Estudo da termorregulação como marcador de agravamento do quadro de sepse experimental em modelo animal^*

Resumos

Objective:

to analyze variations in body temperature and in plasma nitrate and lactate concentrations in rats submitted to the experimental sepsis model.

Method:

a total of 40 rats divided equally into five groups. The induction of endotoxemia was performed with intravenous administration of lipopolysaccharide, 0.5 mg/Kg, 1.5 mg/Kg, 3.0 mg/Kg, and 10 mg/Kg, respectively. The control group received 0.5 mL of saline solution. The experiment lasted six hours, with evaluations performed at 0 (baseline data), 2^nd, 4^th, and 6^thhours.

Results:

The animals that received doses up to 3.0 mg/kg showed a significant increase in body temperature compared to the group with 10 mg/kg, which showed a decrease in these values. The increase in plasma nitrate and lactate concentrations in the groups with lipopolysaccharide was significantly higher than in the group that received the saline solution and was correlated with the increase in body temperature.

Conclusion:

the variations in body temperature observed in this study showed the dose-dependent effect of lipopolysaccharide and were correlated with the increase in the concentrations of nitrate and plasma lactate biomarkers. The implications of this study are the importance of monitoring body temperature, together with the assessment of these pathophysiological markers, which suggest worsening in the prognosis of sepsis.

Descriptors:
Endotoxemia; Sepsis; Body Temperature; Nitric Oxide; Serum Lactate; Biomarkers

Objetivo:

analizar las variaciones de la temperatura corporal y de las concentraciones de nitrato y lactato en plasma en ratones sometidos a un modelo de sepsis experimental.

Método:

se utilizaron 40 ratones divididos en cinco grupos iguales. La inducción de la endotoxemia se realizó mediante administración intravenosa de 0,5 mg/Kg, 1,5 mg/Kg, 3,0 mg/Kg y 10 mg/Kg de lipopolisacárido, respectivamente. El grupo de control recibió 0,5 mL de solución salina. El experimento duró seis horas, con evaluaciones realizadas a la hora 0 (datos de referencia) y a la 2^a, 4^a y 6^ahora.

Resultados:

los animales que recibieron dosis de hasta 3,0 mg/kg presentaron un aumento significativo de la temperatura corporal, en comparación con el grupo al que se le administró 10 mg/kg, que presentó una disminución de dichos valores. En los grupos a los que se les administró lipopolisacárido, el aumento en las concentraciones de nitrato y lactato en plasma fue significativamente mayor que en el grupo al que se le administró la solución salina y estuvo correlacionado con el aumento de la temperatura corporal.

Conclusión:

las variaciones de la temperatura corporal observadas en este estudio mostraron que los efectos dependieron de la dosis de lipopolisacárido, y estuvieron correlacionadas con el aumento en la concentración de biomarcadores, como el nitrato y lactato en plasma. El estudio reveló la importancia del control de la temperatura corporal, junto con la evaluación de estos marcadores fisiopatológicos, que sugieren un empeoramiento en el pronóstico de la sepsis.

Descriptores:
Endotoxemia; Sepsis; Temperatura Corporal; Óxido Nítrico; Lactato Sérico; Biomarcadores

Introdução

Apesar do amplo número de estudos disponíveis na literatura, ainda são encontradas limitações na compreensão dos mecanismos fisiopatológicos, que resultam nas elevadas taxas de morbimortalidades relacionadas à sepse nas Unidades de Terapia Intensiva (UTIs)⁽¹⁾. O percurso clínico da doença pode levar à piora do prognóstico, quando ocorrem mudanças para os estágios de sepse grave e choque séptico⁽²⁾. Essa mudança representa um índice de mortalidade que varia de 10% a 40%^(3-4).

Dentre as manifestações clínicas apresentadas na doença, a temperatura corporal é um importante sinal cardinal sobre as condições de saúde, cujo controle rigoroso da termorregulação pode aumentar as chances de sobrevida dos pacientes⁽⁵⁾. No entanto, os mecanismos que resultam na termorregulação ineficaz, durante os estágios mais graves da sepse, principalmente relacionados à hipotermia, permanecem incompreendidos^(1,5).

