Immunoperoxidase for the detection for the detection of antibodies in cerebrospinal fluid in neurocysticercosis: use of Cysticercus cellulosae and Cysticercus longicollis particles fixed on microscopy slides

Imunoperoxidase para detecção de anticorpos em líquido cefalorraquiano na neurocisticercose: emprego de partículas de Cysticercus cellulosae e Cysticercus longicollis fixadas a lâminas de microscopia

Abstracts

The ORF strain of Cysticercus longicollis represents an important model for the study of heterologous antigens in the immunodiagnosis of neurocysticercosis (NC). The immunoperoxidase (IP) technique was standardized using a particulate antigen suspension of Cysticercus longicollis (Cl) and Cysticercus cellulosae (Cc). Cerebrospinal fluid (CSF) samples were incubated on the antigen fixed to microscopy slides; the conjugate employed was anti-IgG-peroxidase and the enzymatic reaction was started by covering the slides with chromogen solution (diaminobenzidine/H2O2). After washing with distilled water, the slide was stained with 2% malachite green in water. Of the CSF samples from 21 patients with NC, 19 (90.5%) were positive, whereas the 8 CSF samples from the control group (100%) were negative. The results of the IP-Cl test applied to 127 CSF samples from patients with suspected NC showed 28.3% reactivity as opposed to 29.1 % for the IP-Cc test. The agreement index for the IP test (Cl x Cc) was 94.2%, with no significant difference between the two antigens.

Immunoperoxidase; Neurocysticercosis; Cysticercus cellulosae; Cysticercus longicollis; Cerebrospinal fluid


A cepa ORF de Cysticercus longicollis (Cl) representa importante modelo para estudo de antígenos heterólogos no imunodiagnóstico da neurocisticercose (NC). Foi padronizada a técnica de imunoperoxidase (IP) empregando suspensão antigênica particulada. Amostras de líquido cefalorraquiano (LCR) foram incubadas sobre o antígeno fixado em lâminas de microscopia, o conjugado empregado foi anti-IgG-Peroxidase, a reação enzimática iniciou-se ao cobrirem-se as lâminas com solução cromógena (Diaminobenzidina/H2O2). Após lavagens em água destilada, a lâmina foi corada com verde malaquita a 2% em água. De 21 LCR de pacientes com NC, 19 (90,5%) foram reativos e 8 (100%) LCR do grupo controle foram não reativos. Os resultados do teste IP-Cl ensaiando 127 LCR dc pacientes com suspeita de NC mostrou 89,7% de concordância com o teste ELISA empregando extrato salino de Cysticercus cellulosae (Cc) e 94,2% de concordância com o teste IP-Cc.

Immunoperoxidase; Neurocysticercosis; Cysticercus cellulosae; Cysticercus longicollis; Cerebrospinal fluid


PARASITOLOGY

Immunoperoxidase for the detection for the detection of antibodies in cerebrospinal fluid in neurocysticercosis: use of Cysticercus cellulosae and Cysticercus longicollis particles fixed on microscopy slides

Imunoperoxidase para detecção de anticorpos em líquido cefalorraquiano na neurocisticercose: emprego de partículas de Cysticercus cellulosae e Cysticercus longicollis fixadas a lâminas de microscopia

Ana Paula Franco de AndradeI,1 1 Supported by: CNPq-PIBIC/FCF/USP - 1994/95. ; Adelaide Jose VazI; Paulo Mutuko NakamuraII; Viviana Silvia E. Boccardi PalouIII; Regina Ayr Florio da CunhaI; Antonio Walter FerreiraIV

IFaculdade de Ciências Farmacêuticas da Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil

IIInstituto Adolfo Lutz, São Paulo, SP, Brasil

IIIFaculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil

IVInstituto de Medicina Tropical de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil

Correspondence to

SUMMARY

The ORF strain of Cysticercus longicollis represents an important model for the study of heterologous antigens in the immunodiagnosis of neurocysticercosis (NC). The immunoperoxidase (IP) technique was standardized using a particulate antigen suspension of Cysticercus longicollis (Cl) and Cysticercus cellulosae (Cc). Cerebrospinal fluid (CSF) samples were incubated on the antigen fixed to microscopy slides; the conjugate employed was anti-IgG-peroxidase and the enzymatic reaction was started by covering the slides with chromogen solution (diaminobenzidine/H2O2). After washing with distilled water, the slide was stained with 2% malachite green in water. Of the CSF samples from 21 patients with NC, 19 (90.5%) were positive, whereas the 8 CSF samples from the control group (100%) were negative. The results of the IP-Cl test applied to 127 CSF samples from patients with suspected NC showed 28.3% reactivity as opposed to 29.1 % for the IP-Cc test. The agreement index for the IP test (Cl x Cc) was 94.2%, with no significant difference between the two antigens.

Keywords: Immunoperoxidase; Neurocysticercosis; Cysticercus cellulosae; Cysticercus longicollis; Cerebrospinal fluid.

RESUMO

A cepa ORF de Cysticercus longicollis (Cl) representa importante modelo para estudo de antígenos heterólogos no imunodiagnóstico da neurocisticercose (NC). Foi padronizada a técnica de imunoperoxidase (IP) empregando suspensão antigênica particulada. Amostras de líquido cefalorraquiano (LCR) foram incubadas sobre o antígeno fixado em lâminas de microscopia, o conjugado empregado foi anti-IgG-Peroxidase, a reação enzimática iniciou-se ao cobrirem-se as lâminas com solução cromógena (Diaminobenzidina/H2O2). Após lavagens em água destilada, a lâmina foi corada com verde malaquita a 2% em água. De 21 LCR de pacientes com NC, 19 (90,5%) foram reativos e 8 (100%) LCR do grupo controle foram não reativos. Os resultados do teste IP-Cl ensaiando 127 LCR dc pacientes com suspeita de NC mostrou 89,7% de concordância com o teste ELISA empregando extrato salino de Cysticercus cellulosae (Cc) e 94,2% de concordância com o teste IP-Cc.

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ACKNOWLEDGEMENTS

We wish to thank Dr. Carlos Larralde, Universidad Autónoma do Mexico, for the ORF strain of Cysticercus longicollis, Drs. Antonio Spina-França, José A. Livramento, Luis R. Machado and Aluízio B.B. Machado, University of São Paulo, for the CSF samples, and Dr. Mário E. Camargo, Biolab Diagnóstica S/A, for permitting the use of the animal house. We are also indebted to Mr. Calixto Correia da Silva for technical assistance in the animal house.

Recebido para publicação em 03/05/1996

Aceito para publicação em 25/06/1996

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  • Correspondence to:
    Adelaide Jose Vaz
    Faculdade de Ciências Farmacêuticas da Universidade de São Paulo
    Av. Prof. Lineu Prestes, 580, Bloco 17
    05508-900 São Paulo, SP, Brasil
    Telelone: 5511-818-3638, FAX: 5511-813-2197
  • 1
    Supported by: CNPq-PIBIC/FCF/USP - 1994/95.

Publication Dates

  • Publication in this collection
    22 Sept 2006
  • Date of issue
    Aug 1996

History

  • Received
    03 May 1996
  • Accepted
    25 June 1996
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