LISTERIOSE ESPORÁDICA EM BOVINORESUMO
Relata-se a ocorrência de um caso esporádico de listeriose em bezerro de propriedade deexploração leiteira, no Estado de São Paulo. O evento foi único no rebanho e o animal apresentou a sintomatologia classicamente descrita, como incoordenação motora, andar em círculo, perda do equilíbrio, opistótono e prostração seguida de morte. Do líquido cefaloraquidiano bem como do fragmento de sistema nervoso central (SNC) foi possível o isolamento de Listeria monocytogenes. Os autores consideram a possibilidade da silagem fornecida aos animais, ter se constituído na fonte de infecção.
PALAVRAS-CHAVE:
Bovino; encefalite; Listeria monocytogenes.
ABSTRACT
An occurrence of sporadic listeriosis in a heifer of a milk farmin São Paulo state is described. No other cases, in the sarne herd, were registered. The symptons presented were those classically described as: lack of motorcoordination, circling walk, equilibrium loss, opistotonus, prostration and death. Listeria monocytogenes the was isolated from the spinal liquor and fragments of the central nervous system. The authors considered that the silage could have been the source of infection.
KEY WORDS:
Bovine; encefalitis; Listeria monocytogenes.
Desde os trabalhos de ANTON (1934) quando, estudando a ocorrência de mononucleose humana relacionou o fato à presença de um bacilo denominado Bacteriummonocytogenes,inúmeras citações dapresençadesse agente bacteriano têm sido feitas com diferentes manifestações clínicas eem diversas espécies animais.
Em nosso meio, ainda que não sejam de freqüente registro, as encefalites animais decorrentes de infecções por Listeria monocytogenes são, por vezes, registradas poT alguns pesquisadores.
HOFER (1971) assinalou a presença de Listeria monocytogenesem material encefálico oriundo deum bovino. FERNANDES et al. (1971) assinalaram um caso grave de listeriose em ovinos no Rio Grande do Sul. SILV A et al (1973) realizaram estudo sobre um caso de abcesso cerebral em bovinos, relacionando-o à Listeria monocytogenes.
FREITAS et al. (1982) referem-se igualmente ao encontro deum abcesso cerebral em bovino adulto que manifestava sintomatologia nervosa. FREITAS & MAGALHÃES (1986) examinando amostras desistema nervoso central (SNC) procedentes de 65 bovinos que exibiam algum tipo de sintomatologia nervosa lograram isolar, em três oportunidades, a Listeria monocytogenes.
O presente registro refere-se a uma ocorrência isolada naqual um bezerro mestiço das raças holandesa e gir, de uma propriedade de exploração leiteira apresentou uma sintomatologia nervosa caracterizada inicialmente por andar em círculos.
O animal, objero dopresente trabalho, constituía,- se de um bezerro macho, mestiço das raças Gir e Holandesa, de 120 dias de idade, de uma propriedade de exploração leiteira, onde os machos eram criados para o abate e que, segundo a anamnese, exibiu inicialmente uma incoordenação motora que condicionava sua marcha a realizar círculos, girando invariavelmente para o lado direito.
Com a evolução do quadro clínico, o sentido de equilíbrio mostrou-se progressivamentecomprometidoe o animal mantinha-se com os membros afastados visando ampliar seu polígono de sustentação para poder permanecer em estação. Seqüencialmente, o pescoço passou a assumir um desvio permanente para o lado direito (Figs. 1 e 2).
Em fase posterior, com o agravamento do quadro, o animal passou a permanecer prostrado assumindo um decúbito lateral permanente. A partir de então estabeleceu-se um opistótono que se acentuou progressivamente até o êxito letal (Fig. 3).
Em duas diferentes oportunidades foi efetuada a coleta de líquido cefaloraquidiano, com auxílio de seringahipodermica, para pesquisa bacteriológica. Por ocasião da necrópsia foram coletados fragmentos de SNC, que foram conservados em formo] neutro a 20% para exames histopatológicos, dos quais se obteve, pelas técnicas habituais de histopatologia, cortes de 5 micrômetros que foram corados pelo método de hematoxilina-eosina.
As amostras de líquido cefaloraquidiano, bem como do SNC também foram coletadas e mantidas sob refrigeração por 7 dias visando o enriquecimento das mesmas e, a seguir, foram submetidas à seguinte seqüência de estudo: inicialmente, foram semeadas em água peptonada a O, 1 % na proporção de 1:1O e incubadas a 30ºC por 48 horas. Após esse período, os cultivos obtidos foram ressemeados em ágar sangue de carneiro a 5% e em ágar Oxford (OXA, Oxoid) e incubados a 35ºC por 24 horas. Colônias obtidas do crescimento em ágar sangue foram submetidas à coloração de Gram.
Igualmente, após as 48 horas iniciais, O,1 mL das culturas em água peptonada foram semeadas em tubos contendo Prazer modified broth (MFB, Oxoid) que foram mantidos a 35ºC por24 horas, após o que agitouse a cultura e manteve-se a incubação por mais 2 horas antes que se realizasse a leitura do crescimento.