A resposta inflamatória exacerbada e a infecção são fatores determinantes na evolução clínica da sepse⁽⁶⁾, o que acompanha o aumento na produção de citocinas pró-inflamatórias (interleucina - (IL-) 1β, fator de necrose tumoral - (TNF-) α, e interferon - (IFN-) γ) ou citocinas anti-inflamatórias (interleucina - (IL-) 10, fator de transformação de crescimento - (TGF-) β)^(7-8). Durante a resposta imune, também é observado aumento na produção de espécies reativas de oxigênio, como por exemplo, o Óxido Nítrico (NO)⁽⁹⁾.

A formação do NO ocorre endogenamente a partir do catabolismo da L-arginina, resultando na formação de L-citrulina e NO por meio de reação enzimática da enzima NO sintase (NOS)^(10-11). Dentre as isoformas de NOS produzidas no organismo, o NO induzível (iNOS) é o que participa da resposta imune e pode ser produzido através de estímulos externos, como por exemplo, na presença de lipopolissacarídeo (LPS) e por citocinas pró-inflamatórias^(10-11).

Além do aumento do NO durante os estágios da sepse, o lactato plasmático também pode ser encontrado em concentrações elevadas. Esse aumento pode ser considerado um marcador de hipoperfusão tecidual quando em concentrações >1,0 mmol/L⁽²⁾. A elevação do lactato plasmático resulta da produção de energia por via glicolítica anaeróbia⁽¹²⁾, observada principalmente no choque séptico. Embora estes dois biomarcadores apresentem aumento significativo no percurso da doença, somente o lactato é usado como variável preditora de gravidade na prática clínica.

A termorregulação tem sido amplamente investigada em modelos experimentais de sepse e choque séptico^(13-14), sendo evidenciado que o mesmo agente inflamatório pode induzir tanto a febre quanto a hipotermia⁽¹⁴⁾. Contudo, os mediadores que participam da hipotermia ainda são incompreendidos⁽¹⁵⁾. Acredita-se que o NO possa influenciar no controle da temperatura corporal.

Estudos com animais mostraram efeitos distintos do NO na temperatura, quer seja em situações nas quais são administrados doadores ou inibidores da sua síntese^(16-17). Em um estudo com modelo animal submetido à endotoxemia (quadro análogo à sepse), foi identificado que o NO atua como mediador pirético da febre. O estudo mostrou que a administração farmacológica de inibidores da síntese de NO resultou na diminuição da temperatura corporal durante a resposta febril⁽¹⁶⁾. Em contrapartida, a redução de estados febris também foi observada quando administrado doadores de NO no ventrículo cerebral lateral de coelhos, revelando estímulo na atividade antipirética no sistema nervoso central⁽¹⁷⁾.

Estudos envolvendo a mensuração da produção de NO durante a sepse em humanos são raros, porém, em geral evidenciam um pequeno aumento nessa produção⁽¹⁸⁾. Sugere-se que esse aumento possa estar correlacionado com a diminuição da temperatura corporal em pacientes com choque séptico⁽¹⁹⁾.

No que se refere ao lactato, assim como o NO, a relação entre as concentrações deste marcador fisiopatológico e a temperatura corporal na sepse é pouco discutida na literatura. No contexto clínico, altas concentrações de lactato servem como parâmetro global para identificar comprometimento metabólico em pacientes críticos^(12,20).

Durante a atuação da enfermagem, o controle da temperatura corporal é utilizado como referência sobre as condições fisiopatológicas do paciente. O aumento ou a diminuição da temperatura sinalizam situações que requerem intervenções imediatas, com foco em preservar a homeostasia. Logo, o monitoramento dos sinais vitais permite à equipe de enfermagem a identificação precoce de alterações orgânicas sugestivas de sepse e/ou outras complicações⁽²¹⁾. Neste cenário, o gerenciamento na assistência em saúde, realizado pelo enfermeiro, exige conhecimento sobre as modificações morfofuncionais evidenciadas pelo organismo.

