• High diagnostic efficiency of IgM-ELISA with the use of multiple antigen peptides (MAP1) from T. gondii ESA (SAG-1, GRA-1 and GRA-7), in acute toxoplasmosis Toxoplasmosis

    Araújo, Patrícia Regina Barboza; Ferreira, Antonio Walter

    Abstract in Portuguese:

    O principal marcador sorológico para o diagnóstico da toxoplasmose aguda ou recente são os anticorpos IgM específicos, a par de anticorpos IgG de baixa avidez. Entretanto em alguns pacientes, estes anticorpos podem persistir, ultrapassando o período da fase aguda/recente, contribuindo para erro diagnóstico em casos suspeitos de toxoplasmose. No presente estudo, a eficiência diagnóstica de ELISA foi avaliada, com o uso de frações ou peptídeos originados dos antígenos ESA de T. gondii, denominados de SAG-1, GRA-1 e GRA-7. No referido ensaio, estudamos cada uma destas frações isoladamente, como também em quatro diferentes combinações, ou múltiplos peptídeos antigênicos (MAP), visando estabelecer um perfil confiável para a toxoplasmose aguda/recente em amostra única de soro. A melhor eficiência diagnóstica do ensaio foi encontrada com o uso da combinação de peptídeos SAG-1, GRA-1 e GRA-7, denominada MAP1. A detecção de anticorpos IgG e IgM anti-MAP-1 apresentou melhores características diagnósticas para a diferenciação entre a fase aguda/recente da fase não aguda/recente na toxoplasmose. Nossos resultados mostram que anticorpos IgM anti-MAP-1 poderão prestar auxílio como um marcador sorológico, aumentando a eficiência diagnóstica do ensaio para a fase aguda/recente da toxoplasmose.

    Abstract in English:

    The main serological marker for the diagnosis of recent toxoplasmosis is the specific IgM antibody, along with IgG antibodies of low avidity. However, in some patients these antibodies may persist long after the acute/recent phase, contributing to misdiagnosis in suspected cases of toxoplasmosis. In the present study, the diagnostic efficiency of ELISA was evaluated, with the use of peptides derived from T. gondii ESA antigens, named SAG-1, GRA-1 and GRA-7. In the assay referred to, we studied each of these peptides individually, as well as in four different combinations, as Multiple Antigen Peptides (MAP), aiming to establish a reliable profile for the acute/recent toxoplasmosis with only one patient serum sample. The diagnostic performance of the assay using MAP1, with the combination of SAG-1, GRA-1 and GRA-7 peptides, demonstrated better discrimination of the acute/recent phase from non acute/recent phase of toxoplasmosis. Our results show that IgM antibodies to MAP1 may be useful as a serological marker, enhancing the diagnostic efficiency of the assay for acute/recent phase of toxoplasmosis.
  • Serological, clinical and epidemiological evaluation of toxocariasis in urban areas of south Brazil Toxocariasis

    Colli, Cristiane M.; Rubinsky-Elefant, Guita; Paludo, Marcia L.; Falavigna, Dina L. M.; Guilherme, Edson V.; Mattia, Salete; Araújo, Silvana M.; Ferreira, Érika C.; Previdelli, Isolde T. S.; Falavigna-Guilherme, Ana L.

    Abstract in Portuguese:

    A toxocaríase é um problema de saúde pública mundial, com maior risco para crianças que podem, acidentalmente, ingerir ovos embrionados de Toxocara spp.. Os objetivos deste estudo foram avaliar a ocorrência de anticorpos anti-Toxocara spp. em crianças e adolecentes e as variáveis que podem estar envolvidas, bem como a contaminação ambiental por ovos de Toxocara spp., em locais de recreação, em áreas urbanas da mesorregião norte central, Paraná, Brasil. De junho de 2005 a março de 2007 foram coletadas 376 amostras de sangue de crianças e adolescentes de um a doze anos, de ambos os sexos, atendidas pelo Sistema Único de Saúde. As amostras foram analisadas pelo método de ELISA indireto para detecção de IgG anti-Toxocara e previamente absorvidas com antígeno de Ascaris suum. Foram consideradas reagentes as amostras com índice de reatividade > 1. A análise das amostras de areias (n = 19) e gramados (n = 15) de cada município foi realizada em todas as praças e escolas públicas. Das 376 amostras de soro, 194 (51,6%) foram positivas. A taxa de soroprevalência foi substancialmente mais elevada entre as crianças na faixa etária de até um a cinco (p = 0.001) e de seis a oito anos de idade (p = 0,022). Os sinais e sintomas clínicos investigados não mostraram diferenças estatísticas entre soropositivos e soronegativos (p > 0,05). Em 76,5% dos locais de recreação investigados, ovos de Toxocara foram detectados em pelo menos uma das cinco amostras. Os locais de recreação das escolas públicas estavam 2,8 vezes mais contaminados do que as praças. É importante a realização de programas educativos junto às famílias e educadores, o controle sanitário de animais e a higienização dos locais destinados à recreação para prevenção da toxocaríase.

