• Plasmid composition and virulence-associated factors of Yersinia pestis isolates from a plague outbreak at the Paraíba State, Brazil Original Articles

    Leal, Nilma Cintra; Almeida, Alzira Maria Paiva de; Ferreira, Luís Carlos de Souza

    Abstract in Portuguese:

    Cepas patogênicas de Yersinia pestis foram coletadas durante um surto de peste no Estado da Paraíba em 1986. Os isolados de Y. pestis foram analisados quanto a presença de fatores associados à virulência e conteúdo plasmidial. Todas as linhagens analisadas foram proficientes na expressão dos antígenos VW e fração 1, além de possuírem capacidade de adsorção de pigmentos e produção de pesticina-fibrinolisina-coagulase. Um perfil plasmidial semelhante composto por quatro plasmídeos com peso molecular de 60, 44, 14.9, e 6.4 MD foi encontrado em todas as linhagens. A clivagem do DNA plasmidial com a enzima de restrição EcoRI demonstrou o conteúdo plasmidial uniforme dos isolados de Y. pestis. Sete outras linhagens de Y. pestis, isoladas previamente no mesmo local mas em condição endêmica, mostraram o mesmo perfil plasmidial. A falta de diferenças entre os isolados epidêmicos e endêmicos assim como o uso do perfil plasmidial na epidemiologic de Y. pestis e discutida.

    Abstract in English:

    Pathogenic Yersinia pestis isolates were collected during a plague outbreak at the Paraiba State in 1986. The Y. pestis isolates were investigated for the presence of virulence-associated factors and plasmid content. All strains analysed were proficient in the expression of the VW and fraction 1 antigens, pigment adsorption and pesticin-fibronolysin-coagulase production. A similar plasmid profile composed by four plasmid with molecular weight of 60, 44, 14.9, and 6.4 Megadaltons (MD) was found in all strains. DNA cleavage with EcoRI restriction enzyme further demonstrated the uniform plasmid content of the Y. pestis isolates. Seven additional Y. pestis strains, previously isolated in the same region but in an endemic state, showed the same plasmid fingerprint. The lack of any detectable difference between epidemic and endemic isolates as well as the value of plasmid fingerprints in epidemiology of Y. pestis is discussed.
  • Xenodiagnostico, hemocultura e teste de lise mediada pelo complemento, como critérios de seleção de pacientes chagásicos crônicos para quimioterapia Artigos Originais

    Pereira, Vera Lúcia; Levy, Antonio Marcos de A.; Boainain, Elias

    Abstract in Portuguese:

    O tratamento etiológico da doença de Chagas é iniciado geralmente apenas quando se dispõe de um diagnóstico parasitológico positivo. Na tentativa de aumentar o número de candidatos assim selecionados para o tratamento específico, estudamos 36 pacientes chagásicos crônicos associando o xenodiagnóstico, a hemocultura e o teste de lise mediada pelo complemento, em duas séries sucessivas, intercaladas de um mínimo de 60 dias. A sensibilidade do xenodiagnóstico e da hemocultura foi respectivamente de 30,5% e de 8,3% na primeira série e de 36,1% e de 19,4% nas duas séries. Foram positivos, em pelo menos uma das duas provas, 17 (47,2%) dos pacientes. Destes, entretanto, somente 9 (53,0%) mostraram teste de lise constantemente positivo enquanto que em 5 (29,4%) o teste foi negativo e 3 (17,6%) apresentaram resultados ora positivos, ora negativos. Nos pacientes com provas parasitológicas negativas, o teste de lise foi positivo em 4 (15,8%), negativo em 9 (47,4%) e discordante em 6 (31,5%). Assim, o teste de lise mediada pelo complemento não se constitue em bom método de triagem de candidatos ao tratamento. Apesar da baixa sensibilidade, as provas parasitológicas ainda constituem o instrumento mais seguro para o clínico.

