Resumo em Português:

Comparou-se o emprego de cortes em congelação de larvas de S. stercoralis e de S. ratti como fonte de antígenos na reação de imunofluorescência indireta (RIF) para o diagnóstico da estrongiloidíase humana. Os antígenos foram obtidos de coproculturas de fezes humanas e de ratos, respectivamente. Soros de 123 indivíduos foram analisados sendo 54 de pacientes com estrongiloidíase e 69 controles. Empregou-se conjugado anti IgG humano marcado com fluoresceína nos títulos ideais de 10 para S. stercoralis e 100 para S. ratti. A sensibilidade da RIF foi de 94,4% e 92,5% e a especificidade de 94,2% e 97,1% respectivamente para os antígenos de S. stercoralis e S. ratti. Para os 2 antígenos os títulos dos soros variaram de 20 a 2560. Houve correlação linear significativa (r = 0,85 p <FONT FACE="Symbol">£</font> 0,001) entre os títulos de anticorpos para os 2 antígenos. Concluiu-se que os 2 antígenos podem ser empregados na RIF. Diante da disponibilidade de obtenção de grande quantidade de antígeno em laboratório, economia do conjugado, por não haver diferença significativa entre sensibilidades e especificidades e haver correlação linear entre os títulos de anticorpos, a utilização do S. ratti é recomendada como antígeno no diagnóstico da estrongiloidíase humana

Resumo em Inglês:

Cryo-microtome sections of larvae of Strongyloides stercoralis and S. ratti respectively obtained from human and rat feces cultures, were used as antigens. Fluoresceinate conjugates against human IgG were employed at the ideal titer of 10 for S. stercoralis and 100 for S. ratti. The sensitivity of the indirect immunofluorescence reaction (IIF) was 94.4% and 92.5% and the specificity 94.2% and 97.1% for the two specific larval antigens, respectively. Sera from 123 persons (54 from carriers of S. stercoralis infections and 69 from controls) were submitted to the reaction. The titers of different sera varied from 20 to 2560. There was a significant linear correlation (r = 0.85 p <FONT FACE="Symbol">£</font> 0.001) between the antibodies from the two species of larval antigens. We conclude that both antigens may be used in the IIF reaction for the diagnosis of human strongyloidiasis. Due to the feasibility of safe and low-cost mass production of S. ratti larvae in the laboratory with a considerable economy of conjugate, their utilization in the serum diagnosis of human strongyloidiasis is recommended

Resumo em Português:

A cepa MN do HIV-1 é conhecida por ser mais prevalente no Brasil, a cepa BRU é mais prevalente na Europa e a cepa NDK na África. Tem sido sugerido na literatura que diferentes cepas devam ser incluídas em uma mesma vacina contra o HIV-1. Com o intuito de se contribuir para o desenvolvimento de uma vacina universal, a ocorrência de anticorpos (Ac) contra três cepas do HIV-1 (MN, BRU, NDK) foram determinadas em amostras de soros de 85 pacientes voluntários, adultos, soropositivos para o HIV-1, atendidos em um Hospital Universitário. Cem unidades infectantes para cultura de tecido (TCIU) dos vírus reagiram com diluições seriadas de soro (2x) e células MT4 adicionadas a uma concentração final de 0,3 × 106 células/ml, e o efeito citopático foi observado no 7- e 11- dias de incubação. Títulos menores de 1/50 foram considerados negativos. Em 129 testes realizados, encontrou-se negatividade para MN em 40 soros, para BRU em 29 e em 60 para NDK. Houve uma predominância das cepas BRU e MN, a maioria nos títulos de 1/50 a 1/200. Títulos para NDK foram detectados em 25 soros. Conclui-se haver uma predominância das cepas BRU e MN nos indivíduos testados, da região; entretanto a detecção de soros positivos para NDK alerta para a necessidade de estudos desta cepa em outras populações e regiões do Brasil

Resumo em Inglês:

The MN strain of HIV-1 is known to be more prevalent in Brazil, the BRU strain is more prevalent in Europe, and the NDK strain in Africa. It has been suggested in the literature to include different strains in the same vaccine against HIV-1. To contribute to the studies for the development of a universal vaccine, the occurrence of antibodies (Ab) against three HIV-1 strains (MN, BRU and NDK) was determined in serum samples from 85 HIV-1-positive patients, adult volunteers seen at the University Hospital of the Faculty of Medicine of Ribeirão Preto-USP. One-hundred tissue culture infective unit (TCIU) of the viruses reacted with serial dilutions of the sera (2x) and with MT4 cells added at a final concentration of 0.3 × 106 cells/ml, and a cytopathic effect was observed on the 7th and 11th days of incubation. Titres of less than 1/50 were considered to be negative. In 129 tests, the sera were negative for one of the three strains: 40 for MN, 29 for BRU and 60 for NDK. There was a predominance of strains MN and BRU, most of them presenting titres from 1/50 to 1/200. Titres for NDK were detected in 25 sera. We conclude that there seems to be a predominance of strains MN and BRU among the individuals from the region tested; however, the detection of sera with positive NKD titres indicates the need for further studies of this strain in other populations and regions of Brazil

Resumo em Português:

A criptococose é uma das infecções fúngicas mais comuns do sistema nervoso central (SNC) em pacientes com Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (SIDA), sendo meningoencefalite ou meningite manifestações freqüentemente observadas. Apesar disso, poucos são os estudos sistemáticos sobre a composição do líquido céfalo-raquidiano (LCR) de pacientes com SIDA e neurocriptococose. No presente estudo, foram analisadas amostras de LCR de 114 pacientes soropositivos para HIV, com queixa clínica sugestiva de envolvimento do SNC, sendo 32 com neurocriptococose (Grupo 1) e 82 sem doença neurológica identificada (Grupo 2). Considerando os resultados citológicos e bioquímicos, dois perfis liquóricos foram observados: Normal (Grupo 1 = 31%, Grupo 2 = 39%) e Anormal (Grupo 1 = 69%, Grupo 2 = 61%). Linfócitos foram as células predominantes em ambos os grupos. Nossos resultados mostram que, entre os pacientes com SIDA, anormalidades liquóricas são bastante freqüentes, inespecíficas e difíceis de serem interpretadas. Assim, entendemos que nessas condições, a análise do LCR deve, necessariamente, ser complementada pela busca sistemática do agente etiológico através de métodos microbiológicos e/ou imunológicos

Resumo em Inglês:

Cryptococcosis is one of the most common fungal infections of the central nervous system (CNS) in AIDS patients and meningoencephalitis or meningitis is a frequently observed manifestation. However, systematic studies of cerebrospinal fluid (CSF) composition from AIDS patients with CNS cryptococcosis have been few. CSF samples from 114 HIV seropositive patients whose clinical complaint suggested CNS involvement, were analyzed; 32 samples from patients diagnosed as having neurocryptococcosis (Group 1) and 82 samples from patients with no identified neurological disfunction (Group 2). Based on cytological and biochemical results, two distinct profiles were observed: Normal (Group 1 = 31%, Group 2 = 39%); Abnormal (Group 1 = 69%, Group 2 = 61%). Lymphocytes were the most frequent cells in both groups. Our CSF cytological and biochemical findings showed that in AIDS patients liquoric abnormalities are quite frequent, non-specific and difficult to interpret. In these circumstances a systematic search to identify the etiologic agent using microbiological and/or immunological assays must be routinely performed

Resumo em Português:

A persistência, em alguns indivíduos, de anticorpos específicos IgM anti-Toxoplasma gondii por vários meses, após a fase aguda da infecção, tem complicado a interpretação dos resultados dos testes sorológicos para a toxoplasmose. Vários trabalhos têm enfatizado o valor da detecção de anticorpos específicos IgA anti-T. gondii para o diagnóstico da toxoplasmose aguda. No presente trabalho, são apresentados os resultados da pesquisa de anticorpos específicos das classes IgM e IgA anti-T. gondii em amostras de soros de 12 pacientes, obtidas em diferentes intervalos de tempo, após o início das manifestações clínicas da infecção. Os anticorpos IgM foram detectados pelo teste de imunofluorescência indireta (IFI), e pelas técnicas imunoenzimáticas da captura (ELISAc) e quimioluminescência (QmL). Os anticorpos IgA foram quantificados pelas técnicas de ELISA direta (ELISAd) e ELISAc. De acordo com as instruções do fabricante do "kit" de ELISAc usado para a pesquisa de IgA, a maioria dos pacientes com toxoplasmose aguda tem níveis de anticorpos > 40 unidades arbitrárias por ml (UA/ml). Utilizando este parâmetro, a técnica de ELISAc para IgA detectou níveis significativos de anticorpos (> 40 UA/ml) por um período mais curto do que as outras técnicas usadas para a detecção de IgM e IgA. Entretanto, níveis de IgA <FONT FACE="Symbol">£</font> 40 UA/ml não excluem a possibilidade de toxoplasmose aguda, pois tais níveis podem ser alcançados em um curto período de tempo após a infecção com T. gondii. Nossos dados sugerem que, a pesquisa de anticorpos IgA por ELISAc concomitante com a pesquisa de anticorpos IgM permitiria, em algumas circunstâncias, um diagnóstico mais preciso da toxoplasmose aguda adquirida

Resumo em Inglês:

The persistence, in some subjects, of specific IgM antibodies to Toxoplasma gondii for several months after the acute phase of infection has complicated the interpretation of serological test results for toxoplasmosis. Several reports have emphasized the value of the detection of Toxoplasma-specific IgA antibodies for the diagnosis of acute toxoplasmosis. In this article, we report the follow-up profiles of Toxoplasma-specific IgM and IgA antibodies in serum samples obtained from 12 patients at various intervals after the onset of the clinical manifestations of infection. IgM antibodies were detected by the indirect immunofluorescence (IIF) test, antibody capture enzyme-linked immunosorbent assay (cELISA) and enzyme-mediated chemilluminescent technique (CmL). IgA antibodies were quantified by the direct ELISA (dELISA) and cELISA procedures. As defined by the manufacturer of the cELISA test for IgA used, most patients with acute toxoplasmosis have antibody levels > 40 arbritary units per ml (AU/ml). At values > 40 AU/ml, the cELISA for IgA detected significant antibody levels for a shorter time than the other techniques used for IgM and IgA detection. However, IgA levels <FONT FACE="Symbol">£</font> 40 AU/ml do not exclude the possibility of acute toxoplasmosis since such levels can be reached very soon after infection with T. gondii. The results obtained in the present study show that the serological diagnosis of acute toxoplasmosis may not be such an easy task. Our data suggest that use of the IgA-cELISA concomitantly with IgM antibody screening could permit, in some circumstances, a more efficient diagnosis of acute acquired toxoplasmosis

Resumo em Português:

Analisa-se a freqüência relativa dos microrganismos isolados das infecções hospitalares no Hospital das Clínicas da Unicamp no período de 1987 a 1994. O microrganismo mais freqüente foi o S. aureus (20,9%), presente nas infecções da ferida cirúrgica, nas infecções da corrente sangüínea e nas artério-venosas. Nas infecções do trato urinário predominaram os bacilos Gram negativos (56,5%) e as leveduras (9%). Foi observado aumento da freqüência de isolados de Acinetobacter baumannii nos últimos três anos. Dentre os microrganismos isolados das infecções da corrente sangüínea, houve aumento gradual na freqüência de Staphylococcus coagulase negativo e A. baumannii, mas não houve alteração na ocorrência de Candida sp

Resumo em Inglês:

The frequency of microorganisms identified in nosocomial infections at Unicamp University Hospital from 1987 to 1994 was analysed. The most common microorganism was S. aureus (20.9%), which was found in surgical wound, bloodstream and arterial-venous infections. In urinary tract infections (UTI), gram-negative rods (56.5%) and yeasts (9%) predominated. A. baumannii isolates were observed to have increased in the last three years. There was a gradual increase in the frequency of coagulase-negative staphylococci and A. baumannii in bloodstream infections but there wasn’t any change in Candida sp

