• Inoculation of BALB/c mice with Lacazia loboi Mycology

    MADEIRA, Suzana; OPROMOLLA, Diltor Vladimir Araújo; BELONE, Andréa de Faria Fernandes

    Abstract in Portuguese:

    Em trabalho anterior, os autores inocularam camundongos Suíços com o Lacazia loboi (L. loboi) conseguindo a manutenção de um infiltrado granulomatoso e células fúngicas viáveis por até um ano e 6 meses após a inoculação. Considerando-se trabalhos experimentais realizados na paracoccidioidomicose, eles inocularam 0,03 ml de suspensão fúngica, obtida de biópsia de lesão de um paciente portador da doença de Jorge Lobo, em ambos coxins plantares traseiros de 32 camundongos BALB/c, de ambos os sexos e com 6 semanas de idade. Os animais foram sacrificados com 1, 4, 7 e 10 meses pós-inoculação. A suspensão possuía 1.3x10(6) de fungos/ml e 38% de índice de viabilidade. Após 7 meses de inoculação a maioria dos animais já apresentava um infiltrado exuberante constituído por histiócitos isolados, células gigantes tipo corpo estranho e tipo Langhans, grande quantidade de fungos, na sua maior parte viáveis; no 8º mês observou-se o aparecimento de lesões macroscópicas. Tendo como base a contagem do número de fungos, índice de viabilidade antes e após inoculação, presença de lesões macroscópicas e achados histopatológicos semelhantes ao humano, os autores acreditam que os camundongos BALB/c possam se constituir em um bom modelo experimental para o estudo da doença de Jorge Lobo, principalmente com relação às pesquisas terapêuticas.

    Abstract in English:

    In a previous study, the authors inoculated Swiss mice with Lacazia loboi (L. loboi) and succeeded in maintaining a granulomatous infiltrate and viable fungal cells up to one year and six months after inoculation. Considering the experimental work on paracoccidioidomycosis, 0.03 ml of a fungal suspension obtained from a biopsy of a Jorge Lobo's Disease patient were inoculated into both hind foot pads of 32 six week-old BALB/c mice of both sexes. The animals were sacrificed 1, 4, 7 and 10 months post inoculation. The suspension contained 1.3 x 10(6) fungi/ml and presented 38% viability. Seven months after inoculation, most of the animals presented profuse infiltrates consisting of isolated histiocytes, foreign body and Langhans' giant cells and a large number of fungi, most of them viable. Emergence of macroscopic lesions was observed during the 8th month. Based on fungal count, viability index before and after inoculation, presence of macroscopic lesions and histopathological findings similar to the findings in humans, the authors believe that BALB/c mice may be a good experimental model to study Jorge Lobo's Disease, mainly regarding therapeutic evaluation.
  • Paragonimosis in the Cajabamba and Condebamba districts, Cajamarca, Peru Parasitology

    CORNEJO, William; HUIZA, Alina; ESPINOZA, Yrma; ALVA, Pilar; SEVILLA, Carlos; CENTURION, Wilson

    Abstract in Portuguese:

    As amostras de fezes de 409 pré-escolares e escolares de 6 localidades dos distritos de Cajabamba e de Condebamba, departamento de Cajamarca, Peru, foram avaliados pelo método de Lumbreras na busca de ovos de Paragonimus sp. Dois meninos (0,5%), de 6 a 8 anos de idade, revelaram ovos de Paragonimus sp. nas suas fezes, bem como nas amostras de escarro. O exame radiográfico de tórax mostrou lesões pulmonares. Foram coletados 120 caranguejos de rio, Hypolobocera chilensis eigenmanni, no vale de Condebamba , encontrando-se 21 (17,5%) infectados com metacercárias de P. mexicanus (sin. P. peruvianus). Nossos resultados revelam a persistencia de Paragonimus sp. na população na sua principal fonte de infecção, os caranguejos.