    Abstract in English:

    Toxocariasis is a worldwide public-health problem that poses major risks to children who may accidentally ingest embryonated eggs of Toxocara. The objectives of this study were to investigate the occurrence of anti-Toxocara spp. antibodies in children and adolescents and the variables that may be involved, as well as environmental contamination by Toxocara spp. eggs, in urban recreation areas of north central mesoregion, Paraná State, Brazil. From June 2005 to March 2007. a total of 376 blood samples were collected by the Public Health Service from children and adolescents one to 12 years old, of both genders. Samples were analyzed by the indirect ELISA method for detection of anti-Toxocara antibodies. Serum samples were previously absorbed with Ascaris suum antigens, and considered positive with a reagent reactivity index >1. Soil samples from all of the public squares and schools located in the four evaluated municipalities that had sand surfaces (n = 19) or lawns (n = 15) were analyzed. Of the 376 serum samples, 194 (51.6%) were positive. The seroprevalence rate was substantially higher among children aging one to five years (p = 0.001) and six to eight years (p = 0.022). The clinical signs and symptoms investigated did not show a statistical difference between seropositive and seronegative individuals (p > 0.05). In 76.5% of the investigated recreation places, eggs of Toxocara were detected in at least one of the five collected samples. Recreation areas from public schools were 2.8 times more contaminated than from public squares. It is important to institute educational programs to inform families and educators, as well as to improve sanitary control of animals and cleaning of the areas intended for recreation in order to prevent toxocariasis.
  • Updated list of bat species positive for rabies in Brazil Rabies

    Sodré, Miriam Martos; Gama, Adriana Ruckert da; Almeida, Marilene Fernandes de

    Abstract in Portuguese:

    Esse artigo apresenta uma lista atualizada de espécies positivas para raiva no Brasil e foi desenvolvida a partir da base de dados na internet da literatura nacional, internacional e dos anais das mais importantes reuniões técnicas e científicas, envolvendo raiva e morcegos no Brasil durante o período de 1996 a 2009. A nova lista de morcegos positivos para raiva consiste de 41 espécies, pertencentes a 25 gêneros e três famílias: Phyllostomidae 43.9%, Vespertilionidae 29.3% e Molossidae 26.8%. Também foram discutidas questões como a falta de dados sobre sexo, faixa etária e circunstâncias de captura dos animais e identificação incompleta ou desatualizada das espécies. Resultados dos estudos genéticos e antigênicos realizados em amostras de morcegos brasileiros positivos para raiva foram apresentados.

    Abstract in English:

    This paper presents an updated list of bat species positive for rabies in Brazil. It was developed based on database research via the internet, of international and national literature and annals of the most important technical and scientific meetings related to rabies and chiroptera in Brazil from 1996 to 2009. The new list of rabies positive bats consists of 41 species, belonging to 25 genera and three families: Phyllostomidae 43.9%, Vespertilionidae 29.3% and Molossidae 26.8%. In addition, questions were raised regarding the lack of data, including sex, age, circumstances and location of bat capture and incomplete and outdated species identification. Results of genetic and antigenic studies performed on Brazilian rabies positive bats were shown.
  • Leishmania spp. parasite isolation through inoculation of patient biopsy macerates in interferon gamma knockout mice Leishmaniasis

    Oliveira, Milton Adriano Pelli de; Pires, Alause da Silva; Bastos, Rosidete Pereira de; Lima, Glória Maria Collet de Araujo; Pinto, Sebastião Alves; Pereira, Ledice Inácia de Araujo; Pereira, Ana Joaquina Cohen Serique; Abrahamsohn, Ises de Almeida; Dorta, Miriam Leandro; Ribeiro-Dias, Fátima