Resumo em Português:

Os parasitas do gênero Schistosoma situam-se entre os primeiros metazoários que desenvolveram sexos separados, determinado cromossomicamente no ovo fertilizado. Apesar da ocorrência de cromossomos sexuais específicos, as fêmeas de Schistosoma não atingem a maturidade somática e sexual sem a presença dos machos. Na verdade, um dos aspectos mais controversos e, ao mesmo tempo, mais fascinantes, envolvendo o desenvolvimento sexual das fêmeas está em se desvendar a natureza do estímulo que controla e mantém tal processo. Muito embora a natureza do estímulo (físico ou químico) seja motivo de controvérsia, concordam os mais diferentes autores que o acasalamento é um requisito indispensável para que ocorra a maturação e migração das fêmeas para o sítio definitivo de permanência no sistema vascular do hospedeiro vertebrado. Admite-se, ainda, que o estímulo não é espécie-específico e, em alguns casos, nem mesmo gênero-específico. Não obstante a existência de um número considerável de artigos dedicados ao tema, não há um consenso sobre o processo (ou processos) que controla(m) o encontro de machos e fêmeas no sistema circulatório do hospedeiro vertebrado, bem como está por ser determinada a natureza do estímulo, oriundo dos machos, que controla e mantém o desenvolvimento somático e sexual das fêmeas. Ao longo dos anos os machos de Schistosoma têm sido considerados, por vezes pejorativamente, os irmãos, os músculos ou o fígado das fêmeas. Em síntese, resta saber se a natureza do estímulo responsável pelo desenvolvimento das fêmas envolve a transferência de hormônios, nutrientes, a mera estimulação tátil ou a combinação de dois ou mais desses fatores

Resumo em Inglês:

Parasites of the genus Schistosoma were among the first metazoans to develop separate sexes, which is chromosomally determined in the fertilized egg. Despite the occurrence of specific sex chromosomes, the females of most Schistosomatidae species do not complete their somatic development and reach no sexual maturity without the presence of males. Indeed, the most controversial and at the same time most fascinating aspect about the sexual development of Schistosoma females lies on discover the nature of the stimulus produced by males that triggers and controls this process. Although the nature of the stimulus (physical or chemical) is a source of controversy, there is agreement that mating is a necessary requirement for maturation to occur and for migration of the female to a definitive final site of residence in the vascular system of the vertebrate host. It has also been proposed that the stimulus is not species-specific and, in some cases, not even genus-specific. Despite a vast literature on the subject, the process or processes underlying the meeting of males and females in the circulatory system have not been determined and as yet no consensus exists about the nature of the stimulus that triggers and maintains female development. In the studies about their role, Schistosoma males have been considered, at times pejoratively, the brother, the muscles or even the liver of females. Indeed, it still remains to be determined whether the stimulus responsible for female maturation involves the transfer of hormones, nutrients, neuromediators, mere tactile stimulation or a combination of chemotactic and thigmotactic factors

Resumo em Português:

Sistemática é o estudo da diversidade dos organismos e suas relações, compreendendo classificação, nomenclatura e identificação. O termo classificação ou taxonomia relaciona-se ao arranjo dos organismos em grupos, nomenclatura é a atribuição de nomes científicos internacionais corretos aos organismos e identificação é a inclusão de linhagens desconhecidas em grupos derivados da classificação. Portanto, a classificação requer previamente, uma nomenclatura estável e uma perfeita identificação. O limiar da nova era da Sistemática bacteriana, pode ser atribuído à introdução e aplicação dos novos conceitos taxonômicos, a partir das décadas de 1950 e 1960. Progressos importantes foram conseguidos empregando-se recursos de taxonomia numérica e a taxonomia molecular. A taxonomia molecular surgiu com a emergência dos recursos da Biologia molecular, provendo conhecimentos que abrangem a Sistemática de bactérias, na qual existe grande interesse evolutivo, ou onde é observada a necessidade de eliminação de quaisquer interferências ambientais. Quando estudamos a composição e disposição de nucleotídeos em determinadas posições do material genético, estamos procurando conhecer seu genoma, muito menos susceptível às alterações ambientais que as proteínas codificadas por ele. Na taxonomia molecular, pode-se pesquisar tanto o DNA quanto o RNA, e as principais técnicas que tem sido empregadas na Sistemática compreendem a construção de mapas de restrição, hibridação DNA-DNA e DNA-RNA, seqüenciamento do DNA, seqüenciamento das subunidades 16S e 23S do rRNA, RAPD, RFLP, PFGE, etc. Técnicas baseadas em seqüenciamento, embora extremamente sensíveis e de grande precisão, são relativamente caras e impraticáveis para a grande maioria dos laboratórios de taxonomia bacteriana. Algumas outras técnicas tem sido aplicadas ao estudo de microrganismos, nos últimos anos elas incluíram preliminarmente, a análise eletroforética de proteínas solúveis e isoenzimas e subseqüentemente a determinação da composição das bases do DNA e a determinação da homologia das seqüências de bases através de experimentos com hibridação DNA-RNA, entre outros. Essas várias técnicas, tem mostrado a carência de informação taxonômica na Sistemática bacteriana. Existem inúmeras técnicas e metodologias que tornam possíveis a identificação e classificação bacteriana – parte delas descritas nessa revisão – permitindo o estabelecimento dos diferentes graus de similaridade em níveis subespecífico e interespecífico, através da análise do polimorfismo fenético. Contudo foi apontada a necessidade do emprego de mais de uma técnica para melhor se estabelecer graus de similaridade entre microrganismos. Dados obtidos à partir de uma única técnica isolada, podem não prover informação suficiente para a Sistemática bacteriana

Resumo em Inglês:

Systematics is the study of diversity of the organisms and their relationships comprising classification, nomenclature and identification. The term classification or taxonomy means the arrangement of the organisms in groups (rate) and the nomenclature is the attribution of correct international scientific names to organisms and identification is the inclusion of unknown strains in groups derived from classification. Therefore, classification for a stable nomenclature and a perfect identification are required previously. The beginning of the new bacterial systematics era can be remembered by the introduction and application of new taxonomic concepts and techniques, from the 50’s and 60’s. Important progress were achieved using numerical taxonomy and molecular taxonomy. Molecular taxonomy, brought into effect after the emergence of the Molecular Biology resources, provided knowledge that comprises systematics of bacteria, in which occurs great evolutionary interest, or where is observed the necessity of eliminating any environmental interference. When you study the composition and disposition of nucleotides in certain portions of the genetic material, you study searching their genome, much less susceptible to environmental alterations than proteins, codified based on it. In the molecular taxonomy, you can research both DNA and RNA, and the main techniques that have been used in the systematics comprise the build of restriction maps, DNA-DNA hybridization, DNA-RNA hybridization, sequencing of DNA sequencing of sub-units 16S and 23S of rRNA, RAPD, RFLP, PFGE etc. Techniques such as base sequencing, though they are extremely sensible and greatly precise, are relatively onerous and impracticable to the great majority of the bacterial taxonomy laboratories. Several specialized techniques have been applied to taxonomic studies of microorganisms. In the last years, these have included preliminary electrophoretic analysis of soluble proteins and isoenzymes, and subsequently determination of deoxyribonucleic acid base composition and assessment of base sequence homology by means of DNA-RNA hybrid experiments beside others. These various techniques, as expected, have generally indicated a lack of taxonomic information in microbial systematics. There are numberless techniques and methodologies that make bacteria identification and classification study possible, part of them described here, allowing establish different degrees of subspecific and interspecific similarity through phenetic-genetic polymorphism analysis. However, was pointed out the necessity of using more than one technique for better establish similarity degrees within microorganisms. Obtaining data resulting from application of a sole technique isolatedly may not provide significant information from Bacterial Systematics viewpoint