Frente à problemática que envolve os estágios da sepse e suas manifestações clínicas, este estudo teve como objetivo analisar as variações na temperatura corporal e nas concentrações de nitrato e lactato plasmáticos em ratos submetidos ao modelo de sepse experimental. Essa investigação é importante para ampliar a compreensão sobre a participação de biomarcadores na termorregulação.

Método

Estudo experimental realizado com 40 ratos Wistar, com idade de 8 a 12 semanas e massa corporal entre 200 - 300 gramas. Os animais foram mantidos em estantes ventiladas com temperatura ambiente controlada (25°C±2°C). Além disso, foram expostos a regime de luz com ciclo claro-escuro de 12/12 horas e tiveram acesso livre à água e dieta comercial balanceada. Para evitar variações circadianas, todos os experimentos foram iniciados sempre entre 8:00 e 10:00 horas. As etapas experimentais foram conduzidas em conformidade com a Comissão de Ética no Uso Animal da Escola de Enfermagem de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo - USP, Ribeirão Preto, SP, Brasil (protocolo no. 15.737.22.0).

O protocolo experimental adotado neste estudo envolveu a administração endovenosa de solução fisiológica 0,9% (salina) ou diferentes concentrações de LPS de Escherichia coli Sorotipo 0111:B4 (Sigma-Aldrich^®, St. Louis, MO, EUA), os registros da temperatura corporal (°C), e a coleta de sangue para análise do nitrato (µM) e lactato (mmol/L) plasmáticos. Os 40 animais foram distribuídos igualmente em cinco grupos com oito animais cada. Um grupo (controle) recebeu 0,5 mL de solução salina e os demais receberam doses de LPS iguais a 0,5 mg/Kg, 1,5 mg/Kg, 3,0 mg/Kg e 10 mg/Kg, respectivamente.

Para o controle da temperatura corporal, seis dias antes da indução dos modelos experimentais, uma cápsula de datalogger foi inserida dentro da cavidade peritoneal, através de incisão cirúrgica na parede abdominal, sob anestesia geral com cloridrato de xilazina 2% (2 mg/mL) e clodridrato de ketamina 10% (10 mg/mL), administrada em dose única de 0,10 mL para cada 100g de peso animal, por via intraperitoneal (IP).

As cápsulas de dataloggers foram previamente programadas para efetuar os registros da temperatura corporal (°C) em intervalos de 15 minutos por períodos de 24 horas. Após a inserção, o local da incisão foi suturado com fios reabsorvíveis. Ao término da cirurgia, os animais receberam profilaxia com benzilpenicilina (120,000 UI) e estreptomicina (50 mg) e analgesia com flunixinameglumina (2,5 mg/Kg) por via intramuscular (IM) em dose única. O tempo de recuperação pós-cirúrgica correspondeu a cinco dias.

Para administração do LPS ou solução salina por via endovenosa, os ratos foram novamente anestesiados e tiveram a veia jugular canulada conforme técnica descrita na literatura⁽²²⁾. Foram utilizadas cânulas de silástico (Sigma-Aldrich^®) heparinizadas, com comprimento total de 10 cm. Aproximadamente 1,7 cm foram inseridos dentro da veia jugular em direção ao átrio direito. As demais partes da cânula foram posicionadas no dorso do animal com o auxílio de um trocater e fixadas com fios de algodão em blocos com pontos simples.

Imediatamente após a canulação da veia jugular, os animais tiveram a artéria femoral canulada. Uma cânula de polietileno (PE), constituída por um segmento de PE-10 de 4,5 cm de comprimento, conectado a um cateter de PE-50 de 15 cm foi inserida na artéria femoral em direção à aorta abdominal. Ao término, a cânula foi fixada no local e sua extremidade livre exteriorizada, e também fixada no dorso do animal. Esta cânula foi utilizada para coleta das amostras de sangue.

Terminados os procedimentos de canulação de vasos, os animais receberam novamente a mesma profilaxia realizada após a inserção do datalogger e foram alojados na estante ventilada, permanecendo com acesso livre à água e à ração, até o início da indução dos modelos experimentais que ocorreram após 24 horas.