    Abstract in Portuguese:

    O isolamento e a identificação da espécie de parasito do gênero Leishmania são importantes para a confirmação e auxiliam na epidemiologia da leishmaniose. Os camundongos são freqüentemente utilizados para isolar patógenos, porém, as linhagens mais comuns de camundongos são resistentes à infecção por parasitos do subgênero Leishmania (Viannia). Neste estudo, avaliamos a inoculação de macerados de biópsias de pacientes infectados em camundongos deficientes do gene do interferon gama (IFNγ KO) como um método para aumentar a possibilidade de isolar Leishmania spp. Biópsias de 25 pacientes infectados com Leishmania sp. foram avaliadas para a presença de parasitos pelos métodos de imunohistoquímica (IHC) e histopatologia convencional. Os parasitos foram observados, respectivamente, em 88% e 83% das biópsias. Leishmania sp. foi isolada de macerados de biópsia de 52% dos pacientes infectados, quando cultivados em meio Grace, porém, 13% destes isolados foram perdidos devido a contaminações. Inoculação dos macerados em camundongos IFNγ KO proporcionou o isolamento de parasitos oriundos de 31,8% dos pacientes. A maioria dos isolados pertence ao subgênero L. (Viannia), exceto um que pertence ao subgênero L. (Leishmania), como confirmado pela reação da polimerase em cadeia. Nossos resultados preliminares sugerem que o uso de camundongos IFNγ KO pode ser útil para aumentar a possibilidade de isolamento de leishmânias encontradas nas Américas.

    Abstract in English:

    Isolation of Leishmania parasite and species identification are important for confirmation and to help define the epidemiology of the leishmaniasis. Mice are often used to isolate pathogens, but the most common mouse strains are resistant to infection with parasites from the Leishmania (Viannia) subgenus. In this study we tested the inoculation of interferon gamma knockout (IFNγ KO) mice with biopsy macerates from Leishmania-infected patients to increase the possibility of isolating parasites. Biopsies from twenty five patients with clinical signs of leishmaniasis were taken and tested for the presence of parasites. Immunohistochemical assay (IHC) and conventional histopathology detected the parasite in 88% and 83% of the patients, respectively. Leishmania sp. were isolated in biopsy macerates from 52% of the patients by culture in Grace's insect medium, but 13% of isolates were lost due to contamination. Inoculation of macerates in IFNγ KO mice provides isolation of parasites in 31.8% of the biopsies. Most isolates belong to L. (Viannia) subgenus, as confirmed by PCR, except one that belongs to L. (Leishmania) subgenus. Our preliminary results support the use of IFNγ KO mice to improve the possibility to isolate New World Leishmania species.
  • Leishmanicidal activity of Echinaster (Othilia) echinophorus crude extract Leishmaniasis

    Parra, Marley García; Fidalgo, Lianet Monzote; Martinez, Judith Mendiola; Alvarez, Ana Margarita Montalvo; Iglesias, Olga Valdés

    Abstract in Portuguese:

    Neste estudo descreve-se o efeito de um extrato metanólico de Echinaster echinophorus spp. no parasita Leishmania amazonensis. Em testes com as formas promastigotas e amastigotas, o IC50 do extrato foi 62,9 e 37,5 μg.mL-1, respectivamente. O extrato também tem toxicidade moderada em macrófagos de camundongos BALB/c. O tratamento de camundongos BALB/c infectados com L. amazonensis com doses diárias de 100 mg/kg/dia via intraperitoneal durante 15 dias mostrou-se relativamente efetivo no controle da infecção. Esta investigação confirma a importância de produtos naturais como fonte para a descoberta de fármacos com funções anti-Leishmania.