    Abstract in English:

    Normally specific treatment of chronic Chagas' disease begins only after a positive parasitological diagnosis has been established. Xenodiagnosis, hemoculture and complement mediated lysis were associated, and repeated, as an attempt to increase the number of selected candidates for specific treatment. Thirty six chronic chagasic patients were submitted to two series of the above tests, with a minimal interval of 60 days. In the first series of tests sensitivity of xenodiagnosis and hemoculture were 30.5% and 8.3% respectively. Processing of a second sample increased sensitivity to 36.1% (xenodiagnosis) and 19.4% (hemoculture); 47.2% were shown to be positive by at least one of these tests. From the positive cases, 29.4% were consistently negative in the complement mediated lysis test, and 17.6% exhibited discordant results, positive on one occasion and negative on the other. Among patients with negative parasitológica! tests, 47.4% had negative complement mediated lysis tests, 31.5% exhibited discordant results and 15.8% were positive. We conclude that complement mediated lysis test is not a method of choice in the selection of candidates for specific treatment of Chagas' disease in view of the observed variability of results. At this moment, parasitological tests, in spite of a low sensitivity, are a safer tool for the clinician.
  • El ciclo evolutivo experimental de Diphyllobothrium erinaceieuropei en Paracyclops fimbriatus, larvas de Bufo arenarum y caninos

    Venturini, Lucila

    Abstract in Spanish:

    El objetivo del trabajo fue lograr la reproducción experimental del ciclo evolutivo de Diphyllobothrium erinaceieuropei Rudolphi 1819 (Cestoda, Pseudophyllidea) con la intervención de Paracyclops fimbriatus y larvas de Bufo arenarum como hospedadores intermediarios y caninos como hospedadores definitivos. Los huevos del parásito se obtuvieron de heces de caninos infectados naturalmente y se conservaron refrigerados en agua. Se incubaron 7 días a 25°C para que desarrollaran los coracidios y se pusieron en recipientes que contenían a los copépodos mencionados. Al cabo de 12 días a 22,6°C (promedio) se hallaron procercoides maduros en ellos y se agregaron 10 renacuajos de Bufo arenarum. Estos se examinaron por disección 22, 23, 61 y 107 días después, hallándose en todos 1 o más plerocercoides (Temperatura promedio: 24,9°C). El día 23, de 6 renacuajos se obtuvieron 49 plerocercoides, de los cuales se administraron 28, por vía oral, a una perra. El día 107, 3 de 11 plerocercoides obtenidos de un renacuajo se le dieron a otra perra por la misma vía. Se hallaron huevos del cestode en las heces del primer canino a partir del día 22 posterior a la infección (p.i.) y a los 30 días p.i., segmentos de estróbila. En el segundo canino se hallaron huevos a los 30 días p.i..

    Abstract in English:

    Experiments were performed in order to develop the life cycle of Diphyllobothrium erinaceieuropei Rudolphi 1819 (Cestoda, Pseudophyllidea) in Paracyclops fimbriatus and Bufo arenarum as intermediate hosts and dogs as definitive hosts. The eggs of Diphyllobothrium erinaceieuropei from faeces of naturally infected dogs were kept refrigered, in water. In order to obtain coracidiums they were incubated at 25°C, and then were placed in a flask which contained Paracyclops fimbriatus. The copepods were observed to be infected with procercoids 12 days after, (mean temperature 22.6°C) and then, ten tadpoles of Bufo arenarum were put into the same flask. The tadpoles were examined 22, 23, 61 and 107 days later, finding plerocercoids in all them (mean temperature 24.9°C). On the 23th day, 49 plerocercoids were removed from 6 tadpoles and 28 of them were fed to a bitch. On the 107th day, 11 plerocercoids were recovered from a dead tadpole and 3 of them were fed to another bitch. In the faeces of the first bitch there were observed the eggs of Diphyllobothrium erinaceieuropei 22 days post infection (d.p.i.) and part of the strobila 30 d.p.i.. In the faeces of the second bitch the eggs were found 30 d.p.i..
  • Schistosoma mansoni: aspectos quantitativos da evolução de cercarias irradiadas a nível da pele, pulmões e sistema porta, em camundongos Artigos Originais

