Micropropagação de Aechmea miniata e Aechmea blanchetiana

Micropropagation of Aechmea miniata and Aechmea blanchetiana

Resumo

Este trabalho teve o objetivo de avaliar a resposta morfogênica da micropropagação de Aechmea miniata e Aechmea blanchetiana após diferentes tratamentos com citocinina e auxinas. O estabelecimento in vitro se deu a partir de sementes de plantas adultas, com aproximadamente 2 anos de idade. Após descontaminação as sementes foram inoculadas em meio MS. Após 30 dias da germinação, foram isolados segmentos caulinares com aproximadamente 5 mm, e em seguida, foram transferidos para meio MS suplementado com BAP nas concentrações 4,44; 8,88 ou 13,32 µM. Ao final de 225 dias de cultivo, foi avaliado o número de brotos / explante, altura de brotações, porcentagem de enraizamento, número de raízes e comprimento de raízes. Verificou-se que, para as duas espécies, a concentração 4,44 µM de BAP mostrou maior eficiência para a multiplicação. Para a etapa de enraizamento, os brotos obtidos in vitro foram inoculados em meio MS com metade da concentração salina de macronutrientes, acrescido com 1, 2 e 3 µM de AIB ou ANA. Aos 60 dias, verificou-se que as duas espécies apresentaram 100% de enraizamento em meio de cultura sem a adição de reguladores de crescimento. Após enraizamento as plantas foram transferidas para substrato, e aos 180 dias de cultivo foi verificado sobrevivência superior a 80%, independente da espécie.

Palavras-chave:
aclimatização; auxinas; citocinina; enraizamento; multiplicação

Abstract

The objective of this study was to evaluate the morphogenic response of Aechmea miniata and Aechmea blanchetiana after different treatments with cytokinins and auxins during micropropagation. In vitro cultures were established from seeds of adult plants, approximately 2 years old. After sterilization, the seeds were inoculated in MS médium. 30 days after germination, caulin segments of approximately 5 mm were isolated, then, transferred to MS medium supplemented with BAP at concentrations of 4.44, 8.88, and 13.32 µM. At the end of 225 days of culture, the number of buds/explants, height of shoots, percentage of rooting, number of roots, and length of roots were evaluated. It was found that 4.44 µM BAP induced relatively higher frequency of multiplication in both species. For rooting, the shoots obtained in vitro were inoculated in MS medium with half of the concentration of macronutrient salts, and 1, 2, and 3 µM AIB or ANA. At 60 days, the two species exhibited 100% rooting in the médium without the addition of growth regulators. After rooting the plants were transferred to substrate, and at 180 days of culture, the survival rate was more than 80%, independent of the species.

Key words:
acclimatization; auxins; cytokinin; rooting; multiplication

Introdução

A Mata Atlântica ocupa uma área de 1.315.460 km² (Fundação SOS Mata Atlântica 2015) ao longo da costa litorânea do território brasileiro, que se estende do Rio Grande do Norte ao Rio Grande do Sul (BFG 2015). Conhecida mundialmente como uma das áreas prioritárias para conservação (Versieux 2011), este bioma tem registrado crescente redução de sua cobertura vegetal, registrando no ano de 2014 apenas 8,5 % de sua área original (Fundação SOS Mata Atlântica 2015).

Entre os componentes de grande importância ecológica e econômica do bioma Mata Atlântica, encontram-se as bromélias, as quais, pela fragmentação deste ecossistema, e em função de seu valor ornamental, foram, ao longo do tempo, extraídas desordenadamente de seus habitats naturais (Guerra & Dal Vesco 2010).

Apesar do crescimento do mercado de plantas ornamentais, o cultivo comercial de bromélias ainda é incipiente, e muitas das espécies comercializadas, ainda são obtidas, principalmente através do extrativismo predatório, devido à disponibilidade dessas bromélias em seu ambiente natural e ao acesso facilitado (Silveira et al. 2009).

