RESUMO
Relata-se a ocorrência de mastite bovina em rebanho leiteiro do Vale do Paraíba, SP. Os exames bacteriológicos e histopatológicos possibilitaram caracterizar o agente causal como sendo Nocardia sp. As mastites ocasionadas por este microrganismo não são freqüentemente notificadas no Brasil, entretanto como o mesmo se acha presente no solo, água, dejetos, pele dos animais e mesmo em insetos, os autores consideram que o problema deva ser mais freqüente porém poucas vezes diagnosticado.
PALAVRAS-CHAVE:
Bovinos; mastite; Nocardia sp.
ABSTRACT
An occurrence of bovine mastitis on dairy cattle is presented. The presence of Nocardia agent is not frequently notified in Brazil but since the agent is present in soil, water, waste, animal' s skin and also in insecta, the authors consider that this problem must be more frequent but few times diagnostified.
KEY WORDS:
Bovine; mastitis; Nocardia sp.
INTRODUÇÃO
Os agentes do gênero Nocardia, I Jertencentes ao grupo dos actinomicetos aeróbic?s, têm uma distribuição mundial e podem ser isolados com relativa facilidade a partir de amostras de solo, água, ar, vegetais, insetos, dejetos em geral e até mesmo do tegumento de animais, onde fazem parte da microbiota habitual (PIER, 1961, et al. (21); KURUP, et al. 1968 (14)).
A nocardiose foi descrita inicialmente por NOCARD, em 1888 (18) ao isolar, de bovinos acometidos de uma doença então denominada "Farcínio dos Bovinos", um actinomiceto. EPINGER em 1891 (11), publicou um trabalho referindo-se a uma doença que acometia humanos, isolando um agente com características similares àquelas descritas por NOCARD (18), o qual foi denominado Cladothrix. A partir de então, inúmeras citações têm sido feitas em todo o mundo envolvendo estes agentes (MUNCHPETERSEN, 1954 (17); PIER et al., 1958 (20); AWAD, 1960(1);JOHNSTON & CONNOLE, 1962 (13); BRUHL, 1963 (4); EALES, et al., 1964 (10); SCHULZ & WESER, 1968 (25); SHIGIDI & MAMOUN, 1981 (29);SEARS, 1983, 1986(26,27);L - CH, 1988(15) e SCHOONDERWOERD & PLANTEJENKINS, 1988 (23)).
SALMAN et al.,1982 (22) desenvolveram um teste cutâneo destinado ao diagnóstico de infecções determinadas por Nocardia asteroides e Nocardia caviae. PIER et al., 1961 (21) estudaram as possíveis fontes de infecção natural na nocardiose mamária dos bovinos e reproduziram experimentalmente a doença.
O papel deste agente como causador de mastites em bovinos tem sido destacado em diversos países. Em nosso meio, embora seu achado não seja freqüente foi inicialmente assinalado em São Paulo por CORREA, etal., 1971(6))e,posteriormenteno Rio Grande do Sul por WALO, et ai. (31), 1976/7 e PIANTA, 1989 (19). Em geral as mastites devidas a agentes do gênero Nocardia revestem-se de características graves, não raramente levando o animal a perder, por completo, sua principal finalidade econômica que é a produção láctea.
MATERIAL E MÉTODOS
No presente relato, em rebanho leiteiro da região do Vale do Paraíba, composto de animais da raça holandesa, surgiram casos esporádicos de mastite que ofereceram resultados negativos frente aos tratamentos convencionais habitualmente adotados (CALIL etal, 1989(5)). O exame clínico dos animais possibilitou constatar significativo aumento no volume do úbere cuja pele se mostrava distendida. À palpação, percebia-se a existência de alguns nódulos dispersos no parênquima ganglionar. Face ao estado de evolução da doença e à negatividade da regressão do quadro frente aos tratamentos, optou-se pelo sacrifício dos animais envolvidos. A secção do úbere revelou que o parênquima apresentava-se compacto, de consistência aumentada e exibindo áreas de tonalidade avermelhada ( Figura 1).
Na oportunidade, coletou-se fragmentos do parênquima mamário que foram conservados em formal neutro a 20% para histopatologia e, sob refrigeração, para as provas bacteriológicas. Dos fragmentos em formal obtiveram-se, pelas técnicas habituais, cortes de 5 micrômetros de espessura que foram submetidos à coloração de hematoxilina-eosina. Nas provas bacteriológicas realizaram-se semeaduras nos meios de agar sangue, Petragnani, Lowenstein-Jenhsen e Sabouraud. Para o estudo do bioquimismo efetuaram-se as provas de hidrólise da caseina, esculina, tirosina e xantina.
Prepararam-se decalques em lâminas, a partir de fragmentos do parênquima ganglionar, que foram fixados pelo calor e submetidos às colorações de Grame Ziehl-Neelsen modificado.
RESULTADOS
A histopatologia permitiu a evidenciação do seguinte quadro: o tecido mamário revelou áreas granulomatosas de extensão variada e, na região central das mesmas, formações de aspecto irregular semelhantes a drusas coradas pela eosina em tonalidade rósea, de onde se projetavam filamentos delicados em direção à periferia do granuloma. Circunscrevendo essas formações, observou-se infiltrado de células epitelióides, linfócitos e polimorfos nucleares neutrófilos, sendo que, por vezes, percebia-se nítida predominância destes últimos. Visualizou-se ainda elevado número de células em necrose e, no interior dos filamentos, formações de aspecto cocóide ( Figura 2).
