Resumo A síndrome VEXAS (vacúolos, enzima E1, cromossoma X, autoinflamação, mutação somática) foi identificada em 2020 por Beck et al, ao analisar o genoma de 2560 doentes com diferentes tipos de manifestações autoinflamatórias. Fizemos uma revisão da literatura com o objetivo de divulgar a evidência científica existente e aumentar o grau de suspeição clínica da comunidade médica. Atualmente, estão identificadas várias mutações associadas a esta síndrome, originando defeitos na ubiquitinação e ativação do sistema imune inato. Da análise fenotípica dos portadores da mutação, foram encontradas características comuns: sexo masculino, idade superior a 50 anos, citopenias, febre e sintomas constitucionais, podendo estar envolvidos todos os órgãos e sistemas com manifestações e proporções variáveis. A natureza inflamatória e multissistémica desta doença representa uma dificuldade acrescida no seu diagnóstico e tratamento, cursando com elevada morbimortalidade. Atualmente, os tratamentos com maior eficácia demonstrada são corticoterapia, azacitidina, inibidores da JAK-1/2 e inibidores da interleucina-6, parecendo também existir benefício com o transplante autólogo de células estaminais. Tendo em conta a sua identificação recente e baixo número de doentes diagnosticados, a maioria dos estudos disponíveis apresentam limitações relacionadas com a metodologia e curta duração de seguimento, imperando a necessidade de ensaios clínicos prospetivos de modo a definir as melhores estratégias terapêuticas e melhorar o prognóstico destes doentes.

Abstract VEXAS (vacuoles, E1 enzyme, X-linked, autoinflammatory, somatic) syndrome was identified in 2020 by Beck et al, when analyzing the genome of 2560 patients with different types of autoinflammatory manifestations. A literature review was carried out with the aim of disseminating existing scientific evidence and increasing the degree of clinical suspicion of the medical community. Currently, many mutations associated with this syndro-me have been identified, causing defects in the ubiquitylation and activation of the innate immune system. From the phenotypic analyses of the mutation carriers, some common features were found: male, over 50 years old, cytopenias, fever and constitutional symptoms, and all organs and systems with variable manifestations and proportions may be involved. The inflammatory and multi-systemic nature of this disease leads to a diagnostic and treatment challenge, adding to the already existing high morbimortality. Presently, the treatments with greater efficiency are corticosteroid therapy, azacytidine, JAK-1/2 inhibitors and interleukin-6 inhibitors. There are also benefits in autologous stem cell transplants. Given its recent identification and low number of diagnosed patients, most available studies have limitations related to the methodology and short duration of follow-up, prevailing the need for prospective clinical trials in order to define the best therapeutic strategies and to improve these patients’ prognosis.

Resumo A coruja-das-torres americana (Tyto furcata) vive em ambientes urbanos e se alimenta principalmente de pequenos roedores, sendo de grande importância no controle biológico de pragas. O objetivo deste trabalho foi descrever os hábitos alimentares, parentais e reprodutivos de um casal de corujas-das-torres americanas, naturalmente vivendo fora de uma residência na zona urbana do município de Campos dos Goytacazes, estado do Rio de Janeiro, Brasil. Uma caixa de madeira foi instalada em uma parede externa da casa, monitorada por uma câmera de vídeo. Uma planilha foi criada para manter o controle das observações registradas. A fêmea pôs quatro ovos, e após período de incubação de 30-32 dias todos os ovos eclodiram, mas apenas dois filhotes sobreviveram após o canibalismo entre os filhotes. Inicialmente, o macho fornecia a comida aos filhotes e a fêmea permanecia no ninho cuidando da ninhada. Depois de cerca de um mês, a fêmea também começou a sair do ninho e voltar com a presa, que era oferecida aos filhotes, com o macho também continuando com esse comportamento. Os filhotes deixaram o ninho em setembro de 2017. Os dados obtidos mostram a existência de cooperação e divisão de tarefas entre corujas machos e fêmeas durante o período reprodutivo.

