Dot-ELISA para detecção de antígenos polissacarídicos de pneumococos foi padronizado em vista da necessidade de se ter um diagnóstico rápido e eficaz para pneumonia pneumocócica aguda. Um total de 480 amostras de líquido pleural sendo 442 de crianças com diagnóstico clínico e laboratorial de pneumonia bacteriana e 38 de pacientes com tuberculose, mais 20 amostras de soros sanguíneos de crianças sadias foram avaliadas no Dot-ELISA. As amostras foram tratadas previamente a 90°C por 10 min com EDTA 0,1 M de pH 7,5 e aplicadas sobre membrana de nitrocelulose. Para a detecção de antígeno pneumocócico foi empregado omniserum pneumocócico diluído a 1:200. Os resultados de Dot-ELISA avaliados em comparação com os resultados de cultura bacteriana, contra-imunoeletroforese e látex-aglutinação apresentaram índices de 0,940 para sensibilidade, 0,830 para especificidade e 0,760 para concordância. Omniserum pneumocócico mostrou ser um ótimo soro polivalente para a detecção de antígenos pneumocócicos em Dot-ELISA e, essa técnica provou ser uma alternativa prática e eficaz para o diagnóstico de pneumonias pneumocócicas.