Triterpenos das folhas de Minquartia guianensis Aubl. (Olacaceae)

Triterpenes from the leaves of Minquartia guianensis Aubl. (Olacaceae)

Resumos

Este artigo descreve o isolamento dos triterpenos lupeol, taraxerol, lupen-3-ona e esqualeno obtido do extrato diclorometânico das folhas da espécie Minquartia guianensis Aubl., pertencente à família Olacaceae. Estes terpenóides foram isolados através de técnicas cromatográficas e identificados utilizando Ressonância Magnética Nuclear (RMN) de ¹H e de 13C. Na literatura disponível, este é o primeiro relato destes triterpenos em M. guianensis.

Triterpenos; Minquartia guianensis; Olacaceae

This article describes the isolation of the triterpenes lupeol, taraxerol, lupen-3-one and squalene from the dichloromethane extract of the leaves of Minquartia guianensis Aubl. belonging to the Olacaceae family. These terpenoids were isolated through chromatographic techniques and identified using ¹H and 13C Nuclear Magnetic Resonance (NMR). At the best of our knowledge, this is the first report of these triterpenes in M. guianensis.

Triterpenes; Minquartia guianensis; Olacaceae

QUÍMICA

Triterpenos das folhas de Minquartia guianensis Aubl. (Olacaceae)

Triterpenes from the leaves of Minquartia guianensis Aubl. (Olacaceae)

Lorena Mayara de Carvalho Cursino^I; Adriana Spirotto Stein Mesquita^I; Denny William de Oliveira Mesquita^I; Carromberth Carioca Fernandes^II; Orlando Libório Pereira Junior^I; Ieda Leão do Amaral^III; Cecilia Veronica Nunez^I

^IInstituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Coordenação de Pesquisas em Produtos Naturais - CPPN, Av. André Araújo, 2936, Aleixo, Manaus, AM, Brasil. CEP 69060-001. e-mail: [e-mail], [e-mail]

^IIUniversidade Federal do Acre

^IIIInstituto Nacional de Pesquisas da Amazônia, Coordenação de Pesquisas em Botânica - CPBO

RESUMO

Este artigo descreve o isolamento dos triterpenos lupeol, taraxerol, lupen-3-ona e esqualeno obtido do extrato diclorometânico das folhas da espécie Minquartia guianensis Aubl., pertencente à família Olacaceae. Estes terpenóides foram isolados através de técnicas cromatográficas e identificados utilizando Ressonância Magnética Nuclear (RMN) de ¹H e de ¹³C. Na literatura disponível, este é o primeiro relato destes triterpenos em M. guianensis.

Palavras-chave: Triterpenos, Minquartia guianensis, Olacaceae.

ABSTRACT

This article describes the isolation of the triterpenes lupeol, taraxerol, lupen-3-one and squalene from the dichloromethane extract of the leaves of Minquartia guianensis Aubl. belonging to the Olacaceae family. These terpenoids were isolated through chromatographic techniques and identified using ¹H and ¹³C Nuclear Magnetic Resonance (NMR). At the best of our knowledge, this is the first report of these triterpenes in M. guianensis.

Keywords: Triterpenes, Minquartia guianensis, Olacaceae.

INTRODUÇÃO

A espécie Minquartia guianensis Aubl. pertencente à família Olacaceae está dispersa na América Central e na Bacia Amazônica. No Brasil, esta espécie é encontrada nos Estados do Acre, Amazonas, Roraima, Pará e Amapá. Popularmente é conhecida como acariquara, acariquara-roxa, acari, acapú, acaximba, arariúba, dentre outras denominações (Camargo et al., 2005). Um estudo prévio realizado com as cascas do caule de M. guianensis coletadas no Equador forneceu o ácido minquartinóico, um poliacetileno citotóxico, que mostrou atividade moderada em ensaio in vitro com Plasmodium falciparum e Leishmania major (Rasmussen et al., 2000). Algumas populações indígenas do Equador usam a infusão das cascas no tratamento de infecções intestinais causadas por parasitas, contra dores musculares e irritações cutâneas (Marles et al., 1989). Outro importante estudo realizado com cascas de M. guianensis, também coletadas no Equador, revelou a presença dos triterpenos eritrodiol, betulina, o ácido minquartinóico e a lichexantona (El-Seedi et al., 1994).

Os triterpenos apresentam diversas atividades biológicas, entre as quais destacam-se: cardioprotetora (Sudhahar, et al. 2007), gastroprotetora (Pertino, et al. 2007), antiinflamatória (Medeiros, et al. 2007), antitumoral (Braga, et al. (2007), leishmanicida (Delgado-Mendez, et al. 2008) e anti-hiperglicêmica (Sato, et al. 2007).

O presente artigo trata do isolamento dos triterpenos taraxerol (1), lupeol (2), lupen-3-ona (3) e esqualeno (4) das folhas de M. guianensis.

MATERIAL E MÉTODOS

MATERIAL VEGETAL

As folhas de Minquartia guinensis Aubl. foram coletadas na Reserva Ducke, INPA, região de Manaus, em abril de 2005 e identificadas pela MSc. Ieda Leão do Amaral. O material vegetal estava estéril no momento da coleta, razão pela qual não pôde ser depositado no Herbário, mas foi comparado com uma excicata previamente depositada no Herbário do INPA, sob o número 179.806. O material vegetal foi seco à temperatura ambiente e moído.

