• PCR-based identification of Burkholderia pseudomallei Microbiology

    Merritt, Adam; Inglis, Timothy J.J.; Chidlow, Glenys; Harnett, Gerry

    Abstract in Portuguese:

    As técnicas de amplificação de DNA estão sendo cada vez mais utilizadas em laboratórios clínicos para a confirmação da identificação de bactérias que têm importância médica. Um método de identificação de Burkholderia pseudomallei baseado em PCR tem sido usado em nosso centro há 10 anos e foi utilizado para confirmar a identificação de bactérias isoladas de casos de melioidose no Ceará desde 2003. Este método particular tem sido usado como padrão ouro para métodos menos discriminatórios. Nesse estudo, avaliamos três métodos de identificação de B. pseudomallei baseados em PCR e usamos seqüenciamento de DNA para solucionar discrepâncias entre os resultados baseados em PCR e os métodos de identificação fenotípica. O estabelecido protocolo de PCR semi-nested para a região espacial 16-23s da B. pseudomallei produziu um consistente resultado negativo para um de nossos 100 isolados testados (BCC#99), mas identificou corretamente todos os outros 71 isolados de B. pseudomallei. Uma variação anômala da seqüência foi detectada na região interna do sítio de ligação do primer reverso para este método. Métodos de PCR foram desenvolvidos para a detecção de outros dois genes bacterianos metabólicos de B. pseudomallei. O protocolo de PCR IpxO convencional teve sensibilidade de 0,89 e especificidade de 1,0, enquanto que o PCR em tempo real mostrou-se ainda melhor, com sensibilidade de 1,0 e especificidade de 1,0. Este método identificou todos os isolados de B. pseudomallei, incluindo o isolado discrepante que teve o PCR negativo. O protocolo de PCR phaC detectou o gene de todos os B. pseudomallei e em todos exceto três isolados de B. cepacia, tornando este método de identificação de B. pseudomallei baseado em PCR inadequado. Esta experiência com métodos de identificação de B. pseudomallei baseados em PCR indica que devemos ter precaução quando estes forem utilizados sozinhos para identificação dessa bactéria e que eles necessitam ser interpretados em conjunto com métodos fenotípicos e moleculares alternativos, tais como seqüenciamento genético.

    Abstract in English:

    DNA amplification techniques are being used increasingly in clinical laboratories to confirm the identity of medically important bacteria. A PCR-based identification method has been in use in our centre for 10 years for Burkholderia pseudomallei and was used to confirm the identity of bacteria isolated from cases of melioidosis in Ceará since 2003. This particular method has been used as a reference standard for less discriminatory methods. In this study we evaluated three PCR-based methods of B. pseudomallei identification and used DNA sequencing to resolve discrepancies between PCR-based results and phenotypic identification methods. The established semi-nested PCR protocol for B. pseudomallei 16-23s spacer region produced a consistent negative result for one of our 100 test isolates (BCC #99), but correctly identified all 71 other B. pseudomallei isolates tested. Anomalous sequence variation was detected at the inner, reverse primer binding site for this method. PCR methods were developed for detection of two other B. pseudomallei bacterial metabolic genes. The conventional lpxO PCR protocol had a sensitivity of 0.89 and a specificity of 1.00, while a real-time lpxO protocol performed even better with sensitivity and specificity of 1.00, and 1.00. This method identified all B. pseudomallei isolates including the PCR-negative discrepant isolate. The phaC PCR protocol detected the gene in all B. pseudomallei and all but three B. cepacia isolates, making this method unsuitable for PCR-based identification of B. pseudomallei. This experience with PCR-based B. pseudomallei identification methods indicates that single PCR targets should be used with caution for identification of these bacteria, and need to be interpreted alongside phenotypic and alternative molecular methods such as gene sequencing.
  • Pathogenicity of Entamoeba dispar under xenic and monoxenic cultivation compared to a virulent E. histolytica Parasitology

    Costa, Adriana Oliveira; Gomes, Maria Aparecida; Rocha, Orivaldo Alves; Silva, Edward Felix

    Abstract in Portuguese:

    Dois isolados de Entamoeba dispar em cultivo polixênico e culturas clonadas deles obtidas foram submetidos à monoxenização utilizando Crithidia fasciculata como organismo associado. O crescimento em cultivo monoxênico dos isolados e clones, bem como sua capacidade de destruir células VERO (efeito citopático) e de produzir lesões hepáticas em hamster foram comparados a uma cepa virulenta de E. histolytica. Os trofozoítos de E. dispar em cultivo monoxênico apresentaram um crescimento nitidamente menor que o de E. histolytica e foram avirulentos tanto no teste in vivo quanto in vitro. Entretanto, isolados e clones de E. dispar em cultivo polixênico exibiram uma atividade lítica moderada sobre as células VERO (1,5 to 41,8% de destruição) e causaram lesões hepáticas em hamster (29 a 100% em prevalência e 0,86 a 4,00 no grau de lesão) tão extensas quanto aquelas causadas pela E. histolytica. Embora E. dispar não seja associada à doença invasiva no homem, a ocorrência de lesões teciduais significativas, causadas por trofozoítos em condições experimentais, indica que esta espécie pode apresentar potencial patogênico considerável quando em presença de bactérias intestinais.

    Abstract in English:

    Two xenic isolates and cloned cultures of Entamoeba dispar were submitted to monoxenization using Crithidia fasciculata as the associated organism. Growth in monoxenic cultivation and ability of xenic and monoxenic trophozoites to destroy VERO cells and produce lesions in hamster livers were compared to those of a virulent E. histolytica. Parental and cloned E. dispar under monoxenic cultivation showed a remarkable lower growth than the monoxenic E. histolytica and were avirulent in both in vivo and in vitro tests. When xenically cultured, trophozoites of E. dispar showed a moderate lytic activity against VERO cells (1.5 to 41.8% of destruction) but caused severe hepatic lesions in hamsters as those caused by the virulent E. histolytica (29 to 100% in prevalence and 0.86 to 4.00 in lesion degree). Although E. dispar has not been associated with invasive disease in men, the ability of xenic trophozoites to produce prominent tissue damage in experimental conditions has indicated that some strains have a considerable pathogenic potential when in presence of bacteria.
  • Frequency and risk factors for toxocariasis in children from a pediatric outpatient center in southeastern Brazil Parasitology

    Teixeira, Cristiane Rodrigues; Chieffi, Pedro Paulo; Lescano, Suzana A. Z.; Silva, Elisabete Ourique de Melo; Fux, Blima; Cury, Márcia Cristina

    Abstract in Portuguese:

    Para determinar a frequência de anticorpos anti-Toxocara sp. e os fatores de risco associados à infecção, soros de 242 crianças de ambos os sexos, com idade entre um a 15 anos, atendidas no ambulatório do Hospital da Universidade Federal de Uberlândia, Minas Gerais, Brasil, foram analisados pelo ELISA. Questionários foram aplicados, para obter informações sobre os pacientes. As informações sobre as alterações clínicas, de 187 pacientes, foram obtidas no prontuário médico. Do total das 242 amostras, 21 (8,7%) foram positivas para anticorpos anti-Toxocara sp.. A presença de cães e gatos e a variável escola (local de contato) sugerem associação significativa (p < 0.05) com a sorologia positiva. Sintomas respiratórios e elevada contagem de eosinófilos (> 20%) mostram correlação positiva com a soropositividade para Toxocara sp.. A idade, sexo, sintomas como dor de cabeça, dor estomacal, crises convulsivas e anemia não apresentaram associação com toxocaríase.

    Abstract in English:

    To estimate the frequency of anti-Toxocara sp. antibodies, and evaluate factors associated with this infection, sera from 242 male and female children, aged from one to fifteen years old, attended at the Hospital of the Federal University of Uberlândia, Minas Gerais State, Brazil, were analyzed by ELISA. Information on the patients was collected and registered using an investigative questionnaire, and details on possible clinical alterations were obtained from the medical charts of 187 patients. Of a total of 242 samples, 21 (8.7%) were positive for anti-Toxocara sp. antibodies. The presence of dogs and cats and the school variable (place of contact), appeared to be significantly associated (p < 0.05) with a positive serology. Respiratory symptoms and eosinophil counts greater than 20% also showed a positive statistical correlation with a positive serology for Toxocara sp.. Factors such as sex and age, and symptoms like headache, stomach ache, convulsive crises and anemia were not associated with toxocariasis.
  • Asymptomatic oral carriage of Candida species in HIV-infected patients in the highly active antiretroviral therapy era Mycology

    Costa, Carolina Rodrigues; Cohen, Ana Joaquina; Fernandes, Orionalda Fátima Lisboa; Miranda, Karla Carvalho; Passos, Xisto Sena; Souza, Lúcia Kioko Hasimoto; Silva, Maria do Rosário Rodrigues

