• Imunodiagnóstico da neurocisticercose: teste imunoenzimático com antígenos quimicamente ligados a suportes para pesquisa de anticorpos em soro e líquido cefalorraquiano Artigos Originais

    Vaz, Adelaide José; Ferreira, Antonio Walter

    Abstract in Portuguese:

    Foi padronizado o teste imunoenzimático, ELISA, utilizando-se componentes antigênicos de Cysticercus cellulosae quimicamente ligados a suportes sólidos constituídos de discos de tecido-resina (ELISA-d), para pesquisa de anticorpos em soro líquido cefalorraquiano (LCR), ensaiando-se uma única diluição do espécime clínico. O suporte tecido-resina foi composto de tecido de poliéster impregnado com resina polimerizada de N-metilol-acrilamida, apresentando grupos N-metilol livres, capazes de reagir covalentemente com grupos funcionais de proteínas e polissacarídeos presentes no extrato antigênico salino total obtido de cisticercos. Foram ensaiados 38 soros e 74 LCR de pacientes com neurocisticercose comprovada e 50 soros e 107 LCR do grupo controle (pacientes com quadros clínicos neurológicos diversos e indivíduos supostamente normais). Obtivemos os seguintes índices de sensibilidade e especificidade: 94,7% e 92,0% para o teste realizado no soro e 98,6% e 100% para o teste realizado no LCR. O teste ELISA-d mostrou-se eficiente para o diagnóstico da neurocisticercose, principalmente quando realizado no LCR, com vantagens de estabilidade, facilidade de execução e baixo custo.

    Abstract in English:

    The enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA, was developed in a new type of support consisting of discs of sinthetic fabric-resin (ELISA-d) with antigenic components of Cysticercus cellulosae covalently bound for detection of antibodies in sera and cerebrospinal fluid (CSF). The support fabric-resin consistis of poliéster fabric coated with crosslinked resin (N-methylol-acrylamide) containing N-methylol groups able to form covalent bounds with functional groups of proteins and polysaccharides which are present in the antigenic saline extract obtained from Cysticercus cellulosae. Sera titer and CSF titer were determined using only one dilution according to the dose-response standard curves obtained. Thirty-eight sera and 74 CSF from patients with confirmed diagnosis of neurocysticercosis and 50 sera and 107 CSF from a control group (patients suffering from neurological disorders other than neurocysticercosis and supposedly healthy individuals) were assayed The sensitivity and the specificity of ELISA-d were determined: 94.7% and 92.0% for sera and 98.6% and 100% for CSF. The ELISA-d test proved to be efficient for the diagnosis of neurocysticercosis, mainly when carried out in CSF, with the advantages of good stability, easy preparation and execution and low cost.
  • Antibody response to heat-inactivated hepatitis B vaccine (CLB-3mg) in hemodialysis patients and occupational risk personnel: a one year follow-up Original Articles

    Yoshida, C. F. T.; Takahashi, C.; Mercadante, L. A. C.; Camargo, I. F.

    Abstract in Portuguese:

    A resposta imune contra vacina de hepatite B (CLB-3mg) foi avaliada em 59 pacientes de hemodiálise e 20 funcionários de risco em adquirir infecção. A soroconversão foi observada em 52,5% e 70,0%, respectivamente. Um ano após a primeira dose, os níveis de anticorpos anti-HBs foram determinados em 37.5% dos pacientes e 60.0% dos funcionários. Os níveis de anticorpos foram expressos em unidades de radioimunoensaio (SRU = contagem da amostra sobre o controle negativo). Considerando apenas os indivíduos que responderam à vacina, no grupo de pacientes, 38.7% tiveram resposta baixa de anticorpos (2,1 - 9,9 SRU), 32,3% resposta média e 29,0% uma resposta elevada (> SRU), enquanto que no pessoal de risco, os valores foram 14,3%, 64,3% e 21.4%, respectivamente. Os autores sugerem o uso de vacinas de HBV com concentrações de HBsAg mais elevada ou um reforço no esquema de imunização para melhorar a resposta de anti-HBs, não só para pacientes como também para pessoas sadias.

