Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo, Volume: 29, Issue: 6, Published: 1987
  • Standardization and evaluation of an enzyme immunoassay for diagnosis and seroepidemiology of human trichinosis

    Coltorti, Emílio; Fernandez, Eduardo; Santillán, Graciela

    Abstract in Spanish:

    Se estandarizó un enzimoinmunoensayo (EIE) en fase sólida en el que se empleó un antígeno soluble total de T. spiralis y una dilución única de suero, y se evaluó la capacidad del sistema para detectar anticuerpos totales antitriquina con fines diagnósticos y seroepidemiológicos. Las curvas dosis respuesta mostraron que trabajando con una dilución de suero de 1:100 se obtenía una buena diferenciación entre sueros de indivíduos no infectados y pacientes de triquinosis con baja concentración de anticuerpos circulantes y la respuesta fue lineal entre valores de 0.15 y 0.64 unidades de densidad óptica (DO). El estúdio de 720 sueros de población general no infectada revelo una X k = 0.07 y una S = 0.03 unidades de DO. El 98,61% de esta población presentó valores de DO < X k + 3S; el 1,25% valores de DO entre > X k + 3S y < X k + 4S; y el 0.14% restante valores entre > X k + 4S y < X k + 5S. Se empleó un valor de DO = X k + 5S como nivel diagnóstico para estudiar 4 brotes de triquinosis humana, 80 sueros de pacientes de triquinosis con diferentes títulos en inmunofluorescencia indirecta (IFI) y 20 sueros de pacientes de hidatidosis. El EIE propuesto permitió diferenciar en forma confiable y eficiente población infectada de no infectada y tuvo una buena correlación con la IFI. Todos los sueros de pacientes hidatídicos presentaron valores de DO < X k + 4S.

    Abstract in English:

    An enzyme immunoassay (EIA) in solid phase'in which a whole soluble Trichinella spiralis antigen and a single serum dilution were used was standardized and its capacity for detecting total anti-trichinella antibodies for diagnostic and seroepidemiological purpose was evaluated. Dose response curves showed that a working dilution of 1:100 permitted an adequate differentiation between trichinosis patients with low circulating antibodies concentration and non infected individuals; the response was linear between OD values of 0.15 and 0.64. A group of 720 sera from trichinosis free general population showed an arithmetic mean of OD values of 0.07 and a standard deviation of 0.03. OD values were < (X) + 3S in 98,1% of those sera; between > X k+ 3S and < X k + 4S in 1,25% and between > X k + 4S and < X k + 5S in the remaining 0.14%. An OD value = X k + 5S was used as a diagnostic criterion to study sera from four human trichinosis outbreaks; 80 sera from trichinosis patients with different immunofluorescence assay (IFA) titers, and 20 sera from hydatid patients. The proposed EIA differentiates sera from infected and non infected populations both efficiently and reliably. It also showed a good correlation with the IFA results. All sera from hydatid patients showed OD values < X k + 4S.
  • Malaria respiratory manifestations by Plasmomodium falciparum and P Artigos Originais

    Botelho, C.; Barbosa, L. S. Guedes; Aquino, J. L.; Silva, M. D.; Meirelles, S. M. P.; Jardim, J. R. B.

    Abstract in Portuguese:

    Foram selecionados 110 pacientes que procuraram a SUCAM/CUIABÁ para diagnóstico e tratamento de malária, com queixa de febre e procedente de área malarígena. Nestes pacientes foram realizados: gota espessa para a pesquisa de Plasmodium; aplicação de questionário padronizado para detectar sintomas respiratórios presentes no momento da entrevista; gasometria arterial e espirometria para avaliar a função pulmonar. Desta amostra, 62 pacientes foram positivos para malária sendo 41 P. vivax, 20 P. falciparum e 01 forma mista (grupo Malárico); 48 mostraram-se negativos à pesquisa de hematozoários através da gota espessa (grupo Não Malárico). As manifestações respiratórias encontradas nesta população quando comparadas os grupos Malárico e Não Malárico, foram respectivamente: 1º) Sintomáticos Respiratórios de 46,8% para 22 9% (p < 0,05); 2°) Alterações Espirométricas de 53,2% para 20,8% (p < 0,05); 3°) Alterações Gasométricas de 62,9% para 25,0% (p < 0,05). Com estes resultados concluímos que há nítida associação entre a Malária produzida pelo P. vivax e P. falciparum e as manifestações respiratórias apresentadas, nesta população de estudo.