    Abstract in English:

    Stool samples from 409 pre-school and school students, living in six villages of the Cajabamba and Condebamba districts, Cajamarca, Perú, were examined using wet preparations and Lumbreras' method, looking for Paragonimus eggs. Fecal and sputum samples from two children (0.5%) of 6 and 8 year-old showed eggs of Paragonimus. One hundred and twenty freshwater crabs, Hypolobocera chilensis eigenmanni, were collected from the Condebamba valley and 21 (17.5%) of them were infected with P. mexicanus (syn. P. peruvianus) metacercariae. Our results show the persistence of Paragonimus in human beings and in the main source of infection, the crabs.
  • Arbitrarily primed PCR fingerprinting of RNA and DNA in Entamoeba histolytica Parasitology

    VALLE, Paulo Renato; SOUZA, Maria Betânia G.; PIRES, Edna M.; SILVA, Edward F.; GOMES, Maria A.

    Abstract in Portuguese:

    Diferenças na expressão gênica de cepas de E. histolytica foram obtidas pelo "fingerprinting" de RNA (RAP-PCR) e DNA (RAPD). A análise do perfil eletroforético do gel revelou alguns marcadores polimórficos que poderiam ser usados na caracterização individual das cepas. As 260 bandas geradas pela utilização de cinco primers diferentes, tanto no RAP-PCR, quanto no RAPD foram empregadas na construção de dendogramas. O dendograma obtido com os produtos do RAPD permitiu a distinção das cepas isoladas de pacientes sintomáticos e assintomáticos, além de correlacionar o polimorfismo exibido com a virulência das mesmas. O dendograma obtido com os produtos do RAP-PCR não apresentou correlação com a virulência das cepas, mas revelou uma exuberante variabilidade transcricional intra-específica, que pode estar relacionada a outros caracteres biológicos envolvidos, ou não, na patogênese da amebíase.

    Abstract in English:

    Differences were detected in the gene expression of strains of E. histolytica using RNA (RAP-PCR) and DNA fingerprinting (RAPD). Analysis of the electrophoretic profiles of the gels revealed some polymorphic markers that could be used in the individual characterization of the strains. The 260 bands generated by using five different primers for RAP-PCR, as well as RAPD, were employed in the construction of dendograms. The dendogram obtained based on the RAPD products permitted the distinction of symptomatic and asymptomatic isolates, as well the correlation between the polymorphism exhibited and the virulence of the strains. The dendogram obtained for the RAP-PCR products did not show a correlation with the virulence of the strains but revealed a high degree of intraspecific transcriptional variability that could be related to other biological features, whether or not these are involved in the pathogenesis of amebiasis.
  • Characterization and optimization of bovine Echinococcus granulosus cyst fluid to be used in immunodiagnosis of hydatid disease by ELISA Immunodiagnosis

    IRABUENA, Oscar; NIETO, Alberto; FERREIRA, Ana María; BATTISTONI, Julio; FERRAGUT, Gabriela

    Abstract in Portuguese:

    O objetivo do presente trabalho foi testar a composição química do líquido hidático bovino (BHCF) obtido de cistos hidáticos férteis (FC) e não férteis (NFC). Oito lotes de FC e 5 de NFC foram preparados e testados quanto à composição química, proteínas totais, proteínas derivadas do hospedeiro, conteúdo de carbohidratos e lipídeos. Não foram observadas diferenças entre os dois primeiros parâmetros sendo que o conteúdo de carbohidratos e lipídeos foi maior nos lotes FC do que nos NFC. Por SDS-PAGE foram observadas bandas de 38 e 116 kD somente nos BHCF do FC. Foram preparados dois «pools» de BHCF, um de FC (PFC) e outro de NFC (PNFC). Os padrões de reconhecimento dos antígenos foram analisados por imunoblot. As condições físico-químicas para adsorção dos antígenos na superfície das placas de poliestireno (ELISA plates) foram otimizadas. O valor de diagnóstico de ambos tipos de BHCF bem como a importância diagnóstica da oxidação das moléculas de carbohidratos com periodato foram analisadas por ELISA usando 42 amostras de soro de pacientes com hidatidose, 41 de pacientes com outras doenças e 15 de doadores aparentemente saudáveis. A reatividade de todos soros contra antígenos nativos foi analisada com e sem fosforilcolina livre. A melhor eficiência diagnóstica foi observada usando BHCF de PFC tratado com periodato usando tampão glicina com forte força iônica para sensibilizar as placas de ELISA.