    Abstract in Portuguese:

    Candidíase de orofaringe é a infecção fúngica oportunística mais comum em indivíduos infectados com o vírus da imunodeficiência humana. Contagem de linfócitos CD4+ e quantificação de RNA viral no plasma sanguíneo são os principais marcadores da progressão da doença pelo HIV. O presente estudo foi conduzido para avaliar a diversidade de espécies de Candida presentes na cavidade bucal de pacientes infectados pelo HIV e para determinar se havia associação de contagem de células CD4+ e de carga viral com carreadores assintomáticos de Candida, na mucosa bucal. Dos 99 pacientes HIV positivo estudados, 62 (62,6%) apresentaram cultura positiva para Candida sp. sendo denominados carreadores de Candida e os 37 pacientes (37,4%) que não possuíam leveduras do gênero Candida na mucosa bucal foram denominados não carreadores. Os agentes etiológicos mais comuns foram C. albicans e C. tropicalis. A variação de CD4+ foi de 6-2305 cels/mm³ em pacientes colonizados e de 3-839 cels/mm³ para pacientes não colonizados, enquanto a carga viral variou de 60-90016 cópias/mL para pacientes colonizados e de 75-110488 cópias/mL para não colonizados. Não foi possível a detecção de carga viral em 15 pacientes colonizados e em 12 não colonizados, porque o limite mínimo de detecção era de 50 cópias/mL. Nossos resultados mostraram que não houve diferença significante na contagem de células CD4+ e de carga viral entre os pacientes carreadores e não carreadores de Candida na mucosa bucal de pacientes com AIDS.

    Abstract in English:

    Oropharyngeal candidiasis is the most common opportunistic fungal infection in individuals infected with human immunodeficiency virus. CD4+ lymphocytes count and the quantification of viral RNA in blood plasma have been found to be the main markers of HIV disease progression. The present study was conducted to evaluate Candida sp. diversity in the oral cavity of HIV-infected patients and to determine whether there was association of CD4+ cell count and viral load with asymptomatic oral Candida carriage. Out of 99 HIV-positive patients studied, 62 (62.6%) had positive culture for Candida (oral carriage) and 37 patients (37.4%) had Candida negative culture (no oral carriage). The etiologic agents most common were C. albicans and C. tropicalis. The range of CD4+ was 6-2305 cells/mm³ in colonized patients and 3-839 cells/mm³ for non-colonized patients, while the viral load was 60-90016 copies/mL for colonized patients and 75-110488 copies/mL for non colonized patients. The viral load was undetectable in 15 colonized patients and in 12 non colonized patients. Our results showed that there was no significant difference of the variables CD4+ cell count and viral load between oral candida carriage and no oral candida carriage patients.
  • The present situation regarding lymphatic filariasis in Cabo de Santo Agostinho, Pernambuco, Northeast Brazil Epidemiology

    Medeiros, Zulma; Alves, Ayla; Brito, José Anchieta; Borba, Ladjane; Santos, Zailde; Costa, José Pereira; Espírito Santo, Marlene Eunice do; Netto, Maria José Evangelista

    Abstract in Portuguese:

    Foi realizado um estudo seccional de base populacional, sobre a ocorrência da filariose linfática bancroftiana no município do Cabo de Santo Agostinho, Pernambuco, nordeste do Brasil. Foram examinados 7.650 indivíduos de ambos os sexos, residentes em 1.416 domicílios, dos quais 7.644 indivíduos foram identificados como negativos para filariose e seis casos positivos. A idade dos indivíduos examinados variou de 0 a 98 anos (média de 26,6 anos), enquanto que a idade dos positivos variou de 11 a 29 anos, média de 22,5 anos. Cinco dos seis casos eram do sexo masculino. Os indivíduos microfilarêmicos eram residentes na localidade de Pista Preta (01 caso) e nos distritos de Ponte dos Carvalhos (04 casos) e de Pontezinha (01 caso), sendo esse ultimo autóctone. Entre as pessoas examinadas 109 (1,4%) apresentaram queixas clínicas relacionadas à filariose. Esses resultados apontam para a existêcia de transmissão da filariose no município do Cabo de Santo Agostinho, dado esse que determina a necessidade de se estabeceler atividades de controle da endemia, assim como vem colaborar no planejamento do programa nacional de eliminação, uma vez que consegue delimitar áreas contíguas na região metropolitana do Recife com e sem transmissão filarial.