Abstract The American Barn Owl (Tyto furcata) lives in urban, periurban and wild environments and feeds mainly on small rodents, meaning it has great importance in the biological control of pests. The aim of this work was to describe the reproductive, parental and eating habits of a pair of American barn owls naturally living outside a residence in the urban area of the municipality of Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro state, Brazil. A wood box was installed on an outside wall of the home, monitored by a video camera. A spreadsheet was created to keep track of the observations recorded. The female laid four eggs, and after an incubation period of 30-32 days all the eggs hatched, but only two chicks survived after cannibalism among the chicks. Initially, the male provided the food to the chicks and the female remained in the nest caring for the brood. After approximately a month, the female also began to leave the nest and return with prey, which was offered to the chicks, with the male also continuing this behavior. The chicks left the nest in September, 2017. The data obtained show the existence of cooperation and division of tasks between male and female owls during the reproductive period.

Resumo Os microRNAs (miRNAs) são reconhecidos como biomarcadores do diabetes mellitus tipo 2 (DM2), úteis para a compreensão do metabolismo da doença, e possuem grande potencial como alvos terapêuticos. O aumento da expressão de BDNF e IGF1 está altamente envolvido nos benefícios as vias de insulina e glicose, porém, são regulados negativamente em condições de resistência à insulina, enquanto seu aumento de expressão está correlacionado com a melhora do metabolismo da glicose e da insulina. Estudos sugerem a regulação desses genes por microRNA em vários contextos diferentes, proporcionando uma nova abordagem de investigação para compreender o metabolismo do DM2 e revelar potenciais alvos terapêuticos. No presente estudo, investigamos em diferentes modelos animais (humanos, ratos e camundongos) miRNAs que têm como alvo BDNF e IGF1 em tecido muscular esquelético com condições fisiológicas de DM2. As análises foram realizadas utilizando ferramentas de bioinformática e bancos de dados para predição de miRNA, homologia molecular, validação experimental de interações, expressão na condição fisiológica estudada e interação em rede. Os resultados mostraram três candidatos a miRNAs para IGF1 (miR-29a, miR-29b e miR-29c) e um para BDNF (miR-206). As avaliações experimentais e a busca pela expressão no músculo esquelético de indivíduos com DM2 confirmaram a interação prevista entre miRNA-mRNA para miR-29b e miR-206 através de modelos humanos, ratos e camundongos. Essa interação foi reafirmada em múltiplas análises de rede. Em conclusão, nossos resultados mostram a relação de regulação entre miR-29b e miR-206 com os genes investigados, em diversos tecidos, sugerindo um padrão de inibição. Contudo, esses dados mostram um grande número de possíveis processos fisiológicos de interação para perspectivas biotecnológicas.

Abstract microRNAs (miRNAs) are recognized as diabetes mellitus type 2 (T2DM) biomarkers useful for disease metabolism comprehension and have great potential as therapeutics targets. BDNF and IGF1 increased expression are highly involved in the benefits of insulin and glucose paths, however, they are down-regulated in insulin resistance conditions, while their expression increase is correlated to the improvement of glucose and insulin metabolism. Studies suggest the microRNA regulation of these genes in several different contexts, providing a novel investigation approach for comprehending T2DM metabolism and revealing potential therapeutic targets. In the present study, we investigate in different animal models (human, rat, and mouse) miRNAs that target BDNF and IGF1 in skeletal muscle tissue with T2DM physiological conditions. Bioinformatics tools and databases were used to miRNA prediction, molecular homology, experimental validation of interactions, expression in the studied physiological condition, and network interaction. The findings showed three miRNAs candidates for IGF1(miR-29a, miR-29b, and miR-29c) and one for BDNF (miR-206). The experimental evaluations and the search for the expression in skeletal muscle from T2DM subjects confirmed the predicted interaction between miRNA-mRNA for miR-29b and miR-206 through human, rat, and mouse models. This interaction was reaffirmed in multiple network analyses. In conclusion, our results show the regulation relationship between miR-29b and miR-206 with the investigated genes, in several tissues, suggesting an inhibition pattern. Nevertheless, these data show a large number of possible interaction physiological processes, for future biotechnological prospects.