Dos tubos onde se desenvolveu a cor castanha, que indica positividade, realizaram-se repiques em placas do meio de OXA que foram em seguida mantidas a 35ºC até por 48 horas.
Das placas contendo meio de OXA, que revelaram crescimento bacteriano, coletou-se colônias pequenas de cor negra eque seapresentavam circundadas por haloda mesma côr, sugestivas do gênero Listeria, que foram repicadas para placas contendo Tripticase soy ágar (TSA, Difco)com0, 6%deextratodelevedura(YE, Merck) que foram incubadas a 30ºC por 24 horas. Após este peóodo, ascolônias foramobservadas sobiluminação de Henry (luz transmitida com incidência de 45º).
As colônias que refletiam tonalidade azulada, foram repicadas para o meio destinado -à verificação de motilidade (Bacto motility testmedium, DIFCO) permanecendo no mesmo por um período de 7 dias à temperatura ambiente e, parao estudo dobioquimismo, essas colônias foram repicadas para meio de trypticase soy broth adicionado de 0,6% de yeast extract (TSBYE) visando as provas de fermentação de:1-ramnose, d-xiloseemanita.
Pesquisou-se ainda a produção de catalase.
O crescimento em ágar sangue de carneiro revelou colônias pequenas, circundadas por discreto halo de beta hemólise.
No meio OXA, a presença de colônias de cor negra e envoltas porhalodo mesmo tom denunciou tratar-se de Listeriaspp A semeadura em meio de motilidade ofereceu como resultado o crescimento emforma depinheiro invertido também denominado por alguns autores de crescimento em forma de guarda chuva (Fig. 4).
A observação das colônias, obtidas em meio de TSA-YE, sob a iluminação de Henry, ofereceu como resultado a presença de uma tonalidade azulada que caracteriza o gênero Listeria.
Os esfregaços submetidos à coloração de Gram permitiram observar bastonetes curtos, delicados, por vezes mostrando-se aos pares e corados positivamente (Fig. 5).
A histopatologia ofereceu um quadro de meningoencefalite com a presença de nítido infiltrado leucocitáriodelocalizaçãopreferentementeperi-vascular.
As provas bioquímicas mostraram-se positivas paraa utilizaçãodal-ramnoseenquantoquenãohouvealteração para as provas de manita e d-xilose e a verificação da produção de catalase revelou-se positiva.
O conjunto de resultados obtidopermite caracterizar o agente em estudo comoListeria monocytogenes.
Desde que foi pela primeira vez assinalada por MURRAY et al. (1926), acometendo animais de laboratório, a listeriose tem sido registrada por inúmeros pesquisadores acometendo variadas espécies animais comprometendo, não apenas o SNC mas também diversos órgãos e, conseqüentemente, com distintas manifestações clínicas.
GRAHAM et al(1939) realizaram detalhado estudo sobre a listeriose em diversas espécies animais. PACHECO & DIAS (1956) observaram umaoftalmia listeriosa em coelhos no Rio de Janeiro. GRAY & KILLINGER (1966) fizeram revisão das infecções devidas a esta bactéria, tanto no homem quanto em animais domésticos, de laboratório e silvestres, chegando a uma extensa relação de espécies envolvidas.
DONKER (1966) também realizou estudos sobre a incidência da listeriose acometendo inúmeras espécies animais.VALLÉE et al. (1972)chamaramaatenção para o problema da listeriose cerebral em bovinos na França e JENSEN & LARSEN (1973) responsabilizaram a Listeria monocytogenes pela ocorrência de mastites na mesma espécie.
KUMMENEJE & TRYGVE (1975) estudando casos de queratoconjuntivite em bovinos e ovinos, responsabilizaram este agente bacteriano por esse processo inflamatório surgido nos animais no transcor rer do inverno de 1973. SONCINI & TURNES (1976) descreveram igualmente casos de encefalite, devidos à Listeria monocytogenes,em rebanhos bovinos.
GITTER (1980) descreveu a presença de mastite causada por Listeria monocytogenes e VANOERGRAAF et al.(1981) assinalaram um surto grave de meningoencefalite em ovelhas verificado no inverno de 1978 na Austrália envolvendo 21 propriedades com grande número de animais comprometidos.
SRIVASTAVA (1985) referiu-se ao problema de esterilidade bovina na India, devida à Listeria monocytogenes. BUTT et al. (1990) descreveram lesões e estabeleceram odiagnóstico da listeriose pela técnica da imunofluorescência em lhamas adultas que apresentaram encefalite supurativa multifocal.
A consulta à bibliografia possibilita observar que, na maioria das vezes a ocorrência da listeriose restringese a um pequeno número de animais dentro do plantel, resumindo-se, não raras vezes, à assinalação de um ou dois animais atingidos, sendo raras as citações que envolvem números mais amplos dentro de um mesmo rebanho. Outro fato a considerar é que, quando as ocorrências surgem estão, na maioria das vezes, relacionadas ao período mais frio do ano. Este fato está em consonância com a caracteristica de que as baixas temperaturas representam um papel favorável para os agentes do gênero Listeria.
