Dot-ELISA for the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in cerebrospinal fluid using a new solid phase (resin-treated polyester fabric) and Cysticercus longicollis antigens

Teste dot-ELISA para detecção de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae em líquido cefalorraquiano utilizando um novo suporte (tecido de poliéster-resina) e antígenos de Cysticercus longicollis

Abstracts

A dot-ELISA was developed for the detection of antibodies in CSF in the immunologic diagnosis of human neurocysticercosis, using antigen extracts of the membrane and scolex of Cysticercus cellulosae (M+S-Cc) and, alternately, membrane (M) and vesicular fluid (VF) of Cysticercus longicollis (Cl) covalently bound to a new solid phase consisting of polyester fabric treated with N-methylol-acrylamide resin (dot-RT). The test was performed at room temperature, with reduced incubation times and with no need for special care in the manipulation of the support. The sensitivity rates obtained were 95.1% for antigen Cc and 97.6% for antigen Cl. Specificity was 90.6% when Cc was used, and 96.9% and 100% when M-Cl and VF-Cl were used, respectively. No significant differences in titer were observed between tests carried out with homologous and heterologous antigens. The low cost and easy execution of the dot-RT test using antigen extracts of Cysticercus longicollis indicate the test for use in the immunodiagnosis of human neurocysticercosis.

Neurocysticercosis; Dot-ELISA; Cerebrospinal fluid; Cysticercus cellulosae; Cysticercus longicollis; Resin-treated polyester fabric


Foi desenvolvido o teste dot-ELISA para detecção de anticorpos em líquido cefalorraquiano (LCR) no diagnóstico imunológico da neurocisticercose humana, utilizando antígenos de membrana e escólex de Cysticercus cellulosae (M+E-Cc) e, alternativamente, membrana (M) e líquido vesicular (LV) de Cysticercus longicollis (Cl) covalentemente ligados a um novo suporte constituído de tecido de poliéster-resina de N-metilol-acrilamida (dot-TR). O teste foi realizado à temperatura ambiente, com tempos de incubação reduzidos e sem necessidade de cuidados na manipulação do suporte. A sensibilidade obtida foi de 95,1% para o antígeno Cc e 97,6% para o Cl. A especificidade foi de 90,6% quando o antígeno Cc foi usado, e 96,9% e 100% para M-Cl e LV-Cl, respectivamente. Não foi observada diferença significativa entre os antígenos homólogo e heterólogo. O baixo custo e a fácil execução do teste dot-TR empregando extratos antigênicos de Cysticercus longicollis indicam que pode ser empregado como alternativa no imunodiagnóstico da neurocisticercose humana.

Neurocysticercosis; Dot-ELISA; Cerebrospinal fluid; Cysticercus cellulosae; Cysticercus longicollis; Resin-treated polyester fabric


IMMUNOLOGY

Dot-ELISA for the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in cerebrospinal fluid using a new solid phase (resin-treated polyester fabric) and Cysticercus longicollis antigens

Teste dot-ELISA para detecção de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae em líquido cefalorraquiano utilizando um novo suporte (tecido de poliéster-resina) e antígenos de Cysticercus longicollis

Adelaide José VazI; Paulo Mutuko NakamuraII; Mario E. CamargoIII; Eide Dias CamargoII; A. Walter FerreiraIII

IFaculdade de Ciências-Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo. Brasil

IIInstituto Adolfo Lutz, São Paulo, SP, Brasil

IIIInstituto de Medicina Tropical de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil

Correspondence to

SUMMARY

A dot-ELISA was developed for the detection of antibodies in CSF in the immunologic diagnosis of human neurocysticercosis, using antigen extracts of the membrane and scolex of Cysticercus cellulosae (M+S-Cc) and, alternately, membrane (M) and vesicular fluid (VF) of Cysticercus longicollis (Cl) covalently bound to a new solid phase consisting of polyester fabric treated with N-methylol-acrylamide resin (dot-RT). The test was performed at room temperature, with reduced incubation times and with no need for special care in the manipulation of the support. The sensitivity rates obtained were 95.1% for antigen Cc and 97.6% for antigen Cl. Specificity was 90.6% when Cc was used, and 96.9% and 100% when M-Cl and VF-Cl were used, respectively. No significant differences in titer were observed between tests carried out with homologous and heterologous antigens. The low cost and easy execution of the dot-RT test using antigen extracts of Cysticercus longicollis indicate the test for use in the immunodiagnosis of human neurocysticercosis.

