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Osteointegração de osso bovino desvitalizado, hidroxiapatita de coral, poliuretana de mamona e enxerto autógeno em coelhos

Devitalized bovine bone, porous coralline hydroxyapatite, castor beans polyurethane and autograft implants in rabbits

Resumos

OBJETIVO: Estudar comparativamente implantes de osso bovino desvitalizado, hidroxiapatita porosa de coral, poliuretana de mamona e enxerto ósseo autógeno no reparo de defeito ósseo de 6x10mm em fêmur de coelhos. MÉTODOS: Noventa e seis coelhos Nova Zelândia distribuídos em 4 grupos conforme o material de preenchimento do defeito ósseo. Após seguimento de 4 e 12 semanas, as peças foram submetidas a análise macroscópica, microscópica, radiográfica, tomográfica e histométrica. Aos resultados aplicou-se testes estatísticos de Kruskal-Wallis, Mann-Whitney, Fisher, “t” de Student e quiquadrado. RESULTADOS: O enxerto ósseo autógeno mostrou maior potencial osteogênico; o osso bovino desvitalizado produz maior reação inflamatória, maior número de cavidades císticas e lentidão de integração; a hidroxiapatita porosa de coral mantém a radiodensidade inicial; os implantes de osso bovino desvitalizado e poliuretana de mamona mostraram radiodensidades aumentadas conforme foram invadidos pelo tecido ósseo neoformado. CONCLUSÃO: O implante de osso bovino desvitalizado induz reparação tecidual guiada mais lenta quando comparado ao enxerto ósseo autógeno e aos implantes de hidroxiapatita porosa de coral e poliuretana de mamona.

Osso bovino; Hidroxiapatita; Polímero; Transplante autógeno; Coelhos


PURPOSE: To study comparatively devitalized bovine bone, porous coralline hydroxyapatite, castor beans polyurethane implants and autograft in the repair of 6x10mm bony defect in femur of rabbits. METHODS: Ninety six New Zealand rabbits were distributed in 4 groups conforms the material of replacement of the bony defect. After following of 4 and 12 weeks, the pieces were submitted the macroscopic, microscopic, radiographic, tomographic and histometric analysis. To data was applied Kruskal-Wallis, Mann-Whitney, Fisher, t-Student and qui-square statistical tests. RESULTS: The autograft showed greatest osteogenic potential; the devitalized bovine bone produces larger inflammatory reaction, larger number of cystic cavities and slowness integration; the porous coralline hydroxyapatite maintains the initial radiodensity; devitalized bovine bone and castor beans polyurethane implants showed increased radiodensities as they were invaded by the bony formation. CONCLUSION: Devitalized bovine bone implants induces slower bony formation, when compared to the autograft, porous coralline hydroxyapatite and castor beans polyurethane implants.

Bovine bone; Hydroxyapatite; Polimer; Autograft; Rabbit


ARTIGO ORIGINAL

Osteointegração de osso bovino desvitalizado, hidroxiapatita de coral, poliuretana de mamona e enxerto autógeno em coelhos1 1 . Trabalho realizado na Disciplina de Cirurgia Experimental da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, pelo Programa de Pós-Graduação em Cirurgia e Experimentação da Universidade Federal de São Paulo – Escola Paulista de Medicina (UNIFESP-EPM).

Devitalized bovine bone, porous coralline hydroxyapatite, castor beans polyurethane and autograft implants in rabbits

Arthur Silveira de FigueiredoI; Djalma José FagundesII; Neil Ferreira NovoIII; Celso Massaschi InouyeIV; Luiz Carlos TakitaV; Maria Cristina Pita SassiotoVI

IChefe de Serviço de Ortopedia e Traumatologia da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul (UFMS); Pós-Graduando em Cirurgia e Experimentação pela UNIFESP-EPM

IICoordenador do Programa de Pós-Graduação em Cirurgia e Experimentação da UNIFESP-EPM

