Análise in vitro da eficácia do amitraz sobre populações de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) da região sul do Rio Grande do Sul

In vitro analysis of amitraz efficacy against Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) populations of southern region of Rio Grande do Sul state

ARTIGO COMPLETO

Análise in vitro da eficácia do amitraz sobre populações de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) da região sul do Rio Grande do Sul

In vitro analysis of amitraz efficacy against Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini, 1887) populations of southern region of Rio Grande do Sul state

Tânia Regina Bettin dos Santos^I,V; Felipe Geraldes Pappen^II; Nara Amélia da Rosa Farias^III; Itabajara da Silva Vaz Junior^IV,V

^IFaculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas - UFPel

^IIPrograma de Pós Graduação em Veterinária, Universidade Federal de Pelotas - UFPel

^IIIDepartamento de Microbiologia e Parasitologia, Instituto de Biologia, Universidade Federal de Pelotas - UFPel

^IVFaculdade de Veterinária e Centro de Biotecnologia, Universidade Federal do Rio Grande do Sul - UFRGS

^VPrograma de Pós Graduação em Ciências Veterinárias, Universidade Federal do Rio Grande do Sul - UFRGS

^{Autor para correspondência}

RESUMO

Formulações comerciais à base de amitraz são muito utilizadas como acaricidas na Região Sul do Rio Grande do Sul, contudo sem maiores estudos da sua eficácia nessa região. O presente estudo objetivou estimar a frequência de populações de R. (B.) microplus resistente ao amitraz na Região Sul do Rio Grande do Sul, e comparar a eficácia de cinco produtos comerciais à base desse princípio ativo. Os resultados demonstraram que, em 23% das populações estudadas, o amitraz teve uma eficácia inferior a 69%. Em 29% dessas amostras de carrapatos, o grau de eficácia foi igual a zero, sugerindo a presença de altos níveis de resistência ao amitraz. Além disso, o produto comercial mais utilizado na região demonstra o menor índice de eficácia. Esses resultados alertam sobre a possibilidade da dispersão de populações de carrapatos resistentes, o que justifica a necessidade de direcionar pesquisas visando a novas alternativas e produtos para o controle desse parasito.

Palavras-chave: Eficácia, resistência, ixodidae, carrapato, bovino

ABSTRACT

Commercial formulation of the amitraz is the most used acaricide in the southern region of Rio Grande do Sul State, however scientific data about the efficacy of these products in this region are sparse. The aim of the present study was to evaluate the frequency of R. (B.) microplus populations resistant to amitraz acaricides in the Southern region of Rio Grande do Sul State. So, the efficacies of five commercial products containing amitraz were compared. Results showed that the efficacy of amitraz acaricides was lower than 69% in 23% of studied populations. Nearly 29% of the tick samples showed an acaricide efficacy equal to zero, suggesting the presence of a high level of resistance to amitraz. Moreover, the most used commercial product in the region showed the lowest efficacy index. These results alert about the possible spreading of resistant on tick populations and justify research directed toward the search for alternative products to control this parasite.

Keywords: Efficacy, resistance, ixodidae, tick, bovine

Introdução

O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por grandes prejuízos na pecuária bovina brasileira, tanto pelas lesões no couro, queda de produção, e transmissão de doenças, quanto pelos custos e aplicação dos acaricidas (HORN, 1983; VERÍSSIMO, 1993; SILVA et al., 2000).

A utilização de acaricidas para o controle de carrapato ainda é o método mais utilizado e eficaz, apesar de vários relatos de resistência aos diferentes princípios ativos (FAO, 2004). O aparecimento e manutenção de populações de carrapatos resistentes aos acaricidas dependem de muitos fenômenos, os quais podem ser divididos em fatores biológicos e operacionais (DENHOLM; ROWLAND, 1992).

Os fatores biológicos são aqueles relacionados diretamente com o parasito e correspondem a aspectos genéticos, ecológicos, comportamentais e fisiológicos. Esses fatores incluem a dominância dos heterozigotos, a velocidade de mutação, o potencial reprodutivo dos indivíduos (GUERREIRO et al., 2001) e mecanismos que envolvem fatores bioquímicos, como a detoxicação enzimática (MENDES et al., 2001a; VAZ JUNIOR et al., 2004). Esses fatores estão fora do controle direto do homem sendo necessário estudá-los para poder explorar os possíveis impactos sobre a taxa de seleção de indivíduos resistentes, e desenvolver estratégias de controle que minimizem a pressão de seleção, como o desenvolvimento de novos métodos de controle (PARIZI et al., 2009).