    Abstract in English:

    The aim of this work was to assess the influence in the diagnostic value for human hydatid disease of the composition of bovine hydatid cyst fluid (BHCF) obtained from fertile (FC) and non-fertile cysts (NFC). Eight batches from FC and 5 from NFC were prepared and analysed with respect to chemical composition: total protein, host-derived protein, carbohydrate and lipid contents. No differences were observed in the first two parameters but carbohydrate and lipid contents were shown to be higher in batches from FC than in those from NFC. Bands of 38 and 116 kD in SDS-PAGE profiles were observed to be present in BHCF from FC only. Two pools were prepared from BHCF batches obtained from FC (PFC) and NFC (PNFC), respectively. Antigen recognition patterns were analysed by immunoblot. Physicochemical conditions for adsorption of antigens to the polystyrene surface (ELISA plates) were optimized. The diagnostic value of both types of BHCF as well as the diagnostic relevance of oxidation of their carbohydrate moieties with periodate were assessed by ELISA using 42 serum samples from hydatid patients, 41 from patients with other disorders, and 15 from healthy donors. Reactivity of all sera against native antigen were tested with and without free phosphorylcholine. The best diagnostic efficiency was observed using BHCF from periodate-treated PFC using glycine buffer with strong ionic strength to coat ELISA plates.
  • Diagnosis of hepatitis C virus in Brazilian blood donors using a reverse transcriptase nested polymerase chain reaction: comparison with enzyme immunoassay and recombinant protein immunoblot assay Hepatitis

    GONÇALES, Neiva S. L.; COSTA, Fernando F.; VASSALLO, José; GONÇALES JR., Fernando L.

    Abstract in Portuguese:

    Na prevenção da transmissão de Hepatite por Vírus C (HCV) em transfusões de hemocomponentes, utiliza-se rotineiramente, como testes de triagem de doadores de sangue, ensaios que detectam anticorpos anti-HCV e dosagens da enzima alanina-aminotransferase (ALT). O presente estudo tem como objetivo principal avaliar a eficiência do ensaio imunoenzimático de segunda geração (EIA-2) como teste de triagem, na identificação de doadores de sangue potencialmente infectados, e portanto, capazes de transmitir hepatite C pelos hemocomponentes. Nós utilizamos o ensaio de transcrição reversa (RT) e a reação em cadeia da polimerase "nested" («nested PCR») para investigar a presença do RNA do vírus da hepatite C (HCV) em doadores de sangue. A prevalência do RNA-HCV em indivíduos positivos foi comparada com os resultados do ensaio complementar imunoblot recombinante de segunda geração (RIBA-2) com o intuito de avaliar a utilidade de ambos como testes confirmatórios. Estes dois testes também foram comparados com a razão DO/C (valores de densidade óptica das amostras dividida pelo valor de corte da reação) no EIA-2. Os resultados das dosagens da ALT foram expressos como uma razão unitária denominada qALT, que representa o cálculo do valor do ALT da amostra dividido pelo valor máximo considerado normal para o teste (53UI/L). Os doadores de sangue foram divididos em cinco grupos de acordo com os resultados do EIA-2 e o qALT: grupo A (EIA > ou = 3, ALT<1), grupo B (EIA > ou = 3, ALT>1), grupo C (1<=EIA<3, ALT<1), grupo D (1<=EIA<3, ALT>1) e grupo E (EIA<=0,7). As seqüências do HCV foram detectadas por RT-nested PCR, utilizando-se os "primers" da região mais conservada do genoma viral. O teste RIBA-2 foi aplicado nas mesmas amostras. No grupo A (n=6) todas as amostras foram positivas para o RT-nested PCR e RIBA-2. Entre as 124 amostras do grupo B, 120 (96,8%) eram RIBA-2 positivas e 4 (3,2%) eram RIBA-2 indeterminadas mas positivas para o antígeno c22.3. No grupo B, as 109 amostras (87,9%) RIBA-2 positivas também apresentaram RT-nested PCR positivas, bem como todas as amostras com RIBA-2 indeterminadas. No grupo C, todas as amostras (n=9) foram RT-nested PCR negativas: 4 (44,4%) apresentaram também RIBA-2 negativa enquanto que 4 (44,4%) foram RIBA-2 positivas e 1(11,1%) foi RIBA-2 indeterminada. O RNA-VHC foi detectado por RT-nested PCR em 3 (37,5%) das 8 amostras do grupo D. Todas as amostras do grupo E (controle) foram RT-nested PCR e RIBA-2 negativas. Nosso estudo sugere uma forte relação entre a razão anti-HCV EIA-2 > ou = 3 e a positividade do RNA-HCV por RT-nested PCR. Nós também pudemos observar que os doadores de sangue com RIBA-2 indeterminados apresentaram um alto grau de positividade no RT-nested PCR (75%), especialmente quando está presente a banda correspondente ao antígeno c22.3.