ABSTRACT Chrysanthemum (Dendranthema grandiflora) is the second most produced and commercialized ornamental plant in the world. Measuring leaf area through non-destructive methods is fundamental for studies on its growth and production. The estimation of leaf area by linear dimensions of the leaves can be a strategy for this purpose. The objective of this study was to find allometric equations to estimate the leaf area of chrysanthemum. The linear, linear without intercept, quadratic, cubic, power, and exponential regression models were used for the analysis. The choice of equations was based on the highest coefficients of determination. The non-destructive method using allometric models has accuracy for estimating the leaf area (LA) of chrysanthemum from the product between leaf length (L) and leaf width (W). The LA of chrysanthemum can be estimated using the equation ŷ = 0.6611*LW0.9490 (L - leaf length; W - leaf width). This equation will allow researchers and producers to determine leaf area non-destructively.

RESUMO O crisântemo (Dendranthema grandiflora) é a segunda planta ornamental mais produzida e comercializada no mundo. A medição da área foliar por métodos não destrutivos é fundamental para estudos sobre seu crescimento e produção. A estimativa da área foliar por dimensões lineares das folhas pode ser uma estratégia para este fim. O objetivo deste estudo foi encontrar equações alométricas para estimar a área foliar do crisântemo. Os modelos de regressão linear, linear sem intercepto, quadrático, cúbico, potência e exponencial foram utilizados para a análise. A escolha das equações foi baseada nos maiores coeficientes de determinação. O método não destrutivo por meio de modelos alométricos tem acurácia para estimar a área foliar (AF) do crisântemo a partir do produto entre o comprimento da folha (C) e a largura da folha (L). A AF do crisântemo pode ser estimada pela equação ŷ = 0,6611*CL0,9490 (C - comprimento da folha; L - largura da folha). Essa equação permitirá que pesquisadores e produtores determinem a área foliar de forma não destrutiva.

ABSTRACT Papaya cultivation is widespread in Brazil, particularly in the states of Bahia and Espírito Santo, where most commercial plantations are concentrated. Owing to the economic and social importance of papaya, the present study aimed to determine the explanatory variables between the genotypes of two cultivars: Golden (from the Soil group) and Tainung Nº 1 hybrid (from the Formosa group), cultivated under high temperatures and hydric stress. The genotypes containing more desirable agronomic characteristics were identified for use in plant genetic improvement programs. Principal component analysis (PCA) was applied to select the desirable genotypes for Golden and Tainung Nº 1 cultivars based on specific variables analyzed for two groups of variables; for group 1, the plant height, stem diameter, leaf length, leaf width, and leaf number were analyzed, whereas for group 2, the leaf and root dry mass, stem dry mass and fresh mass of 10 discs, fresh mass, and stem and root fresh mass were analyzed. When exposed to hydric and thermal stress, the Tainung Nº 1 cultivar outperformed the Golden cultivar for the evaluation characteristics selected for use in genetic improvement programs.

RESUMO No Brasil, o cultivo do mamão é difundido, principalmente nos estados da Bahia e Espírito Santo, onde se concentra a maior parte dos plantios comerciais. Devido à importância econômica e social do mamão, este estudo teve como objetivo determinar variáveis explicativas entre os genótipos de mamoeiro, cultivados sob altas temperaturas e condições de estresse hídrico, para definir quais contêm características agronômicas mais desejáveis para serem utilizadas em programas de melhoramento genético de plantas. Para isso, a análise de componentes principais foi aplicada para selecionar genótipos desejáveis para as cultivares Golden e Tainung Nº 1, com base em dois grupos de variáveis: grupo 1 - altura da planta, diâmetro do caule, comprimento da folha, largura da folha e número de folhas; e grupo 2 - massa seca da folha, massa seca da raiz, massa seca do caule, massa seca de 10 discos, massa fresca de 10 discos, massa fresca, massa fresca do caule e massa fresca da raiz. A cultivar Tainung Nº 1 do grupo Formosa apresentou vantagens em relação à cultivar Golden, quando submetida a condições de estresse hídrico e térmico para as características de avaliação sendo mais indicada para ser utilizada em programas de melhoramento genético.