IIIProfessor Titular de da Disciplina de Bioestatística da UNIFESP-EPM

IVProfessor Titular do Departamento de Clínica Cirúrgica da UFMS

VProfessor Adjunto de Anatomia Patológica da UFMS

VIProfessor Substituto de Propedêutica e Semiologia da UFMS

Endereço para correspondência Endereço para correspondência Dr. Arthur Silveira de Figueiredo Rua Barão do Rio Branco, 2167 79008-067 Campo Grande – MS Tel: (67)325-8775 Fax: (67)321-0453 E-mail: xxaxxi@brturbo.com

RESUMO

OBJETIVO: Estudar comparativamente implantes de osso bovino desvitalizado, hidroxiapatita porosa de coral, poliuretana de mamona e enxerto ósseo autógeno no reparo de defeito ósseo de 6x10mm em fêmur de coelhos.

MÉTODOS: Noventa e seis coelhos Nova Zelândia distribuídos em 4 grupos conforme o material de preenchimento do defeito ósseo. Após seguimento de 4 e 12 semanas, as peças foram submetidas a análise macroscópica, microscópica, radiográfica, tomográfica e histométrica. Aos resultados aplicou-se testes estatísticos de Kruskal-Wallis, Mann-Whitney, Fisher, “t” de Student e quiquadrado.

RESULTADOS: O enxerto ósseo autógeno mostrou maior potencial osteogênico; o osso bovino desvitalizado produz maior reação inflamatória, maior número de cavidades císticas e lentidão de integração; a hidroxiapatita porosa de coral mantém a radiodensidade inicial; os implantes de osso bovino desvitalizado e poliuretana de mamona mostraram radiodensidades aumentadas conforme foram invadidos pelo tecido ósseo neoformado.

CONCLUSÃO: O implante de osso bovino desvitalizado induz reparação tecidual guiada mais lenta quando comparado ao enxerto ósseo autógeno e aos implantes de hidroxiapatita porosa de coral e poliuretana de mamona.

Descritores: Osso bovino. Hidroxiapatita. Polímero. Transplante autógeno. Coelhos.

ABSTRACT

PURPOSE: To study comparatively devitalized bovine bone, porous coralline hydroxyapatite, castor beans polyurethane implants and autograft in the repair of 6x10mm bony defect in femur of rabbits.

METHODS: Ninety six New Zealand rabbits were distributed in 4 groups conforms the material of replacement of the bony defect. After following of 4 and 12 weeks, the pieces were submitted the macroscopic, microscopic, radiographic, tomographic and histometric analysis. To data was applied Kruskal-Wallis, Mann-Whitney, Fisher, t-Student and qui-square statistical tests.

RESULTS: The autograft showed greatest osteogenic potential; the devitalized bovine bone produces larger inflammatory reaction, larger number of cystic cavities and slowness integration; the porous coralline hydroxyapatite maintains the initial radiodensity; devitalized bovine bone and castor beans polyurethane implants showed increased radiodensities as they were invaded by the bony formation.

CONCLUSION: Devitalized bovine bone implants induces slower bony formation, when compared to the autograft, porous coralline hydroxyapatite and castor beans polyurethane implants.

Key words: Bovine bone. Hydroxyapatite. Polimer. Autograft. Rabbit.

Introdução

Na prática ortopédica freqüentemente encontra-se dificuldade de reparação de defeitos ósseos, quando o rápido crescimento de tecido conjuntivo no interior desses defeitos impede a formação de tecido ósseo, causando alterações anatômicas e perturbações funcionais e exigindo procedimentos operatórios reconstrutivos, que têm na enxertia óssea seu principal método de tratamento1.

O objetivo primário da enxertia óssea é o de preencher ou unir o defeito com material osteoindutivo e/ou osteocondutivo e o sucesso da enxertia depende da participação ativa do enxerto no processo da osteogênese reparativa2.

O osso autógeno é superior do ponto de vista da osteogênese e tem a vantagem adicional de não transmitir doenças infecto-contagiosas; mas possui limitações de uso, como quantidade insuficiente, quando a fonte doadora é escassa, como nas crianças e em pacientes já submetidos a cirurgias anteriores que exauriram áreas potencialmente doadoras de osso3,4,5,6.