Aechmea miniata (Beer) Baker e Aechmea blanchetiana (Baker) L. B. Smith são espécies nativas da Mata Atlântica do Brasil, utilizadas no paisagismo, adaptadas a todas as regiões do país e vêm sendo extraídas de seu ambiente natural para atender a demanda do mercado de plantas ornamentais (Coelho & Amorim 2014). A reprodução destas espécies pode ser tanto pela via sexuada quanto assexuada. Na via sexuada, através de sementes, a maturação fisiológica da capsula de sementes pode ocorrer em até um ano, a partir da antese floral. Já na via assexuada, através de rebentos laterais, após a floração, uma planta em idade adulta pode fornecer no máximo, dois rebentos, e seguida, após emissão da inflorescência, a planta matriz entra em senescência (Santos et al. 2005).

A produção de mudas para atender à crescente demanda do mercado de plantas ornamentais seria uma estratégia para reduzir o extrativismo predatório (Silveira et al. 2009); e, neste cenário, a técnica de micropropagação pode ser uma ferramenta biotecnológica para atender está demanda, disponibilizando uma grande quantidade de mudas sadias, livres de agentes fitopatogênicos, em curto tempo, quando comparada ao processo de reprodução (Palú et al. 2011). Além disso, a micropropagação pode favorecer a seleção de plantas in vitro de Aechmea miniata e Aechmea blanchetiana, que podem ser utilizadas como matrizes fornecedoras de explantes em trabalhos futuros.

Métodos de cultivo in vitro têm sido aplicados na conservação e multiplicação de diversos genótipos de bromélias (Lima et al. 2012), porém, o emprego desta técnica depende do estabelecimento de protocolos específicos. Segundo Guerra & Dal Vesco (2010) as respostas morfogênicas in vitro em bromélias, apresentam características diferenciadas dos sistemas regenerativos tradicionais e a variabilidade da resposta morfogênica existe até mesmo entre genótipos da mesma espécie.

Diante da escassez de estudos e das limitações para a propagação destas espécies, este trabalho teve como objetivo estabelecer os protocolos de micropropagação de A. miniata e A. blanchetiana.

Material e Métodos

O estabelecimento in vitro foi realizado a partir de cápsulas de sementes de A. miniata e A. blanchetiana coletadas de plantas com aproximadamente 2 anos de idade, logo no início da deiscência dos frutos (Fig. 1a), no Banco Ativo de Germoplasma de plantas ornamentais da Empresa Baiana de Desenvolvimento Agrícola (EBDA), localizada no município de Salvador, Bahia, Brasil.

Figura 1
a. Cápsula de sementes de Aechmea miniata ; b. sementes de A. miniata em meio de cultura; c. sementes de A. miniata após 15 dias em meio de cultura; d. brotações de A. miniata em meio de cultura com 4,44 µM de BAP; e. plântulas de A. miniata em meio de enraizamento; f. plântulas de Aechemea sp aos 180 dias de cultivo em substrato. (Barra de escala: 0,5 cm).
Figure 1
a. Aechmea miniata seed capsule; b. seeds of A. miniata in culture medium; c. seeds of A. miniata after 15 days in culture medium; d. sprouts of A. miniata in culture medium with 4.44 µM BAP; e. A. miniata seedlings in rooting medium; f. Aechemea sp seedlings at 180 days of substrate cultivation. (Scale bar: 0.5 cm).

Em câmara de fluxo laminar, as sementes foram retiradas dos frutos e descontaminadas em álcool 70 % durante 1 minuto, seguido de solução de hipoclorito de sódio com 2 % de cloro ativo por 15 minutos e posteriormente foram lavadas duas vezes em água destilada estéril. Após a descontaminação as sementes foram transferidas para frascos de vidro (100 × 70 mm) contendo 25 mL do meio de cultura MS (Murashige & Skoog 1962) (Fig. 1b), suplementado com 30 g L^-1 de sacarose e 7 g L^{- 1} de ágar, e pH ajustado para 5,7 ± 0,1 antes da esterilização em autoclave à temperatura de 120 ºC e pressão de 1 kgf cm^-2 durante 15 minutos.