    Abstract in English:

    In this study, a methanolic extract from Echinaster (Othilia) echinophorus was evaluated for activity against Leishmania amazonensis. The extract showed activity against the promastigote and amastigote forms with IC50 values of 62.9 and 37.5 μg.mL-1 respectively. This extract showed a moderate toxicity on macrophages from BALB/c mice. A dose of 100 mg/kg/day was effective when administered during 15 days by intraperitoneal route to BALB/c mice infected experimentally.
  • Subcutaneous immunization against Leishmania major - infection in mice: efficacy of formalin-killed promastigotes combined with adjuvants Leishmaniasis

    Mutiso, Joshua M.; Macharia, John C.; Mutisya, Rosemary M.; Taracha, Evans

    Abstract in Portuguese:

    Promastigotos mortos pela formalina (FKP) de Leishmania major combinados com Montanide ISA 720 (MISA), BCG ou alumen foram usados na vacinação de modelo murino cutâneo de leishmaniose (CL). Aumento significante e específico de resposta IgG anti FKP foram detectados tanto no FKP com alumen como naquele com BCG comparados ao MISA-FKP (p < 0,001). Aumento significante da proliferação esplênica de linfócitos de memória foi obtida nos camundongos vacinados com MISA-FKP quando comparados aos grupos vacinados com alumen-FKP ou BCG-FKP (p < 0,01). As maiores respostas por interferon-gama foram observadas no grupo BCG-FKP seguido pelo MISA-FKP enquanto que o alumen-FKP deu a menor resposta. No grupo MISA-FKP foram obtidas reduções significantes do tamanho das lesões quando comparado aos grupos vacinados com BCG/adjuvante de alumen-FKP. Embora o grupo BCG-FKP tenha mostrado a maior resposta por interferon-gama, não houve controle das lesões cutâneas. Redução significante no número de parasitas foi observada tanto no grupo vacinado com MISA-FKP como no BCG-FKP (p < 0,001). Houve boa correlação entre a carga parasitária e o nível de interferon-gama indicando que a resposta do interferon-gama é parâmetro sensível do estado imunológico. Em conclusão, MISA-FKP é a forma mais eficaz de vacina contra a leishmaniose cutânea murina.

    Abstract in English:

    Formalin-killed promastigotes (FKP) of Leishmania major, in combination with Montanide ISA 720 (MISA), BCG or alum were used in vaccination of an inbred murine model against cutaneous leishmaniasis (CL). Significant and specific increases in anti-FKP IgG responses were detected for both alum-FKP and BCG-FKP compared to MISA-FKP (p < 0.001). Significant increases in splenic lymphocyte recall proliferation was obtained in the MISA-FKP vaccinated mice compared to alum-FKP or BCG-FKP vaccinated groups (p < 0.01). The highest interferon-γ responses were observed in the BCG-FKP group followed by the MISA-FKP while the alum-FKP gave the least responses. Significantly reduced lesion sizes were obtained in the MISA-FKP group compared to the BCG/alum adjuvants-FKP vaccinated groups. Although the BCG-FKP group showed the highest IFN-γ responses, it failed to control cutaneous lesions. Significant reductions in parasite numbers were observed in the MISA-FKP and BCG-FKP vaccinated groups (p < 0.001). There was a good correlation between parasite burden and IFN-γ level indicating IFN-γ response as a sensitive parameter of the immune status. In conclusion, MISA-FKP is the most efficacious vaccine formulation against murine cutaneous leishmaniasis.
  • The effects of the experimental infection from a focus of transmission of Schistosoma mansoni in a population of Biomphalaria tenagophila (D'Orbigny, 1835) in the region of "Vale do Ribeira de Iguape", Brazil Schistosomiasis

    Guimarães, Marisa Cristina de Almeida; Muniz, Cynthia; Takahashi, Fernanda Yoshika; Ohlweiler, Fernanda Pires; Kawano, Toshie; Natal, Delsio

    Abstract in Portuguese:

    Com objetivo de observar os efeitos da infecção parasitária na biologia de B. tenagophila, foram realizadas infecções experimentais em populações de campo e laboratório, ambas procedentes de Itariri, Vale do Ribeira, Brasil. Cada molusco recebeu 10 miracídios de Schistosoma mansoni (linhagem SJ), sendo observado durante o desenvolvimento dos parasitos. As variáveis biológicas foram comparadas segundo os critérios "grupo" e "fase de infecção". Os principais danos decorrentes do parasitismo se manifestaram na reprodução, na longevidade e em lesões na concha dos moluscos na fase patente. Foi encontrada uma taxa de infecção de 58,8%. O estudo microanatômico da glândula digestiva e do ovoteste do molusco revelou a presença de formas larvárias em evolução e cercárias. Concluiu-se que os efeitos da infecção parasitária, sobre as duas populações, foram moderados, uma vez que os danos não impediram a reprodução e a eliminação de cercárias que se manteve por um longo período, apesar da baixa sobrevivência dos moluscos parasitados.