Resumo em Português:

Uma biblioteca de expressão de cDNA de verme adulto de S. mansoni foi selecionada utilizando-se soros de macacos babuínos em fase inicial da infecção. Os clones que reagiram positivamente com os soros de infecção recente foram examinados quanto à reatividade contra soros normais e soros de infecção heteróloga. Com a finalidade de se conseguir melhor discriminação entre reatividade positiva com o anticorpo específico e aquela devido aos anticorpos anti-E. coli residuais, um clone de cDNA não relacionado ao S. mansoni foi plaqueado em mistura com o clone positivo. O plano de fundo negativo proporcionado pelo clone não relacionado forneceu o contraste necessário para discriminar a reação positiva específica. Esta metodologia de caracterização dos clones de expressão permite alcançar rapidamente os clones que apresentam o perfil de reatividade desejada, para posterior sequenciamento, subclonagem e expressão

Resumo em Inglês:

A S. mansoni adult worm cDNA expression library was screened with sera from baboons in a early phase after infection. The clones that were positive with the early infection sera were examined for reactivity with pre-infection sera and heterologous infection sera. In order to discriminate a positive antibody reaction from the reactivity due to residual anti-E. coli antibodies, an unrelated cDNA clone was plated with the positive clone. The unrelated clone provided the negative background and the contrast necessary to discern a positive antibody reaction. In this way, we were able to eliminate selected clones that were positive with the pre-infection sera or heterologous infection sera. This characterization of the expression library clones enabled us to quickly target only clones with the desired pattern of antibody reactivity for sequencing, subcloning, and expressing

Resumo em Português:

Relatamos um caso de meningite por Cryptococcus neoformans em paciente com Síndrome de Imunodeficiência Adquirida (SIDA). A terapia de manutenção com fluconazol não evidenciou melhora clínica e micológica, ao mesmo tempo em que o teste de suscetibilidade in vitro revelou aumento progressivo da concentração inibitória mínima (CIM). Estes resultados sugerem o desenvolvimento de resistência secundária ao fluconazol, todavia, resistência cruzada com outros derivados azólicos não foi constatada

Resumo em Inglês:

Cryptococcus neoformans is the fifth most common opportunistic agent of infection in patients with AIDS in the USA, exceeded only by Candida species, Pneumocystis carinii, cytomegalovirus and Mycobacterium avium1, 2, 6, 10, 11. In Brazil is the sixth, exceeded by Candida species, P. carinii, Mycobacterium species, Toxoplasma gondii, and herpes simplex virus (AIDS, Boletim Epidemiológico, set/nov 96, Ministério da Saúde, Brasil). During 30 years, the treatment of C. neoformans meningitis was based on the use of amphotericin B with or without flucytosine13. Nowadays, with the immunodepression caused by human immunodeficiency virus (HIV) infection and the availability of new antifungal drugs as the triazoles, the concept related to cure and relapses of cryptococcosis has been altered7, 20. Patients are treated with amphotericin B with or without flucytosine as initial therapy, but maintenance therapy is always necessary in AIDS patients with C. neoformans infections

Resumo em Português:

Relatamos um caso de diagnóstico pré-natal de rubéola congênita. Após o nascimento, além da confirmação feita através do exame físico e sorológico do recém-nascido, o vírus também pode ser demonstrado no primeiro fluido aspirado da orofaringe do recém-nascido, utilizando-se a reação em cadeia da polimerase (PCR). Sugerimos que este fluido (colhido rotineiramente no momento da reanimação neonatal) possa ser utilizado na pesquisa de outros agentes infecciosos, que não são facilmente identificados por outros métodos

Resumo em Inglês:

We present a case of prenatal diagnosis of congenital rubella. After birth, in addition to traditional serologic and clinical examinations to confirm the infection, we could identify the virus in the "first fluid aspirated from the oropharynx of the newborn", using polimerase chain reaction (PCR). We propose that this first oropharynx fluid (collected routinely immediately after birth) could be used as a source for identification of various congenital infection agents, which may not always be easily identified by current methods