Após a transferência das sementes, as culturas foram mantidas em sala de crescimento com temperatura de 25 ± 2 ºC, densidade de fluxo de fótons de 60 µmol m^-² s^-1 e fotoperíodo de 16 h. A cada dois dias, foram avaliados o número de sementes germinadas, até que este se tornasse constante. Foram consideradas como germinadas todas as sementes em que ocorreu a protusão da radícula e posteriormente formaram plantas normais (Fig. 1c). Após 50 dias de cultivo, foi determinada a porcentagem de germinação. Para cada espécie foram utilizadas 4 repetições, sendo que cada repetição constou de um frasco contendo 50 sementes, totalizando 200 sementes por espécie.

Para a fase de multiplicação, em câmara de fluxo laminar, segmentos caulinares de plantas de A. miniata e A. blanchetiana germinadas in vitro, onde, cada planta germinada forneceu 1 explante com aproximadamente 5 mm de altura, foram isolados a partir de plantas com 3 cm de altura e 0,2 cm de diâmetro. Em seguida, os segmentos caulinares foram inoculados em tubos de ensaio (25 × 150 mm) contendo 15 mL de meio de cultura MS, suplementado com 30 g L^-1 de sacarose e 7 g L^-1 de ágar, acrescido de BAP nas concentrações 4,44; 8,88 ou 13,32 µM, mais um tratamento controle, sem a adição de BAP, totalizando 8 tratamentos. O pH do meio de cultura foi ajustado para 5,7 ± 0,1, antes da esterilização em autoclave à temperatura de 120 °C e pressão de 1 kgf cm^-2 durante 15 minutos.

Após a transferência, as culturas foram mantidas em sala de crescimento com temperatura de 25 ± 2 ºC, densidade de fluxo de fótons de 60 µmol m^-2 s^-1 e fotoperíodo de 16 h. Para verificar a resposta morfogênica ao longo do tempo, foram realizados 5 subcultivos, totalizando 225 dias, com intervalo de 45 dias entre subcultivos. Em cada subcultivo, os explantes foram individualizados e novamente isolados de modo que ficassem com aproximadamente 5 mm de altura, e em seguida, inoculados em meio fresco, suplementado com a mesma concentração de BAP do meio de cultura de origem (Fig. 1d). Ao final do 5º subcultivo, foi avaliado o número total de brotos / explante, altura de brotações (cm), número de raízes, e comprimento das raízes (cm). Cada tratamento foi composto por 40 repetições, sendo que cada unidade experimental constituiu-se de 1 explante por tubo de ensaio.

Na fase de enraizamento, brotações de A. miniata e A. blanchetiana com aproximadamente 10 mm de comprimento, provenientes de meio de cultura sem a adição de regulador de crescimento (MS0), foram transferidas para tubos de ensaio (25 × 150 mm) contendo 15 mL de meio de cultura MS com metade da concentração salina de macronutrientes, acrescido isoladamente com ácido indol-butírico (AIB) ou ácido naftalenoacético (ANA) nas concentrações 1, 2 ou 3 µM, mais um tratamento controle, isento de auxina, totalizando 14 tratamentos (Fig. 1e). O pH do meio de cultura foi ajustado para 5,7 ± 0,1 antes da esterilização em autoclave à temperatura de 120 °C e pressão de 1 kgf cm^-2 durante 15 minutos. Após a transferência, as culturas foram mantidas em sala de crescimento com temperatura de 25 ± 2 ºC, densidade de fluxo de fótons de 60 µmol m^-² s^-1 e fotoperíodo de 16 h. Após 60 dias, foram analisados a porcentagem de enraizamento, número de raízes e comprimento das raízes. Cada tratamento foi composto por 40 repetições, sendo que cada unidade experimental constituiu-se de 1 explante por tubo de ensaio.