    Abstract in English:

    A group of 110 patients (101 male, 9 female with mean age ± SD: 31,1 ± 11,0 years) with fever, coming from an endemic malaria region, was studied at SUCAM-CUIABÁ, for diagnosis and treatment of possible protozoal infection. For this group a simplified questionnaire on respiratory symptoms was applied and laboratory tests consisting of peripheral blood film, arterial blool gas analysis and pulmonary function test rwere done. 62 patients had a positive test of malaria (41 P. vivax, 20 P. falciparum 1 F + V) a¡rd 48 were negative, We conclude that there is an association between malarial infection and the presence of respiratory problems.
  • "In vitro" studies on the levels of Plasmodium falciparum drug resistance from 1983 to 1986 Artigos Originais

    Santos, M. A. V.; Couto, A. A.; Oliveira, S. G.; Rosário, V. E.

    Abstract in Portuguese:

    Foram realizados 171 testes de sensibilidade (microtécnica) com cepas de Plasmodium falciparum da Região Amazônica brasileira para cloroquina, mefloquina, amodiaquina e quinino. Os testes tiveram duração de 24 horas com as drogas preparadas na hora da realização de cada teste. Os resultados mostraram elevada resistência a cloroquina (83%) e sensibilidade em quase a totalidade das amostras testadas para mefloquina (97,7%). Para amodiaquina e quinino observou-se sensibilidade em 51,0% e 56,5% das cepas, respectivamente. Este estudo demonstra a emergência de um possível foco de resistência do Plasmodium falciparum a mefloquina, em Tucuruí.

    Abstract in English:

    Drug resistance tests were performed with 171 strains of P. falciparum obtained from the Amazon Region, using chloroquine, mefloquine, amodiaquine and quinine. Tests lasted about 24 hours and the drug solutions were prepared just before use. Results show high percentage of resistance to chloroquine (83%) whereas nearly all strains were shown to be sensitive to mefloquine (97.7%). For both amodiaquine and quinine sensitivities were of 51.0% and 56.5% respectively. The present study demonstrates that resistance to mefloquine may be starting in Tucuruí, Pará.
  • Lectins for the detection of IgM antibodies to T. gondii in the diagnosis of acute toxoplasmosis by immunofluorescence test Original Articles

    Nojimoto, I. T. I.; Hoshino-Shimizu, S.; Nagasse-Sugahara, T. K.; Camargo, M. E.

    Abstract in Portuguese:

    Lectinas foram marcadas com fluoresceína e testadas na reação de imunofluorescência para a detecção de anticorpos anti-T. gondii, no diagnóstico da toxoplasmose aguda. Neste estudo tentou-se encontrar reagentes alternativos para conjugados fluorescentes anti-IgM humano (CFAIgMH), que com freqüência contém anticorpos antitoxoplasma, como contaminantes, devido às infecções naturais por T. gondii, entre os animais utilizados para imunização. Conjugados fluorescentes de lectina de lentilha (CFL) (Lens culinaris) forneceram resultados satisfatórios. Avaliação do CFL efetuada em total de 179 amostras de soros de pacientes com toxoplasmose aguda e crônica, com infecções não relacionadas e de indivíduos sadios, mostrou valores altos nos índices de eficiência relativa, co-positividade e co-negatividade, respectivamente de 0,989, 0,969 e 1,000, em relação ao CFAIgMH convencional. Além disso, três partidas de CFL preparadas sucessivamente forneceram resultados reprodutíveis. A vantagem de se empregar o LFC como reagente alternativo no diagnóstico sorológico da toxoplasmose aguda consiste nos aspectos práticos da sua preparação.

