Inoculação de Curvularia eragrostidis em inhame (Dioscorea alata) cv. São Tomé

Inoculation of Curvularia eragrostidis in yam plants (Dioscorea alata) cv. São Tomé

RESUMO

Objetivou-se selecionar o método de inoculação de Curvularia eragrostidis em mudas de inhame (Dioscorea alata) cv. São Tomé para a determinação da infecção e do período de latência. O isolado de C. eragrostidis foi obtido a partir de folhas de inhame com sintomas da doença. Plantas com 45 dias de idade, cultivadas em casa de vegetação, foram inoculadas com o patógeno da seguinte forma: T1 – Suspensão de esporos (1x10⁵ conídios mL^-1); T2 - Discos de colônia de 10 mm fixados com fita adesiva (dois na face abaxial e um na face adaxial); T3 - Pincelamento de esporos; T4 - Algodão umedecido na suspensão de inóculo; T5 - testemunha (plantas borrifadas com água destilada e esterilizada). Após 72 h da inoculação, a incidência da doença foi avaliada diariamente e a severidade avaliada ao 15º dia. Os resultados obtidos revelaram que a pulverização de suspensão de esporos foi mais eficiente na inoculação de C. eragrostidis em mudas de inhame, ocasionando o aparecimento dos primeiros sintomas a partir do terceiro dia após a inoculação.

Palavras-chave
queima das folhas; incidência; severidade

ABSTRACT

The aim of this study was to select the method of C. eragrostidis inoculation in yam seedlings (Dioscorea alata) cv. São Tomé to determine the infection and the latency period. The isolate of C. eragrostidis was obtained from yam leaves showing symptoms of the disease. Plants aged 45 days old, cultivated in a greenhouse, were inoculated with the pathogen, as follows: T1 – Spore suspension (1x10 conidia mL^-1); T2 – Colonial disks of 10mm fixed with adhesive tape (two on the abaxial surface and one on the adaxial surface); T3 - Brushing of spores; T4 - Cotton soaked in the inoculum suspension; T5 - Control (plants sprayed with sterile distilled water). After 72h of inoculation, the disease incidence was daily evaluated and the severity was assessed on the 15^th day. The obtained results revealed that the spore suspension spraying method was more efficient for C. eragrostidis inoculation in yam seedlings, causing the first symptoms to appear from the third day after inoculation.

Keywords
leaf blight; incidence; severity

O cultivo do inhame (Dioscorea sp.) vem crescendo nos últimos anos e, no Brasil, a cultura concentra-se principalmente na região Nordeste, onde é cultivado utilizando-se mão de obra familiar e baixos níveis tecnológicos, que não tem permitido alcançar produtividade satisfatória (²).

As limitações de produtividade estão diretamente relacionadas à ocorrência de doenças, dentre as quais a queima das folhas, causada pelo fungo Curvularia eragrostidis (Henn.) Meyer [teleomorfo Cochliobolus eragrostidis Tsuda & Ueyama], considerada a principal doença foliar dessa cultura (⁵), cujos sintomas caracterizam-se por manchas foliares necróticas, de coloração marrom-escura, circundadas por um halo amarelo (⁴).

O desenvolvimento de metodologias de inoculação visando uma avaliação precoce da resistência de materiais vegetais a patógenos consiste numa importante etapa na seleção de genótipos superiores em programas de melhoramento (¹). Dessa forma estudos com métodos de inoculação, são importantes para o conhecimento do patossistema C. eragrostidis x Dioscorea spp. Nesse sentido, o presente trabalho teve como objetivo avaliar métodos de inoculação de C. eragrostidis em mudas de inhame.

Os experimentos foram conduzidos em casa de vegetação e no Laboratório de Fitopatologia, Centro de Ciências Agrárias da Universidade Federal da Paraíba - UFPB, Areia-PB. O isolado de C. eragrostidis foi obtido a partir de folhas de inhame com sintomas da doença, coletadas em áreas de produção comercial no município de Areia-PB e seu isolamento constou da desinfestação superficial de fragmentos das folhas com etanol 70% por 30 segundos, hipoclorito a 1% por 1 minuto, e duas lavagens com água destilada esterilizada (ADE) e, acondicionados em placas de Petri contendo meio BDA e acondicionadas a 25 ±2°C, por sete dias sob alternância luminosa de 12h. A identificação do fungo foi feita através de literatura especializada (⁶), com o auxílio de microscópio ótico As plântulas inoculadas com o patógeno tinham 45 dias de idade, cultivadas em vasos, em casa de vegetação. A suspensão de conídios foi preparada a partir de colônias fúngicas crescidas em BDA, conforme descrito anteriormente, e ajustada para 5x10⁵ conídios.mL^-1. O delineamento experimental foi DIC, com cinco tratamentos de cinco repetições. As inoculações de C. eragrostidis foram dispostas em T1 – Suspensão de esporos (1x10⁵ conídios.mL^-1); T2 - Discos de colônia de 10 mm fixados com fita adesiva (dois na face abaxial e um na face adaxial); T3 - Pincelamento de esporos; T4 - Algodão umedecido na suspensão de inóculo; T5 - testemunha (plantas borrifadas com água destilada e esterilizada). Após as inoculações, as plântulas foram mantidas em casa de vegetação por 15 dias.