Com o intuito de avaliar o efeito dos tratamentos de enraizamento sobre a aclimatização, plantas de A. miniata e A. blanchetiana foram removidas da condição in vitro e tiveram suas raízes lavadas para a retirada do meio de cultura, em seguida foram transferidas para bandejas de polipropileno de 200 células, com dimensões de 5 × 5 × 9 cm, contendo substrato plantmax hortaliças HT^® (Fig. 1f) onde permaneceram em casa de vegetação com interceptação luminosa de 50 % e irrigação com vazão de 60 L / H / m² durante 2 minutos. Nos primeiros 20 dias as plantas foram submetidas a duas irrigações diárias, com intervalo de 8 horas entre cada irrigação, sendo mantida apenas uma irrigação a partir do 21^o dia. As plantas foram mantidas nestas condições por 180 dias, e após este período foi avaliado a porcentagem de sobrevivência das plantas.

Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância e regressão. A comparação de médias foi realizada com o teste de Tukey a 5% de probabilidade, utilizando o programa estatístico SISVAR (Ferreira 2014). Para homogeneizar a variância, fez-se a transformação de dados de número de folhas e número de raiz usando-se a fórmula $\sqrt{\mathit{X}+0,5}$.

Resultados e Discussão

Após 50 dias de cultivo, foi verificado que a porcentagem de germinação de sementes de A.miniata e A. blanchetiana foi de 97,1 % e 90,2 %, respectivamente. A germinação in vitro não é um fator limitante para a propagação de bromélias, sendo relatadas altas taxas de germinação por diversos autores, como: Sasamori et al. (2016) trabalhando com Vriesea incurvata Gaudich; Pickens et al. (2003) com Tillandsia eizii L.B. Smith; e Santa-Rosa et al. (2013) e Silveira et al. (2009) com Neoglaziovia variegata (Arruda) Mez, que obtiveram respectivamente, 95, 86,7, 90 e 62 % de germinação em meio de cultura MS.

Na fase de multiplicação in vitro a partir de segmentos caulinares, o aumento das concentrações de BAP promoveu um comportamento linear crescente para o número de brotos / explante (Fig. 2), e, quando se utilizou a concentração 13,32 µM de BAP, obteve-se ao final de 225 dias de cultivo o maior número de brotos / explantes, com a formação de 14,5 para A. miniata e 10,5 para A. blanchetiana (Fig. 2a).

Figura 2
a. Número de brotações por explantes; b. altura de brotações; c. número de raízes; d. comprimento de raízes em brotações de Aechmea miniata (♦) e Aechmea blanchetiana (■) em função de diferentes concentrações de BAP (µM).
Figure 2
a. Number of shoots per explant; b. height of shoots; c. number of roots; d. root length of shoots of Aechmea miniata (♦) and Aechmea blanchetiana (■) as a function of different concentrations of BAP (µM).

Porém, apesar da concentração 13,32 µM de BAP ter proporcionado o maior número médio de brotos por explante, estes apresentaram características morfológicas não desejáveis, como brotos pequenos, ausência de raízes ou pouco desenvolvidas, características que também foram observadas para as brotações formadas no tratamento com a concentração 8,88 µM de BAP (Fig. 3). Resultados similares também reportados para Aechmea distichantha Lem. (Santa-Rosa et al. 2013) e Mentha arvensis L. (Arrigoni-Blannk et al. 2011); segundo estes autores, as concentrações elevadas de BAP promovem a formação de grande número de brotos em detrimento, porém, de seu desenvolvimento. Segundo Aros et al. (2017) e Dal Vesco et al. (2014) as citocininas, principalmente o BAP, quando utilizadas na fase de multiplicação in vitro, promovem a formação de parte aérea, mas seu excesso pode ser prejudicial à formação de brotações, promovendo a formação de um grande número de brotos, diminuição de folhas, encurtamento das brotações, engrossamento exagerado dos caules e vitrificação, causando a inviabilidade dos explantes.