Keywords: Neurocysticercosis; Dot-ELISA; Cerebrospinal fluid; Cysticercus cellulosae; Cysticercus longicollis; Resin-treated polyester fabric.

RESUMO

Foi desenvolvido o teste dot-ELISA para detecção de anticorpos em líquido cefalorraquiano (LCR) no diagnóstico imunológico da neurocisticercose humana, utilizando antígenos de membrana e escólex de Cysticercus cellulosae (M+E-Cc) e, alternativamente, membrana (M) e líquido vesicular (LV) de Cysticercus longicollis (Cl) covalentemente ligados a um novo suporte constituído de tecido de poliéster-resina de N-metilol-acrilamida (dot-TR). O teste foi realizado à temperatura ambiente, com tempos de incubação reduzidos e sem necessidade de cuidados na manipulação do suporte. A sensibilidade obtida foi de 95,1% para o antígeno Cc e 97,6% para o Cl. A especificidade foi de 90,6% quando o antígeno Cc foi usado, e 96,9% e 100% para M-Cl e LV-Cl, respectivamente. Não foi observada diferença significativa entre os antígenos homólogo e heterólogo. O baixo custo e a fácil execução do teste dot-TR empregando extratos antigênicos de Cysticercus longicollis indicam que pode ser empregado como alternativa no imunodiagnóstico da neurocisticercose humana.

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Recebido para publicação em 26/09/1996

