TOXOPLASMA GONDII EM BOVINOS: EVIDENCIAÇÃO DO PARASITA A PARTIR DE RETINA E DIAFRAGMA DE ANIMAIS ABATIDOS EM MATADOUROS DO ESTADO DE SÃO PAULO - BRASIL^*.

Toxoplasma gondii in cattle: isolation of the parasite from retina and diaphragm of animals slaughtered at abattoir in the State of São Paulo - Brazil.

RESUMO

Os autores evidenciaram cistos teciduais e bradizoítos de Toxoplasma gondii em cortes histológicos de cérebros de camundongos inoculados com retinas e músculos diafragmáticos de bovinos. Os bovinos, em número de 50, eram destinados ao consumo humano e foram abatidos em matadouros do Estado de São Paulo - Brasil. As cepas isoladas, em número de 9, apresentaram comportamento cistogênico e baixa patogenicidade para camundongos.

PALAVRAS-CHAVE
Toxoplasma gondii; bovino; retina; diafragma.

SUMMARY

Tissue cysts and free bradyzoites of Toxoplasma gondii were seen in histological sections from brains of several mice inoculated with material from retina and diaphragmatic muscles of 50 apparently healthy bovines slaughtered in the São Paulo (Vinhedo and Jundiaí) - Brazil in order to be sold for human consumption. The 9 strains isolated 3 from retina and 6 from diaphragmatic muscles, showed low pathogenicity for mice and cystogenic behavior in several passages.

KEY-WORDS
Toxoplasma gondii; bovine; retina; diaphragm.

INTRODUÇÃO

A pesquisa de portadores assintomáticos de toxoplasmose entre as espécies animais domésticas é parte integrante da linha de trabalho traçada pela Seção de Parasitoses do Instituto Biológico de São Paulo.

Estudos realizados nas espécies suína, caprina e felina (¹, ², ³, ¹⁸), demonstraram a importância da infecção em nosso meio e a necessidade de ampliar os estudos a outras espécies animais.

Pesquisas realizadas em alguns países demonstraram que os bovinos podem ser fontes de infecção para o homem e para outros animais, pois vísceras desta espécie proporcionaram o isolamento de Toxoplasma gondii após inoculações em camundongos (⁴, ¹⁰, ¹³, ¹⁴). Sendo a carne bovina uma das mais consumidas no Brasil, o estudo da infecção latente assume, portanto, papel preponderante.

Um dos primeiros relatos citados na literatura sobre toxoplasmose bovina adquirida naturalmente foi o de SANGER et alii (¹⁶) que, em 1953, demonstraram a presença de T. gondii em animais do Estado de Ohio na América do Norte.

No Brasil, estudos sorológicos realizados por COSTA et alii (⁷, ⁸) em Poços de Caldas (Minas Gerais) e Jaboticabal (São Paulo), utilizando a reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), demonstraram que 12% e 32,3% dos bovinos apresentaram, respectivamente, anticorpos antitoxoplasma. PASSOS et alii (¹⁵), em Belo Horizonte (Minas Gerais), utilizando também a RIFI, constataram que 9,0% dos bovinos pesquisados apresentavarn títulos 1 :64 para T. gondii.

Infecções experirnentais realizadas por COSTA et alii (⁶, ⁹), administrando cistos e oocistos de T. gondii em bovinos, demonstraram a susceptibilidade destes animais, através de estudos clínicos, laboratoriais, sorológicos e de isolamento do parasita.

O presente trabalho teve como objetivos: 1) determinar a ocorrência da toxoplasmose latente ou assintomática na espécie bovina, através de isolamentos de T. gondii e 2) verificar qual material, retina ou músculo diafragnático, é mais indicado para se tentar o isolamento do protozoário.

MATERIAL E MÉTODOS

O material constou de músculos diafragmáticos e retinas coletadas de bovinos clinicamente sadios, abatidos em matadouros de São Paulo (Vinhedo e Jundiaí) e destinados ao consumohumano.