ABSTRACT In fruit species, the amount of solar energy absorbed can influence fruit quality; hence, ensuring optimal light distribution management in the canopy of plants is essential. Therefore, the objectives of this study were (i) to analyze the variations in gas exchange through the day and (ii) identify the photosynthetically active photon flux density (PPFD) that promotes higher chlorophyll fluorescence and electron transport rate in jaboticaba seedlings. The experimental design was completely randomized, with treatments consisting of 18 photosynthetic photon flux densities and three evaluations throughout the day. Six replicates were used, with two plants per plot. Gas exchange and chlorophyll a fluorescence in P. peruviana were altered due to fluctuating photosynthetic photon flux density (0; 25; 50; 75; 100; 125; 150; 175; 200; 400; 600; 800; 1,000; 1,200; 1,400; 1,600; 1,800; and 2,000 μmol m-2 s-1) and environmental conditions throughout the day (8:00 a.m., 12:00 and 4:00 p.m.). The higher PPFD (1,384.6 μmol m-2 s-1) and air temperature (39.74 °C) at noon (12:00 p.m.) favored gas exchange in this species. An increase in PPFD of up to 1,000 μmol m-2 s-1 positively influenced the gas exchange and chlorophyll a fluorescence of P. peruviana.

RESUMO Em espécies fruteiras, é essencial considerar o gerenciamento da distribuição da luz nas copas das plantas, pois a quantidade de energia solar absorvida pode influenciar na qualidade dos frutos. Diante disso, os objetivos deste estudo foram: (i) analisar as variações das trocas gasosas ao longo do dia; (ii) identificar a densidade de fluxo de fótons fotossinteticamente ativos (PPFD) que promove maior fluorescência da clorofila e maior taxa de transporte de elétrons em mudas de jaboticaba. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, sendo os tratamentos compostos por 18 densidades de fluxo de fótons fotossinteticamente ativos (0; 25; 50; 75; 100; 125; 150; 175; 200; 400; 600; 800; 1.000; 1.200; 1.400; 1.600; 1.800 e 2.000 μmol m-2 s-1) e três horários de avaliação ao longo do dia (08:00, 12:00 e 16:00 h). Foram utilizadas seis repetições, considerando duas plantas por parcela útil. Trocas gasosas e fluorescência da clorofila a de P. peruviana foram alterados em virtude da PPFD e das condições ambientais ao longo do dia. A alta PPFD (1.384,6 μmol m-2 s-1) e temperatura do ar (39,74 °C) no horário de 12 horas favoreceu as trocas gasosas dessa espécie. O aumento da PPFD até 1.000 µmol m-2 s-1 influenciou positivamente as trocas gasosas e fluorescência da clorofila a de P. peruviana.

RESUMO A área foliar é um parâmetro de fundamental importância para estudos relacionados ao crescimento e fisiologia vegetal. O objetivo do trabalho foi construir equações alométricas que permitam estimar com precisão e rapidez a área foliar do sapotizeiro. Foram coletadas 250 folhas de diferentes formas e tamanhos em árvores matrizes de sapotizeiro localizadas na Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Mossoró-RN, Brazil. Em cada folha, foi mensurado o comprimento, largura, produto entre comprimento e largura (LW), produto entre comprimento e comprimento, produto entre largura e largura, e área foliar. Modelos lineares e não lineares foram utilizados para construção das equações alométricas. As melhores equações foram escolhidas com base nos seguintes critérios: maior coeficiente de determinação, coeficiente de correlação linear de Pearson e índice de concordância de Willmott, e menor critério de informação de Akaike e raiz do quadrado médio do erro. Diante disso, verificou-se que os modelos que utilizaram o produto entre comprimento e largura apresentaram os melhores critérios para estimar a área foliar do sapotizeiro. Buscando reduzir o tempo das análises e maior precisão dos dados, as equações ŷ = 0.664 × LW1.018 e ŷ = 0.713 × LW e utilizando LW são as mais indicadas para estimar a área foliar do sapotizeiro.

ABSTRACT The leaf area is a parameter of fundamental importance in studies on plant growth and physiology. The objective of this study was to build allometric equations for the accurate and fast estimation of sapodilla leaf areas. In total, 250 leaves of different shapes and sizes were collected from sapodilla matrices trees growing at the Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Mossoró-RN, Brazil. For each leaf, the length, width, product of length and width (LW), product of length and length, product of width and width, and leaf area were measured. Linear and nonlinear models were used to construct the allometric equations. The best equations were chosen on the basis of the following criteria: the highest coefficient of determination, Pearson’s linear correlation coefficient, and Willmott’s index of agreement; and the lowest Akaike information criterion and root mean square error. It was verified that the models that used the LW value presented the best criteria for estimating the leaf area. Specifically, the equations ŷ = 0.664 × LW1.018 and ŷ = 0.713 × LW, which use LW values, are the most suitable for estimating the leaf area of sapodilla quickly and accurately.

