Avaliação de antígenos do trypanosoma cruzi para a reação de hemaglutinação indireta: II. Antígenos de diferentes amostras e formas evolutivas

Evaluation of Trypanosoma cruzi antigens for the indirect hemagglutination test: II. Different stocks and evolutive forms

IMUNOLOGIA

Avaliação de antígenos do trypanosoma cruzi para a reação de hemaglutinação indireta. II. Antígenos de diferentes amostras e formas evolutivas

Evaluation of Trypanosoma cruzi antigens for the indirect hemagglutination test. II. Different stocks and evolutive forms

Ricardo Wagner de Almeida Vítor; Egler Chiari

RESUMO

Para aprimorar a sensibilidade e a especificidade da reação de hemaglutina-ção indireta no diagnóstico da doença de Chagas, foram utilizados eritrocitos sensibilizados com antígeno de epimastigotas de diferentes amostras (clones Al.7, B12, Cl e cepas D150 e Y), de tripomastigotas metacíclicos de cultura (TMC) e de tri-pomastigotas de cultura de células (TCC) do Trypanosoma cruzi. Foram titulados 132 soros de indivíduos chagásicos e 161 soros de não chagásicos, diagnosticados pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI), considerada como reação de referência no cálculo dos índices de co-positividade (i.c.p.), co-negatividade (i.c.n.) e concordância. Utilizando o título discriminante (T.D.) de 1:40, os antígenos da cepa Y e do clone B12 apresentaram valores elevados para os três índices calculados, indicando boa sensibilidade e especificidade em relação à RIFI. Os antígenos dos clones Al .7 e Cl apresentaram baixa especificidade considerando o T.D. de 1:40, mas ocorreu um aumento acentuado para o i.c.n. considerando o T.D. de 1:80, indicando um aumento de especificidade relativa sem alteração significativa da sensibilidade relativa. Com os antígenos T.M.C, e T.C.C, foram observados títulos mais baixos e valores menores para o i.c.p., indicando pouca sensibilidade em relação à RIFI.

Unitermos: Doença de Chagas; Diagóstico; Sorologia; Hemaglutinação indireta.

SUMMARY

To improve sensitivity and specificity of the indirect hemagglutination test (IHA) for Chagas' disease serodiagnosis, different antigens of Trypanosoma cruzi extracts from epimastigotes (A1.7, B12 and CI clones; Y and D150 strains) and from trypomastigotes (metacyclics and tissue cell cultures) -were tested. Sera of 132 individuals with chronic Chagas' disease, demonstrated by immunofluorescence test (IFT) and sera of 161 non chagasic individuals were assayed. The IFT was the reference test to evaluate the co-positivity index (c.p.i.) and co-negativity index (c.ni.). The antigens of Y strain and B12 clone presented high values for the calculated index with a cut off of 1:40, suggesting sensitivity, specificity and agreement of IHA in relation to IFT. Antigens of A1.7 and CI clones presented high values for the calculated index only with a cut off of 1:80. Titers presented by sera from chagasics tested by IHA with trypomastigote antigens were lower than those with epimastigote antigens. Trypomastigote antigens gave lower values for co-positivity index, suggesting little sensitivity in relation to IFT.

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AGRADECIMENTOS

A Cléa de Andrade Chiari, pela ajuda na realização do presente trabalho, a Lúcia M. C. Galvão, pela gentileza em nos ceder os tripomastigotas de cultura de células, ao Paul Wil liams, pela revisão do resumo em inglês e aos laboratoristas Afonso da Costa Viana e Orlando Carlos Magno, pela ajuda técnica.

Recebido para publicação em 27/11/1986.