    Abstract in English:

    A cross-sectional population-based survey on the occurrence of lymphatic filariasis was carried out in the municipality of Cabo de Santo Agostinho, Pernambuco, Northeast Brazil. 7,650 individuals of both sexes were examined (from 1,416 households) of whom six tested positive for microfilaria according to the thick blood diagnostic test. The age of the individuals examined varied from 0 to 98 (averaging 26.6 years), whilst the age of the microfilaria-positive individuals varied from 11 to 29, averaging 22.5 years. Five of the six positive cases were male. These cases were residents of the following areas: Pista Preta (one case); Ponte dos Carvalhos (four cases); and Pontezinha (one case). This last case from Pontezinha was autochthonous. Of the individuals examined, 109 (1.4%) cited complaints relating to filariasis. These results suggest that filariasis is being transmitted in the municipality of Cabo de Santo Agostinho, a finding that establishes the need to carry out disease control activities, and to collaborate with the planning of the national programme for the elimination of filariasis.
  • Occurrence of enteroparasites in day care centers in Botucatu (São Paulo State, Brazil) with emphasis on Cryptosporidium sp., Giardia duodenalis and Enterobius vermicularis Epidemiology

    Carvalho, Thaís Batista de; Carvalho, Lídia Raquel de; Mascarini, Luciene Maura

    Abstract in Portuguese:

    Verificou-se a prevalência dos enteroparasitas em 279 crianças (0 a 6 anos) de quatro creches municipais de Botucatu/SP. Foram coletadas três amostras de fezes de cada criança e processadas pelos métodos Hoffman, Faust e Ritchie e posterior coloração do esfregaço fecal pelos métodos de Auramina-O e Ziehl-Neelsen modificado para diagnóstico de Cryptosporidium sp. e método da fita gomada para diagnóstico de Enterobius vermicularis. Das crianças analisadas apresentaram-se parasitadas 53.40%, sendo que o parasita mais freqüente foi Giardia duodenalis (26.88%). Verificou-se associação significativa entre enteroparasitose, renda familiar, escolaridade materna e idade; quanto maior a renda e o grau escolar, menor a freqüência de enteroparasitas. Observou-se que G. duodenalis é mais prevalente em crianças de 0 a 4 anos e E. vermicularis em crianças entre três e quatro anos de idade. A elevada prevalência de enteroparasitas em creches sugere estrutura complexa em sua epidemiologia, onde fatores além do saneamento devem ser considerados.

    Abstract in English:

    The occurrence of the enteroparasites was verified in 279 children (0 to 6 years) of four municipal day cares of Botucatu/SP. Three samples of each child's feces were collected and processed by the methods of Hoffman-Pons-Janner, Faust and Ritchie and subsequent coloration of the fecal smear by the methods of Auramina-O and Ziehl-Neelsen modified for diagnosis of Cryptosporidium sp. and Graham method for diagnosis of Enterobius vermicularis. Of the analyzed children we verified a prevalence of intestinal parasitism in 53.40%, and the most frequent parasite was Giardia duodenalis (26.88%). Significant association was verified among enteroparasitosis, family income, maternal education and age; the lowest enteroparasite frequency occurred in children of families with larger income and higher education. It was observed that G. duodenalis is more prevalent in children from 0 to 4 years and E. vermicularis is more frequent in children between three and four years old. The high enteroparasite prevalence in day cares suggests complex structure in its epidemiology, where factors beyond sanitation should be considered.
  • Comparison of serology, antigenemia assay and the polymerase chain reaction for monitoring active cytomegalovirus infections in hematopoietic stem cell transplantation patients Virology

    Bonon, Sandra Helena Alves; Rossi, Cláudio Lúcio; Souza, Cármino Antonio de; Vigorito, Afonso Celso; Costa, Sandra Cecília Botelho

    Abstract in Portuguese:

    Quarenta e seis pacientes receptores de transplantes de células progenitoras hematopoéticas (TCPH) foram monitorados em relação à infecção ativa por citomegalovírus (CMV). Testes sorológicos imunoenzimáticos foram utilizados para a detecção de anticorpos IgM e elevação significativa das concentrações de anticorpos IgG (aumento IgG), nested-PCR (N-PCR) foi utilizada para a detecção de CMV-DNA e antigenemia (AGM) para a detecção de antígenos virais. A presença de CMV-IgM e/ou CMV-aumento IgG foi detectada em 12/46 (26,1%) pacientes, sendo o tempo mediano entre o transplante e a detecção dos marcadores sorológicos de 81,5 dias; AGM positiva foi detectada em 24/46 (52,2%) pacientes, sendo o tempo mediano entre o transplante e a detecção de antígenos virais de 62 dias. Dois ou mais resultados positivos consecutivos de N-PCR foram detectados em 32/46 (69,5%) pacientes, sendo o tempo mediano entre o transplante e o primeiro teste positivo de 50,5 dias. Esses resultados confirmaram que a AGM e principalmente a PCR são superiores à sorologia, com relação ao diagnóstico da infecção pelo CMV. Seis pacientes apresentaram reações CMV-IgM positivas e/ou CMV-aumento IgG com reações negativas de AGM (cinco casos) ou N-PCR (um caso). Em cinco desses casos, os marcadores sorológicos foram detectados nos 100 primeiros dias após o transplante, considerado o período de maior risco. Esses resultados indicam que os testes sorológicos podem ser úteis no monitoramento da infecção por CMV após o transplante de células progenitoras hematopoéticas, principalmente quando a N-PCR não for disponível.

    Abstract in English:

    Forty-six allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) patients were monitored for the presence of CMV antibodies, CMV-DNA and CMV antigens after transplantation. Immunoenzymatic serological tests were used to detect IgM and the increase in CMV IgG antibodies (increase IgG), a nested polymerase chain reaction (N-PCR) was used to detect CMV-DNA, and an antigenemia assay (AGM) was used to detect CMV antigens. The presence of CMV-IgM and/or CMV-increase IgG antibodies was detected in 12/46 (26.1%) patients, with a median time between HSCT and the detection of positive serology of 81.5 days. A positive AGM was detected in 24/46 (52.2%) patients, with a median time between HSCT and antigen detection of 62 days. Two or more consecutive positive N-PCR results were detected in 32/46 (69.5%) patients, with a median time between HSCT and the first positive PCR of 50.5 days. These results confirmed that AGM and mainly PCR are superior to serology for the early diagnosis of CMV infection. Six patients had CMV-IgM and/or CMV-increase IgG with a negative AGM (five cases) or N-PCR assay (one case). In five of these cases the serological markers were detected during the first 100 days after HSCT, the period of highest risk. These findings support the idea that serology may be useful for monitoring CMV infections in HSCT patients, especially when PCR is unavailable.
  • Human papillomavirus status and cervical abnormalities in women from public and private health care in Rio de Janeiro State, Brazil Virology

    Oliveira, Ledy H.S.; Rosa, Maria L.G.; Pereira, Claudia R.N.; Vasconcelos, Gentil A.L.B.M.; Silva, Roberta A.; Barrese, Tomás Z.; Carvalho, Maria O.O.; Abi, Gabriela M. Abib; Rodrigues, Eliana M.; Cavalcanti, Silvia M.B.

    Abstract in Portuguese:

    Este artigo analisa a infecção por HPV e anormalidades citológicas cervicais encontradas em pacientes atendidas em serviços ginecológicos dos sistemas de saúde público e privado do estado do Rio de Janeiro. O trabalho também avalia os testes utilizados para detecção de DNA do HPV em cada população estudada. Um grupo de 454 mulheres oriundas de serviços da rede privada de saúde foi testado por Captura do Híbrido II. Destas, 58,4% apresentaram infecção por HPV e cerca de 90% delas estavam infectadas por HPV de alto risco. Este grupo, entretanto, apresentava poucos casos de lesões cervicais pré-malígnas e nenhum caso de câncer. Estudamos, também, 220 mulheres de baixo nível econômico atendidas no serviço de saúde pública que foram testadas para HPV pela reação da polimerase em cadeia utilizando-se os oligonucleotídeos My09/My11. A identificação dos tipos foi efetuada por amplificação com oligonucleotídeos específicos para a região E6 do genoma viral. A prevalência de HPV nesta população foi de 77.3%, observando-se uma alta porcentagem de casos de neoplasias intraepiteliais cervicais de alto grau (26,3%) e de carcinoma cervical invasivo (16,3%). A infecção por HPV foi achada em, respectivamente, 93,1% e 94,4% destes casos. A média de idade em ambos os grupos era de 31,5 e 38 anos, respectivamente. Na série 1, a prevalência da infecção por HPV decresce com a idade, enquanto na série 2 ela não desaparece, dando suporte não só à idéia de persistência viral neste grupo, mas também a variações epidemiológicas na mesma área geográfica. Diferenças significativas foram vistas nos dois grupos. Casos normais e benignos foram incidentes na série 1, enquanto as lesões malígnas predominaram na série 2. Ao contrário, casos normais infectados por HPV eram prevalentes na série 2 (p < 0.001), indicando maior exposição ao vírus. Embora as mulheres de ambos os grupos tenham sido incluídas no estudo por apresentarem citologia anormal, evidências sócio-demográficas demonstram que mulheres da série 1 tem acesso mais fácil e rápido ao tratamento do que as mulheres da série 2 antes que as lesões pré-malígnas se desenvolvam. Estes resultados fornecem dados sobre o papel das desigualdades sociais associadas à infecção por HPV de alto risco na progressão do câncer cervical. Programas de prevenção abrangentes e o desenvolvimento de vacinas eficazes e seguras contra o HPV poderiam reduzir o tributo desta doença que afeta principalmente mulheres pobres.