De cada animal, num total de 50, eram retirados fragrnentos da musculatura junto ao pilar diafragrnático e um dos globos oculares. Destes, no laboratório, era dissecado todo tecido retiniano com ajuda de pinça de dissecação e tesoura de ponta fina.

As amostras, 50 fragmentos de músculos diafragmáticos e 50 globos oculares, eram colhidas aleatoriamente, em pontos adequados da linha de matança.

As amostras de músculo diafragmático foram submetidas a digestão péptica, segundo método descrito por JACOBS & MELTON (¹¹) e o tecido retiniano foi macerado em graal estéril. Após a adição de 3 gotas de antibiótico ( lmg de estreptomicina e 1.000 UI de penicilina por ml), cada amostra foi inoculada, pela via intraperitoneal, na quantidade de lml, em cinco camundongos indicadores.

FIGURA 1
Cérebro de camundongo. Foco inflamatório linfocitário tendo na região supe- rior pequenos cistos teciduais de T. gondii. col. H.E. X256.

A observação e o exame dos camundongos inoculados foi procedido como o descrito em trabalho anterior (¹⁸).

Para visualização dos cistos teciduais e bradizoítos livres foi utilizada a coloração pela hematoxilina-eosina, segundo técnicas histológicas usuais.

RESULTADOS

Das 100 amostras inoculadas (50 de músculos diagragmáticos e 50 de retinas), nove proporcionaram a evidenciação de cistos teciduais e bradizoítos livres (Figs. 1, 2, 3 e 4), em cortes histológicos feitos a partir dos cérebros dos camundongos inoculados.

Dessas 9 amostras, três foram observadas em camundongos inoculados com macerados de retinas e seis de músculos diafragmáticos.

Dois animais (n.^os 23 e 25) proporcionaram a evidenciação de T. gondii em camundongos inoculados tanto com retina quanto com diafragma. Um bovino (n.^o05) proporcionou resultados positivos só em camundongos inoculados com macerado de retina. Quatro animais (n.⁰s 06, 14, 21 e 22) proporcionaram a evidenciação de T. gondii somente em camundongos inoculados com digeridos de diafragmas.

As cepas isoladas apresentaram comportamento cistogênico e baixa patogenicidade para camundongos.

Nos cortes histoló$cos foram observados focos de infiltração linfocitária perivascular ou distantes dos vasos sanguíneos.

FIGURA 2
Cérebro de camundongo. Cisto tecidual isolado. col. H.E. X2560.

FIGURA 3
Cérebro de camundongo. Infiltração de células mononucleares nas meningues e microfocos linfocitários no parênquima. Col. H. E. X79

FIGURA 4
Cerebelo de camundongo. Presença de cisto tecidual próximo a um microfoco linfocitário. Do lado oposto, foco inflamatório linfocitário abrangendo a meninge. Col. H.E. X79.

TABELA 1
Resultados dos exames histológicos em cérebros de camundongos indicadores inoculados com digeridos diafragrnáticos ou macerados de retinas de bovinos.

Bovino n.			Material inoculado Lesão encontrada		Exame histológico
					Estágio do T. gondii observado
	05	retina		encefalite linfocitária		cistos teciduais
	06	diafragma		meningo-encefalite linfocitária		cistos teciduais
	14	diafragma		encefalite linfocitária		bradizoítos livres
	21	diafragma		meningo-encefalite linfocitária		bradizoítos livres
	22	diafragma		meningo-encefalite linfocitária		bradizoítos livres
	23	retina		encefalite linfocitária		bradizoítos livres
	23	diafragma		encefalite linfocitária		cistos teciduais
	25	retina		encefalite linfocitária		bradizoítos livres
	25	diafragma		enceflaite linfocitária		bradizoítos livres

T. gondii foi observado tanto na forma de cisto tecidual quanto na de bradizoítos livres. A primeira, eqüidistante dos focos inflamatórios.

Em alguns cortes, provenientes de camundongos inoculados com tecido diafragrnático, ocorreram infiltrações de células linfocitárias nas meninges, determinando um quadro de meningoencefalite.

