Durante el año 2003, se observaron síntomas del mal de Pierce (PD) en dos plantaciones de vid en la provincia de San José (Santa Ana y La Uruca) y en otra en La Garita, provincia de Alajuela. De un total de 24 plantas sintomáticas analizadas mediante DAS-ELISA usando anticuerpos para Xylella fastidiosa, se detectaron 16 plantas positivas (nueve de Santa Ana, cinco de La Uruca y dos de La Garita). A partir de diferentes intentos de aislamiento de los peciolos en medio líquido PW, se obtuvieron siete aislamientos. Alícuotas de medio líquido se inocularon en medio PW sólido. Diez días después de la inoculación, se observaron colonias circulares, cónvexas, lisas y opalescentes, con márgenes enteros, con diámetro entre 0.5-1mm. De cada aislamiento se seleccionaron tres colonias, las cuales fueron consideradas como clones diferentes. Todos los clones presentaron valores positivos mediante DAS-ELISA. Los clones presentaron bacilos Gram negativo, catalasa positivo y oxidasa negativo. Los bacilos al observarse al microscopio electrónico de transmisión presentaron la pared rugosa previamente informada para X. fastidiosa. Al amplificar el ADN extraido de cada clon mediante la técnica de la PCR con los imprimadores 272-1/272-2 y RST31/RST33, se obtuvieron productos de 500pb y 733pb, respectivamente. Estos resultados confirman la presencia de X. fastidiosa causando mal de Pierce en vid en Costa Rica.
DAS-ELISA; aislamiento; PCR; microscopia electrónica; mal de Pierce