    Abstract in English:

    This article reports the HPV status and cervical cytological abnormalities in patients attended at public and private gynecological services from Rio de Janeiro State. It also comments the performance of each HPV DNA tests used. A set of 454 women from private health clinics was tested by routine Capture Hybrid II HPV DNA assay. Among these, 58.4% presented HPV and nearly 90% of them were infected by high risk HPV types. However, this group presented few premalignant cervical lesions and no invasive cervical cancer was registered. We also studied 220 women from low income class attended at public health system. They were HPV tested by polymerase chain reaction using My09/11 primers followed by HPV typing with E6 specific primers. The overall HPV prevalence was 77.3%. They also showed a high percentage of high squamous intraepithelial lesion-HSIL (26.3%), and invasive cervical carcinoma (16.3%). HPV infection was found in 93.1% and 94.4% of them, respectively. The mean ages in both groups were 31.5 and 38 years, respectively. In series 1, HPV prevalence declined with age, data consistent with viral transient infection. In series 2, HPV prevalence did not decline, independent of age interval, supporting not only the idea of viral persistence into this group, but also regional epidemiological variations in the same geographic area. Significant cytological differences were seen between both groups. Normal and benign cases were the most prevalent cytological findings in series 1 while pre-malignant lesions were the most common diagnosis in the series 2. HPV prevalence in normal cases were statistically higher than those from series 1 (p < 0.001), indicating a higher exposure to HPV infection. Women from both samples were referred for previous abnormal cytology. However, socio-demographic evidence shows that women from series 1 have access to treatment more easily and faster than women from series 2 before the development of pre-malignant lesions. These data provides baseline support for the role of social inequalities linked to high risk HPV infection leading to cervical cancer. Broadly screening programs and the development of safe and effective vaccines against HPV would diminish the toll of this disease that affect mainly poor women.
  • Survival of Trypanosoma cruzi in sugar cane used to prepare juice Brief Communication

    Cardoso, Adriana V.N.; Lescano, Susana A.Z.; Amato Neto, Vicente; Gakiya, Érika; Santos, Sérgio V.

    Abstract in Portuguese:

    A doença de Chagas pode ser transmitida ao homem através de vários mecanismos: fezes de triatomíneo infectado; transfusão sangüínea; acidente em laboratório; transplante de órgão; vias congênita ou oral convindo salientar que esta última tem motivado ocorrências recentemente. Neste estudo procuramos avaliar a sobrevida de Trypanosoma cruzi presente em cana de açúcar contaminada com o parasita, utilizada no preparo do caldo e, também, a viabilidade e a capacidade de infecção do parasita depois de ser recuperado. Trinta triatomíneos foram contaminados com a cepa Y de T. cruzi; após 45 dias realizamos a contaminação de pedaços de cana de açúcar com o conteúdo intestinal dos insetos. Estes pedaços foram moídos em diferentes tempos: no início (tempo 0) e após 1, 4, 6, 12 e 24 horas da contaminação e o caldo extraído foi analisado por diferentes métodos: direto, centrifugação em tubo de hematócrito, QBC. Este caldo contaminado foi inoculado em 47 camundongos machos BALB/c, sendo cinco controles (com caldo de cana limpo) e sete para cada tempo estudado (cinco inoculados pela via oral e dois pela intraperitoneal). Na análise direta e no QBC obtivemos resultados positivos até 12 horas e, na centrifugação, ocorreu positividade somente até as quatro horas. As parasitemias dos animais inoculados foram todas positivas em um período de 14 dias de observação, demonstrando alto grau de sobrevivência do T. cruzi na cana de açúcar.