    Cardoso, Gileno de Sá; Coelho, Paulo Marcos Zech

    Abstract in Portuguese:

    Foi estudada a migração do Schistosoma mansoni (cepas LE e SJ) em oito grupos de camundongos albinos (Mus musculus) não isogênicos, infectados transcutaneamente com cerca de 450 cercarias não irradiadas (grupos controles) e irradiadas com 3 Krad, 20 Krad e 40 Krad de radiação gama proveniente de cobalto-60, Na pele, observou-se uma diminuição progressiva das taxas de recuperação em função do tempo e, nos pulmões e sistema porta, verificou-se uma relação inversa significativa entre as taxas de recuperação total e as doses de irradiação. A dose de 20 Krad praticamente impede a migração dos parasites, de ambas as cepas, dos pulmões até o sistema porta, enquanto a de 40 Krad praticamente impede a migração dos mesmos da pele para os pulmões.

    Abstract in English:

    The migration of Schistosoma mansoni (LE and SJ strains) has been studied in eight groups of outbred Swiss albino mice (Mus musculus), which were previously infected with ca 450 cercariae, transcutaneously. The infection of mice was performed with non irradiated cercariae (control groups), or with gamma-irradiated cercariae, at the schedule of 3, 20 and 40 Krad. Regarding the skin, a progressive decrease was detected for the recovery rates, related to the time of infection. As far as the lungs and portal system are concerned, a significant inverse correlation was observed between the total recovery rate and the irradiation dosages. The dose of 20 Krad practically hinders the migration of the parasites (in both strains) from the lungs to the portal system, whereas the dose of 40 Krad prevents the migration of most of the parasites from the skin to the lungs.
  • Measles vaccination: influence of age on its efficacy Original Articles

    Lopes, Marta Heloísa; Mendonça, João Silva de; Pannuti, Cláudio Sérgio; Albrecht, Paul; Biancalana, Maria Lúcia Neves; Mantese, Orlando César; Correa, José Fábio; Amato Neto, Vicente

    Abstract in Portuguese:

    Os autores comparam a eficácia sorológica e a proteção clinica obtidas com três esquemas diferentes de vacinação contra o sarampo, em crianças eutróficas, na cidade de São Paulo, Brasil. Duzentas e quarenta e duas crianças foram divididas em três grupos. Grupo A, compreendendo 117 crianças primovacinadas antes dos 12 meses de idade e revacinadas com 12 ou mais meses de idade. Grupo B, compreendendo 46 crianças vacinadas com dose única, antes dos 12 meses de idade. Grupo C, compreendendo 79 crianças vacinadas com dose única, aos 12 ou mais meses de idade. A média geométrica do título de anticorpos no grupo A foi 790,1; no grupo B, 251,1; e no grupo C, 550,3. Não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos A e C. A exposição ao vírus do sarampo foi provavelmente semelhante em todos os grupos. As crianças dos grupos A e C apresentaram risco de adoecimento semelhante após vacinação, enquanto que tal risco foi maior no grupo B quando comparado aos outros dois grupos. Os resultados obtidos neste estudo falam a favor do uso, em países em desenvolvimento, de um programa de vacinação contra o sarampo que inclua uma primeira dose àos oito meses de idade e revacinação após os 12 meses de idade.

    Abstract in English:

    The authors compare the serologic efficacy and the clinical protection afforded by three different measles vaccination schemes in adequately nourished children in São Paulo city, Brazil. Two hundred forty two children were divided into three groups. Group A, comprising 117 children who had received the vaccine before 12 months of age and a second dose at 12 months of age or more. Group B, comprising 46 children who had received only one dose, before 12 months of age. Group C, comprising 79 children who had received only one dose, at 12 months of age or more. The geometric mean titer of antibodies in Group A was 790.1; in Group B, 251.1; and in Group C, 550.3. There was no statistically significant difference between Groups A and C. The exposure to the measles virus was probably similar in all groups, and the children in Groups A and C had similar chances of acquiring the disease after vaccination whereas in Group B the chances were higher when compared to the other two groups. The results obtained in this study favor the use, in developing countries, of a vaccination program against measles that includes an early first dose at eight months of age and revaccination after 12 months of age.
  • Comparison of serum hepatitis B virus replication markers in patients with chronic hepatitis B: studies on HBeAg/Anti-HBe system, viral dna polymerase and HBV-DNA Original Articles