Na sala de experimento, a temperatura ambiente foi mantida em 25±2°C. Incialmente, os animais foram submetidos à adaptação neste local para que ocorresse o equilíbrio térmico do corpo com a temperatura ambiente. Após as seis horas de experimento, os animais foram sacrificados e a cápsula de datalogger retirada da cavidade peritoneal. Tanto a programação quanto a obtenção dos registros da temperatura foram realizadas por meio do software SubCue Analyzer.

Para avaliar as concentrações do nitrato e lactato plasmáticos, foram realizadas coletas de sangue por meio da cânula femoral (0,4 mL) na 0 h (dados basais), na 2^a h, na 4^a h e na 6^a h após a indução dos modelos experimentais. Após a dosagem do lactato, as amostras de sangue foram armazenadas em tubos de polipropileno contendo heparina sódica (1500 UI/tubo), sendo imediatamente colocadas no gelo. A reposição volêmica, referente às alíquotas de sangue retiradas dos animais nos horários descritos, foi realizada na mesma proporção (0,4 mL) com solução fisiológica 0,9%.

A determinação do lactato plasmático foi realizada pelo aparelho portátil ACCUTREND PLUS (Roche^®), com o uso de fitas reagentes específicas (Accusport BM - Lactate). Imediatamente após a coleta do sangue, uma pequena alíquota era colocada sobre a fita reagente e as demais partes armazenadas a -20°C, para posterior dosagem do nitrato plasmático. Com a fita preenchida por sangue, o aparelho permitia identificar uma faixa de valores de 0,8 a 22 mmol/L, com um tempo de medição de 60 segundos.

O nitrato plasmático foi determinando por meio do sistema de Sievers (Instruments Nitric Oxide Analyzer). Após centrifugação do sangue a 5000 rpm por 10 minutos, as amostras de plasma obtidas foram desproteinadas usando-se etanol absoluto frio. Na sequência, essas amostras foram injetadas em um recipiente contendo tricloreto de vanádio (VCI₃), que converte o nitrato em NO. O NO produzido foi detectado por ozônio induzido por quimioluminescência. As concentrações de pico do NO dessas amostras, foram determinadas usando a curva-padrão, estabelecida com soluções de nitrato de sódio de várias concentrações (0; 7,5; 15; 30; 60; 120; 240 µM).

Os dados foram analisados empregando a Análise de Variância Unidirecional (One-Way ANOVA) seguida do pós-teste de Tukey para testar as diferenças entres as médias dos grupos experimentais com 0, 2, 4, e 6 horas após a administração do LPS ou salina. Os valores médios obtidos na 0 hora foram considerados como valores basais. Ainda, o Teste de Correlação de Pearson e/ou o Teste de Correlação de Spearman foi usado para identificar possíveis associações entre as variáveis investigadas e conforme a dose de LPS administrada. Os resultados foram apresentados em gráficos de média e erro padrão da média (EPM). O nível de significância adotado para todos os teste foi de 0,05 (5%).

Resultados

A administração de LPS na concentração de 10 mg/Kg diminuiu significativamente a temperatura corporal dos animais quando comparada aos demais grupos após duas horas de experimento (Figura 1^‡). Na quarta hora, a temperatura dos animais com 0,5, 1,5 e 3,0 mg/Kg de LPS foi maior quando comparada ao grupo salina e 10 mg/Kg, sendo os valores estatisticamente significativos (Figura 1^ǁ). Na sexta hora, nos grupos com LPS não houve diferenças estatísticas. Contudo, a temperatura corporal dos grupos 1,5 e 3,0 mg/Kg de LPS permaneceu estatisticamente superior ao grupo salina (Figura 1^**).

