Inibidores de proteases encontrados em sementes de Caesalpinia echinata (paubrasil): isolamento e caracterização do inibidor de tripsina

Resumo

Caesalpinia echinata, o pau-brasil, é uma árvore pertencente à família das Leguminosas, sub-família Caesalpinoidae. Como já foram encontrados inibidores de proteases em sementes de outras Leguminosas, o objetivo do trabalho é purificar e caracterizar o inibidor de tripsina extraído das sementes de C. echinata. Após extração salina e precipitação por acetona, os inibidores foram purificados por cromatografia de troca iônica e filtração em gel, apresentando massas moleculares de 19,5 e 10 kDa e constante de inibição da ordem de nM.


Inibidores de proteases encontrados em sementes de Caesalpinia echinata (paubrasil) – isolamento e caracterização do inibidor de tripsina

Lúcio Garcia de Oliveira; Andrezza Justino Gozzo; Viviane Abreu Nunes; Ilana Cruz Silva; Misako Uemura Sampaio; Claudio Augusto Machado Sampaio; Mariana da Silva Araújo* * mariana.bioq@epm.br

Departamento de Bioquímica, Universidade Federal de São Paulo, Rua Três de Maio, 100, 04044-020, São Paulo, SP, Brasil

RESUMO

Caesalpinia echinata, o pau-brasil, é uma árvore pertencente à família das Leguminosas, sub-família Caesalpinoidae. Como já foram encontrados inibidores de proteases em sementes de outras Leguminosas, o objetivo do trabalho é purificar e caracterizar o inibidor de tripsina extraído das sementes de C. echinata. Após extração salina e precipitação por acetona, os inibidores foram purificados por cromatografia de troca iônica e filtração em gel, apresentando massas moleculares de 19,5 e 10 kDa e constante de inibição da ordem de nM.

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Afgradecimentos

FAPESP, CNPq e FADA-UNIFESP/EPM.

  • 1 Oliva MLV, Souza-Pinto JC, Batista IFC, Araújo MS, Silveira VF, Auerswald EA, Mentele R, Eckerskorn C, Sampaio UM, Sampaio CAM. Leucaena leucocephala serine proteinase inhibitor: primary structure and action on blood coagulation, kinin release and rat paw edema. Biochimica et Biophysica Acta. 2000; 1477: 64-74
  • 2 Batista IFC, Araújo MS, Sampaio MU, Richardson M, Fritz H, Sampaio CAM. Primary structure of a Kunitz-type trypsin inhibitor from Enterolobium contortisiliquum seeds. Action on blood clotting phase enzymes. Phytochemistry. 1996; 41:1017-22
  • 3 Karlin S, Zuker M, Brocchieri L. Measuring residue associations in protein structures; possible implications for protein folding. Journal of Molecular Biology 1994; 239: 227-48
  • 4 Barros C, Crosby JA, Moreno RD. Early steps of sperm-egg interactions during mammalian fertilization. Cell Biology. International. 1996; 20 (1): 33-9
  • 5 Schmaier AH. Contact activation: a revision. Thrombosis and Haemostasis 1997; 78 (1): 101-7
  • 6 Cohen GM. Caspases: the executioners of apoptosis. The Biochemical Journal. 1997; 326: 1-16
  • 7 Rafati S, Bara AA, Bakhshayeh M, Vafa M. Vaccination of BALB/c mice with Leishmania major amastigote-specific cysteine proteinase. Clinical and Experimental Immunology. 2000; 120 (1): 134-8
  • 8 DeClerk YA, Imren S. Proteases inhibitors: role and potential therapeutic use in human cancer. European Journal of Cancer 1994; 30A: 2170-80
  • 9 Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantification of microgam quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Analytical Biochemistry. 1976; 263 (32): 16626-30
  • 10 Oliva MLV, Sampaio UM, Sampaio CAM. Serine and SHproteinase inhnibitors from Enterolobium contortisiliquum beans. Purification and preliminary characterization. Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 1988; 20: 767-70
  • 11 Morrison JF. The slow binding and slow tight-binding inhibition of enzyme-catalysed reactions. Trends in Biochemical Sciences. 1982; March:102-5
  • 12 Laemmli UK. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature. 1970; 227 (259): 680-685

Datas de Publicação

  • Publicação nesta coleção
    05 Out 2009
  • Data do Fascículo
    2002
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