Aceito para publicação em 14/11/1996

  • 1. BITTENCOURT, E.; GUIMARĂES, M.; CAMARGO, M.E.; FERREIRA, A.W. & MAKINO, M.M. - Immunoassays conducted with resin treated nylon fabrics. J. Polymer Sci., Polymer Lett. Ed., 21:717-722, 1983.
  • 2. BRADFORD, M.M. - A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein dye binding. Analyt. Biochem., 72:248-254, 1976.
  • 3. CAMARGO, M.E.; BITTENCOURT, E.; FERREIRA, A.W.; PERES, L. & CARVALHO, M.B. - Utilizaçăo de resinas sobre suportes inertes para fixaçăo covalente de componentes antigęnicos ou anticorpos, como fase sólida em testes sorológicos. In: JORNADA CIENTÍFICA DO INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL DE SĂO PAULO, 2, Săo Paulo, 1983. Resumos p. 21.
  • 4. CORREA, D.; PLANCARTE, A.; SANDOVAL, M.A. et al. - Immunodiagnosis of human and porcine cysticercosis. Detection of antibodies and parasite products. Acta leidensia, 57:93-99, 1989.
  • 5. FREEMAN, R.S. - Studies on the biology of Taenia crassiceps. Canad. J, Zool., 40:969-990, 1962.
  • 6. KATTI, M.K. & CHANDRAMUKHI, A. - Comparative evaluation of cysticercal antigens and immunoassays in the diagnosis of neurocysticercosis. Ann. trop. Med. Parasit., 85:605-615, 1991.
  • 7. LARRALDE, C.; SOTELO, J.; MONTOYA, R.M. et al. - Immunodiagnosis of human cysticercosis in cerebrospinal fluid. Antigens from murine Taenia crassiceps effectively substitute those from porcine Taenia solium. Arch. Path. Lab. Med., 114:926-928, 1990.
  • 8. MACHADO, A.B.B.; PIALARISSI, C.S.M. & VAZ, A.J. -Cisticercose humana diagnosticada em hospital geral, Săo Paulo, SP (Brasil). Rev. Saúde públ. (S. Paulo), 22:240-244, 1988.
  • 9. PARKHOUSE, R.M.E. & HARRISON, L.J.S. - Antigens of parasite helminthes and diagnosis, protection and pathology. Parasitology, 99 (Suppl.):S5-S19, 1989.
  • 10. PIALARISSI, C.S.M.; VAZ, A.J.; SOUZA, A.M.C. et al. - Estudo comparativo de testes sorológicos no diagnóstico imunológico da neurocisticercose. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 29:367-373, 1987.
  • 11. SCHENONE, H.; VILLARROEL, F.; ROJAS, A. & RAMIREZ, R. - Epidemiology of human cysticercosis in Latin America. In: FLISSER, A., ed. Cysticercosis: present state of knowledge and perspectives New York, Academic Press, 1982. p. 25-38.
  • 12. SIEGEL, S. - Estatística năo paramétrica para as cięncias do comportamento Rio de Janeiro, McGraw-Hill, 1975.
  • 13. SPINA-FRANÇA, A. - Patogenia das infecçőes do SNC e LCR. Análise crítica da contribuiçăo diagnóstica. Rev. paul. Med., 107:169-174, 1989.
  • 14. SPINA-FRANÇA, A.; LIVRAMENTO, J.A. & MACHADO, L.R. - Cysticercosis of the central nervous system and cerebrospinal fluid. Immunodiagnosis of 1573 patients in 63 years (1929-1962). Arq. Neuropsiquiat., 51:16-20, 1993.
  • 15. THOMPSON, S.N.; PLATZER, E.G. & LEE, R.W. - Phosphoglycerides and derivatives in Taenia crassiceps examined by 31P NMR spectroscopy. J. Parasit., 74:194-196, 1988.
  • 16. VAZ, A.J. - Cysticercus longicollis: caracterizaçăo antigęnica e desenvolvimento de testes imunológicos para pesquisa de anticorpos em líquido cefalorraquiano na neurocisticercose humana Săo Paulo, 1993. (Tese de Doutoramento - Instituto de Cięncias Biomédicas da Universidade de Săo Paulo.)
  • 17. VAZ, A.J. & FERREIRA, A.W. - Imunodiagnóstico da neurocisticercose: teste imunoenzimático com antígenos quimicamente ligados a suportes para pesquisa de anticorpos em soro e líquido cefalorraquiano. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 30:1-10, 1988.
  • 18. VAZ, A.J.; FERREIRA, A.W.; CAMARGO, M.E.; NAKAMURA, P.M. & CAMARGO, E.D. - Dot-ELISA for detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in human cerebrospinal fluid using a new solid phase (resin-treated polyester fabrics). Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 32:355-359, 1990.
  • 19. VAZ, A.J.; MACHADO, A.B.B.; NUNES, C.M.; SILVA, M.V. & PIAZZA, R.M.F. - Utilizaçăo de líquido vesicular de Cysticercus longicollis no teste ELISA para o imunodiagnóstico da neurocisticercose humana (comunicaçăo). Rev. Soc. bras. Med. trop., 24 (Supl. 1):176, 1991.
  • 20. WILSON, M.; BRYAN, R.T.; FRIED, J.A. et al. - Clinical evaluation of the cysticercus enzyme-linked immunoelectrotransfer blot in patients with neurocysticercosis. J. infect. Dis., 164:1007-1009, 1991.
  • 21. ZENTENO-ALANIS, G.H. - A classification of human cysticercosis. In: FLISSER, A., ed. Cysticercosis: present state of knowledge and perspectives New York, Academic Press, 1982. p. 107-126.

  • Correspondence to:
    Adelaide José Vaz
    Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo
    Av. Prof. Lineu Prestes, 580, bloco 17
    05508-900 São Paulo, SP, Brasil
    Telephone: +5511-818-3638; Fax: +5511-813-2197

Publication Dates

  • Publication in this collection
    22 Sept 2006
  • Date of issue
    Dec 1996

History

  • Accepted
    14 Nov 1996
  • Received
    26 Sept 1996
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