Caracterização molecular do sistema de grupo sangüíneo Dombrock em uma população brasileira

Molecular characterization of the Dombrock blood group system in a Brazilian population

RESUMO DE TESE THESIS

Caracterização molecular do sistema de grupo sangüíneo Dombrock em uma população brasileira

Molecular characterization of the Dombrock blood group system in a Brazilian population

Wilson Baleotti Jr

^{Endereço para correspondência}

Orientadora

Lilian M. de Castilho

RESUMO

O sistema de grupo sangüíneo Dombrock é constituído por um par de antígenos antitéticos, Doa e Dob e três antígenos de alta freqüência populacional, Gregory (Gya), Holley (Hy) e Joseph (Joa). O gene DO, que codifica os antígenos do sistema Dombrock, foi recentemente clonado e suas bases moleculares foram elucidadas.

Os antígenos Doa e Dob, são controlados pelos alelos DOA e DOB, que estão associados à troca de três nucleotídeos no exon 2 do gene DO: 378C/T, 624T/C e 793A/G, respectivamente. O fenótipo Jo(a–) está associado com a substituição 350C/T, que caracteriza o alelo JO. O fenótipo Hy–negativo está associado à presença de um dos alelos: HY1 ou HY2. O alelo HY2 é caracterizado pela substituição 323G/T. Uma substituição adicional 898C/G, no exon 3, caracteriza o gene HY1. Recentemente, dois novos alelos do gene DO foram descritos: DOB–SH (378C, 624C, 793G) e DOA–HA (378T, 624T, 793A).

Considerando que as bases moleculares dos antígenos Dombrock foram elucidadas; que novos alelos têm sido descritos; a miscigenação da população brasileira e que, até o momento, nenhum estudo foi realizado sobre a freqüência dos genes Dombrock na nossa população, nós analisamos 450 amostras de DNA, através das técnicas de PCR–RFLP e Microarrays® – HEA Beadchip, com a finalidade de determinar a freqüência dos alelos DO (DOA, DOB, HY1, HY2, JO).

Dois novos alelos foram identificados baseados em novas combinações de SNPs: alelo DOB–WL (793G, 898G, 323G) e alelo DOA–SH (378C, 624C, 793A). Nossos dados demonstram uma grande complexidade e heterogeneidade dos alelos Dombrock na população brasileira e confirmam a necessidade do estudo molecular em diferentes populações.

ABSTRACT

The molecular basis of the Doa and Dob polymorphisms are associated with three single–nucleotide polymorphisms (SNPs) on exon 2 of the DO gene: 378C>T, 624T>C and 793A>G, the DOA and DOB alleles. The SNPs 350C>T (JO allele) and 323G>T (HY allele) are associated with: Jo(a–) and Hy–negative phenotypes. Recently, two new DO alleles were identified using microarray technology, DOB–SH (378C, 624C, 793G) and DOA–HA (378T, 624T, 793A). Although the molecular background of the Dombrock system is well defined, no studies have been carried out in the Brazilian population.

We used PCR–RFLP based assays and a microarray assay to determine the frequency of the DO alleles (DOA, DOB, HY1, HY2 and JO) in Brazilians. We tested the DNA of 288 individuals by PCR–RFLP to determine the 793A>G (DOA/DOB), 323G>T (HY), 350C>T (JO) and 898C>G (HY1/HY2) SNPs. We also tested DNA from 162 blood donors using HEA BeadchipTM (BioArray Solutions, USA) to determine the 378C>T, 624T>C, 793A>G (DOA/DOB), 350C>T (JO allele) and 323G>T (HY) SNPs.

Two novel allelic combinations were found in our samples: the 793G SNP (DOB allele) associated with 898G and 323G (DOB–WL) and the 378C, 624C, 793A and 323G (DOA–SH) SNPs. We also found the recently reported DOB–SH and DOA–HA alleles.

Our data demonstrate the high heterogeneity of DO alleles in the Brazilian population and highlight the importance of testing a cohort of different populations to determine DO allelic combinations and establish reliable genotyping to predict the Doa/Dob antigen status.

Recebido: 06/09/2006

Aceito: 26/09/2006

Tese de Doutorado apresentada à Pós–graduação da Faculdade de Ciências Médicas da Universidade Estadual de Campinas para obtenção do grau de Doutor em Clínica Médica na área de Ciências Básicas.

Avaliação: A Revista Brasileira de Hematologia e Hemoterapia publica os resumos e abstracts de teses da área apresentados em entidades que tenham programas de pós–graduação reconhecidos pelo MEC/Capes e considera a obtenção do título suficiente para sua publicação na forma como se propõe a seção.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  12 Nov 2007
• Data do Fascículo
  Jun 2007