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Agrotransformação de Phytophthora nicotianae: um método simplificado e otimizado

RESUMO

Phytophthora nicotianae é um fitopatógeno responsável por danos em culturas e ecossistemas naturais em todo o mundo. P. nicotianae está relacionada às doencas: gomose e podridao de raízes e o manejo destas doencas depende principalmente de certificação de mudas e erradicação de plantas infectadas. No entanto, pouco se sabe sobre a estratégia de infecção do patógenos em plantas de citrus, o que eleva a necessidade de examinar a sua virulência em níveis moleculares. Neste trabalho nós apresentamos um método otimizado para manipular geneticamente o micélio de P. nicotianae. P. nicotianae foi transformada com um vetor de expressão da proteína fluorescente DsRed. O método AMT otimizado gerou relativa alta eficiência de transformação. Também apresenta vantagens sobre os outros métodos porque é o de mais simples execução, não requer protoplastos ou esporos como alvos, é menos dispendioso e não requer equipamento específico. A transformação com DsRed não prejudicou a fisiologia, reprodução ou virulência do patógeno. O método AMT otimizado aqui apresentado é útil para rápida, eficaz e confiável transformação de P. nicotianae com qualquer gene de interesse.

Palavras-chave
transformação genética; DsRed; Agrobacterium tumefaciens

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