    Abstract in English:

    Lectins were labeled with fluorescein and tried as conjugates in the immunofluorescence (IP) test for the detection of IgM antibodies to T. gondii, in the diagnosis of acute toxoplasmosis. This approach was an attempt to find alternative reagents for anti-human IgM fluorescent conjugates (AHIgMFC), which contain quite frequently anaibcdies to toxoplasma, as contaminants, due to natural T. gondii infections among animals used for imunization. Lentil (Lens culinaris) lectin fluorescence conjugates (LcFC) provided most satisfactory results. The evaluation of LcFC carried out in a total of 179 sera from patients with acute and chronic toxoplasmosis, with non-related infections or healthy subjects, gave high values of relative efficiency, co-positivity and co-negativity indices, respectively 0.989, 0.969 and 1.000, in reference to the conventional AHIgMFC. Moreover, three batches of LcFC successively prepared gave reproducible test results. The advantage of LcFC as an alternative reagent for the serodiagnosis of acute toxoplasmosis is supported by practical aspects of its preparation.
  • Schistosoma mansoni: implantation of worms into the peritoneal cavity aiming at the induduction of immunoprotection Artigos Originais

    Coelho, Paulo Marcos Z.; Gerken, Sílvia E.; Tavares, Carlos Alberto P.

    Abstract in Portuguese:

    Tentou-se obter imunoproteção contra infecção cercariana pela inoculação de vermes vivos na cavidade peritoneal de camundongos. Embora os vermes sobrevivessem bem nestas condições e não ocorresse postura de ovos, não foi possível obter imunoproteção, Também a inoculação de ovos viáveis por via sangüínea e peritoneal não propiciou o aparecimento de imunoproteção nos camundongos com vermes na cavidade peritoneal.

    Abstract in English:

    An attempt has been made to induce immunoprotection against cercarial infection through inoculation of live worms into the peritoneal cavity of mice. Although the worms were able to survive normally under these conditions, and no egg-laying could be detected, immunoprotection was obtained. Likewise, the inoculation of viable eggs, by circulatory and peritoneal routes, did not provide immunoprotection in mice with worms in the peritoneal cavity.
  • Comparative study of serological tests in immunological diagnosis for neurocysticercosis Artigos Originais

    Pialarissi, Carmen Silvia de Melo; Vaz, Adelaide José; Souza, Ana Maria Carvalho de; Nakamura, Paulo Mutuko; Camargo, Eide Dias; Silva, Marcos Vinícius da; Ueda, Mirthes

    Abstract in Portuguese:

    Estudamos comparativamente quatro técnicas imunológicas para o diagnóstico da neurocisticercose (NC) utilizando líquido cefalorraquiano (LCR) como espécime clínico: as reações de fixação de complemento (RFC), hemaglutinação passiva (RHA), imunofluorescência indireta (RIF) e teste imunoenzimático ELISA Foram ensaiadas 125 amostras de LCR de pacientes com NC comprovada e 94 amostras de LCR do grupo controle (60 de pacientes com quadros clínicos neurológicos diversos e 34 de pacientes supostamente normais). Os índices de sensibilidade e especificidade obtidos para os testes foram, respectivamente, de 48,0% e 90,4% para a RFC; 88,8% e 96,8% para a RHA; 87,2 e 98,9% para a RIF e 97,6% e 98,9% para o teste ELISA. A diferença significativa (p < 0,05) observada entre os testes permite concluir que o melhor teste para o diagnóstico de NC foi o teste ELISA seguido das reações de HA e IF.

    Abstract in English:

    Four immunological techniques were evaluated for the detection of antibodies to Cysticercus cellulosae in cerebrospinal fluid (CSF): complement fixation test (CF), passive haem-magglutination test (PHA), indirect immunofluorescence test (IF) and the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). One-hundred twenty-five CSF from patients with confirmed neurocysticercosis and 94 CSF from a control group (60 from patients suffering from neurological disorders other than neurocysticercosis and 34 from presumably healthy individuals) were assayed. The sensitivity and specificity of the tests were determined, which were, 48.0% and 90.4% for CF; 88 8% and 96.8% for FHA; 87.2% and 98.9% for IF, and 97.6% and 98.9% for ELISA, respectively. There were significative differences among the tests and these allowed to conclude that the best immunodiagnostic test for neurocysticercosis was ELISA, followed by PHA and IF tests.
  • Malária no município de Humaitá, estado do Amazonas: XXI. Prevalência da deficiência de glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PD) Em amostra da população e em doentes com malaria causada pelo Plasmodium falciparum Artigos Originais