    Abstract in English:

    Chagas disease can be transmitted to man by many different means, including contact with infected triatomine feces, blood transfusion, laboratory accidents, organ transplants, and congenital or oral routes. The latter mode has received considerable attention recently. In this assay, we evaluate the survival of Trypanosoma cruzi contaminating sugar cane used to prepare juice, as well as the viability and capacity for infection by the parasite after recovery. Thirty triatomines were contaminated with T. cruzi Y strain and 45 days later pieces of sugar cane were contaminated with the intestinal contents of the insects. The pieces were ground at different intervals after contamination (time = 0, 1, 4, 6, 12 and 24 hours) and the juice extracted and analyzed. Different methods were used to show T. cruzi in the juice: direct analysis, hematocrit tube centrifugation and QBC, and experimental inoculation in 47 female BALB/c mice (five control mice and seven mice for each interval examined (five inoculated orally and two intraperitoneally). Positive results were found using the direct analysis and QBC methods for juice prepared up to 12 hours after initial contamination. However, by the centrifugation technique, positivity was found only up to four hours after contamination of the sugar cane. Inoculated animals showed parasitemia during a 14 day observation period, demonstrating the high survival rate of T. cruzi in sugar cane.
  • Listeria monocytogenes peritonitis in cirrhotic patients: first description in Brazil Case Report

    Toyoshima, Marcos Tadashi Kakitani; Apanavicius, André; Soeiro, Alexandre de Matos; Almeida, Gisele Madeira Duboc de; Arai, Milton Hideaki

    Abstract in Portuguese:

    Foram relatados dois casos de peritonite bacteriana espontânea (PBE) por Listeria monocytogenes em pacientes com cirrose. Em um dos casos isolamos também o agente no líquido pleural. A PBE é uma complicação comum e grave de pacientes com ascite por cirrose e a cultura do líquido ascítico é de grande importância para o diagnóstico e para o tratamento mais adequado. Embora uma cefalosporina de terceira geração seja geralmente utilizada para o tratamento empírico da PBE, ela não oferece cobertura adequada contra a Listeria spp. Nesses casos, recomenda-se o uso de ampicilina (com ou sem sulbactam) ou sulfametoxazol-trimetoprim. Para a profilaxia secundária indica-se o uso deste último, ao invés da norfloxacina. Em resumo, a infecção por Listeria monocytogenes é uma causa rara de PBE e o tratamento específico deve ser administrado.

    Abstract in English:

    Two cases of spontaneous bacterial peritonitis (SBP) caused by Listeria monocytogenes in cirrhotic patients are reported. In one of the cases, the microorganism was isolated from pleural effusion and ascites. SBP is a serious and common complication of patients with ascites caused by hepatic cirrhosis and the culture of the ascitic fluid is an important tool for the diagnosis and for the more appropriate treatment. Although a third generation cephalosporin has usually been employed for empiric treatment of SBP, it does not provide adequate coverage against Listeria spp. In such cases the use of ampicillin (with or without sulbactam) or sulfamethoxazole-trimethoprim is recommended. The last one is used for secondary prophylaxis, instead of norfloxacin. To summarize, Listeria monocytogenes infection is a rare cause of SBP, whose treatment should be specific for the bacteria.
  • Rhinoscleroma: eight Peruvian cases Case Report

    Maguiña, Ciro; Cortez-Escalante, Juan; Osores-Plenge, Fernando; Centeno, Jorge; Guerra, Humberto; Montoya, Manuel; Cok, Jaime; Castro, Cleudson

    Abstract in Portuguese:

    O rinoscleroma é uma infecção rara nos países desenvolvidos, no entanto, tem sido relatado com alguma freqüência nas regiões pobres da África Central, América Central e do Sul, Europa Central e Oriental, Oriente Médio, Índia e Indonésia. A doença pode ser erroneamente diagnosticada como leishmaniose mucocutânea, hanseníase, paracoccidioidomicose, rinosporidiose, sífilis tardia, neoplasias ou outras doenças que afetam a via respiratória superior. No período de 1996 a 2003, foram diagnosticados oito casos de rinoscleroma no serviço de Doenças Dermatológicas e Infecciosas do Hospital Nacional "Cayetano Heredia", em Lima, Peru. Os pacientes apresentaram alterações estruturais das vias respiratórias, caracterizadas por estenose da nasofaringe e orofaringe, e em um paciente, a nível da laringe. As biópsias mostraram macrófagos com grandes vacúolos (células de Mikulicz). A ciprofloxacina 500 mg de 12/12 horas por quatro a 12 semanas foi usada em sete pacientes e oxitetraciclina 500 mg de 6/6 horas por seis semanas em um paciente. Durante o acompanhamento por seis a 12 meses todos os pacientes apresentaram cura clínica, sem recaída, embora exibissem algum grau de estenose na via respiratória superior. O motivo do relato deve-se ao fato desta doença constituir um grande desafio diagnóstico e pelo sucesso alcançado com o tratamento antibiótico.