EXTRAÇÃO E FRACIONAMENTO

A extração das folhas (289 g) de M. guianensis foi realizada com diclorometano, metanol e água, cada extração foi realizada em triplicata e usando ultra-som por 20 minutos. Após filtração, os extratos diclorometânico e metanólico foram concentrados utilizando-se rota-evaporador e o aquoso usando liofilizador (Figura 1).

Uma vez que o extrato diclorometânico apresentava indícios da presença de terpenóides quando analisado em cromatografia em camada delgada comparativa (CCDC) e revelado com Ce(SO₄)₂, apresentando manchas com colorações alaranjadas e avermelhadas, o mesmo foi fracionado e os outros dois extratos (metanólico e aquoso) foram guardados para estudos posteriores. O fracionamento do extrato diclorometânico (3,5 g) foi realizado através de cromatografias em coluna aberta e de recristalizações, conforme mostrado na figura 1. As frações que continham triterpenos foram escolhidas por revelarem colorações entre o lilás, laranja e vermelho, quando reveladas em CCDC com Ce(SO₄)₂ e Rf de ~ 0,6 quando eluídas com hexano/acetato de etila 8:2.

RESULTADOS E DISCUSSÃO

A identificação dos triterpenos inicia-se pela análise dos espectros de RMN de ¹H, seguida pela de ¹³C. Assim, os primeiros indícios da presença de triterpenos são a presença de ligação dupla isolada entre 5 e 6 ppm e a presença de 8 metilas entre 0,8 e 1,7 ppm, nos espectros de RMN de ¹H. Na seqüência, os espectros de RMN de ¹³C [Broad Band Decoupling (BBD) e Distortionless Enhancement by Polarization Transfer (DEPT) 135º] foram analisados, de maneira que a identificação estrutural iniciou-se pelas análises de ligação dupla, comparando paralelamente com dados de RMN de ¹³C de triterpenos pentacíclicos publicado por Mahato e Kundu (1994). Desta forma, foi possível identificar os triterpenos taraxerol (1) e lupeol (2) (Figura 2). Podemos destacar a ligação dupla, pela presença de um dd em δ 5,46 (J=8,5 e 3,5 Hz) no espectro de RMN de ¹H e no espectro de RMN de ¹³C, sinais correspondentes ao carbono quaternário em 158,33 ppm e CH em 117,11 ppm, que permitiram a identificação do taraxerol, os demais sinais foram compatíveis com a estrutura proposta. Para o triterpeno 2, nos espectros de RMN de ¹H, destacam-se os sinais: em δ 4,62 s e 4,49 s referentes aos 2 hidrogênios da ligação dupla terminal (H₂₉); outro sinal característico é o dd em δ 3,12 (J=11,5 e 5 Hz) referente ao H₃. A substância 2 apresentou deslocamentos químicos em 150,9 ppm e 109,3 ppm, nos espectros de RMN de ¹³C, característicos do grupo olefínico (C-20 e C-29) dos triterpenos Lupanos. A comparação dos demais sinais com os da literatura (Mahato e Kundu, 1994) confirmaram a estrutura proposta.

No espectro de RMN de

¹H da lupen-3-ona (

3), observam-se a presença de sinais de hidrogênios da ligação dupla entre 4,49 e 4,61 ppm. No espectro de RMN de

¹³C (BBD e DEPT 135º), verifica-se o sinal em 150,72 ppm referente ao carbono quaternário, em δ 109,71 sinal de CH

₂ da ligação dupla e 217,71 ppm a presença de carbonila que confirma ser a lupen-3-ona. Os outros sinais de 2 e 3 (

Figura 2) foram comparados com outros espectros das mesmas moléculas previamente isoladas de

Wunderlichia crulsiana (Nunez,

et al., 2004), além da comparação com a revisão de Mahato e Kundu (1994).

A identificação do esqualeno (4) foi baseada nas análises dos dados dos espectros de Ressonância Magnética Nuclear (RMN) de ¹H e de ¹³C unidimensionais, com os sinais na Tabela 2. No espectro de RMN de ¹H, os sinais em aproximadamente 5 ppm correspondem aos hidrogênios das ligações duplas. Em aproximadamente 2 ppm observam-se os hidrogênios dos metilenos vizinhos às ligações duplas. Em 1,7 e 1,8 ppm observam-se os sinais referentes aos deslocamentos químicos dos hidrogênios das metilas. Através da análise dos dados de ¹³C (BBD e DEPT 135º) foi possível observar que os sinais entre 131 e 135 ppm são referentes aos carbonos quaternários. A comparação dos dados de RMN da susbstância 4 com os dados da literatura (Saitoa et al., 2007) (Tabela 1), possibilitou propor a mesma como sendo o esqualeno (Figura 2).

CONCLUSÃO

De acordo com a literatura consultada, este é o primeiro relato do isolamento dos triterpenos esqualeno, lupen-3-ona, taraxerol e lupeol em Minquartia guianensis.

AGRADECIMENTOS

Os autores agradecem à FAPEAM e ao PPBio/INPA/CNPq/MCT pelos auxílios concedidos e pelas bolsas de estudo concedidas: LMCC (FAPEAM), ASSM e DWOM (CNPq), CCF (SUFRAMA).

BIBLIOGRAFIA CITADA

Recebido em 14/03/2008

Aceito em 15/06/2008

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  27 Maio 2009
• Data do Fascículo
  Mar 2009

Histórico

• Aceito
  15 Jun 2008
• Recebido
  14 Mar 2008