Os fatores operacionais são aqueles que estão relacionados ao controle realizado pelo homem e referem-se à eleição dos produtos, à frequência de aplicação, à concentração, ao método de aplicação (DENHOLM; ROWLAND, 1992), além da eficácia do produto comercial utilizado.

Até o início da década de 70, era comum associar a eficácia clínica do medicamento apenas à atividade intrínseca do fármaco, sem avaliar as interferências de sua formulação. No entanto, várias evidências demonstram que os componentes da formulação e as técnicas de fabricação também influenciam, podendo, em alguns casos, dar origem a um produto ineficaz ou até mesmo tóxico. Assim, não é raro que produtos comerciais com o mesmo princípio ativo tenham diferença no grau de eficácia. Segundo Guimarães et al. (2003), a garantia de qualidade dos medicamentos compreende a combinação entre fármaco (princípio ativo) e excipientes e/ou veículos. Portanto, é necessário que a formulação empregada seja capaz de liberar o fármaco na quantidade e na velocidade adequadas, de modo a garantir a eficácia do tratamento (STORPIRTIS et al., 2004).

Farias et al. (2008) relatou que, nos últimos anos, em razão do aumento da resistência aos piretroides, estes foram substituídos pelas formamidinas (amitraz), com os inconvenientes de ter baixa ação inseticida, não atuar em pH ácido e já existirem populações resistentes a esses produtos, que precisavam ser controladas por meio da utilização de endectocidas e fluazuron. A resistência ao amitraz é descrita por vários autores no Brasil (MENDES et al., 2001b; SANTOS et al., 2008).

Os casos de resistência ao amitraz têm sido pontuais e com uma lenta disseminação (MENDES et al., 2001b, GEORGE et al., 2004). Apesar disso, Farias et al. (2008), entre março de 2003 e fevereiro de 2006, observaram que, em municípios da Região Sul do Rio Grande do Sul, os produtos à base de amitraz são amplamente comercializados, tendo sido utilizados em 85% das propriedades durante este período.

Assim, o presente estudo, além de estimar a frequência de populações de R. (B.) microplus resistentes ao amitraz no Sul do Rio Grande do Sul, também teve como objetivo comparar a eficácia de cinco diferentes produtos comerciais à base desse princípio ativo e verificar os produtos acaricidas mais utilizados na região.

Material e Métodos

O trabalho foi realizado em propriedades de bovinos de corte e/ou leite, em 11 municípios (Piratini, Pedro Osório, Cerrito, Rio Grande, Canguçu, Morro Redondo, Capão do Leão, Pelotas, Herval, Arroio Grande e Pinheiro Machado), da Região Sul do Rio Grande do Sul, durante o período de maio de 2005 a abril de 2007.

Nesse período, foram entrevistados 100 pecuaristas, sobre os produtos carrapaticidas (produtos comerciais) utilizados em suas fazendas, com o intuito de saber qual o produto comercial mais utilizado na região.

Nessa mesma região, foram processadas fêmeas ingurgitadas de 34 propriedades rurais.

A amostragem, tanto as entrevistas quanto as fêmeas ingurgitadas, foram obtidas por conveniência, ou seja, informações de 100 proprietários que solicitaram teste de eficácia acaricida ao Laboratório de Parasitologia do Departamento de Microbiologia e Parasitologia do Instituto de Biologia da Universidade Federal de Pelotas (UFPel). Quando havia um excedente de carrapatos, as amostras eram processadas pelo teste de Drummond et al. (1973), frente a cinco acaricidas comerciais à base de amitraz. Assim ao longo do período, foi possível testar 34 amostras de carrapato.

Cada grupo experimental foi constituído de duas repetições, contendo cada uma 10 fêmeas ingurgitadas com tamanho e peso homogêneos. Os grupos foram imersos por cinco minutos, nas diluições dos produtos comerciais testados, sendo o grupo controle imerso em água destilada.