Figura 3
a-d. Brotações de Aechmea miniata cultivadas em meio MS com - a. 0,00; b. 4,44; c. 8,88; d. 13,32 µM de BAP. e-h. brotações de Aechmea blanchetiana cultivadas em meio MS suplementado com suplementado com - e. 0,00; f. 4,44; g. 8,88; h. 13,32µM de BAP. (Barra de escala: 0,5 cm).
Figure 3
a-d. Aechmea miniata sprouts cultured on MS medium with - a. 0.00; b. 4.44; c. 8.88; d. 13.32 µM BAP. e-h. Aechmea blanchetiana sprouts grown on MS medium supplemented with supplemented with - e. 0.00; f. 4.44; g. 8.88; h. 13.32µM BAP. (Scale bar: 0.5 cm).

Para a variável altura das brotações, independente da espécie, os maiores valores foram observados para o tratamento sem a adição do BAP, verificando-se um comportamento linear decrescente, pois, à medida que se aumentou a concentração de BAP, houve a redução da altura das brotações (Fig. 2b). Estes resultados corroboram os observados por diversos autores, como Pasqual et al. (2008) em trabalhos com Ananas lucidus Mill., Silveira et al. (2009) em Neoglaziovia variegata e Macêdo et al. (2003) em Ananas comosus L. Merril, que também relataram este efeito quando se adicionado BAP ao meio de cultivo. Segundo estes autores, apesar das concentrações mais elevadas promoverem o maior número de brotações, em geral, estas apresentam menor altura e unidas entre si, dificultando o processo de individualização. Estes resultados indicam que tratamentos com concentrações menores de BAP são os mais indicados devido à maior facilidade de individualização dos brotos.

O aumento na concentração de BAP também teve efeito negativo para comprimento e número de raízes formadas. Nas concentrações maiores que 4,44 µM, esta redução foi ainda mais drástica, independente da espécie avaliada (Fig. 2c-d). Resultados similares foram obtidos por Pasqual et al. (2008) em abacaxi ornamental. Ao estudar a influência do BAP na proliferação in vitro dessa espécie, os autores verificaram que o aumento nas concentrações desse regulador ocasionou redução no número de raízes.

A respeito da multiplicação in vitro de A. miniata e A. blanchetiana, pode-se concluir que a concentração de 4,44 µM de BAP foi a mais adequada para as variáveis número total de brotos / explante e altura das brotações. Já a adição de elevadas concentrações do BAP (8,88 e 13,32 µM) ao meio de cultura promoveu a maior formação de brotações / explante, em detrimento ao crescimento em altura de brotações, além de ter favorecido a presença de características morfológicas indesejáveis. Este comportamento indica uma forte ação do BAP na indução das brotações laterais e um balanço auxina / citocinina insuficiente para promover a formação satisfatória de raízes, juntamente com a formação de brotos. Monfort et al. (2012) afirma que, quando utiliza-se concentrações elevadas de citocininas no cultivo in vitro, as citocininas favorecem a inibição da ação das auxinas endógenas presente nos explantes.

Brotações de A. miniata e A. blanchetiana apresentaram 100 % de enraizamento, independente do tipo e da concentração da auxina estudada (Tab. 1). Este resultado é similar ao relatado por Atawia et al. (2016) que testou as concentrações 1, 2 e 3 µM de AIA e AIB no enraizamento in vitro de brotações de Ananas comosus, porém, não verificou diferença estatística entre os tratamentos avaliados.

Tabela 1
Efeito de diferentes concentrações de ANA ou AIB sobre a porcentagem de enraizamento, número de raízes e comprimento das raízes (cm), em brotos de Aechmea miniata e Aechmea blanchetiana.
Table 1
Effect of different concentrations of NAA or IBA on the percentage of rooting, number of roots and length of roots (cm), in sprouts of Aechmea miniata and Aechmea blanchetiana.