    Abstract in English:

    Rhinoscleroma is a rare infection in developed countries; although, it is reported with some frequency in poorer regions such as Central Africa, Central and South America, Eastern and Central Europe, Middle East, India and Indonesia. Nowadays, rhinoscleroma may be erroneously diagnosed as mucocutaneos leishmaniasis, leprosy, paracoccidioidomycosis, rhinosporidiasis, late syphilis, neoplasic diseases or other upper airway diseases. From 1996 to 2003, we diagnosed rhinoscleroma in eight patients attended in the Dermatologic and Transmitted Diseases service of "Cayetano Heredia" National Hospital, in Lima, Peru. The patients presented airway structural alterations producing nasopharyngeal, oropharyngeal and, in one patient, laryngeal stenosis. Biopsy samples revealed large vacuolated macrophages (Mikulicz cells) in all patients. Ciprofloxacin 500 mg bid for four to 12 weeks was used in seven patients and oxytetracycline 500 mg qid for six weeks in one patient. After follow-up for six to 12 months the patients did not show active infection or relapse, however, all of them presented some degree of upper airway stenosis. These cases are reported because of the difficulty diagnosing the disease and the success of antibiotic treatment.
  • Candida albicans skin abscess Case Report

    Tuon, Felipe Francisco; Nicodemo, Antonio Carlos

    Abstract in Portuguese:

    Abscesso subcutâneo por Candida é infecção muito rara mesmo em pacientes imunocomprometidos. Alguns casos são relatados quando ocorre dano na pele, como celulite bacteriana ou abscesso, procedimentos iatrogênicos, trauma e abuso de substância parenteral. Relatamos caso de abscesso subcutâneo por Candida albicans sem fungemia, que pode estar associado com cateter venoso central.

    Abstract in English:

    Subcutaneous candidal abscess is a very rare infection even in immunocompromised patients. Some cases are reported when breakdown in the skin occurs, as bacterial cellulites or abscess, iatrogenic procedures, trauma and parenteral substance abuse. We describe a case of Candida albicans subcutaneous abscess without fungemia, which can be associated with central venous catheter.
  • Sea urchin granuloma Case Report

    Rossetto, André Luiz; Mora, Jamesson de Macedo; Haddad Junior, Vidal

    Abstract in Portuguese:

    Os acidentes por animais aquáticos traumatizantes e venenosos podem provocar morbidez importante em humanos. Equinodermos marinhos incluem mais de 6000 espécies de estrelas-do-mar, ouriços-do-mar, "bolachas-de-praia" e pepinos-do-mar. Vários equinodermos têm sido responsabilizados por acidentes em humanos. Granulomas por ouriço-do-mar são lesões de caráter granulomatoso, crônicas, causada por acidentes com espículas de ouriço-do-mar. Os autores relatam um caso típico de granulomas por ouriço-do-mar ocorrido em um pescador e enfatizam as implicações terapêuticas aplicadas.

    Abstract in English:

    Injuries caused by venomous and poisonous aquatic animals may provoke important morbidity in humans. The phylum Echinoderma include more than 6000 species of starfish, sea urchins, sand dollars, and sea cucumbers some of which have been found responsible for injuries to humans. Initial injuries by sea urchins are associated with trauma and envenomation, but later effects can be observed. Sea urchin granuloma is a chronic granulomatous skin disease caused by frequent and successive penetration of sea urchin spines which have not been removed from wounds. The authors report a typical case of sea urchin granuloma in a fisherman and its therapeutic implications.
  • Study of variables related to soil contamination by eggs of Toxocara canis (Ascaridae, Nematoda) Summary of Thesis

    Queiroz, Maisa Leite de
  • Tratado de Clínica médica Resumo de Livro

    Amato Neto, Vicente
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