    Abstract in English:

    Immune response against hepatitis B vaccine (CLB 3mg) was evaluated in 59 hemodialysis patients and 20 occupational risk personnel. Seroconversion was induced in 52.5% and 70.0% respectively. Twelve months after the first dose, 37.5% of patients and 60.0% of occupational risk personnel had detectable anti-HBs level. Antibody level was expressed in sample ratio units (SRU). Considering only the responders, in the patients group 38.7% had a low anti-HBs response (2.1-9.9 SRU) 32.3% a medium response (10-99.9 SRU) and 29.0% a high response (>100 SRU) while in occupational risk personnel these values were 14.3%, 64.3% and 21.4% respectively. The authors suggest the use of HBV vaccines with more elevated HBsAg concentration or a reinforced immunization schedule to improve the anti-HBs response not only for patients but also for healthy persons.
  • "In vitro" activity of gentian violet against asexual Plasmodium falciparum parasites Original Articles

    Yang, Shen Lin; Di Santi, Silvia Maria; Amato Neto, Vicente; Moreira, Antonio Augusto Baillot; Pinto, Pedro Luiz Silva; Boulos, Marcos; Campos, Rubens; Sant'Ana, Eunice José de; Shiroma, Mario

    Abstract in Portuguese:

    Utilizando a técnica de RIECKMANN e col.5, os autores realizaram 20 microtestes de sensibilidade, procurando verificar a capacidade da violeta de genciana em impedir, na cultura "in vitro", o desenvolvimento habitual do Plasmodium falciparum. Os resultados mostraram que houve inibiçáo da evolução do protozoário nas concentrações de 1/1000, 1/1500, 1/2000, 1/2500, 1/3000 e 1/4000, significando que nas condições da experiência o corante atuou sobre as formas sangüíneas assexuadas do protozoário. Estas verificações sugerem que a violeta de genciana poderia ser usada na profilaxia da malária transfusional.

    Abstract in English:

    In order to investigate whether gentian violet exhibited "in vitro" inhibitory activity against Plasmodium falciparum, the Authors have carried out 20 sensitivity tests according to the microtechnique described by RIECK MANN et al.5. Results have shown inhibition of schizonts'maturation at the following concentration: 1/1000; 1/1500; 1/2000; 1/2500; 1/3000 and 1/4000, thus demonstrating inhibitory activity of the tested dye against asexual blood parasites. The present data suggest gentain violet may be possibly used in the prophylaxis of transfusion-acquired malaria.
  • Comparative study of the biological behaviour in hamster of two isolates of leishmania characterized respectively as L. major-like and L. donovani Original Articles

    Duarte, M. I. S.; Laurenti, M. D.; Andrade Jr., H. F.; Corbett, C. E. P.

    Abstract in Portuguese:

    Experimentos utilizando-se hamsters inoculados intraperitonealmente com 1 x 10(7) parasitas de 2 cepas, L. donovani (MHOM/BR/72/LD 46) e L. major-like (MCAN/BR/73/LD 70) isoladas no Novo Mundo foram realizados e estudados em grupos de 15, 30, 60 e 90 dias de infecção. A carga e a densidade parasitária mostraram progressivo aumento com a evolução da infecção e foi maior nos grupos inoculados com L. donovani do que nos grupos inoculados com L. major-like. Os grupos inoculados com L. major-like mostraram densidade parasitária maior no baço que no fígado e foram semelhantes em ambos os órgãos nos grupos inoculados com L. donovani. A histopatologia mostrou intensa e difusa hyperplasia e hipertrofia do sistema reticuloendotelial com alto parasitismo nos grupos inoculados com L. donovani, enquanto foi encontrado envolvimento focai nestes órgãos nos grupos inoculados com L. major-like, formando nódulos de macrófagos discretamente parasitados. O comportamento biológico seria útil em estudos preliminares de identificação de cepas de Leishmania em laboratórios regionais e na compreensão da histopatologia das lesões causadas por diferentes espécimes de leishmanias.