A hidroxiapatita porosa de coral é uma cerâmica que tem como principais propriedades ser biocompatível, não tóxica, não carcinogênica, ter estabilidade química e biológica, e apresentar densidade, peso, resistência mecânica e elasticidade adequados6,7.

O osso bovino desvitalizado provê um arcabouço para as células fibroblásticas do osso hospedeiro invadirem e se diferenciarem em tecido cartilaginoso e ósseo e suas propriedades osteocondutivas podem ser melhoradas pela adição de fatores de crescimento8,9,10.

A poliuretana derivada do óleo de mamona é um poliéster formado por três moléculas do ácido ricinoleico, cada uma com um grupo hidroxila no carbono 12, propício para polimerização por meio de ligações uretana. A presença do radical amino na sua fórmula química lhe confere ação bactericida e a polimerização ocorre numa temperatura de aproximadamente 40ºC, compatível com a vida celular3,11,12.

A revisão bibliográfica não mostrou nenhum trabalho experimental publicado em nosso país ou na América Latina que comparasse o osso bovino desvitalizado, a hidroxiapatita porosa de coral, a poliuretana de mamona e o enxerto ósseo autógeno, em animal de experimentação, tornando pertinente este estudo comparativo.

Métodos

Noventa e seis coelhos Nova Zelândia, albinos, machos, com idade média de cinco meses, peso médio de 2970g, provenientes do Biotério Central da UFMS, foram distribuídos em quatro grupos com 24 animais, de acordo com o preenchimento do defeito padrão: Grupo I - enxerto ósseo autógeno, Grupo II - osso bovino desvitalizado, Grupo III - hidroxiapatita porosa de coral e Grupo IV - poliuretana de mamona. Os grupos foram divididos em subgrupos A (seguimento de 4 semanas) e B (seguimento de 12 semanas).

Os procedimentos operatórios foram realizados no Laboratório de Cirurgia Experimental do Departamento de Clínica Cirúrgica da UFMS. A proposta deste estudo foi submetida à apreciação e aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa da UNIFESP-EPM, ratificadas pela Comissão de Pesquisa da Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós-Graduação da UFMS.

Blocos quadrangulares de osso bovino desvitalizado e de hidroxiapatita porosa de coral foram recortados e modelados com broca odontológica em cilindros de 6mm de diâmetro e 10mm de comprimento.

A poliuretana de mamona foi preparada pela mistura manual do poliol (20mL) com carbonato de cálcio (20g) até sua homogeneização. Em seguida, o pré-polímero (20mL) foi acrescentado, seguindo-se com a homogeneização da mistura. O compósito foi deixado em repouso, em temperatura ambiente, por quarenta minutos, adquirindo um estado plástico poroso. Com serra ortopédica oscilatória o bloco foi dividido em fragmentos quadrangulares, e com broca odontológica foram recortados e modelados em cilindros com 10mm de comprimento e 6mm de diâmetro.

Os cilindros foram vedados em embalagem plástica dupla, consecutivas, individuais, esterilizados por óxido de etileno e armazenados em temperatura ambiente até o momento da operação. Os procedimentos operatórios de confecção do defeito padrão e de seu preenchimento com enxerto autógeno ou implante de biomateriais seguiram método já padronizado6.

Após observação por período de 4 e 12 semanas, os coelhos receberam injeção intramuscular de pentobarbital sódico, na dose de 60mg.Kg-1, promovendo eutanásia. Os membros posteriores foram desarticulados no quadril, os tecidos moles conectores com a tíbia seccionados e os fêmures dissecados com isolamento da área condilar do procedimento operatório.

Na análise macroscópica observou-se a coloração, textura e reparação da cortical óssea, além da mobilidade dos implantes. Os fêmures foram submetidos a radiografias em posicionamento crânio-caudal e látero-lateral, com observação da integridade óssea, desvio angular, formação óssea ectópica e consolidação óssea.