Para a análise da doença utilizou-se escala diagramática estabelecida para C. eragrostidis (³), com severidade variando de 0 a 32%. A severidade de manchas foliares foi estimada ao 15º dia após as inoculações e os dados foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey (P=0,05). As avaliações de incidência foram realizadas diariamente, após 72h da inoculação a partir do número de folhas afetadas.

Foram observadas diferenças significativas entre os métodos de inoculação, tanto para a incidência, quanto para a severidade avaliadas (Tabela 1). O método de suspensão de esporos proporcionou maior incidência quando comparado aos demais tratamentos. Aos 15 dias após a inoculação, o tratamento com suspensão de esporos apresentou 93% de incidência e 59,6% de área foliar necrosada diferindo estatisticamente dos demais métodos.

Tabela 1
Incidência e severidade dos sintomas em função dos diferentes métodos de inoculação de Curvularia eragrostidis em folhas de inhame. Areia, PB 2011.

Métodos	Incidência (%)												Severidade (%)
	Dias após a inoculação
	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12	13	14	15
SE	24a*	28a	34a	44a	50a	56a	61a	71a	80a	86a	90a	93a	93a	59,6 a
DC	0b	0b	20b	25bc	30b	36b	42b	51b	56b	63b	67b	74b	74b	50,0 b
PE	0b	0b	22b	29b	33b	40b	47b	53b	59b	67b	72b	76b	76b	49,3 b
AU	0b	0b	0c	17c	22c	27c	32c	38c	44c	50c	56c	60c	60c	30,0 c
TE	0b	0b	0c	0d	0d	0d	0d	0d	0d	0d	0d	0d	0d	00,0 d
CV(%)	51,0	35,7	23,3	18,7	14,6	11,5	11,6	9,8	9,5	8,1	8,1	6,6	6,6	3,6

• SE - Suspensão de esporos (1x10⁵ conídios mL^-1); DC - Discos de colônia de 10 mm fixados com fita adesiva (dois na face abaxial e um na face adaxial); PE -Pincelamento de esporos; AU - Algodão umedecido na suspensão de inoculo; TE - testemunha (plantas borrifadas com ADE). CV - coeficiente de variação (%).
• ^*
  Médias seguidas de mesma letra nas colunas não diferem entre si pelo teste de Tukey (5%).

A severidade permitiu identificar a eficiência do método em inocular C. eragrostidis em plantas de inhame e avaliar com maior precisão e rapidez a reação da resistência ou suscetibilidade de materiais vegetais em função da severidade do patógeno. Essa resposta consiste numa importante etapa na seleção de genótipos superiores em programas de melhoramento vegetal.

Os sintomas primários foram manchas necróticas de coloração marrom-escura, corroborando com Moura (⁴). Gomes et al. (¹), estudaram diferentes métodos de inoculação de Phakopsora euvitis em videira “Isabel” e comprovaram que o método do pincelamento de esporos foi o mais eficiente na inoculação do fungo em mudas de videira, propiciando o aparecimento dos primeiros sintomas a partir do quinto dia após a inoculação e 100% de infecção após o 13^º dia. Tais resultados diferem dos obtidos nesse trabalho, onde a inoculação do C. eragrostidis pelo método do pincelamento de esporos apresentou baixa eficiência.

Neste trabalho, o método da pulverização de suspensão de esporos foi o método mais eficiente na inoculação de C. eragrostidis em plantas de inhame, ocasionando o aparecimento dos primeiros sintomas a partir do terceiro dia após a inoculação, podendo ser utilizado de forma eficiente em testes de patogenicidade em programas de melhoramento de plantas visando resistência no patossistema C. eragrostidis x D. alata.

AGRADECIMENTOS

A CAPES pela concessão das bolsas de pós-doutorado e mestrado.

REFERÊNCIAS

• ¹
  GOMES, E.C.S., NASCIMENTO, L.C., PEREZ, J.O., LEITE, R.P., SILVA, F.J.A.S. Métodos de inoculação de Phakopsora euvitis Ono em Vitis labrusca L. Ciência Rural, Santa Maria, v.40, n.4, p.983-985, 2010.
• ²
  MENDES, R.A. Cultivando inhame ou Cará da Costa. Embrapa, Cruz das Almas, p.26, 2005.
• ³
  MICHEREFF, S.J.; MAFFIA L.A.; NORONHA, M.A. Escala diagramática para avaliação da severidade da queima das folhas do inhame. Fitopatologia Brasileira, São Paulo, v.24, p.174-180, 2000.
• ⁴
  MOURA, R.M. Doenças do inhame da Costa. In: KIMATI, H.; AMORIM, L.; BERGAMIN-FILHO, A.E; CAMARGO, L.E.A. (Ed.) Manual de Fitopatologia doenças das plantas cultivadas , 2005, 4ª ed. Ceres: São Paulo. v. 2, p. 415- 419.
• ⁵
  NORONHA, M.A. Intensidade da queima das folhas do inhame no Estado de Alagoas. Embrapa, Alagoas, p.1-6, 2016.
• ⁶
  SEIFERT, K.; GAMS, W. The genera of Hyphomycetes CBS-KNAW Fungal Biodiversity Centre, Utrecht, 2011, p. 866.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Jul-Sep 2018

Histórico

• Recebido
  22 Jun 2017
• Aceito
  05 Nov 2017