    Abstract in English:

    Hamster inoculated intraperitoneally with 1 x 10(7) parasites of L. donovani and L. major-like of the New World were studied in groups of 15, 30, 60 and 90 days of infection. The parasite load and density showed progressive increase with the evolution of the infection and was higher in the L. donovani groups than in the L. major-like groups. The L. major-like groups showed parasite density higher in the spleen than in the liver and was similar in both organs in L. donovani groups. The histopathology showed a diffuse marked hyperplasia and hypertrophy of the reticuloendothelial system with high parasitism in the L. donovani groups while there was focal involvement of these organs in L. major-like groups, forming nodules of macrophages that were scantly parasitised. The biological behaviour could be useful in the preliminary studies of Leishmania strain in regional laboratories and understanding the histopathology of lesions caused by different leishmania species.
  • Aportes al conocimiento de la hidatidosis como zoonosis urbana

    Larrieu, Edmundo; Iriarte, Jorge; Zavaleta, Omar

    Abstract in Spanish:

    En la República Argentina, la hidatidosis constituye un serio problema que afecta a la salud publica y tiene graves repercusiones socioeconómicas. Las fuertes corrientes urbanisticas han traido consigo el traslado de algunas costumbres rurales hacia los centros poblados. A partir ae ello la hidatidosis en las areas endêmicas ha adquirido importância como zoonosis urbana. Si bien las cifras de infección canina halladas (1.12%) son significativamente inferiores que en las áreas rurales de la misma región, la capacidad potencial de infectar al hombre es muy superior en canes domiciliados en áreas de gran densidad demográfica. Las altas tasas de infección humana halladas son demostrativas de los aspectos señalados.

    Abstract in English:

    In Argentina hydatidosis is a serious problem of Public Health with socioeconomic effects Strong urbanistic populational streams brought from the country local habits to urban areas. Hydatidosis became them an urban zoonosis. In spite of data on canine infection found (1.12%) are lower than those found in rural areas from the same region, the potential capacity to infect humans is higher in dogs from areas of high demographic density. The high incidences of human infections found are in accordance with this idea.
  • Avaliação da técnica de lise mediada por complemento em pacientes chagásicos crônicos tratados com drogas tripanosomicidas Ensaios Técnicos

    Levy, Antonio Marcos de Aparecida; Pereira, Vera Lucia; Boainain, Elias

    Abstract in Portuguese:

    Os níveis de anticorpos líticos foram determinados em pacientes chagásicos crônicos, tratados com nifurtimox ou benzonidazol, através da Lise Mediada por Complemento (LMCo). Dois grupos de pacientes foram estudados: um grupo tratado há mais de seis anos e outro há menos de seis anos. Ambos os grupos, após o tratamento, apresentaram xenodiagnósticos negativos, embora as provas sorológicas permanecessem reagentes. Foram incluídos um grupo controle negativo com provas sorológicas não reagentes e um grupo controle positivo com provas sorológicas e parasitológicas positivas. Para a LMCo foram utilizadas duas amostras de cada paciente, obtidas em ocasiões diferentes, tanto dos grupos estudados quanto do grupo controle positivo. Em vista dos resultados foi calculada a sensibilidade da reaçáo (83.3%) e a especificidade (100,0%). Nos grupos estudados observou-se que cerca da metade dos pacientes apresentaram lise menor do que 20%, podendo, este resultado, corroborar a "cura parasitológica". Notou-se que 43,6% dos pacientes tratados há mais de seis anos apresentaram resultados contraditórios, ora negativos, ora positivos, dependendo da amostra. Tais resultados foram considerados inconclusivos, em virtude das provas parasitológicas permanecerem negativas. Um seguimento a longo prazo poderá esclarecer o significado desses resultados.

    Abstract in English:

    Levels of lytic antibodies were determined by complement mediated lysis (CoML) in chronic chagasic patients treated with nifurtimox orbenznidazole. Two groups of patients were studied: one who had been treated more than six years ago and another with less than six years since treatment, although serologic reactions remained positive. CoML was carried out in two samples obtained from patients on different occasions, in test groups as well as in positive controls. In view of results observed sensitivity of reaction (83.3%) and its specifity (100.0%) were calculated. It was observed that about half of the patients presented lysis up to 20% and this result may corroborate "parasitological cure". It was noted that 43.6% of patients treated more than six years ago and 20.0% of patients with less than six years since treatment presented variable results, either positive or negative, differing for each sample from the same individual. Such results were thus considered as inconclusive, since parasitological tests remain negative. A prolonged follow-up may shed light over such results.
  • Prevalência de anticorpos para chlamydia trachomatis em grupos populacionais do Brasil, Inglaterra e Portugal Soroepidemiologia