• 1. ARAÚJO, F. G. & GTJPTILL, D. - Use of antigen preparations of the amastigote stage of Trypanosoma cruzi in the serology of Chagas' disease. Amer. J. trop Med. Hyg., 33: 362-371, 1984.
• 2. ARMITAGE, P. - Statistical methods in medicai research. 4th. ed. London, Blackwell Scientific Publication, 1977. p. 217-232.
• 3. BATISTA, S. M. - Teste de hemaglutinação com diferentes antígenos no diagnóstico da doença de Chagas. Belo Horizonte, 1973. (Tese - Universidade Federal de Minas Gerais).
• 4. BUCK, A. A. & GART, J. J. - Comparison of i screening test and a reference test in epidemiologic studies. I. Indices of agreement and their relation to prevalence. Amer. J. Epidem., 83: 586-592, 1966.
• 5. CAMARGO, M. E. - Fluorescent antibody test for the serodiagnosis of American trypanosomiasis. Technical modification employing preserved culture forms of Trypanosoma cruzi in a slide test. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 8: 227-234, 1966.
• 6. CERISOLA, J. A. ALVAREZ, M. BOCK, M. & WEGNER, D. A. - Comparison of a new antigen from amastigotes of Trypanosoma cruzi and an antigen from epimastigotes for the diagnosis of Chagas' disease by the indirect immunofluorescence test. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 13: 162-166, 1971.
• 7. CHIARI, E. - Diferenciação do Trypanosoma cruzi em cultura. Belo Horizonte, 1981. (Tese - Universidade Federal de Minas Gerais).
• 8. CHIARI, E. DIAS, J. O P. LANA, M. & CHIARI, C. A. - Hemocultures for the parasitological diagnosis of human Chagas' disease in the chronic phase. In: CONGRESSO INTERNACIONAL SOBRE DOENÇA DE CHAGAS, Rio de Janeiro, 1979. Anais. p. N1-5.
• 9. GALVAO, L. M. O; BRENER, Z. & KRETTLI, A. U. ■-Continuous cell cultures for the production of Trypanosoma cruzi trypomastigotes (Try). In: REUNIÃO ANUAL SOBRE PESQUISA BÁSICA EM DOENÇA DE CHAGAS, 10a., Caxambu, Minas Gerais, Brasil, 1983. Resumos, p. BI64.
• 10. GOLDBERG, S. S. & CHIARI, E. - Growth and isolation of single colonies of Trypanosoma cruzi on solid medium. J. Parasit., 66: 677-679, 1980.
• 11. HOSHINO-SHIMIZU, S. CAMARGO, M. E. NAGAS-SE, T. K. - A stable polysaccharide-hemagglutination reagent for the diagnosis of acute or recent Trypanosoma cruzi infections. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 20: 208-212, 1978.
• 12. LOWRY, O. H. ROSEBROUGH, N. J. FARR, A. L. & RANDALL, R. J. - Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. biol. Chem., 193: 265-275, 1951.
• 13. MUNIZ, J. & FREITAS, G. - Contribuição para o diagnóstico da doença de Chagas pelas reações de imunidade. I. Estudo comparativo entre as reações. de aglutinação e de fixação de complemento. Mem. Inst. Osw. Cruz, 41: 303-333, 1944.
• 15. NEAL, R. A. & MILES, R. A. - Indirect haemagglu-tination test for Chagas' disease, with a simple method for survey work. Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo, 12: 325-332, 1970.
• 15. NEVA, F. A. & GAM, A. A. - A complement-fixing antigen from Trypanosoma cruzi grown in cell cultures. Amer. J. trop. Med. Hyg., 26: 37-46, 1977.
• 16. ROMANHA, A. J. - Heterogeneidade isoenzimática era Trypanosoma cruzi Belo Horizonte, 1982. (Tese - Universidade Federal de Minas Gerais).
• 17. SILVA, L. H. P. & NUSSENZWEIG, V. - Sobre uma cepa de Trypanosoma cruzi altamente virulenta para o camundongo branco. Folia clín.biol. (S. Paulo). 20: 191-208, 1953.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  17 Fev 2011
• Data do Fascículo
  Jun 1987

Histórico

• Recebido
  27 Nov 1986