    Pinho, João Renato Rebello; Fonseca, Luís Edmundo Pinto da; Song, Yu; Miyamoto, Yuriko; Carrilho, Flair José; Granato, Celso Francisco Hernandes; Silva, Luiz Caetano da

    Abstract in Portuguese:

    A detecção do genoma do HBV no soro por hibridização molecular é o mais sensível e específico marcador da replicação e infectividade do HBV, sendo sua utilização proposta como técnica rotineira no acompanhamento de doenças relacionadas a este vírus. Comparando diferentes técnicas descritas anteriormente, escolhemos a deposição direta das amostras séricas sobre a membrana de nitrocelulose sob filtração a vácuo, seguida de banhos desnaturantes e neutralisantes como mais prática e simples, com sensibilidade equivalente. O ensaio da DNA polimerase usando ácido fosfonofórmico como inibidor virai específico mostrou 86.8% de concordância com a detecção direta do DNA viral, sendo, portanto, uma alternativa viável no acompanhamento de pacientes com hepatite crônica B. Encontramos 19,2% das amostras AgHBe positivos sem outros marcadores de replicação viral. Por outro lado, nenhuma amostra anti-HBe positiva teve HBV-DNA detectável. Discordância entre estes dois sistemas foi extensamente descrita, e confirmamos pela primeira vez este fato em pacientes com hepatite crônica B em nosso país. Técnicas de biologia molecular são, portanto, fundamentais na determinação da replicação viral em cada paciente.

    Abstract in English:

    The detection of HBV-DNA in serum by molecular hybridization is the most sensitive and specific marker of replication and infectivity of hepatitis B virus and currently is proposed as a routine diagnostic technique in the follow-up of HBV - related diseases. Comparing different techniques already described, we found that direct spotting of serum samples on nitrocellulose membranes under vacuum filtration, followed by denaturing and neutralizing washes is more practical, simple, sensible and reproducible. DNA polymerase assay using phosphonoformic acid as specific viral inhibitor has shown 86.8% of concordance with HBV-DNA detection, and so, it is an useful alternative in the follow-up of hepatitis B chronic patients. We found 19.2% HBeAg positive samples with no other markers of viral replication and no anti-HBe positive sample had detectable HBV-DNA. Discordance between the 2 systems have been extensively described, and we confirm this for the first time in our country. Molecular biological techniques are essential to determine the replication status of chronic hepatitis B patients.
  • Enzyme linked immunosorbent assay: determination of anti-adenovirus antibodies in an infant population Serology

    Weinberg, Adriana; Fink, Maria Cristina D. S.; Takimoto, Sueko; Ishida, Maria Akiko; Souza, Maria Cândida O.

    Abstract in Portuguese:

    Com a finalidade de encontrar um ensaio preciso para a detecção de anticorpos anti-adenovírus, o teste ELISA recentemente padronizado foi comparado à imunofluorescência indireta (IFI) e à fixação de complemento (FC). Após testar 58 soros, o ELISA demonstrou maior sensibilidade do que a IFI e a FC, que mostraram sensibilidades relativas de 94% e 63%, respectivamente. A falta de um padrão universal não permitiu alcançar conclusões definitivas quanto à especificidade dos ensaios. Além disso, o ELISA foi utilizado para estabelecer a prevalência de anticorpos anti-adenovírus em 116 crianças entre 1 e 24 meses de idade (média 7.28). Os dados mostraram que os anticorpos maternos desaparecem ao redor dos 5 a 6 meses de idade e que mais de 80% das crianças tinham sido infectadas antes dos 10 meses de idade.