    Abstract in English:

    To observe the effects of the parasitic infection on the biology of B. tenagophila, field and laboratory populations of this mollusk from Itariri, in Vale do Ribeira, Brazil, were experimentally infected. Each mollusk received 10 miracidia of Schistosoma mansoni (SJ lineage) and was observed throughout the parasite's development. The biological variables were compared according to the criteria "group" and "infectious phase". The main damage caused by the parasitic infection manifested itself in reproduction, longevity and lesions on the shell of the mollusks in the patent phase. An infection rate of 58.8% was observed. Microanatomical study of the mollusk's digestive gland and ovotestis revealed the presence of evolving larval forms and cercariae. It was concluded that the effects of the parasitic infection on both populations were moderate, despite the low survival rate of the infected mollusks, the damage did not prevent either reproduction or the elimination of cercariae, which continued for a long time.
  • Disseminated toxoplasmosis in an immunocompetent patient from Peruvian Amazon Case Report

    Nunura, Juan; Vásquez, Tania; Endo, Sergio; Salazar, Daniela; Rodriguez, Alejandrina; Pereyra, Sonia; Solis, Hilda

    Abstract in Spanish:

    Reportamos un caso de toxoplasmosis severa en un paciente inmunocompetente caracterizado por neumonía, retinocoroiditis, hepatitis y miositis. El diagnóstico fue confirmado por serología, el hallazgo de T. gondii en gota gruesa y la presencia de bradizoitos en biopsia muscular. El tratamiento con pirimetamina mas sulfadoxina fue exitoso pero solo hubo una parcial recuperación de la agudeza visual y de la capacidad de extensión de la cadera. Este es el primer reporte de un caso de toxoplasmosis severa en el Perú.

    Abstract in English:

    We report a case of severe toxoplasmosis in an immunocompetent patient, characterized by pneumonia, retinochoroiditis, hepatitis and myositis. Diagnosis was confirmed by serology, T. gondii in thick blood smear and presence of bradyzoites in muscle biopsy. Treatment with pyrimethamine plus sulfadoxine was successful but visual acuity and hip extension were partially recovered. This is the first case report of severe toxoplasmosis in an immunocompetent patient from Peru.
  • Enterococcus gallinarum meningitis in an immunocompetent host: a case report Case Report

    Antonello, Vicente Sperb; Zenkner, Francis de Moura; França, Josiane; Santos, Breno Riegel

    Abstract in Portuguese:

    Descrevemos caso raro de paciente de 53 anos com história de alcoolismo prévio, com meningite por Enterococcus gallinarum, um organismo que raramente causa infecções em humanos e é encontrado principalmente no trato gastrointestinal de aves. O paciente teve melhora importante após início de tratamento intravenoso com ampicilina e gentamicina combinados. Para o nosso conhecimento, este é o primeiro caso relatado de meningite por E. gallinarum no Brasil e possivelmente o primeiro caso descrito em paciente sem imunodepressão.

    Abstract in English:

    We describe a rare case of a 53-year-old man with a long history of alcohol abuse, with Enterococcus gallinarum meningitis, an organism that rarely causes human infection and is primarily found in the gastrointestinal tract of poultry. The patient improved with high-dose ampicillin and gentamicin therapy. To our knowledge, this is the first Brazilian reported case of E. gallinarum meningitis and probably the first case described in an immunocompetent host.
  • Nissen fundoplication for the treatment of gastroesophageal reflux disease in patients with Chagas disease without achalasia Letter to the Editor

    Pantanali, Carlos A.R.; Herbella, Fernando A. M.; Henry, Maria A. C. A.; Aquino, Jose L. B.; Farah, Jose Francisco Mattos; Grande, Jose C. Del
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    Silveira, José Franco da
  • Ecosystem applied to the dengue control at local level: an approach based in the social reproduction Summary of thesis

    Santos, Solange Laurentino
  • Patologia: processos gerais

    Franco, M.; Montenegro, M.R.; De Brito, T.; Bacchi, C.E.; Cardoso de Almeida, P.
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