Ambos fêmures de seis animais do Subgrupo A e de dez animais do Subgrupo B foram sorteados e submetidos à tomografia axial computadorizada, em cortes tomográficos com 1mm de espessura e ampliação das imagens em torno de 2,2 vezes para análise da integração óssea dos implantes. Baseando-se nas radiodensidades obtidas pela tomografia computadorizada, pontuou-se um escore máximo de 20 para o osso cortical, de 9 para o osso medular, de 0 a 1 para o tecido gorduroso, e de acordo com a maior ou menor capacidade de absorção dos raios-X dos seguimentos analisados nas áreas implantadas, pontuou-se escores intermediários nesta escala de valores (Quadro 1)


Os fêmures foram processados histológicamente e nas imagens obtidas pela microscopia óptica foram observadas e quantificadas a reação inflamatória e a formação de tecido ósseo. Nos campos microscópicos da zona de transição do implante com o osso hospedeiro foi realizada a contagem de osteoblastos. Nas imagens captadas pela digitalização das lâminas histológicas calculou-se a o diâmetro, a densidade e a área física ocupada pelo implante.

Para análise estatística dos resultados, realizada pela Disciplina de Bioestatística do Departamento de Medicina Preventiva da UNIFESP-EPM, foram aplicados os testes de análise de variância para grupos independentes13,14 fixando-se em 0,05 ou 5% (a < 0,05) o nível de rejeição da hipótese de nulidade.

Resultados

A evolução ponderal mostrou que todos coelhos ganharam peso, demonstrando que os procedimentos experimentais não interferiram no desenvolvimento dos animais.

Os resultados da observação macroscópica da coloração da cortical óssea mostraram uma maior alteração nos animais do grupo IV, no seguimento de 4 e 12 semanas, pelo fato da poliuretana de mamona ter, originalmente, uma cor amarelada que persistiu nos períodos seguimentos (Z=10,91 - Grupo IV < I, II e III).

A recuperação da textura lisa da cortical óssea foi significante nos grupos I e III com seguimento de 4 semanas, e no grupo I no seguimento de 12 semanas (c2=11,22 - Grupo I > II, III e IV).

No seguimento de 4 semanas, os animais dos grupos I e III apresentaram uma cicatrização cortical mais rápida que os animais dos grupos II e IV. No seguimento de 12 semanas os animais do grupo III apresentaram resultados semelhantes aos animais do grupo I, mostrando que o enxerto ósseo autógeno e a hidroxiapatita porosa de coral promovem uma osteogênese mais precoce (c2=15,19 - Grupo I e III < II e IV).

A observação radiográfica da presença de fratura femoral, não mostrou diferença significante entre os grupos estudados, o que parece ser resultante de uma técnica operatória pouco agressiva na confecção de um defeito padrão em dimensões que não provocam instabilidade óssea.

Os coelhos do grupo III mostraram uma maior presença de desvio em valgo do eixo femoral longitudinal no seguimento de quatro semanas, por possível lesão da cartilagem de crescimento femoral distal durante o procedimento operatório (c2=8,57 - Grupo III > I, II e IV).

A presença de formação óssea mais exuberante, ultrapassando os limites da cortical óssea, foi significante no grupo I, nos seguimentos de 4 e 12 semanas, demonstrando uma maior capacidade de osteoindução dos enxertos ósseos autógenos (c2=10,43 - Grupo I < II, III e IV).

A análise estatística dos resultados da observação da radiodensidade dos implantes, por tomografia computadorizada, mostrou uma diferença significante dos animais do Grupo III, no seguimento de 4 e 12 semanas, resultante da maior radiodensidade original do próprio implante de hidroxiapatita porosa de coral, que se acentua com a invasão de seus poros pelo tecido ósseo neoformado (H=76,12 - Grupo III > I, II e IV) (Figura 1).


