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Detecção e quantificação de anticorpos anti-rábicos neutralizantes pela técnica de citometria de fluxo

A titulação de anticorpos neutralizantes contra o vírus rábico (AcN) pós-imunização é um parâmetro aceito como indicador de eficácia da vacina e do sucesso do processo de imunização. Este estudo descreve um teste de neutralização realizado em cultura de células, analisado através da técnica de citometria de fluxo. Diluições seriadas de amostras de soro foram misturadas in vitro com vírus rábico e adicionados a células BHK-21. Após incubação de 24 h, as células foram individualizadas por tratamento com tripsina, fixadas e permeabilizadas com p-formaldeído e coradas com conjugado específico. A porcentagem de inibição da infecção viral causada pelos anticorpos específicos presentes nas amostras de soro foi determinada em citômetro de fluxo Beckton & Dickinson FACSCalibur® e comparada com um soro de referência internacional. Os títulos de AcN foram determinados por extrapolação. Os níveis de correlação (r) entre os títulos obtidos com CF e SFIMT foi de 0.7712 (p < 0,001), e entre CF e ELISA de 0,6702 (p < 0,001). Os resultados indicam que a CF pode ser utilizada na análise de títulos de anticorpos neutralizantes em amostras de soro, com a vantagem de ser um método automatizado. No entanto, devem ser realizados novos estudos, comparando a CF com as técnicas consideradas como padrão ouro, para que os valores reais de Sensibilidade e Especificidade sejam determinados.


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