    Abstract in English:

    Screening blood donations for anti-HCV antibodies and alanine aminotransferase (ALT) serum levels generally prevents the transmission of hepatitis C virus (HCV) by transfusion. The aim of the present study was to evaluate the efficiency of the enzyme immunoassay (EIA) screening policy in identifying potentially infectious blood donors capable to transmit hepatitis C through blood transfusion. We have used a reverse transcriptase (RT)-nested polymerase chain reaction (PCR) to investigate the presence of HCV-RNA in blood donors. The prevalence of HCV-RNA positive individuals was compared with the recombinant immunoblot assay (RIBA-2) results in order to assess the usefulness of both tests as confirmatory assays. Both tests results were also compared with the EIA-2 OD/C ratio (optical densities of the samples divided by the cut off value). ALT results were expressed as the ALT quotient (qALT), calculated dividing the ALT value of the samples by the maximum normal value (53UI/l) for the method. Donors (n=178) were divided into five groups according to their EIA anti-HCV status and qALT: group A (EIA > or = 3, ALT<1), group B (EIA > or = 3, ALT>1), group C (1<=EIA<3, ALT<1), group D (1<=EIA<3, ALT>1) and group E (EIA<=0.7). HCV sequences were detected by RT-nested PCR, using primers for the most conserved region of viral genome. RIBA-2 was applied to the same samples. In group A (n=6), all samples were positive by RT-nested PCR and RIBA-2. Among 124 samples in group B, 120 (96.8%) were RIBA-2 positive and 4 (3.2%) were RIBA-2 indeterminate but were seropositive for antigen c22.3. In group B, 109 (87.9%) of the RIBA-2 positive samples were also RT-nested PCR positive, as well as were all RIBA-2 indeterminate samples. In group C, all samples (n=9) were RT-nested PCR negative: 4 (44.4%) were also RIBA-2 negative, 4 (44.4%) were RIBA-2 positive and 1 (11.1%) was RIBA-2 indeterminate. HCV-RNA was detected by RT-nested PCR in 3 (37.5%) out of 8 samples in group D. Only one of them was also RIBA-2 positive, all the others were RIBA-2 indeterminate. All of the group E samples (controls) were RT- nested PCR and RIBA-2 negative. Our study suggests a strong relation between anti-HCV EIA-2 ratio > or = 3 and detectable HCV-RNA by RT-nested PCR. We have also noted that blood donors with RIBA-2 indeterminate presented a high degree of detectable HCV-RNA using RT-nested PCR (75%), especially when the c22.3 band was detected.
  • An initial examination of the epidemiology of malaria in the State of Roraima, in the Brazilian Amazon Basin Malaria

    CHAVES, Sandra S.; RODRIGUES, Laura C.

    Abstract in Portuguese:

    Este estudo primeiramente descreve a epidemiologia da malária em Roraima, Bacia Amazônica, Brasil, entre 1991 a 1993: a predominância de especies de plasmódios, a distribuição de lâminas de sangue examinadas, o risco de malária e sua sazonalidade; e também investiga se o crescimento populacional de 1962 a 1993 estava associado com o aumento no risco de malária. A freqüência de malária variou significativamente entre os diversos municípios. Significativamente, mais casos de malária foram notificados durante a estação de seca (Outubro a Abril), mesmo depois de controlar por ano e município. Vivax foi o tipo predominante em todos os municípios, mas a razão entre tipos de plasmódios variou entre municípios. Nenhuma associação direta entre crescimento populacional e aumento no risco de malária entre 1962 e 1993 foi detectado. Malária em Roraima é do tipo epidemiológico dito "de fronteira", com alto potencial para epidemias.

