Ocorrência de Lasiodiplodia pseudotheobromae em bacurizeiro (Platonia insignis)

O bacurizeiro (Platonia insignis Mart.) é espécie frutífera nativa da Amazônia com potencial de comercialização para todas as regiões do Brasil. No ano de 2012, observou-se a ocorrência de plantas com sintomas de seca descendente e exsudação de resina (Figura 1A, B) no Campo Experimental da Embrapa Amazônia Oriental em Belém, Pará. As plantas sintomáticas foram coletadas e transportadas ao Laboratório de Fitopatologia, onde foram realizados os procedimentos para a identificação do patógeno. Após o isolamento e cultivo em meio de cultura batata-dextrose-ágar (BDA), foi realizado o teste de patogenicidade em mudas de bacurizeiro, por meio de sobreposição de disco micelial no caule, previamente ferido, e vedado com parafilme. Após oito dias da inoculação, constataram-se, nas plantas inoculadas, os mesmos sintomas de seca observados em campo (Figura 1C). O fungo foi reisolado e a patogenicidade comprovada. O isolado apresentou conídios hialinos, unicelulares, elipsoides que com o amadurecimento se tornavam marrom escuro, com parede espessa e septo centralizado e, algumas estrias longitudinais foram observadas (Figura 1D). O tamanho dos conídios variou de 23-26 µm x 10-15 µm (n=30). A morfologia é característica do gênero fúngico Lasiodiplodia. Para a caracterização molecular, o DNA foi extraído a partir da colônia do fungo em meio de cultura BDA por sete dias (⁵). Posteriormente, realizou-se PCR utilizando os pares de primers: ITS4 e ITS5 (¹⁴), referentes à região espaçadora transcrita interna (ITS), e EF1-688F e EF1-1251R (¹²), da região fator de elongação (EF1). Após amplificação do DNA, procedeu-se sua purificação e sequenciamento. As sequências ITS (KX171632) e EF1 (KX171633) obtidas foram comparadas com sequências disponíveis no GenBank via Blastn e citadas por Coutinho et al. (⁴), sendo posteriormente analisadas por meio de alinhamentos múltiplos através do programa ClustalW. As inferências filogenéticas para a verificação em nível de espécie foram aferidas por meio da análise de máxima parcimônia (MP) utilizando o método de busca heurística TBR no programa Mega X (⁷). A validade estatística da árvore foi testada usando análise de bootstrap com 1000 repetições. Um isolado de Macrophomina phaseolina (PD112) (⁶) foi usado como outgroup. Escores da árvore, incluindo seu comprimento, o índice de consistência (IC), índice de retenção (IR) e o índice de consistência redimensionada (CR) também foram calculados. As sequências obtidas foram depositadas no GenBank. A árvore mais parcimônia foi a de comprimento 498 (IC = 0,603104, IR = 0,848048 e CR = 543227). O isolado identificado formou clado com acessos de L. pseudotheobromae (CBS 116459 e CMM 3887) (¹, ², ⁹) suportado por 89% de bootstrap. A informação presente nesse estudo é o primeiro relato de Lasiodiplodia pseudotheobromae causando seca descendente em bacurizeiro em território brasileiro. No Brasil, há relatos de L. pseudotheobromae ocorrendo em manga (¹⁰), mamão (²), mandioca (⁸), pinhão-manso (⁹), uva (³), coco (¹³), caqui (¹¹), cajueiro, tamarindo e ciriguela (⁴). O isolado encontra-se depositado na Coleção de Microrganismos de Importância Agrícola e Ambiental da Embrapa Meio Ambiente, com o código CMAA1756.

Figura 1
Sintomas da seca descendente (A) com a liberação de resina (B) em planta de bacurizeiro. Reação de muda de bacurizeiro nove dias após a inoculação de Lasiodiplodia pseudotheobromae (C). Conídios jovens (hialinos e unicelulares) e maduros com coloração escura e septo centralizado de L. pseudotheobromae (D)

REFERENCES

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  08 Maio 2020
• Data do Fascículo
  Jan-Apr 2020

Histórico

• Recebido
  20 Mar 2018
• Aceito
  23 Jan 2020