Figura 1
Efeito da administração de diferentes doses de LPS sobre a temperatura corporal

As concentrações de nitrato plasmático foram estatisticamente diferentes nos animais com LPS quando comparados ao grupo salina (Figura 2). Na zero hora (Figura 2^*) os animais com 10 mg/Kg de LPS apresentaram médias superiores aos demais grupos, contudo, as concentrações de nitrato plasmático não ultrapassam 100 µM, diferente dos níveis observados nas demais horas. Após duas horas da administração do LPS, observaram-se diferenças significativas entre os grupos 0,5, 3,0 e 10 mg/Kg - LPS quando comparados ao grupo salina (Figura 2^§). Na quarta hora os grupos com LPS diferiram-se estatisticamente do grupo salina apresentando um aumento expressivo nas concentrações de nitrato chegando a ultrapassar 500 µM (Figura 2^¶). Passadas seis horas após a administração do LPS a diferença significativa com o grupo salina permaneceu, além disso, os grupos com maiores doses de LPS apresentaram concentrações estatisticamente superiores de nitrato plasmático chegando a ultrapassar 900 µM (Figura 2^††).

Figura 2
Efeito da administração de diferentes doses de LPS na concentração de nitrato plasmático

As concentrações de lactato plasmático na zero hora não diferiram entre os grupos experimentais, no entanto, na segunda e na quarta hora ocorreram aumentos expressivos nessas concentrações levando a uma elevação estatisticamente significativa quando comparado LPS versus salina (Figura 3^‡ e 3^ǁ). Após seis horas, diferenças significativas foram observadas somente na comparação dos grupos com maiores doses de LPS, respectivamente 3,0 e 10 mg/Kg, quando comparado ao grupo salina (Figura 3^**).

Figura 3
Efeito da administração de diferentes doses de LPS nas concentrações de lactato plasmático

Na análise de correlação entre as concentrações de nitrato plasmático e a temperatura corporal dos modelos experimentais (Figura 4), não foram encontradas diferenças significativas nos grupos salina e 10 mg/Kg - LPS. Entretanto, houve correlação significativa no grupo 0,5 mg/Kg - LPS; 1,5 mg/Kg - LPS; e 3,0 mg/Kg - LPS. A correlação significativa apresentada na Figura 4 sugere que quanto maior a concentração de nitrato plasmático, maior a temperatura corporal.

Figura 4
Diagrama de dispersión para el análisis de la correlación entre las concentraciones de nitrato en plasma y la temperatura corporal

A correlação entre as concentrações de lactato plasmático e a temperatura corporal dos modelos experimentais (Figura 5) não apresentou diferenças estatísticas nos grupos salina; 0,5 mg/Kg - LPS; 10 mg/Kg - LPS. Porém, os animais que receberam 1,5 mg/Kg - LPS e 3,0 mg/Kg - LPS apresentaram correlação significativa, sendo que, quanto maior a concentração de lactato plasmático, maior o valor da temperatura corporal.

Figura 5
Diagrama de dispersão para análise de correlação entre as concentrações de lactato plasmático e a temperatura corporal

Discussão

Este estudo, mostra pela primeira vez a correlação entre a temperatura corporal e mediadores que participam da fisiopatologia da sepse e do choque séptico (NO e lactato plasmáticos) em animais submetidos à sepse experimental com diferentes doses de LPS. Os animais apresentaram termorregulação ineficaz, acompanhada pelo aumento nas concentrações plasmáticas dos marcadores fisiológicos analisados.

Em humanos, as mudanças na temperatura corporal identificadas na sepse, também estão relacionadas à febre e/ou hipotermia, sendo estes sinais característicos para o rastreamento e diagnóstico da doença⁽²⁾. Sugere-se que a febre seja uma manifestação frequente na sepse. Em contrapartida, a hipotermia é comum no choque séptico, sendo interpretada como uma piora clínica no prognóstico do paciente, aumentando as chances de óbito^(5,23-24).

Embora existam diferentes tentativas de reproduzir a sepse e o choque séptico em modelos animais, é importante interpretar os resultados com cautela, visto que os ratos apresentam respostas distintas das respostas dos humanos⁽²⁴⁾. Nos quadros de infecção, normalmente o homem apresenta febre e em alguns casos pode haver diminuição na temperatura, ao passo que os roedores normalmente apresentam diminuição da temperatura corporal frente a uma infecção significativa^(24-25).