    Abstract in English:

    This study firstly describes the epidemiology of malaria in Roraima, Amazon Basin in Brazil, in the years from 1991 to 1993: the predominance of plasmodium species, distribution of the blood slides examined, the malaria risk and seasonality; and secondly investigates whether population growth from 1962 to 1993 was associated with increasing risk of malaria. Frequency of malaria varied significantly by municipality. Marginally more malaria cases were reported during the dry season (from October to April), even after controlling for by year and municipality. Vivax was the predominant type in all municipalities but the ratio of plasmodium types varied between municipalities. No direct association between population growth and increasing risk of malaria from 1962 to 1993 was detected. Malaria in Roraima is of the "frontier" epidemiological type with high epidemic potential.
  • Biotyping, serotyping and ribotyping as epidemiological tools in the evaluation of Acinetobacter baumannii dissemination in hospital units, Sorocaba, São Paulo, Brazil Nosocomial infections

    GONÇALVES, Célia R.; VAZ, Tania Mara I.; ARAUJO, Eliane; BONI, Regina de Fátima; LEITE, Daniela; IRINO, Kinue

    Abstract in Portuguese:

    Foi avaliada a disseminação, durante um período de dois anos, de cepas de Acinetobacter baumannii em diferentes unidades de um hospital de Sorocaba, São Paulo.Usando as técnicas de biotipagem, sorotipagem e ribotipagem, as 76 cepas isoladas no período 1993-94, foram diferenciadas em 27 distintos clones. Dois clones, 2:O4:A (biotipo:sorotipo:ribotipo) e 2:O29:A predominaram, em 1993, entre as cepas disseminadas nas várias unidades. Observou-se no final de 1993, a introdução de um novo clone, 6:O13:B e a sua predominância em 1994. Entre as 15 cepas isoladas de recém nascidos, 6 (40%) pertenciam ao mesmo clone, 2:O4:A . A maioria das cepas desse clone foram isoladas da unidade de terapia intensiva neonatal, de berçário e de unidades pediátricas. Quanto à resistência aos agentes antimicrobianos, todas as cepas foram sensíveis à polimixina B e ao imipenen. Em 1993, 66,7% das cepas eram multi-resistentes (resistentes de 4 a 12 dos 15 antimicrobianos testados), enquanto que, em 1994, 84,8% das 46 cepas isoladas foram multi-resistentes a mais de 4 e até a 12 drogas.

    Abstract in English:

    Dissemination of Acinetobacter baumannii strains in different units of a hospital in Sorocaba, São Paulo, Brazil was evaluated over a period of two years. By using biotyping, serotyping and ribotyping, 27 distinct clones were differentiated among 76 strains isolated between 1993-94, from clinical specimens of hospitalized patients. Two clones, 2:O4:A (biotype:serotype:ribotype) and 2:O29:A accounted for the majority of strains widely disseminated in the units during 1993. The introduction in the hospital setting, of a new clone, 6:O13:B, at the end of 1993 and its predominance through 1994 is discussed. Among 15 strains isolated from neonates, 6 (40%) belonged to the same clone, 2:O4:A. Interestingly, this clone was almost all recovered in neonatal intensive care unit, nursery and in pediatric unit. All strains were susceptible to imipenem and polymyxcin B. Multiresistant strains (up to 12 antimicrobial agents) accounted for 66.7% and 84.8% of the strains isolated in 1993 and in 1994, respectively.
  • Envenomation by the neotropical colubrid Boiruna maculata (Boulenger, 1896): a case report Case report

    SANTOS-COSTA, Maria Cristina dos; OUTEIRAL, Arlete Ballestrin; D'AGOSTINI, Fernanda Maurer; CAPPELLARI, Lize Helena

    Abstract in Portuguese:

    Este trabalho relata o envenenamento por serpente do gênero Boiruna maculata em criança admitida e posteriormente hospitalizada no Hospital Municipal de Pronto Socorro de Porto Alegre, RS, Brasil. A paciente foi mordida no membro inferior esquerdo e apresentou sinais de envenenamento local pronunciado, foi tratada como acidente botrópico e permaneceu no hospital por cinco dias, recebendo alta após melhora.