Os resultados da observação microscópica mostraram uma presença significante de cavidades císticas nos coelhos dos grupos II, III e IV no seguimento de 4 e 12 semanas, com ausência das mesmas nos animais do grupo I. As cavidades são, possivelmente, resultantes de uma ação osteoclástica mais intensa pela presença de implantes não vascularizados, interpretados pelo tecido receptor como corpos estranhos (c2=43,51 - Grupo I < II, III e IV).

Observou-se uma diferença significante da presença de tecido ósseo maduro nos animais do grupo I no seguimento de 4 semanas e nos animais dos grupos I e III no seguimento de 12 semanas. Tal fato encontra explicação na característica da matriz óssea dos enxertos ósseos autógenos agir como indutora da neoformação óssea pela transformação dos fibroblastos ou células mesenquimais locais, em osteoblastos que, por sua vez, utilizam a hidroxiapatita presente para formar osso novo (c2=21,37 - Grupo II < I, III e IV).

A análise estatística dos resultados da quantificação da reação inflamatória na zona de transição entre o enxerto/implante e o osso receptor, por programa informatizado, mostrou diferença significante nos animais do grupo II no seguimento de 4 e 12 semanas. Baseando-se nestes resultados pode-se afirmar que o osso bovino desvitalizado, quando comparado aos demais implantes, é o que provoca maior reação inflamatória local com retardo no processo de consolidação óssea (H=88,97 - Grupo I < II, III e IV).

Os resultados da quantificação do tecido ósseo neoformado na zona de transição entre o enxerto/implante e o osso receptor, mostraram diferença significante entre o grupo I e os demais grupos no seguimento de 4 e 12 semanas, decorrente de osteogênese precoce promovida pelos enxertos ósseo autógenos (H=86,30 - Grupo I > II, III e IV) (Figuras 2 e 3).



No seguimento de 4 semanas foi observado maior quantidade de osteoblastos na zona de transição entre o enxerto/implante o osso receptor nos animais dos Grupos I, e menor quantidade dessas células nos animais do Grupo II, mostrando que os enxertos ósseos autógenos desencadeiam o processo de osteogênese mais precocemente e, que os implantes de osso bovino desvitalizado necessitam de maior período de tempo para início do processo osteogênico, quando comparados com os implantes de hidroxiapatita porosa de coral e poliuretana de mamona (H=74,44 - Grupo I < II, III e IV).

Os resultados da quantificação da área física ocupada pelos implantes mostraram uma redução significante das áreas ocupadas pelos implantes do grupo II, no seguimento de 4 semanas (F = 28,80), com redução também significante no seguimento de 12 semanas (F = 40,45), que foi interpretada como resultante de uma maior atividade osteoclástica na zona de transição entre o implante e o osso receptor (F=40,45 - Grupo II < III e IV) (Figura 4). A mensuração do menor diâmetro dos implantes mostrou diferença significante do grupo III nos seguimentos de 4 e 12 semanas (F=20,32 - Grupo II > III)


Discussão

A retirada do enxerto ósseo autógeno implica em aumento do tempo operatório, maior perda sangüínea, ferida operatória adicional e conseqüente aumento da morbidade1. A busca de outros materiais implica, também em limitações logísticas como relação custo/benefício, facilidade de obtenção, disponibilidade de fonte doadora, local apropriado e tempo disponível para o tratamento2.

Um biomaterial de uso a ser proposto é a matriz óssea desvitalizada, como uma possível solução para situações clínicas que exijam o reparo de defeitos ósseos, por possuir propriedades osteocondutivas que estimulam a neoformação e aposição óssea em sua periferia e interior, fixando-se firmemente às paredes de defeitos padrão4,10.

A hidroxiapatita porosa de coral é uma cerâmica biocompatível, biodegradável, anisotrópica, inerte e atóxica que provê uma estrutura para a invasão do tecido receptor, podendo ser produzida no tamanho e na quantidade desejadas, recortada, esterilizada e estocada por longos períodos em temperatura ambiente15,16.