Até o momento, a compreensão sobre a participação do NO na regulação da temperatura corporal leva a interpretações distintas - alguns estudos apontam que a inibição da síntese do NO com o uso de L-NAME (inibidor da síntese de NO) injetado no peritônio preveniu a febre em animais submetidos à administração de LPS⁽²⁶⁾, sugerindo que o NO possa atuar como mediador pirético da febre. Por outro lado, também é demonstrado que o aumento nas concentrações de NO em animais submetidos à endotoxemia resultou em hipotermia⁽²⁷⁾. Além disso, a administração de doadores de NO na região intracerebroventricular reduziu a febre em coelhos⁽¹⁷⁾, sugerindo um efeito antipirético central.

Em estudo com humanos, realizado por pesquisadores do nosso laboratório, observou-se uma correlação entre a queda da temperatura corporal e a elevação das concentrações plasmáticas de NO em situações de choque séptico, que não foi observada durante a sepse⁽¹⁹⁾. No entanto, observamos correlação positiva nos grupos de animais que receberam doses menores de LPS, sendo os valores de temperatura corporal diretamente relacionados às concentrações de NO. Essa diferença entre os grupos de animais que receberam doses distintas pode ser atribuída a uma maior resistência dos animais experimentais ao LPS.

A correlação observada entre as doses de NO e a temperatura corporal na endotoxemia, com doses menores de LPS, pode sugerir a ação do NO, com sua propriedade bactericida⁽²⁸⁾, associado ao aumento da temperatura corporal, como forma de defesa do organismo. Assim, o aumento na temperatura pode estar vinculado à maior atividade do sistema imunológico, com a produção de prostaglandina E2 (PGE2) e consequentemente elevação da temperatura corporal.

Por outro lado, sabendo-se do efeito deletério do NO em altas concentrações, a correlação inversa observada em estudo com humanos⁽¹⁹⁾ durante o choque séptico pode ser um indicativo de falência na capacidade de resposta do organismo, associada ao aumento do estresse oxidativo e consequentemente a hipotermia.

Considerando as respostas distintas entre humanos e animais, os resultados do nosso estudo sugerem que provavelmente a maior concentração de NO em humanos resultaria na diminuição da temperatura corporal, visto que nos animais ocorre efeito oposto. Essa hipótese tem sido investigada em estudos com humanos, sendo confirmada a correlação entre o aumento nas concentrações de nitrato com a diminuição da temperatura corporal no choque séptico⁽¹⁹⁾.

Ressalta-se que a diminuição intensa da temperatura corporal observada no grupo que recebeu maior dose de LPS (10 mg/Kg), acompanhada pelo aumento expressivo nas concentrações de nitrato, mostra que quanto maior a dose administrada menor será a temperatura corporal, confirmando os apontamentos encontrados na literatura⁽²⁹⁾.

O aumento significativo nas concentrações plasmáticas de lactato nos grupos com LPS também foi observado em nosso estudo. Ambos os marcadores da sepse (nitrato e lactato), em conjunto com a avaliação dos sinais vitais, são importantes indicadores sobre a gravidade clínica da sepse em humanos. Ressalta-se que o lactato é utilizado como parâmetro para o diagnóstico do choque séptico⁽³⁰⁾. Por se tratar de um mediador de difícil dosagem no ambiente clínico, frequentemente a avaliação do NO se restringe à pesquisa científica.

Nos estágios da sepse e em situações de endotoxemia, ocorre aumento no metabolismo anaeróbio e na produção de lactato, que por sua vez alteram o funcionamento das células imunes⁽³¹⁾. A elevação nessa produção pode resultar na regulação negativa de enzimas glicolíticas, especificamente a hexoquinase e a fosfofrutoquinase, nas células imunes⁽³²⁾ e em uma variedade de tecidos⁽³³⁾. Assim, considerando a importância da glicólise aeróbia para o funcionamento das células do sistema imunológico em atividade, a regulação negativa dessas enzimas sob influência do lactato implica no comprometimento funcional dessas células⁽⁶⁾.