ABSTRACT Carcass classification consists of grouping animals with similar carcass characteristics. When the groups are defined a priori, as in the case of conformation and finishing scores, the interest is to identify the contribution of each variable used in separating the groups. Therefore, discriminant analysis was used to discriminate Santa Inês animals according to the conformation and carcass finishing scores (score 2 = regular, score 3 = good) and to identify the variables that most contribute to the differentiation. The conformation and carcass finishing scores vary from 1 to 5. This study used scores 2 and 3, considering that the evaluated animals ranged between these two respective scales. The database consisted of information from 122 uncastrated Santa Inês sheep submitted to the confinement regime, of which 24 variables related to the carcass of the animals were recorded. Data were submitted to the Mardia test to verify multivariate normality, followed by the nonparametric k-nearest neighbor (k-NN) test. The stepwise procedure selected a particular subset of variables, and the Mahalanobis Distance (D2) was used to assess the separation of groups (p-value ˂ 0.05). The variables with the highest discriminatory power for the carcass conformation scores were cold carcass weight (CCW), external carcass length (ECL), and neck (NEC), for carcass finishing were live weight at slaughter (LWS), ECL, and thoracic perimeter (TP). The multivariate discriminant analysis proved efficient in allocating the animals in their groups of origin.

RESUMO A classificação da carcaça consiste em agrupar animais com características de carcaça semelhantes. Quando os grupos são definidos a priori, como o caso dos escores de conformação e acabamento, o interesse é identificar a contribuição de cada variável utilizada na separação dos grupos. Diante disso, utilizou-se a análise discriminante para discriminar animais da raça Santa Inês em função dos escores de conformação e acabamento (escore 2 = razoável, escore 3 = boa) e, identificar as variáveis que mais contribuem na diferenciação. Os escores de conformação e acabamento variam numa escala de 1 a 5. Nesse estudo, foram usados escores 2 e 3 considerando que os animais avaliados variaram entre essas duas respectivas escalas. O banco de dados foi composto por 122 informações de ovinos não castrados da raça Santa Inês, submetidos ao regime de confinamento, dos quais foram registradas 24 variáveis relacionadas à carcaça dos animais. Os dados foram submetidos ao teste de Mardia, para verificar a normalidade multivariada, seguido do teste não-paramétrico k-vizinho mais próximo (K-NN). Um subconjunto particular de variáveis foi selecionado pelo procedimento stepwise e a Distância de Mahalanobis (D2) para avaliar a separação dos grupos (p-valor ˂ 0,05). As variáveis com maior poder discriminatório para os escores de conformação de carcaça foram peso de carcaça fria (PCF), comprimento externo da carcaça (CEC) e pescoço (PES), para acabamento de carcaça foram peso vivo ao abate (PVA), CEC e perímetro torácico (PT). A análise discriminante multivariada mostrou-se eficiente para alocar os animais em seus grupos de origem.

Resumo O Brasil é o país mais rico em biodiversidade no mundo, incluindo espécies de mamíferos. No bioma Cerrado, a diversidade de mamíferos é enorme, com cerca de 251 espécies, sendo 32 delas endêmicas e 22 listadas como ameaçadas de extinção. Neste estudo, investigamos a diversidade de espécies de mamíferos de médio e grande porte da RPPN Pontal do Jaburu (RPPN-PJ) e seu entorno, que é uma floresta de inundação localizada em um importante corredor biológico na zona de ecótono Cerrado-Amazonia, uma área prioritária para conservação da biodiversidade no Brasil. Os dados foram coletados por armadilhas fotográficas, busca ativa (noturna e diurna) e identificação de pegadas durante a estação seca (abril - agosto de 2016). Registramos um grande número de espécies de mamíferos (n = 29), sendo a ordem carnívora a mais representativa com 11 espécies. Com relação ao status de ameaça, 34,5% das espécies registradas foram listadas como ameaçadas na lista vermelha do Brasil e 20,7% na lista vermelha da IUCN. Destacamos a alta frequência relativa de registros de espécies ameaçadas como Tapirus terrestris, Panthera onca, Blastocerus dichotomus, Pteronura brasiliensis, Priodontes maximus, bem como a presença da recém descrita espécie de mamífero aquático Inia araguaiaensis. Nós discutimos a importância da RPPN-PJ e seus arredores para a conservação de espécies de mamíferos, onde inclui habitats complexos (áreas de inundação) localizados em uma importante zona de ecótono.. Os resultados reforçam a relevância desta área para a conservação de mamíferos.