    Ishak, Marluísa de Oliveira Guimarães; Mumtaz, Gilanfan; Ishak, Ricardo; Ridgway, Geoff

    Abstract in Portuguese:

    A prevalência de anticorpos IgG, grupo-específico para Chlamydia, em populações do Brasil, Inglaterra e Portugal foi determinada através do teste de imunofluorescência indireta, tendo-se como antígeno a cepa SA2 (f). Foram considerados positivos os soros com títulos de IgG >1:32. Dentre as populações brasileiras, a prevalência de anticorpos para Chlamydia foi maior em Serra Norte (76,2%, p < 0,01) do que nas das populações de Belém (53,6%) e dos Índios Xicrins (51,3%). Entre os pacientes do Departamento de Medicina Genito-Urinária do University College Hospital (UCH) e do quadro do mesmo Hospital, a prevalência de anticorpos anti-Chlamydia foi de 62% e 53,1%, respectivamente. Anticorpos anti-Chlamydia foram detectados em 54% e 66% na Inglaterra e em 56% e 68% em Portugal, nas pacientes do sexo feminino que freqüentavam Clínicas de Pré-Natal e de Infertilidade, respectivamente, Os resultados encontrados mostram uma alta exposição das populações testadas, à Chlamydia, principalmente do grupo de baixo nível sócio-econômico de Serra Norte, Brasil. A evidência de infecção por Chlamydia é da mesma ordem, tanto no Brasil, quanto na Inglaterra e Portugal.

    Abstract in English:

    The prevalence of group - specific antichlamydial IgG in populations from Brazil, England and Portugal was studied using the whole inclusion - indirect immunofluorescence test, and SA2 (f) as antigen. Those sera with the IgG titre > 1:32, were considered to be positive. Among the Brazilian populations, prevalence of chlamydial antibody was higher in Serra Norte (76,2%, p < 0,01) than in Belém (53,6%) and among Xicrins Indians (51,3%). In patients attending the Departament of Genito Urinary Medicine, University College Hospital and in members of the UCH staff, London, England, the prevalence of antichlamydial IgG was 62% and 53,1%, respectively. Antibody to Chlamydia was detected in 54% and 66% of the English women and in 56 and 68% of the Portuguese women attending Antenatal and Infertility Clinics, respectively. These results show a wide exposure to Chlamydia among all the populations tested, mainly among the low socio-economic group of Serra Norte, Brazil. Evidence of chlamydial infections is of the same order in Brazil, England and Portugal.
  • Caracterização dos macrófagos presentes nas lesões cutâneas da hanseníase: estudo por monoclonais Imunologia

    Sarno, Euzenir Nunes; Alvarenga, Fátima de Barros Fonseca; Vieira, Leila Maria Machado; Souza, Paulo R. Cotrim de

    Abstract in Portuguese:

    As lesões cutâneas de 16 pacientes com hanseníase foram estudadas por imunofluorescência com anticorpos monoclonais anti-monócitos (OKM1 e anti-MO) e anti-Ia (OKIa). Foi avaliada a atividade de fosfatase ácida utilizando-se naftol AS-B1 fosfato como substrato. Os macrófagos parecem constituir uma população heterogênea em relação aos antigenos estudados neste trabalho e quanto a atividade enzimática. Em todas as formas estudadas um grande número de células eram OKIa positivas.

    Abstract in English:

    The skin lesions from 16 leprosy patients were studied by immunofluorescence technique using monoclonal antibodies against monocytes (OKM1 and Anti-Mo) and la-like antigen. Acid phosphatase activity was evaluated using naphthol AS-BI phosphate as substrate. The macrophages seem to be a heterogeneous population in concern with the antigens here studied as well as the enzimatic activity. Ia-like antigen was expressed in a great number of cells throughout the clinical spectrum.
  • Passive haemagglutination test for human neurocysticercosis immunodiagnosis: I. Standardization and evaluation of the passive haemagglutination test for the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies Immunology

    Ueda, Mirthes; Camargo, Eide Dias; Vaz, Adelaide José; Souza, Ana Maria Carvalho de; Figueiredo, Regina Maria; Silva, Marcos Vinicius da

    Abstract in Portuguese:

    Foi padronizada e avaliada a reação de hemaglutinação passiva (RHA) para pesquisa de anticorpos específicos, anti-Cysticercus cellulosae, no líquido cefalorraquiano (LCR). Foram utilizadas hemácias humanas O Rh-formolizadas e sensibilizadas com extrato antigênico salino total de cisticercos, ainda pouco estudado. De 115 amostras estudadas de LCR de pacientes com neurocisticercose, 94 foram reagentes, resultando em 81,7% de sensibilidade, com intervalo de confiança de 95% de probabilidade (IC95%) abrangendo de 74,5% e 88,9%. Também foram ensaiadas 89 amostras de LCR de indivíduos do grupo controle, sendo tão reagentes em 94,4%, com IC95%, de 89,6% a 99,2%. Os valores preditivos positivo e negativo obtidos para a RHA foram, respectivamente, de 1,4% e 99,9%, considerando a prevalência média de neurocisticercose na América Latina de 0,1%. Os resultados indicam que a RHA como um método simples, altamente reprodutível e moderadamente sensível para a detecção de anticorpos específicos no LCR, porém apropriados para a triagem de infectados.

    Abstract in English:

    A passive haemagglutination test (PHA) for human neurocysticercosis was standardized and evaluated for the detection of specific antibodies to Cysticercus cellulosae in cerebrospinal fluid (CSF). For the assay, formaldehyde-treated group O Rh-human red cells coated with the cysticerci crude total saline extract (TS) antigen were employed. A total of 115 CSF samples from patients with neurocysticercosis was analysed, of these 94 presented reactivity, corresponding to 81.7% sensitivity, in which confidence limit of 95% probability (CL95%) ranged from 74.5% to 88.9%. Eighty-nine CSF samples derived from individuals of control group presented as nonreactive in 94.4% (CL95% from 89.6% to 99.2%). The positive and negative predictive values were 1.4% and 99.9%, respectively, considering the mean rate of that this assay provide a rapid, highly reproducible, and moderately sensitive mean of detecting specific antibodies in CSF samples.
  • Passive haemagglutination test for human neurocysticercosis immunodiagnosis: II - Comparison of two standardized procedures for the passive haemagglutination reagent in the detection of anti-Cysticercus cellulosae antibodies in cerebrospinal fluids Immunology

    Ueda, Mirthes; Vaz, Adelaide José; Camargo, Eide Dias; Souza, Ana Maria Carvalho de; Benelli, Regina Maria Figueiredo; Silva, Marcos Vinícius da

    Abstract in Portuguese:

    São descritas duas metodologias para o preparo de reagente para a reação de hemaglutinação passiva (RHA) destinada à pesquisa de anticorpos anti-Cysticercus cellulosae no líquido cefalorraquiano (LCR). Foram utilizadas hemácias humanas O Rh-formolizadas (HA-1) e hemácias de carneiro tratadas com glutaraldeído (HA-2), sensibilizadas com extrato antigênico salino total (ST) de cisticercos. Cento e quinze amostras de LCR de pacientes com neurocisticercose foram ensaiadas pelos testes HA-1 e HA-2, resultando em positividade de 81,7% e 88,7%, respectivamente. A especificidade obtida foi de 94,4% para HA-1 e 96,6% para HA-2. Não foi observada diferença significativa quanto à capacidade diagnostica dos reagentes na RHA em neurocisticercose (p < 0.05).

    Abstract in English:

    A comparison of two different standardized reagent procedures for the passive haemagglutination test (PHA) in the detection of specific antibody to Cysticercus cellulosae in cerebrospinal fluid (CSF) was carried out. The formaldehyde-treated group O Rh-human red blood cells (HuRBC) and glutaraldehyde-treated sheep red blood cells (SRBC) were the supplies for the reagents preparation and, in the tests, they were designated as PHA-1 and PHA-2, respectively. For both reagents the cells were coated with the cysticerci total saline extract (TS) antigen. PHA-1 and PHA-2 were assessed in a total of 204 CSF from patients with neurocysticercosis, from non-related infections and from healthy individuals. The positivity and specificity indices obtained were respectively 81.7% and 94.4% for PHA-1 and for PHA-2, 88.7% and 96.6%. Since no significant differences were observed between the results provided by two reagents, at level of significance of 0.05, either processes of cell sensitization can alternatively be used according to the own laboratory convenience.
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