Estudos recentes mostraram que a diminuição na produção de lactato resultou na melhora da sobrevida de animais^(34-36), ao passo que altas concentrações de lactato em soluções de diálise peritoneal inibiu a maturação de células dendríticas induzida por LPS (10 ng/mL)⁽³⁷⁾. O tratamento com lactato também aumentou a produção de genes associados ao M2 (VEGF e Arg1) e marcadores (Fizz1, Mgl1 e Mgl2)⁽³⁸⁾. O M2 é um fenótipo imunossupressor derivado dos macrófagos encontrado nos estágios tardios da sepse, seu aumento pode resultar em disfunção crítica no sistema imunológico⁽³⁸⁾.

No sistema imune adaptativo, a presença de altas concentrações de lactato no líquido sinovial e nas articulações de pacientes com artrite reumatoide desempenhou um papel de sinalizador para localização de células T no local da inflamação⁽³²⁾. Ao realizar experimentos in vitro, os autores do estudo apontam que o lactato de sódio extracelular e o ácido lático bloqueiam respectivamente a motilidade das células T CD4+ e CD8+⁽³²⁾.

Assim como nos modelos animais, o aumento nas concentrações de lactato na sepse e no choque séptico em humanos é interpretado como um prognóstico ruim. Esse aumento repercute na redução das chances de sobrevida⁽²⁰⁾⁾ e sinaliza disfunções no sistema imunológico^(31-32). Neste contexto, nossos resultados reforçam a importância no monitoramento do lactato em pesquisas experimentais e clínicas, visto que é uma variável fácil de ser mensurada e possibilita compreender seu comportamento na endotoxemia e/ou sepse.

Os dados obtidos em nosso estudo, mostrando a elevação das concentrações de lactato após a administração de LPS, estão de acordo com as evidências da literatura^(13,39). Esse aumento parece ter um efeito imunomodulador levando às alterações na termorregulação. No entanto, é necessária a ampliação de estudos que possam explicar o efeito do lactato na temperatura corporal. Acreditamos que existe potencial para se considerar as avaliações da temperatura corporal, associadas às concentrações de NO e lactato plasmáticos, como forma de se avaliar uma mudança no prognóstico do paciente séptico.

As limitações do presente estudo estão relacionadas à ausência de caracterização no modelo experimental de choque séptico, como forma para analisar os efeitos da endotoxemia sobre a temperatura corporal. A análise da termorregulação em modelo choque séptico experimental poderá refletir de forma mais clara os efeitos do LPS na hipotermia e nas concentrações de nitrato e lactato plasmáticos. Portanto, também sugerimos a avaliação desses biomarcadores em modelos experimentais de choque séptico.

Conclusão

Este estudo mostrou que os animais submetidos à sepse experimental apresentaram termorregulação ineficaz, conforme a dose de LPS administrada. Os animais que receberam doses maiores de LPS apresentaram temperatura significativa menor em relação aos demais grupos endotoxêmicos, que apresentaram aumento na temperatura. Esse comportamento foi acompanhado pelo aumento nas concentrações de NO e lactato plasmáticos. Também foi identificado que a febre esteve correlacionada com altas concentrações de NO e lactato plasmáticos, importantes mediadores fisiopatológicos observados durante a endotoxemia. O estudo traz como implicações para enfermagem a importância no monitoramento da temperatura corporal, em conjunto com a avaliação destes marcadores fisiopatológicos, os quais sugerem um agravamento no prognóstico da sepse.

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  Artigo extraído da tese de doutorado “Influência do óxido nítrico sobre a temperatura corporal em ratos com sepse, sepse grave e choque séptico”, apresentada à Universidade de São Paulo, Escola de Enfermagem de Ribeirão Preto, Centro Colaborador da OPAS/OMS para o Desenvolvimento da Pesquisa em Enfermagem, Ribeirão Preto, SP, Brasil. Apoio Financeiro da Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP), Processo 2016/176819, Brasil.

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Editado por

Editora Associada: Maria Lúcia Zanetti

Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  07 Set 2020
• Data do Fascículo
  2020

Histórico

• Recebido
  06 Maio 2019
• Aceito
  12 Mar 2020