravo (Eugenia aromatica Baill), canela (Cinnamonum zeylanicum Blume), louro (Laurus nobilis L.) e orégano (Origanum vulgare L.). Avaliação da ação antioxidante Para avaliação da atividade antioxidante foi utilizado o método seqüestrador de radicais livres DPPH (1,1-difenil-2-picril-hidrazila) descrito por Yepez et al. (2002) e Fenglin et al., (2004) com pequenas modificações como segue: em um tubo de ensaio, foram colocados 2,0 mL de uma solução metanólica de radical livre DPPH 6,5 x 10-5 M. Em seguida foram adicionados ao tubo 2,0 mL da solução metanólica do extrato (0,1 g/mL) a ser testado. Após 20 minutos de reação, foi medida a absorbância em um espectrofotômetro Spekol 1100 no comprimento de onda de 517 nm. O procedimento foi feito em diferentes concentrações para cada uma das amostras pesquisadas. A atividade antioxidante dos extratos desses chás foi determinada através da sua capacidade de seqüestrar o radical DPPH. O método é baseado na variação da absorbância obtida por uma perda estequiométrica da cor da solução do radical na presença de substâncias antioxidantes presentes na amostra do extrato, para calcular o Índice de Varredura (IV) do DPPH em percentual foi usada a fórmula: IV% = (ADPPH - A/ADPPH) x 100 Onde ADPPH é a absorbância inicial da solução de DPPH e A é a absorbância final, decorridos 20 minutos de reação. Para comparação, usou-se o Eugenol como padrão na proporção molar eugenol/DPPH de 0,5 mg/mL. Com os resultados dos IV% obtidos na leitura da absorbância das diferentes concentrações de cada uma das amostras foi possível calcular o índice capaz de inibir 50% dos radicais livres (CI50) (Lee et al., 2003). RESULTADOS E DISCUSSÃO Na Tabela 1 encontram-se os dados obtidos dos testes da atividade antioxidante dos chás e condimentos comumente consumidos pela população brasileira, juntamente com a constituição química e uso popular de cada espécie estudada. Os resultados variaram em função do tipo de chá e do condimento. Dentre as amostras analisadas, as que se mostraram mais eficientes frente aos radicais livres foram: chá verde (Camelia sinensis (não-fermentada)) com IC50 de 0,14 mg/mL, canela (Cinnamonum zeylanicum) com CI50 de 0,37 mg/mL, cravo (Eugenia aromatica) com CI50 de 0,46 mg/mL, louro (Laurus nobilis) com CI50 de 0,76 mg/mL e chá preto (Camelia sinensis (fermentada)) com CI50 de 0,96 mg/mL. O bom poder antioxidante dessas plantas pode ser explicado pela presença de substâncias capazes de inibir os radicais livres. Basicamente há três tipos de chás tendo como nome científico Camelia sinensis, que são mais consumidos mundialmente: chá verde (sem fermentação), Oolong (parcialmente fermentado) e chá preto (totalmente fermentado). Os constituintes mais importantes das folhas do chá de Camelia sinensis são compostos fenólicos, em especial taninos (ácido gálico) e flavonóides (quercetina, miricetina, canferol e catequinas) (Lima et al., 2004; Matsubara & Rodriguez-Amaya, 2006; Bettelheim et al., 1995; Ferrara et al., 2001). De acordo com dados da literatura (Schmitz et al., 2005) as catequinas são polifenóis responsáveis pela cor e corpo do chá, que correspondem a 26,7% dos compostos presentes na espécie Camelia sinensis (chá verde), dos quais 11% são constituídos de galato-3-epigalocatequina (EGCG), 10% galato-3-epicatequina (EGC), 2,5% epicatequina (EC) e 2% epigalocatequina (ECG). Neste estudo, a substância que apresentou maior atividade antioxidante foi a EGCG (Figura 1). Os condimentos analisados que obtiveram os melhores CI50, canela (Cinnamonum zeylanicum), cravo (Eugenia aromatica Baill), e louro (Laurus nobilis) têm em sua constituição um forte antioxidante como o eugenol, um composto fenólico (4-alil-2-metoxifenol) (Figura 1), cuja eficácia já foi comprovada tanto in vitro como in vivo (Ito et al., 2005). Todos os materiais testados demonstraram ação antioxidante em suas diferentes concentrações. O bom desempenho desses produtos deve-se à presença de flavonóides, catequinas e outros compostos fenólicos já relatados na literatura como capazes de inibir os radicais livres presentes no organismo. As variedades de chás e condimentos testadas possuem um bom potencial antioxidante quando comparadas com o eugenol cuja atividade já é comprovada. Portanto o conhecimento das propriedades antioxidantes dos produtos de nosso consumo diário pode direcionar a população apropriadamente na escolha de um produto com maior poder medicinal. Os resultados descritos neste trabalho estimulam a continuidade da pesquisa para avaliar o poder antioxidante de substãncias isoladas das espécies estudadas. AGRADECIMENTOS Os autores agradecem ao Programa Institucional de Bolsas de Iniciação Científica - PIBIC/CNPq da Universidade Estadual do Ceará e a FUNCAP, pelo apoio financeiro para o desenvolvimento deste trabalho. REFERÊNCIAS Andrade CA, Costa CK, Bora K, Miguel MD, Miguel OG, Kerber VA2007. 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