Abstract Brazil is the world's richest country in biodiversity, including mammal species. In the Brazilian Cerrado biome, mammalian diversity is vast, with about 251 species, 32 of them are endemic and 22 listed as threatened species. In this work, we investigated species diversity of medium- and large-sized mammals in the private protected area RPPN Pontal do Jaburu (RPPN-PJ) and its surroundings, which is a flooded area located in an important biological corridor in the Cerrado-Amazon ecotone zone, a priority area for biodiversity conservation in Brazil. We used camera-trapping, active search (night and day), and track survey during dry season (Apr – Aug 2016). We recorded 29 mammal species, being the Carnivora order the most representative with 11 species. Regarding threat status, 35.7% of the recorded species were listed as threatened in Brazil and 32.1% worldwide. We highlight the high relative frequency of threatened species records such as Tapirus terrestris, Panthera onca, Blastocerus dichotomus, Pteronura brasiliensis, Priodontes maximus, and other, as well as the presence of the newly described aquatic mammal species Inia araguaiaensis. We stress the importance of RPPN-PJ and its surroundings for mammal conservation, which include complex habitats (wetlands) located in an important ecotone zone.

Abstract In this work, a thermal plasma-based ablation test system was used to evaluate the ablative performance of the EPDM composite. The system produces a high enthalpy plasma jet generated by a plasma (DC) torch, operating at atmospheric pressure using compressed air as working gas, enabling the variation of the thermal flux concerned with the studied EPDM composites. The samples were characterized using Scanning Electron Microscopy (SEM), Energy Dispersive Spectroscopy (EDS), Fourier-Transform Infrared spectroscopy (FTIR), and Thermogravimetric Analysis (TGA) to investigate the morphology, mass-loss rate, the reaction layer (char formation), and chemical changes of the samples for each thermal flux. For a complete evaluation, the thermal fluxes were varied in 0.30, 0.45, 0.60, 0.75, and 0.90 MW/m2 and for each thermal flux, disk-shape samples remained exposed to the plasma jet for 10s. During the plasma jet exposure time, the temperatures of the surface and the back of the samples were collected to verify the formed char layer's insulator capacity and the samples' thermal diffusivity for each experimental condition. The mass loss is continuous under the thermal fluxes of 0.30 and 0.45 MW/m2, stabilizing at 60% until 0.75 MW/m2. The formed char layer begins to lose its protective capacity, evidenced by the size decrease (from 800 µm to 700 µm), due to the ablation process of the reaction layer from the thermal flux of 0.90 MW/m2.

Abstract Bacteria responsible for causing infections are common in hospital environments, water, soil, and food products. The infection risk is intensified by the absence of public sanitation, poor quality of life, and food scarcity. These external factors promote the dissemination of pathogens by direct contamination or biofilm formation. In this work, we identified bacterial isolates obtained from intensive care units in the southern region of Tocantins, Brazil. We compared matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) techniques and 16S ribosomal ribonucleic acid (rRNA) molecular analysis; we also performed phenotypic characterization. Fifty-six isolates characterized using morphotinctorial tests were classified as gram-positive (80.4%; n = 45) and gram-negative (19.6%; n = 11) and were resistant to several antibiotic classes; notably, we identified the blaOXA-23 resistance gene in the ILH10 isolate. Microbial identification using MALDI-TOF MS resulted in the identification of Sphingomonas paucimobilis and Bacillus circulans. 16S rRNA sequencing revealed four isolates belonging to the genera Bacillus and Acinetobacter. The similarity was superior to 99% for Acinetobacter schindleri in the Basic Local Alignment Search Tool (BLAST), grouped in the clade superior to 90%. Several strains isolated from intensive care units (ICU) were resistant to various antibiotic classes. These techniques allowed for the identification of several microorganisms of importance in public health, enabling improvements in human infection control and proving the quality of inputs, food, and water.