Aechmea miniata
Trat.	ANA (µM)	AIB (µM)	Enraizamento (%)	Nº raízes	Comp. raízes (cm)
1	0	0	100a	3,45d	3,07a
2	1	0	100a	3,27d	3,67a
3	2	0	100a	4,10bc	3,55a
4	3	0	100a	4,75a	3,61a
5	0	1	100a	3,75cd	3,28a
6	0	2	100a	3,67cd	3,42a
7	0	3	100a	4,35ab	3,49a
CV (%)				31,64	48,52
Aechmea blanchetiana
Trat.	ANA (µM)	AIB (µM)	Enraizamento (%)	Nº raízes	Comp. raízes (cm)
1	0	0	100a	1,82e	2,05b
2	1	0	100a	2,70d	3,49a
3	2	0	100a	3,95ab	2,89a
4	3	0	100a	4,35a	2,96a
5	0	1	100a	3,00cd	2,97a
6	0	2	100a	3,50bc	3,08a
7	0	3	100a	4,25a	3,45a
CV (%)				31,16	41,41

• Médias seguis letras nas colunasdas pelas mesma, não diferem entre si ao nível de 5% de probabilidade pelo teste de Tukey.

O número e o comprimento de raízes formadas em explantes de A. blanchetiana, aumentou de acordo com o aumento da concentração, independentemente da auxina adicionada (Tab. 1), sendo verificado maior número de raízes formadas nos tratamentos com 3 µM de ANA ou AIB, com 4,35 e 4,25 raízes por explante, respectivamente. O mesmo comportamento foi observado para A. miniata, ao suplementar o meio de cultura com 3,0 µM de ANA ou AIB, apresentando, respectivamente, 4,75 e 4,35 raízes por explante (Tab. 1). Estes resultados corroboram Almeida et al. (2015) que, ao estudarem diferentes concentrações de ANA e AIB no enraizamento in vitro de Aegiphila verticillata Vell., verificaram que as concentrações 2,00 e 3,00 µM foram as que apresentaram melhores resultados, independente da auxina utilizada. De acordo com Simão et al. (2016), a adição de auxina ao meio de cultivo favorece o processo de indução de formação de raízes, onde, a auxinas atuam inicialmente em células do meristema primário, estimulando a divisão celular, e consequentemente, promovendo o alongamento celular.

Na fase de aclimatização, para A. miniata, foi verificado que entre os tratamentos testados, não houve diferença estatística para o percentual de sobrevivência, porém, para A. blanchetiana, todos os tratamentos com adição de auxinas, se mostraram superiores ao tratamento controle (Tab. 2). Este comportamento pode estar relacionado com o fato das plantas oriundas do tratamento sem auxina, terem apresentado a menor formação de raízes. De acordo com Ford et al. (2002), existe uma relação intrínseca entre os níveis endógenos de auxinas e a capacidade de formação de raízes, e que a resposta morfogênica ao estímulo pode ser influenciada pelo tipo de auxina, concentração e material vegetal. Ainda, de acordo com Guerra & Dal Vesco (2010), as respostas morfogênicas in vitro em bromélias, apresentam variabilidade até mesmo entre genótipos da mesma espécie.

Tabela 2
Valores médios para sobrevivência de Aechmea miniata e Aechmea blanchetiana após 60 dias de transferência para casa de vegetação, em função de diferentes concentrações de ANA e AIB.
Table 2
Mean values for survival of Aechmea miniata and Aechmea blanchetiana after 60 days of transfer to greenhouse, depending on different concentrations of NAA and IBA.