    Abstract in English:

    In order to define an accurate assay for anti-adenovirus antibody detection, a recently developed ELISA was compared with IFA and CF. On 58 sera, the ELISA was more sensitive than both CF and IFA, which showed relative sensitivities of 63% and 94%, respectively. It was not possible to determine the exact specificity of the tests because of the lack of a gold standard. Furthermore, the ELISA was used to define the prevalence of adenovirus antibodies in 116 infants between 1 and 24 months old (mean 7.28). The data showed that maternal antibodies waned by the age of 5 to 6 months and that more than 80% of the children had been infected by adenoviruses by the age of 10 months.
  • Simplification of Immune Adherence Hemagglutination test for detection of rabies antibodies in human serum Technical Trials

    Zanetti, Carlos Roberto; Tino, Milene Silva; Chamelet, Esther Luiza Bocato; Ishizuka, Masaio Mizuno; Pereira, Octavio Augusto de Carvalho

    Abstract in Portuguese:

    A Reação de Hemaglutinação por Imunoaderência foi padronizada de maneira simplificada, para detecção de anticorpos rábicos em soros humanos. Esta reação mostrou grande reprodutibilidade, maior que a apresentada pela clássica prova de soroneutralização em camundongos (SN). Ambas as provas mostraram alto grau de correlação, ou seja, altos títulos em uma reação correspondeu a altos títulos na outra; o mesmo ocorreu em relação aos títulos baixos. A reação de Hemaglutinação por Imunoaderência, além de ser de execução extremamente simples e rápida, tem custo bem menor se comparada a provas como a soroneutralização ou a imunofluorescência indireta. Pode, portanto, serde grande utilidade em laboratórios com poucos recursos ou mesmo ser utilizada como uma prova de triagem para a titulação de anticorpos rábicos.

    Abstract in English:

    In the present work the immune adherence hemagglutination test (IAHA) was standardized in a simplified procedure. This test showed good reproducibility, better than the classical mice serum neutralization test (SN). The tests showed high correlation degree: high titers in one test corresponded to high titers in the other one, and the same occured with low titers. The IAHA test is extremely simple, fast to perform, and of low cost when compared to tests such as SN or indirect immunofluorescense (IIF). It also proved to be useful in less sophisticated laboratories or even as a screening test for the titration of rabies antibodies.
  • "In vitro" susceptibility of Cryptococcus strains to 5 antifungal drugs

    Bava, A. J.; Negroni, R.

    Abstract in Spanish:

    Se estudió la susceptibilidad "in vitro" de 24 cepas de 3 especies del género Cryptococcus a 5 drogas antifúngicas (anfotericina B, 5 fluorocitosina, ketoconazol, itraconazol y miconazol). Las mismas se agruparon según su especie, variedad y origen de aislamiento. Para determinar la concentración inhibitoria mínima (C.I.M.) de cada droga se empleó el método de dilución en agar con el medio básico nitrogenado para levaduras, adicionado de glucosa. Se obtuvo además la media geométrica de estos valores para cada grupo y se comparó cada uno de ellos. Los resultados obtenidos fueron homogéneos con la sola excepción de las cepas de Cryptococcus sp (no neoformans), en las cuales se detectaron elevados valores de C.I.M. para la 5 fluorocitosina.

    Abstract in English:

    A comparative study of the "in vitro" susceptibility of 24 Cryptococcus strains to 5 antifungal drugs (amphotericin B, 5 fluorocytosine, miconazole, itraconazole and ketoconazole), was carried out. These strains were grouped according to species, varieties and isolation's origins. The minimum inhibitory concentration (M.I.C.) was determinated by the agar dilution technique in yeast nitrogen base agar with dextrose. The mean geometrical of the M.I.C. values of each group was compared with the others. The results obtained were homogeneous with the only exception of the "non neoformans" strains, in which, higher M.I.C. to 5 fluorocytosine values were detected.
  • Esporotricosis felina: aspectos clínicos e zoonóticos Registro de Caso

    Larsson, Carlos Eduardo; Gonçalves, Mareia de Almeida; Araujo, Vera Cavalcanti; Dagli, Maria Lúcia Zaidan; Correa, Benedito; Fava Neto, Celeste

    Abstract in Spanish:

    La esporotricosis consiste en micosis profunda, de evolución subaguda o crónica decurrente de infección por el hongo dimorfico Sporothrix schenkii. Consiste en dermatopatia mucho frecuente en nuestro medio, resultante de la penetración de abrojos e de arañazos por espinos de plantas. El S. schenkii ha sido descrito, en S. Paulo, en perros, gatos, aseninos, bovinos, equinos y ratones. Todavía, el carácter de antropozoonosis de la enfermedad pocas veces ha sido descrito tanto en la literatura internacional como en la nacional, existiendo apenas una citación en lo Brasil, de probable transmisión gato/hombre. Se discrebió, en lo presente relato, caso clínico de esporotricosis felina con transmisión através de arañadura en propietario, tratador y médico veterinário. Un gato, sin raza definida, macho, con 3 años, mucho agresivo, con grave cuadro cutáneo (cefálico, torácico y de miembros torácicos) manifestado por lesiones ulceradas, exudativas de alopecia, deposición de crostas hemorrágicas, agraviado por síntomas de lo complejo respiratorio felino, donde por su temperamento agresivo habia arenado en corto espacio de tiempo 5 individuos, donde 3 de los individuos manifestaron sintomas de evolución y gravedad distintas. El diagnostico clínico presuntivo fue confirmado perlo examen histopatológico (H.E., PAS) de fragmentos de piel, linfonodos y amígdalas cogidos, "intra-vitam" y/o "post-morten", per lo aislamiento de lo agente, per la inoculación en testículos de ratas adultas y posterior nuevo aislamiento. Se confirmó la patologia por pruebas suerológicas (F.C., anticuerpos precipitantes) y prueba de intradermoreación (esporotriquina) en los pacientes acometidos.

    Abstract in English:

    The sporotrichosis is a deep mycosis, its course is subacute or chronic, and is caused by the Sporothrix schenckii. It's a very common dermatopathy, generally arising from thorn wounds, insects stings as well as from splinters. The S. schenckii has been described in São Paulo, Brazil, in canines, felines, asinines, bovines, equines and murines. However, its antropozoonotic feature has seldom been mentioned in the international literature, and, in Brazil, there is only one report about a possible transmission cat-human being. The current approach describes a clinical case of feline sporotrichosis transmitted by cat scratch to the owner, the career and the veterinarian.' A very offensive three-year-old male mongrel cat showed severe cutaneous lesions in cephalic, thoracic regions and forelimbs. These lesions were ulcerations, exsudation, crusts, alopecia worsened by the symptoms of the feline respiratory complex. This cat wounded, in a short time, 5 persons. Three of them had shown symptoms of distinct severity and development. The presumptive clinical diagnosis was corroborated by histopathology (HE, PAS) of skin, lymphonodes, and tonsils fragments obtained "intra-vitam" and "post-morten". This was true by the isolation of the agent. Finally, this was confirmed as a result of serological (FC, precipitation antibodies) and immunocutaneous (sporotrichina, histoplasmina) tests made in affected patients.
  • Fifth disease in children living in Belém, Brazil Case Reports

    Miranda, Mário F. R. de; Linhares, A. C.; Shirley, J. A.

    Abstract in Portuguese:

    Amostras de soro colhidas na fase aguda de doença exantemática, acomentendo duas crianças, revelaram-se positivas quanto à presença de IgM específica para o vírus B 19, através do método de rádio-imuno-ensaio por mecanismo de captura. O primeiro paciente, um menino de dois anos, apresentou erupção cutânea com seis dias de duração; o segundo foi uma menina de quatro anos de idade, irmã do primeiro paciente e que foi submetida a exame à mesma época em que se procedeu à avaliação clínica do irmão, e que exibia "rash" cutâneo que evoluía há três dias.

    Abstract in English:

    Acute sera from two children suffering from an illness with an erythematous rash were positive for B 19 virus specific IgM antibody, as tested by a capture radioimmunoassay. The first patient, a two year old boy, presented with a cutaneous rash of six days duration, the second was a four year old girl, sister of the first patient, who was examined at the same time and had a three day history of cutaneous rash.
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