Os carrapatos foram removidos da imersão com o auxilio de um tamis, secos em toalha de papel absorvente, colocados em placas de Petri e mantidos na estufa a 27 ºC, com umidade relativa (UR) superior a 70% para posterior avaliação. No 15º dia de incubação, foi mensurada a massa de ovos aparentemente férteis (coloração marrom-clara, brilhantes e agrupados) de cada grupo, sendo incubada para a análise da eclodibilidade (no 30º dia de incubação). A partir desses dados, foi avaliada a eficácia de cada produto comercial, pelas seguintes Equações 1 e 2, segundo Drummond et al. (1973):

Os cinco produtos à base de amitraz utilizados no experimento foram: Amitraz 1 = Taktic^® (Intervet), Amitraz 2 = Triatox^® (Schering-Plough), Amitraz 3 = Amipur^® (Vetbrands), Amitraz 4 = Amitox^® (Leivas Leite), Amitraz 5 = Biotox^® (Biofarm). Os resultados obtidos com os produtos comerciais referem-se ao lote e partida dos produtos testados e não devem ser extrapolados para todos os lotes e partidas dos produtos.

A análise estatística da eficácia dos cinco produtos à base de amitraz foi realizada pelo teste de Qui-quadrado (SAMPAIO, 2002), por meio do programa Statistix 8.0.

Resultados e Discussão

A eficácia ao amitraz das cinco diferentes formulações comerciais utilizadas no experimento está apresentada na Tabela 1.

Evidencia-se uma diferença de eficácia entre os cinco produtos à base de amitraz, sendo o percentual de propriedades com grau de eficácia superior a 90% inferior no amitraz 3.

Avaliando o produto amitraz 1, amplamente utilizado em ensaios biológicos, os resultados do teste de Drummond demonstraram que, em 23% das populações estudadas, o amitraz teve uma eficácia inferior a 69%, indicando, portanto, a presença de populações resistentes a este princípio ativo. A resistência ao amitraz no Brasil foi descrita por Mendes et al. (2001b) e Santos et al. (2008).

Entre as populações com eficácia inferior a 69%, observaram-se 29% das amostras de R. (B.) microplus com grau de sensibilidade igual a zero, sugerindo, dessa forma, uma grande disseminação da resistência ao amitraz.

Verificaram-se diferentes graus de eficácia dos produtos à base de amitraz (Tabela 1), principalmente o amitraz 3, que demonstrou eficácia inferior, concordando com Storpiritis (1999) e Guimarães et al. (2003). Esses autores afirmam que produtos com o mesmo principio ativo podem ter graus de eficácia diferentes, seja por estarem em subdose, por deficiência nos veículos e/ou estabilizantes ou, ainda, por mau uso desses produtos.

Além disso, os cinco produtos à base de amitraz testados, demonstraram eficácia mínima de zero e máxima de 100%, fortalecendo a afirmação de George et al. (2004) de que os casos de resistência ao amitraz têm sido pontuais e com uma lenta disseminação.

Essas observações são importantes, pois os produtos à base de amitraz são os mais utilizados na região; 60% dos proprietários entrevistados utilizam carrapaticidas com esta formulação. Esse percentual é inferior ao verificado por Farias et al. (2008), apesar de serem ainda os produtos mais comercializados. Os endectocidas ocupam a segunda posição, sendo utilizados em 22% das propriedades, seguidos das associações de piretroides com fosforados (10%) e, em menor volume, são utilizados os piretroides, associação de amitraz com fosforados, fipronil e fluazuron.

Entre os produtos comerciais mais utilizados no momento, o amitraz 3 representa 67% do mercado, seguido do amitraz 1 (15%), amitraz 2 (12%) e amitraz 4 (6%). O amitraz 5, por ser um produto novo e ainda com baixo grau de comercialização, não é utilizado em nenhuma propriedade analisada.

Ao comparar a eficácia e o uso dos produtos comerciais, observa-se, na Figura 1, que o produto mais utilizado (amitraz 3) é também o que possui a menor eficácia. Esse fator operacional (DENHOLM; ROWLAND, 1992), sem dúvida, contribui fortemente para a seleção de populações de R. (B.) microplus resistentes a esse princípio ativo, na Região Sul do Rio Grande do Sul.

Conclusões

Na Região Sul do Rio Grande do Sul, existem populações de R. (B.) microplus nas quais o amitraz possui baixa eficácia, e também diferenças entre a eficácia de produtos comerciais à base do principio ativo.

Este estudo alerta quanto à importância dos fatores operacionais, pois produtos comerciais de marcas diferentes, com o mesmo princípio ativo, podem ter diferentes graus de eficácia. Assim, a escolha de um produto comercial de menor eficácia pode acelerar a seleção de populações de R. (B.) microplus resistentes. Além disso, esta pesquisa alerta sobre a seleção e disseminação de novas populações resistentes ao amitraz, sendo fundamental o direcionamento de pesquisas que busquem novas alternativas e/ou produtos para o controle desse parasito.