    Barraviera, Benedito; Meira, Domingos Alves; Machado, Paulo Eduardo de Abreu; Curi, Paulo Roberto

    Abstract in Portuguese:

    Os autores estudaram a prevalência da deficiência de glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PD), pelo método de BREWER et alii, em 141 indivíduos da população do município de Humaitá, Estado do Amazonas. Destes, 128 eram amazônides, 67 dos quais nunca tiveram malária, enquanto que 61 tinham tido ou estavam tendo a doença; os 13 restantes que estavam com malária não eram arnazônides. Os resultados revelaram que 7 arnazônides (4,96%), eram deficientes. Destes, 5 eram do sexo feminino e 2 do masculino. Em todos os indivíduos do sexo feminino o teste foi positivo com comportamento do tipo heterozigoto. Dos indivíduos deficientes, 4 nunca tinham tido malária; dos outros 3, 2 apresentavam a reação de hemaglutinação positiva com título 1/16 e o terceiro estava tendo malária causada pelo Plasmodium falciparum pela primeira vez. Este doente apresentou forma benigna de malária evoluindo para cura clínica e parasitológica no 3.° dia de tratamento com a clindamicina. Nenhum dos 13 doentes não arnazônides apresentava deficiência de G6PD. Dessa forma, não houve diferença na prevalência da deficiência de G6PD em arnazônides que nunca tiveram malária e em arnazônides que tinham tido ou estavam tendo a doença. Portanto, os indivíduos com deficiência de G6PD estão sujeitos a infecções por Plasmodium falciparum na mesma proporção que os não deficientes. Por outro lado, o aumento da prevalência da deficiência de G6PD, na amostra estudada, poderia estar relacionado com a pressão seletiva exercida pela malária em população submetida à homozigose.

    Abstract in English:

    The authors studied the prevalence of glucoses-phosphate dehydrogenase (G6PD) deficiency by BREWER method et al, in 141 individuals from Humaita county, Amazonas State. From this total, 128 were born in Amazonian 67 had never had malaria, but 61 had already had this disease or were with; it the others thirteen left, who had this disease were not from Amazonian. The results revealed that 7 (4,96%) Amazonian individuals were deficients. From this total, there were 5 females and 2 males individuals. In all female individuals the test was positive according to heterozygote kind of behaviour. Among the deficient individuals, four had never had malaria from the 3 left, 2 presented a positive hemagglutination reaction with 1/16 tittle and the third was with malaria for the first time, caused by Plasmodium falciparum. This patient presented the benign form of malaria followed by clinical and parasitological remission in the third day of treatment with clindamycin. None of the 13 patients who weren't Amazonian individuals presented G6PD deficiency. Being so, there were no diference in the prevalence of G6PD in Amazonian individuals who had never had the disease and in Amazonian individuals who had already had or were with the disease. Thus, the individuals with G6PD deficiency are subject to contamination by Plasmodium falciparum in the same proportion to the no deficients. In the other hand, the increase of prevalence of G6PD deficiency in the sample studied, could be related to the seletive pressure on malaria in population submited to homozygous.
  • Basidiobolomycosis: Report of a case with unusual presentation Artigos Originais

    Bittencourt, Achiléa Lisboa; Andrade, Jacy Amaral Freire de; Carvalho, Edgard Marcelino de

    Abstract in Portuguese:

    Registro de um caso de basidiobolomicose com lesões múltiplas, com aspecto pseudo-tumoral, em criança de 4 anos. Constitui o sexto caso descrito na América do Sul, com o isolamento do agente etiológico. O tratamento com iodeto de potássio foi coroado de sucesso.