Esta bactéria, é sob esse aspecto, particular, uma vez que é capaz de desenvolver-se numa faixa de temperatura situada entre 4 e 45ºC sendo que tal característica é usada em laboratório como recurso de técnica de enriquecimentodos materiais suspeitos.
Poroutro lado, constitue-se emfator negativo, noque se refere àsaúde pública, visto tratar-se de uma zoonose que tem, para o homem, como fonte de infecção, o alimento. Desta forma, o simples fatoda preservação dos produtos alimentares pelo frio ser um recurso valioso, paralelamente constitue-se em fator de risco.
Na presente ocorrência, os autores consideram que a fonte de infecção possa ter sido a silagem que foi fornecida aos animais como complementação alimentar durante o período da seca.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
- ANTON, W.L. Experimentelle beitraege zur biologie des Bakterium monocytogenes mit besonderer berücksichigungseiner beziechung zur infektiõse mononukleose des menschen. Zentralbl. Bakteriol. Abt.l Orig., Stuttgard, v.131, p.89-103, 1934.
- BUTT, M.T.; WELDON,A.; STEP,D.; LAHUNTA, A.; HUXTABLE, C. Encephalitic listeriosis in two adult llamas (Lama glama): clinicai presentation, lesions and immunofluerescence of Listeria monocytogenes in brain sistem lesions. Cornel Vet., v.81, n.3, p.251-258, 1991.
- DONKER, V.J. Listeriosis in animals. Bull Off. Int. Epizoot., v.64, p.757-764, 1966.
- FERNANDES, J.C.T.; BOLLWANN, W.; SIQUEIRA, C.S. Listeria em ovinos no Rio Grande do Sul; descrição de um caso. Rev. Med. Vet., v.7, p.131, 1971.
- FREITAS, M.A.Q.;SANTOS, J.A.;MAGALHÃES, H.; CARVALHO, E.C.Q. Abcesso cerebral por Listeria monocytogenes em bovino. Pesqui. Agropecu. Bras., v.17, n.1, p.137-141, 1982.
- FREITAS, M. A. Q. & MAGALHÃES, H. Isolamento de Listeria monocytogenes em cérebro de bovinos negativos para raiva. In: CONGRESSO BRASILEIRO DEMEDICINA VETERINÁRIA, 20., 1986, Cuiabá, MT. Resumos. p.224.
- GITTER, M.; BRADLEY, R.; BLAMPIED, P.H. Listeria monocytogenes infection in bovine mastitis. Vet. Rec., v.7, p.390-393, 1980.
- GRAHAN, R. Listerella encephalitis or encephalomyelitis in domestic animais. J. Am. Vet. Med. Assoe., v.95, p.289-292, 1939.
- GRAY, M.L. & KILLINGER, A.H. Listeria monocytogenes and listeric infections. Bacteriol. Rev., v.30, n.2, p.309-382, 1966.
- HOFER, E. Presença deListeria monocytogenes em material encefálico de bovino. Arq. Inst. Biol., São Paulo, v.34, n.4, p.285 287, 1971.
- JENSEN, J. & LARSEN, H.E. Listeria monocytogenes the aetiological agent in three cases ofmastitis cows. Nord. Veterinaermed., v.25, p. 322-329, 1973.
- KUMMENEJE, K. & MIKKELSEN, T. Isolation of Listeria monocytogenes type 4 from cases of keratoconjunctivitis in cattle and sheep. Nord. Veterinaermed., v.27, p.144-149, 1975.
- MURRAY, E.G.D.;WEBB, R.A.;SWAN, M.B.R. A disease of rabbits characterized by large mononuclear leucocitosis caused by hitherto and described bacillusBacteriummonocytogenes.J. Pathol. Bacteriol., v.29, p.407-439, 1926.
- PACHECO, G. & DIAS, V.M. Oftalmia listeriosa em coelhos. Bol. Soe. Eras. Med. Vet., v.24, p.15-20, 1956.
- SILVA, J.M.L.;LUCIO, W.F.;PAULA, I.R.;COUTO, E.S. Abcesso cerebral em bovinos. Arq. Esc. Vet., Belo Horizonte, v.25, n.1, p.27-32, 1973.
- SONCINI, R.A. &TURNES, C.G. Encephalitis caused by Liste ria monocytogenes in cattle. Gac. Vet., v.38, n.315, p.503-507, 1976.
- SRIVASTAVA, N.C.; GUPTA, S.K.; UPPAL, P.K. Listeria monocytogenes infection in infertile cows. Indian Vet. J., v.62, n.7, p.545-547, 1985.
- VALLÉE, A.; GUILLON, J.C.; LEV ADITI, J.; DESPIERRES, M. Aspect actuel de la listériose cérébrale bovine en France. Bull. Acad. Vet. France, v.45, n.6, p.277-282, 1972.
- VANDERGRAAFF, R.; BORLAND, N.A.; BROWNING, J.W. An outbreak of listerial meninga encephalitis in sheep. Aust. Vet.J., v.57, n.2, p.94-96, 1981.