DRUMMOND, R. O. et al. Boophilus annulatus and B. microplus: laboratory tests of insecticides. Journal of Economic Entomoloy, v. 66, n. 1, p. 130-133, 1973.

FARIAS, N. A.; RUAS , J. L.; SANTOS, T. R. B. Análise da eficácia de acaricidas sobre o carrapato Boophilus microplus, durante a última década, na região sul do Rio Grande do Sul. Ciência Rural, v. 38, n. 6, p. 1700-1704, 2008.

FOOD AND AGRICULTURE ORGANIZATION - FAO. Guidelines resistance management and integrated parasite control in ruminants. Roma: Food and Agriculture Organization of the United Nations, 2004. p. 77.

GEORGE, J. E.; POUND, J. M.; DAVEY, R. B. Chemical control of ticks on cattle and resistance of these parasites to acaricides. Parasitology, v. 129, p. 353-366, 2004.

GUERREIRO, F. D.; DAVEY, R. B.; MILLER, R. J. Use of an allele-specific polymerase chain reaction assay to genotype pyrethroid resistant strains of Boophilus microplus (Acari: Ixodidae). Journal of Medical Entomology, v. 38, n. 1, p. 44-50, 2001.

GUIMARÃES, M. C. L. et al. O registro sanitário do medicamento similar no Brasil e suas implicações na Saúde Pública: a responsabilidade do Estado frente à vulnerabilidade da população. Revista Infarma, v. 15, n. 7/8, p. 91-98, 2003.

HORN, S. C. Prováveis prejuízos causados pelos carrapatos no Brasil. 2 ed. Brasília: Ministério da Agricultura, 1983. 79 p. (Boletim de Defesa Sanitária Animal, n. especial).

MENDES, M. C.; SILVA, M. X.; BRACCO, J. E. Teste bioquímico para determinar a resistência de duas cepas do carrapato Boophilus microplus (Canestrini, 1887) Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, v. 10, n. 2, p. 61-65, 2001a.

MENDES, M. C. et al. Biossays for measuring the acaricides susceptibility of cattle tuck Boophilus microplus (Canestrini, 1887) in São Paulo state, Brazil. Arquivos do Instituto Biológico, v. 68, n. 2, p. 23-27, 2001b.

PARIZI, L. F. et al. New approaches toward anti-Rhipicephalus (Boophilus) microplus tick vaccine. Revista Brasileira de Parasitologia Veterinária, v. 18, n. 1, p. 1-7, 2009.

SAMPAIO, I. B. M. Estatística aplicada à experimentação animal. Belo Horizonte: FEPMVZ, 2002. 265 p.

SANTOS, T. R. B. et al. Uso de acaricidas em Rhipicephalus (B.) microplus de duas regiões fisiográficas do Rio Grande do Sul. Acta scientiae Veterinarie, v. 6, n. 1, p. 25-30, 2008.

SILVA, M. C. L.; SOBRINHO, R. N.; LINIARES, G. F. C. Avaliação in vitro da eficácia do Clorfenvinfós e da Cialotrina sobre o Boophilus microplus, colhidos em bovinos da bacia leiteira da microrregião de Goiânia - Goiás. Ciência Animal Brasileira, v. 1, n. 2, p. 143-148, 2000.

STORPIRTIS, S. et al. A equivalência farmacêutica no contexto da intercambialidade entre medicamentos genéricos e de referência: bases técnicas e científicas. Brasília: Anvisa, 2004. Disponível em: <http://www.anvisa.gov.br/divulga/artigos/genericos_referencia.pdf>. Acesso em: Maio 2009.

VAZ JÚNIOR, I. S. et al. Effect of acaricides on the activity of a Boophilus microplus glutathione S-transferase. Veterinary Parasitology, v. 119, n. 2/3, p. 237-245, 2004.

Recebido em 12 de Julho de 2007

Aprovado em 28 de Maio de 2009

• DENHOLM, I.; ROWLAND, M. W. Tactics for managing pesticide resistance in arthropods: theory and practice. Annual Review of Entomology, v. 37, n. 1, p. 91-112, 1992.
• VERÍSSIMO, C. J. Controle do carrapato dos bovinos Jaboticabal: FUNEP, 1993. 26 p.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  12 Abr 2012
• Data do Fascículo
  Dez 2009