A poliuretana de mamona, um polímero vegetal biocompatível e atóxico, utilizado na clínica ortopédica como cimento ósseo nas artroplastias, proporcionando uma fixação firme ao osso por uma massa pouco porosa. Em função desta característica, preparou-se o polímero vegetal adicionado com carbonato de cálcio com o duplo propósito de conferir-lhe maior porosidade e visibilidade aos raios X17. Para evitar a diminuição da massa superficial do polímero, descrita como “compactação” da massa polimérica, que ocasionaria perda do ajuste do implante às paredes do defeito-padrão, optou-se por permitir a polimerização da poliuretana fora do defeito padrão. Exposta ao meio ambiente, a poliuretana de mamona mostrou aumento de sua porosidade, condição necessária para facilitar a invasão do implante pelo tecido ósseo neoformado18.

Selecionou-se o coelho como animal de experimentação por ser de fácil obtenção e manuseio, e por ser o menor mamífero com dimensões femorais suficientes para o estudo dos implantes nas dimensões pré-determinadas em estudo piloto. A região metáfiso-epifisária do fêmur foi escolhida pela facilidade e simplicidade do acesso operatório, e pela quantidade de osso esponjoso necessária ao estudo comparativo proposto, baseando-se em Figueiredo e col.6.

Foram utilizados animais de mesma raça, sexo e idade para homogeneização da amostra e sua divisão em grupos e subgrupos teve a finalidade de permitir os seguimentos em relação ao tempo e adequada aplicação dos testes estatísticos.

Preferiu-se o processo de esterilização dos implantes com óxido de etileno, que se mostrou eficaz, não levando a alteração do aspecto físico, em concordância com os achados de Ohara e col.12. O processo de esterilização por autoclavagem, promove uma significante redução da resistência mecânica dos implantes de osso bovino, conforme relato de Viceconti e col19.

Nos coelhos utilizados em pesquisa, a anestesia é considerada um fator limitante, em virtude dos animais apresentarem instabilidade dose-resposta aos agentes anestésicos e dificuldades em manter o plano anestésico. O procedimento anestésico seguiu as orientações de Fonseca e col.20 e transcorreu sem incidentes com o uso da associação de quetamina (sedativo e analgésico) com a xilazina (hipnótico não-narcótico e relaxante muscular). A manutenção do plano anestésico efetivo foi em torno de 60 minutos, tempo este suficiente para a realização dos procedimentos operatórios, que duraram em média 45 minutos.

No modelo experimental escolhido, no momento da confecção do defeito padrão, optou-se pela não ressecção do periósteo no local de posicionamento da trefina, apesar do conhecimento da grande capacidade osteogênica que este tecido possui, e que pode ser responsabilizada pela formação óssea ectópica presente em todos os grupos de estudo.

Para evitar necrose celular nas paredes do defeito padrão, utilizou-se um perfurador elétrico de baixa rotação. Este fato foi observado por Ignácio e col.11, que relataram necrose térmica das células ósseas, na zona de transição implante-osso receptor, provocada por perfurador elétrico de alta rotação, prejudicando a possível consolidação.

A escolha do enxerto a ser utilizado é decisivamente influenciada pela estabilidade do leito receptor. Nos casos de defeitos estáveis, como os defeitos ósseos criados experimentalmente, os enxertos não necessitam oferecer nenhuma estabilidade adicional ou receber nenhum tipo de fixação interna ou externa6,10.

Os implantes utilizados, por terem as mesmas dimensões dos defeitos padrões, tiveram firme estabilidade marginal, não necessitando fixação adicional. A análise estatística dos resultados da observação de mobilidade dos enxertos e dos implantes não mostrou diferenças significantes nos diversos grupos estudados.

Com relação às observações radiográficas, ressalta-se as inúmeras tentativas de se manter um posicionamento padronizado dos fêmures, em ântero-posterior e látero-lateral, o que não foi possível em função do arqueamento natural desta espécie animal. Considerou-se sinal radiográfico de consolidação a ausência de halo de radiotransparência circunjacente aos enxertos ou implantes. Os resultados mostraram uma diferença significante do grupo I no seguimento de 4 e 12 semanas, demonstrando ser a consolidação óssea um aspecto tempo-dependente e que os métodos radiográficos convencionais são, por si só, insuficientes para a determinação fidedigna da consolidação em ossos, e calos ósseos, de pequenas dimensões3.