Notou-se também a presença de focos de calcificação de formas arredondadas e tamanhos variados que apareciam corados em roxo pela hematoxilina-eosina. A luz dos ácinos mamários exibia resíduos da secreção da glândula.
O cultivo em estufa bacteriológica a 37ºC, em condições aeróbicas permitiu observar, após 48 horas, no meio de ágar sangue, o desenvolvimento de colônias pequenas, brancas, opacas e bastante aderentes à superfície do meio. Após 7 dias as colônias apresentavam-se com os bordos irregulares, superfície pregueada e de tonalidade amarelada ( Figura 3). Nos meios de Petragnani e Lowenstein-Jenhsen, após 72 horas de incubação, notou-se o desenvolvimento de colônias pequenas, amarelas, com bordos irregulares e superfície de aspecto pulverulento.
A bacterioscopia mostrou formações filamentosas que se assemelhavam a hifas ramificadas e por vezes de aspecto enovelado. Em alguns campos a presença de fragmentos dessas hifas, bem como formas de aspecto bacilar, foram visualizadas. Tais formações exibiam uma coloração de tonalidade não uniforme quando submetidas ao método de coloração de Gram ( Figura 4 ). A coloração de Ziehl-Neelsen mostrou, ser este agente, dotado de álcoolácido resistência com fixação do corante também desuniforme (Figura 5). As provas bioquímicas efetuadas ofereceram resultados positivos à hidrólise da caseína, da esculina e da tirosina e negativo para a xantina.Os exames realizados permitiram caracterizar o agente como sendo Nocardia asteroides.
DISCUSSÃO E CONCLUSÕES
Mastites determinadas pelo gênero Nocardia, não são um fato comum, quando considerado o universo da patologia infecciosa da mama em um rebanho leiteiro. Entretanto, em animais de linhagem apurada geneticamente, nos quais a produção láctea atinge índices elevados e, principalmente quando mantidos em sistemas de criação intensiva ou semi-intensiva, poderão surgir mastites causadas por agentes mais incomuns. Entre estes, os componentes do grande grupo dos Actinomycetes podem fazer-se presentes e manifestar seu papel patogênico potencial.
Observa-se pela literatura pertinente, que as mastites causadas por Nocardia sp parecem ser um fato mais corriqueiro em países de clima frio. O Canadá, por exemplo, revela através da literatura consultada, uma certa freqüência no problema (BARNUM & FULLER, 1956 (2); DITCHFIELD etal., 1959(8);SEARS, 1983/1986(26,27);LYNCH, 1988 (15); SCHOONDERWOERD & PLANTE-JENKINS, 1988 (23); SCHOONDERWOERD & LYNCH, 1989 (24); DOHOO, 1989 (9) e LYNCH, 1990 (16)).
SCHOONDERWOERD & LYNCH, 1989 (24) analisando a situação das mastites causadas por Nocardia no Canadá publicaram trabalho no qual estabelecem um elenco de medidas visando o controle deste tipo de mastite.
Dentro do gênero Nocardia, a espécie asteroides é apontada como relevante no panorama das mastites bovinas ( AWAD, 1960 (1); PIER, WILLERS & MEJIA, 1961 (21); JONHSTON & CONNOLE, 1962, (13); BRUHL, 1963 (4); etal., 1964 (10); WALD etal., 1976/7 (31); SHIGIDI & MAMOUN, 1981/(29) e PIANTA, 1988 (9)). Entretanto, também aNocardia caviae (SALMAN et al., 1982 (22), além daNocardia brasiliensis, têm sido responsabilizadas pelo surgimento de mastites nessa espécie animal (DITCHFIELD et al., 1959 (8); CORREA et al., 1971 (6); BERD, 1973 (3) e COSTA et al. 1987 (7)).
LYNCH (1990) (16) preconizou o uso de um meio seletivo paraNocardia sp. relatando as vantagens do mesmo para o cultivo deste agente quando comparado a outros meios usualmente utilizados. É provável que esteja aí a explicação para o pequeno número de citações da presença deste agente em nosso meio.
Além da espécie bovina, a nocardiose mamária foi constatada também em caprinos (SHARMA & IYER, 1974 (28) e TRIPATHI etal., 1989(30)), bem como em suínos (FRANKE, 1973 (12)).
Corte histológico revelando a presença de formação corada em róseo com aspecto de drusas circundadas por intenso infiltrado celular leucocitário.
Na situação ora apresentada, o rebanho em foco enquadra-se nesse contexto, visto tratar-se de animais com alto índice de produção leiteira e o controle das mastites ser adotado como rotina. No momento da detecção de alterações organolépticas no leite os animais eram separados do rebanho e submetidos a um esquema padrão de tratamento. Face ao insucesso da terapia instituída buscou-se, através do recurso laboratorial de diagnóstico, a solução para o problema.
O quadro observado e a histopatologia permitiram caracterizar uma mastite granulomatosa e as provas bacteriológicas realizadas sugeriram a presença de um agente do grupo dos Actinomicetos, o qual foi caracterizado como Nocardia asteroides.
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