La emergencia de leishmaniosis visceral zoonótica (LVZ) en América Latina es problema de salud pública en aumento. La urbanización de la LVZ es un fenómeno observado en diferentes países alrededor del mundo y hay un número creciente tanto de denuncias respecto a la aparición de esta infección en nuevas ubicaciones, como su aumento en zonas endémicas previamente establecidas. En la ciudad de Posadas, provincia de Misiones, nordeste de Argentina, la transmisión de LVZ asociada a canes y Lutzomyia longipalpis fue descrita por primera vez en 2006. En la ciudad de Puerto Iguazú, provincia de Misiones, el primer caso humano de LVZ tuvo lugar en febrero de 2014. De 209 perros muestreados, 15 (7.17%) resultaron positivos mediante métodos serológicos y/o parasitológicos. Se observó amplificación en 14 muestras y en todos los casos la especie implicada fue Leishmania infantum. Según nuestro conocimiento, esta es la primera caracterización molecular de L. infantum en perros procedentes de este área.