Na tabela 1 são apresentados os resultadós dos exames histológicos realizados em cérebros de camundongos indicadores inoculados com digeridos de diafragna ou macerados de retina, dos bovinos positivos.

DISCUSSÃO

Compulsando a literatura nacional, verificamos que os resultados alcançados pela maioria dos autores que trabalharam com material de bovino, na tentativa de evidenciar a presença do T. gondii, diferem daqueles obtidos no presente trabalho.

Assim, JAMRA et alii (¹²) utilizando amostras de músculos de bovinos, adquiridas em mercados e açougues da cidade de São Paulo, conseguiram detectar anticorpos antitoxoplasrna, através da reação de Sabin-Feldman, em 8,1% dos camundongos inoculados, sem entretanto isolarem o parasita.

FERNANDES & BARBOSA (¹⁰), trabalhando com globos oculares de 60 bovinos, colhidos em matadouros de Goiás, não conseguiram isolar o protozoário.

PASSOS et alii (¹⁵), partindo de 99 amostras de músculos diafragmáticos de bovinos abatidos em Belo Horizonte (Minas Gerais), não conseguiram isolar o parasita, e os camundongos inoculados foram negativos para a presença de anticorpos antitoxoplasma e ao exame parasitológico do cérebro.

Aproxirnação maior dos resultados auferidos no presente trabalho é obtida quando os dados são comparados com os descritos por COSTA (⁵) que isolou três cepas de T. gondii, duas a partir de cérebro e uma de retina de fetos de bovinos. Os dados diferem substancialmente com os do autor citado, quando é feito o confronto entre comportamentos das amostras descritas. COSTA (⁵) refere serem as amostras isoladas patogênicas para camundongos, com graus diferentes de patogenicidade conforme a origem da amostra, enquanto que no presente trabalho a patogenicidade foi baixa para camundongos e as cepas mostraram sempre comportamento cistogênico.

CONCLUSÕES

1) toxoplasmose latente ou assintomática ocorre na espécie bovina, no Brasil ;

2) a freqüencia dos parasita em retina e músculo diafragrnático de bovinos sadios clinicamente, não foi alta;

3) em bovinos clinicamente sadios, o múscuIo diafragnático moustrou-se mais adequado do que a retina para isolamento de T. gondii