Branemark e col.21 estudando a osteointegração de implantes dentais encontrou dificuldades no planejamento operatório. O fato das imagens radiográficas convencionais serem bi-dimensionais, não permitiu avaliação fidedigna da qualidade e quantidade do tecido ósseo na área de interesse. Para suprir as necessidades de planejamento e controle pós-operatório, passaram a utilizar a tomografia computadorizada, que usa os raios-X da mesma forma que as radiografias convencionais, mas, ao invés de uma projeção simples, ela combina matematicamente centenas de projeções, formando uma imagem sem distorções, num único plano, que geralmente, é transverso ao eixo longitudinal corporal.

A imagem obtida pela tomografia computadorizada é um mapa do pixel do coeficiente de atenuação do tecido em imagem linear obtida pelos raios-X dentro de um plano; esse coeficiente de atenuação é proporcional à densidade do tecido e também depende de um cálculo complexo utilizando números atômicos. A tomografia computadorizada converte o coeficiente de atenuação linear para uma escala numérica, o escore de Hounsfield, podendo discernir tecidos com uma diferença de atenuação menor que 1 % ou poucos pontos da escala de Hounsfield.

Considerando ser a tomografia computadorizada um exame de alto custo operacional, optou-se pela redução do número de animais estudados, porém, com realização dos exames em todos os grupos e subgrupos estudados, compondo uma amostra suficiente para a execução de uma análise estatística confiável. Os resultados do escore de Hounsfield para os valores da radiodensidade das áreas de interesse nos côndilos femorais mostraram que os animais de todos os grupos apresentaram um aumento significante da radiodensidade nos seguimentos de 4 e 12 semanas, decorrente da invasão dos implantes pelo tecido ósseo neoformado, demonstrando não haver vantagem na utilização da tomografia computadorizada na comparação de implantes com alta radiodensidade original.

Na biopatologia dos osteoclastos, que são formados pela fusão de células mononucleares, uma vez iniciada sua atividade de reabsorção pela presença de elementos estranhos ao tecido, ocorre a formação de cavidades císticas com resíduos desses elementos em seu interior22.

A aquisição, processamento e análise de imagens têm sido utilizadas como uma ferramenta indispensável de auxílio às pesquisas, permitindo ao pesquisador determinar inúmeras variáveis tais como a área, perímetro, número de estruturas e fator de forma da estrutura (absorção de luz, maior e menor diâmetro, distância entre dois pontos, cálculo de ângulos e coordenada do centro de massa), de uma maneira fácil, rápida e precisa; permitindo ainda que os dados de imagens adquiridas possam ser armazenados, impressos ou exportados para outros programas, permitindo uma eficiente e completa documentação23,24.

De acordo com Weiler e col.25 e Quinn e col.26, as alterações da superfície podem estar relacionadas a uma interação dos materiais dos implantes com o organismo. Vários mecanismos foram apontados como os responsáveis pela biodegradação, sendo os principais a hidrólise e a oxidação, onde participariam os fluidos orgânicos, agentes oxidativos liberados pelos macrófagos e células gigantes.

A maior densidade da poliuretana de mamona no seguimento de 4 semanas foi atribuída à sua menor porosidade. No seguimento de 12 semanas a hidroxiapatita porosa de coral mostrou maior densidade, talvez pela maior invasão de tecido ósseo neoformado em sua rede de poros.

Holmes e col.27 observaram pela microscopia eletrônica que a hidroxiapatita porosa de coral após implantação óssea tinha 84% da área com densidade maior que a do osso, e que os 16% restantes eram representados pelas lacunas, canais e espaços fibrovasculares.

