Extrato metílico de Leptospira interrogans sorovar canicola foi purificado por precipitação com acetona ou acetona e clorofórmio. A antigenicidade não foi alterada por aquecimento ou tratamento com pepsina e pronase, entretanto foi perdida quando o antígeno foi tratado com ácido periódico. Análise química revelou a presença de 40% de carboidrato (22% de metilpentose, 28% de hexose), 4% de proteína, 20% de lípide e 2,7% de fosfato. Reação de fixação de complemento realizada com soros de pacientes com leptospirose apresentou concordância com a reação de aglutinação microscópica.