REFERENCIAS BIBLIOGRÅFICAS

• ¹ AMARAL, V. & MACRUZ, R. Toxoplasma gondii: isolamento de amostras a partir de diafragmas de sufnos clinicamente sadios, abatidos em matadouros de Säo Paulo - Brasil. Arq. Inst. Bid, Säo Paulo, 36:47-54, 1969.
• ² AMARAL, SANTOS, S. M.; MACRUZ, R., FENERICH, F. L.; RIBEIRO, L.O.C.; REBOUGAS, M.M. Toxoplasma gondii: isolamento do protozoårio a partir de diafragmas de gatos domésticos, clinicamente hfgidos. Biolågico, Säo Paulo, 44:2114, 1978.
• ³ AMARAL. V.; SANTOS, s.M.•, REBOUCAS, M.M. Sobre a prevaléncia de anticorpos antitoxoplasma em soros de caprinos e ovinos procedentes, respectivamente, dos Estados da Bahia e Rio Grande do Sul, Brasil. Biolågico, Säo Paulo, 44: 33140, 1978.
• ⁴ BALBO, s.M.; CONTI, GUGLIELMINO, S.; IANNOTTA, V.; SCALI, G.; STIBALA, A.; TUMINO, URSINO, F. Ricerche preliminari sulla diffusione di Toxoplasma gondii (Nicolle e Manceaux, 1908) nell'uomo e nei bovini. Giorn. Mal. Inf. Parass., 39:538-40, 1987.
• ⁵ COSTA, A.J. Toxoplasmose congénita natural em bovinos e infecgäo experimental de pacas gestantes com oocistos de Toxoplasma gondii (NICOLLE & MANCEAUX, 1908) NICOLLE & MANCEAUX, 1909. Säo Paulo, 1979, 88p. Tese (dout.) Universidade de Säo Paulo.
• ⁶ COSTA, A.J.; ARACJO, F.G.•, COSTA, J.o.•, LIMA, J.D.; NASCIMENTO, E. Experimental infection of bovines with oocysts of Toxoplasma gondii J. ParasitoL, 63:212-8, 1977.
• ⁷ COSTA, A. J. & COSTA, E. P. Freqüéncia de bovinos reagentes reagäo de imunofluorescéncia indireta para Toxoplasma gondii em Pops de Caldas, M.G., Brasil. Arq. Esc. Vet. Univ. Fed. Minas Gerats, 30:47-51, 1978.
• ⁸ COSTA, A.J.; AVILA, F.A.•, KASAI, PAULILLO, A.c.; SILVA, M.B.; GALESCO, H. Anticorpos anti-Toxoplasma em soros de bovinos do municipio de Jaboticabal, S.P., Brasil. Arq. Inst. Biol., Säo Paulo, 44: 331-40 1978.
• ⁹ COSTA, A.J. Experimental infection of pregnant cows with Toxoplasma gondii oocysts. In: ENCONTRO DE PESQUISAS VETERINÅRIAS, 4., Jaboticabal, 1979. Resumos. p. 65-6.
• ¹⁰ FERNANDES, w.J. & BARBOSA, W. Toxoplasmose. Nota sobre uma ocorréncia em animais domésticos em Goiänia. Rev. Patol. Trop., Goiånia, 1: 259-65, 1972.
• ¹¹ JACOBS, L. & MELTON, M.L. A procedure for testing meat samples for Toxoplasma with preliminary results of a survey of pork and beef samples. J. Parasitol., 43 (Suppl.):38, 1957.
• ¹² JAMRA, L.M.F.; DEANE, M.P.•, GUIMARÄES, E.c. On the isolation of Toxoplasma gondii from human food of animal origin. Partial results in the city of Säo Paulo (Brazil). Rev. Inst. Med. Trop., Säo Paulo, 11:169-76, 1969.
• ¹³ MAYER, H.F. Primeiros aislamientos de Toxoplasma gondii de retina de bovinos. An. Inst. Med. Reg., 6:25-34, 1962/63.
• ¹⁴ MAYER, H.F. & BOEHRINGER, I.K. Nuevos aislamientos de Toxoplasma gondii em material humano y animal. Rev. Fac. Cienc. Vet. La Plata, 10:175-80, 1968.
• ¹⁵ PASSOS, L.M.F.•, LIMA, J.D.; FIGUEIREDO, B.L. Determinagäo da infecgäo por Toxoplasma gondii em bovinos abatidos em Belo Horizonte (M.G.). Através da frequéncia de anticorpos e tentativa de isolamento a partir de musculatura diafragmåtica. Arq, Bras. Med. Vet. Zootec., 36:581-4, 1984.
• ¹⁶ SANGER, v.L.; CHAMBERLAIN, D.M.; CHAMBERLAIN, K.w.; COLE, C.R.; FARREL, R.L. Toxoplasmosis. V. Isolation of Toxoplasma from cattle. J. Amer. Vet. Med. Assoc., 123:87-91, 1953.
• ¹⁷ SANTOS, s.M.•, AMARAL, REBOUCAS, M.M. Prevaléncia de anticorpos antitoxoplasma, por hemaglutinagäo indireta, em soros de sufnos provenientes de diferentes municfpios do Estado de Säo Paulo, Brasü Biolågico, Säo Paulo, 44:149-50, 1978.
• ¹⁸ SPÖSITO, Filha, AMARAL, V.; SANTOS, s.M.•, MACRUZ, R.; REBOUCAS, M.M. Toxoplasma gondii em caprinos: isolamento de cepas a partir de diafragrnas de animais oriundos do Estado da Bahia e abatidos em matadouros de Säo Paulo - Brasil. Biolågico, Säo Paulo, 49:199-206, 1983.

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  21 Fev 2025
• Data do Fascículo
  Jan-Dec 1988

Histórico

• Recebido
  18 Out 1988