    Abstract in English:

    The purpose of this paper is to report a case of basidiobolomycosis in a four year-old child who had multiple and voluminous lesions resembling a soft tissue tumor. This the sixth case with isolation of the etiologic agent reported in South America.
  • Cutaneous leishmaniasis in germfree, gnotobiotic, and conventional mice Original Articles

    Vieira, Enio Cardillo; Nicoli, Jacques Robert; Moraes-Santos, Tasso; Silva, Marcelo Eustáquio; Costa, Carlos Alberto da; Mayrink, Wilson; Bambirra, Eduardo Alves

    Abstract in Portuguese:

    A leishmaniose tegumentar foi muito mais grave em camundongos convencionais e convencionalizados do que em seus pares isentos de germes ou gnotobióticos. Usou-se um inóculo de Leishmania mexicana amazonensis.

    Abstract in English:

    Cutaneous leishmaniasis was much more severe in conventional than in gnotobiotic mice as revealed by macro and microscopic examination. An inoculum of Leishmania mexicana amazonensis was used.
  • An ELISA method using serum derived HDAg for the sorological detection of HDV antigens and antibodies Original Articles

    Granato, Celso; Strauss, Edna; Vitvitsky, Ludmila; Gayotto, Luiz Carlos da Costa; Trepo, Christian

    Abstract in Portuguese:

    Um dos maiores problemas no desenvolvimento de metodologia para detecção de antígenos e anticorpos do vírus da hepatite delta (VHD) tem sido a fonte de antígenos, uma vez que fígados humanos e de animais infectados pelo VHD são de difícil obtenção e baixo rendimento Ao uso de soro de pacientes na fase aguda da infecção pelo VHD, como fonte de antígenos, associamos a técnica imunoenzimática, com finalidade de facilitar o manuseio e economizar antígeno. O antígeno delta foi obtido a partir do soro de indivíduo na fase aguda de infecção por VHD e o anticorpo a partir de soro de portadores crônicos de VHD. Para a detecção do antígeno foi empregado o método "sanduíche" e para a detecção do anticorpo um ensaio tipo competição. Visando testar a especificidade e a sensibilidade relativas do novo método de detecção de anticorpo, foram feitas comparações do mesmo com radio-imunoensaio comercial (C-RIE, Lab. Abbott) e um radio-imunoensaio desenvolvido na Unité 271-INSERM de Lyon, França (NC-RIA). Soros de 42 pacientes foram testados pelos três métodos, sendo observados resultados discrepantes em apenas 2 casos. Os autores concluem que: 1) soros de pacientes na fase aguda e crônica da infecção pelo VHD podem ser usados como fonte de antígeno e anticorpos em ensaios imunológicos 2) o EIE e o RIE tem especificidade e sensibilidade relativas comparáveis 3) o EIE é de fácil execução, mais barato, não poluente, tem vida útil maior, além de proporcionar economia de antígeno.

    Abstract in English:

    One of the main difficulties related to the detection of the Hepatitis Delta Virus (HDV) antigen and antibody has been the source of the needed HD antigen since HDV containing human and animal livers are very difficult to obtain and since yield is low. This fact prompted us to try to use the serum of patients in the acute phase of HDV infection as a source of HDAg and turn to enzyme immunoassays (EIA) instead of RIA for the sake of easiness and economy in the amount of HDAg needed. The antigen for EIA was obtained from patients during the acute phase of HDV infection and the antibody from patients who have been carriers for many years. For the detection of the antigen, a sandwich type method was employed, whereas for the antibody a competition assay was developed. In order to assess the relative specificity and sensibility of the test, the antibody assay was compared to a commercial RIA (C. RIA, Abbott) and to a non-commercial RIA (NC RIA). Forty-two sera were tested by the two methods and only in two cases discrepant results were obtained. Its is concluded that: 1) sera from patients in the acute and chronic phases of HDV infection can be used as source of both antigen and antibody, for immunoassays; 2) EIA and RIA have comparable relative specificity and sensibility and 3) EIA is easier to perform, cheaper, non-hazardous, has a longer shelf-life and saves scarce HDAg.
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