    Abstract in English:

    This is a case report of a Boiruna maculata snake bite in a child admitted to the Hospital Municipal de Pronto Socorro de Porto Alegre, Porto Alegre, RS, Brazil. The patient was bitten on the lower left limb, and exhibited pronounced local manifestations of envenomation. She was treated with Bothrops antivenom and was discharged from the hospital five days later with marked improvement of envenomation.
  • Massive ocular hemorrhage resulting in blindness in a patient with the sickle cell trait who developed leptospirosis. Case report Case report

    COSTA, Everaldo; LOPES, Antonio Alberto; SACRAMENTO, Edilson; SANTOS, Paulo Afonso B.

    Abstract in Portuguese:

    Este relato de caso descreve os achados em homem negro com 18 anos de idade, da Bahia, estado do nordeste do Brasil, com estigma falciforme que desenvolveu hifema bilateral e hemorragia vítrea com cegueira no curso de leptospirose. O paciente começou a se queixar de visão embaçada quatro dias após o início da febre e da dor muscular e aproximadamente 12 horas após o início da penicilina. A gravidade da leptospirose em conjunto com o estigma falciforme foi considerada a mais provável explicação para esta complicação ocular.

    Abstract in English:

    This case report describes the findings of a 18 year-old black male from Bahia, a Northeastern state in Brazil, with the sickle cell trait, who developed bilateral hyphema and vitreous hemorrhage with blindness in the course of leptospirosis. The patient started to complain of blurred vision four days after the start of fever and muscular pain and approximately twelve hours after the introduction of penicillin. The severity of the leptospirosis in conjunction with sickle cell trait was considered to be the most likely explanation for this ocular complication.
  • Susceptibility of Biomphalaria tenagophila and Biomphalaria straminea to Schistosoma mansoni infection detected by low stringency polymerase chain reaction Brief communication

    JANNOTTI-PASSOS, Liana Konovaloff; SOUZA, Cecilia Pereira de

    Abstract in Portuguese:

    Para determinar a taxa de infecção pelo Schistosoma mansoni em Biomphalaria tenagophila e em B. straminea foi utilizada a reação em cadeia da polimerase em baixa estringência (LS-PCR), como técnica complementar ao método de exposição à luz. A LS-PCR já foi padronizada no nosso laboratório para detectar o DNA do trematódeo em B. glabrata. A taxa de infecção pelo S. mansoni foi maior quando utilizou-se a técnica convencional e a LS-PCR. O perfil do DNA do parasita foi detectado após 7 dias de exposição a miracídios em ambas as espécies, quando utilizou-se a LS-PCR. Esta técnica possibilita a detecção precoce de focos de transmissão, em áreas endêmicas, antes do início da eliminação de cercárias.

    Abstract in English:

    In order to determine Schistosoma mansoni infection rates in Biomphalaria tenagophila and B. straminea, low stringency polymerase chain reaction (LS-PCR) technique was used as a complementary method to light exposure technique. LS-PCR has already been standardized in our laboratory to detect the trematode DNA in B. glabrata. Higher S. mansoni infection rates were detected using conventional method and LS-PCR. The parasite DNA profile was detected in both species after 7-day exposure to miracidia, using LS-PCR. This technique enables early detection of schistosomiasis transmission focuses, in endemic areas, before the beginning of cercariae shedding.
  • Preliminary studies on antigenic mimicry of Ascaris lumbricoides Letter to the editor

    PONCE DE LEÓN, Patricia; VALVERDE, Juana; ZDERO, María
  • Aloantibodies ABO in patients with ascariasis Letter to the editor

    PONCE DE LEON, Patricia; VALVERDE, Juana; ZDERO, María
  • Acute bacterial infections of the lower respiratory tract: epidemiological, clinicopathologic and molecular-genetic findings in children from warm-climate countries Summary of thesis

    WOLF, Bartholomeus Hubertus Maria
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