Analisando os dados expostos e sabendo que o melhor implante é aquele que provoca menor reação inflamatória e permite maior invasão de tecido ósseo dentro e fora de sua estrutura num período de tempo mais curto, pode-se deduzir que o enxerto ósseo autógeno produz menor reação inflamatória que os demais implantes estudados, com presença de células gigantes tipo corpo estranho, sem formação de cavidades císticas, e cria as condições necessárias a uma osteogênese reparativa mais precoce.

O osso bovino desvitalizado apesar da maior reação inflamatória com presença de células gigantes tipo corpo estranho, formação de cavidades císticas com resíduos do implante em seu interior e invasão mais lenta dos poros pelo tecido ósseo, em comparação com os demais implantes, mostrou propriedades osteocondutivas na reparação de defeitos ósseos.

A hidroxiapatita porosa de coral mostrou maior eficácia na promoção da osteogênese, com presença de menor reação inflamatória que os implantes de poliuretana de mamona e osso bovino desvitalizado, porém mostrou-se menos eficaz que o enxerto ósseo autógeno.

A poliuretana de mamona mostrou maior propriedade osteocondutiva e menor reação inflamatória que o osso bovino desvitalizado, com invasão de seus poros e preenchimento das cavidades císticas por tecido ósseo, mostrando-se eficaz como arcabouço para a reparação tecidual guiada.

A observação radiográfica mostrou que a presença do halo de radiotransparência circunjacente ao enxerto/implante é um aspecto eficaz na avaliação da consolidação óssea. A alta radiodensidade inicial da hidroxiapatita porosa de coral, comprometeu o estudo comparativo entre os implantes, devendo novas pesquisas ser desenvolvidas na procura da melhor alternativa de avaliação por imagem da integração óssea utilizando biomateriais.

A digitalização das lâminas histológicas, permitindo a visibilização direta da peça óssea, mostrou-se eficaz para quantificação da área ocupada pelo biomaterial, assim como da alteração de sua forma por reabsorção ou ação de forças compressivas.

Considerando-se os aspectos morfológicos comparados nos períodos de estudo, as limitações devidas aos métodos empregados e os resultados obtidos, pode-se deduzir que houve osteogênese necessária à recuperação da integridade mecânica e fisiológica do osso, com todos os materiais estudados. Novas pesquisas deverão ser realizadas, no futuro, para averiguar outros fatores que influenciem o processo de reparação tecidual guiada na presença de enxerto ósseo autógeno, osso bovino desvitalizado, hidroxiapatita porosa de coral e poliuretana de mamona.

Conclusão

O implante de osso bovino desvitalizado produz maior reação inflamatória, maior formação de cavidades císticas e reparação tecidual guiada mais lenta, quando comparado ao enxerto ósseo autógeno e aos implantes de hidroxiapatita porosa de coral e poliuretana de mamona.

Recebimento: 15/04/2004

Revisão: 21/05/2004

Aprovação: 08/06/2004

Conflito de interesse: nenhum

Fonte de financiamento: nenhuma

Como citar este artigo:

Figueiredo AS, Fagundes DJ, Novo NF, Inouye CM, Takita LC, Sassioto MCP. Osteointegração de osso bovino desvitalizado, hidroxiapatita de coral, poliuretana de mamona e enxerto ósseo autógeno em coelhos. Acta Cir Bras [serial online] 2004 Jul-Ag;19(4). Disponível em URL: http://www.scielo.br/acb. [também em CD-ROM].

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  • Endereço para correspondência
    Dr. Arthur Silveira de Figueiredo
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    Tel: (67)325-8775
    Fax: (67)321-0453
    E-mail:
  • 1
    . Trabalho realizado na Disciplina de Cirurgia Experimental da Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, pelo Programa de Pós-Graduação em Cirurgia e Experimentação da Universidade Federal de São Paulo – Escola Paulista de Medicina (UNIFESP-EPM).
  • Datas de Publicação

    • Publicação nesta coleção
      12 Ago 2004
    • Data do Fascículo
      Ago 2004

    Histórico

    • Aceito
      08 Jun 2004
    • Revisado
      21 Maio 2004
    • Recebido
      15 Abr 2004
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