		Sobrevivência (%)
Auxina	Concentração (µM)	Aechemea miniata	Aechemea blanchetiana
	0	95a	81b
ANA	1	98a	91a
	2	100a	93a
	3	100a	96a
AIB	1	100a	93a
	2	96a	95a
	3	94a	100a

• Médias seguidas pelas mesmas letras nas colunas, não diferem entre si ao nível de 5% de probabilidade pelo teste de Tukey.

Foi verificado que a aclimatização das duas espécies estudadas não é um fator limitante à micropropagação. Os resultados mostram altas taxas de sobrevivência, superiores a 80 %, independente da espécie estudada (Tab. 2). Estes resultados corroboram Kurita & Tamaki (2014) que verificaram sobrevivência de até 100 % de indivíduos de Nidularium minutum Mez. após 90 dias de aclimatização. Bem como Santos et al. (2010), que obtiveram 95 % de sobrevivência de plântulas micropropagadas de Acanthostachys strobilacea (Schult. f.) Klotzsch aclimatizadas em substrato com irrigação de diferentes diluições do meio MS, após 240 dias e Oliveira et al. (2007) que, avaliando diferentes substratos na aclimatização de plântulas micropropagadas de Ananas lucidus, verificaram sobrevivência de 97 %, independente do substrato avaliado.

Com base nos resultados encontrados neste trabalho, recomendando o uso de 4,44 µM de BAP como o tratamento mais adequado para a indução de brotações em explantes de A. miniata e A. blanchetiana, pode-se fazer uma projeção para a produção de mudas no período de 225 dias. Assim, a partir de 1 explante, que corresponde a 1 segmento caulinar, obtido a partir da gerrminação de uma semente, e, considerando que a taxa média de multiplicação de plantas viávies encontrada ao longo do período de cultivo para esse tratamento foi de 6,87 e 6,44 brotações por explantes para A. miniata e A. blanchetiana, respectivamente, ao final dos 5 subsultivos, ou seja, 225 dias, teríamos 15.303 brotações para A. miniata e 11.044 brotações para A. blanchetiana (Tab. 3). Número de brotações superior, quando comparado aos métodos de reprodução natural destas espécies, tanto assexuado, quanto ao sexuado.

Tabela 3
Projeção para o número de brotações obtidas a partir de um único explante de Aechmea miniata e Aechmea blanchetiana ao final de 225 dias de cultivo em meio de MS suplementado com 4,44 µM de BAP.
Table 3
Projection for the number of shoots obtained from a single explant of Aechmea miniata and Aechmea blanchetiana at the end of 225 days of culture in MS medium supplemented with 4.44 µM BAP.

		Número de brotações
Subcultivo	Dias	Aechemea miniata	Aechemea blanchetiana
1º	45	6,87	6,44
2º	90	47,19	41,47
3º	135	324,24	267,08
4º	180	2.227,54	1.720,05
5º	225	15.303,25	11.044,18

Portanto, a técnica de micropropagação pode ser utilizada como ferramenta biotecnológica, para a propagação massal de A. miniata e A. blanchetiana, espécies que possuem considerável importância econômica e ornamental, de forma a contribuir para a conservação destes germoplasmas vegetais, que também, exercem relevante importância ecológica dentro do bioma Mata Atlântica.

Nas condições deste trabalho, a germinação in vitro de sementes de Aechemea miniata e Aechemea blanchetiana apresentaram altas taxas de germinação, não sendo uma limitação para a propagação in vitro destas espécies. A suplementação do meio MS com a concentração de 4,44 µM de BAP apresentou melhores resultados para a multiplicação in vitro a partir de segmentos caulinares das duas espécies, que também apresentaram, independente do tipo e da concentração de auxina utilizada, 100% de enraizamento, apesar disto, a utilização da auxina favoreceu somente a aclimatização de plantas de Aechemea blanchetiana.

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Editado por

Editora de área: Dra. Georgia Pacheco

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  30 Abr 2021
• Data do Fascículo
  2021

Histórico

• Recebido
  31 Maio 2018
• Aceito
  11 Set 2019