Resumo As bactérias responsáveis por causar infecções são comuns em ambientes hospitalares, água, solo e produtos alimentícios. O risco de infecção é intensificado pela ausência de saneamento público, má qualidade de vida e escassez de alimentos. Esses fatores externos promovem a disseminação de patógenos por contaminação direta ou formação de biofilme. Neste trabalho, identificamos isolados bacterianos obtidos de unidades de terapia intensiva na região sul do Tocantins, Brasil. Comparamos técnicas de espectrometria de massa de tempo de voo com ionização por dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-TOF MS) e análise molecular de ácido ribonucleico ribossômico 16S (rRNA); também realizamos caracterização fenotípica. Cinquenta e seis isolados caracterizados por testes morfotintoriais foram classificados como gram-positivos (80,3%; n = 45) e gram-negativos (19,6%; n = 11) e foram resistentes a várias classes de antibióticos; notavelmente, identificamos o gene de resistência blaOXA-23 no isolado de ILH10. A identificação microbiana usando MALDI-TOF MS resultou na identificação de Sphingomonas paucimobilis e Bacillus circulans. O sequenciamento do 16S rRNA revelou quatro isolados pertencentes aos gêneros Bacillus e Acinetobacter. A similaridade foi superior a 99% para Acinetobacter schindleri no BLAST, agrupado no clado superior a 90%. Várias cepas isoladas de ICU foram resistentes a várias classes de antibióticos. Essas técnicas permitiram a identificação de diversos microrganismos de importância em saúde pública, possibilitando melhorias no controle de infecções humanas e comprovando a qualidade dos insumos, alimentos e água.

Abstract The isolation of multidrug-resistant Klebsiella pneumoniae in hospitals is a major public health threat, increasing patient hospitalization costs, morbidity and mortality. Therefore, this work investigated the resistance mechanisms that produced different carbapenems susceptibility profiles in two isogenic strains of K. pneumoniae isolated from the same patient in a public hospital in Recife, Pernambuco. The genes that encode the main porins in K. pneumoniae, ompK35 and ompK36, and several beta-lactamase genes were analyzed. The expression of these genes was evaluated by quantitative real time PCR (polymerase chain reaction) with reverse transcriptase (RT-qPCR). SDS-PAGE (sodium dodecyl sulphate–polyacrylamide gel electrophoresis) was performed to analyze the outer membrane proteins. The analysis of the ompK36 genetic environment disclosed an IS903 insertion sequence disrupting this gene in the ertapenem resistant isolate (KPN133). The blaKPC-2 gene showed down-regulated expression in both isolates. Our findings show that changes in porins, especially OmpK36, are more determinant to carbapenems susceptibility profile of bacterial isolates than variations in blaKPC gene expression.

Resumo O isolamento de Klebsiella pneumoniae multirresistente em hospitais é uma grande ameaça à saúde pública, aumentando os custos de internação, morbidade e mortalidade dos pacientes. Portanto, este trabalho investigou os mecanismos de resistência que produziram diferentes perfis de suscetibilidade aos carbapenêmicos em duas cepas isogênicas de K. pneumoniae isoladas do mesmo paciente em um hospital público em Recife, Pernambuco. Foram analisados os genes que codificam as principais porinas em K. pneumoniae, ompK35 e ompK36, e diversos genes de beta-lactamases. A expressão desses genes foi avaliada por PCR (reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real) com transcriptase reversa (RT-qPCR). SDS-PAGE (dodecil sulfato de sódio-poliacrilamida gel eletroforese) foi realizada para analisar as proteínas da membrana externa. A análise do ambiente genético ompK36 revelou uma sequência de inserção IS903 interrompendo este gene no isolado resistente ao ertapenem (KPN133). O gene blaKPC-2 apresentou expressão negativamente regulada em ambos os isolados. Nossos achados mostram que alterações nas porinas, especialmente OmpK36, são mais determinantes no perfil de suscetibilidade aos carbapenêmicos de isolados bacterianos do que variações na expressão do gene blaKPC.

ABSTRACT: The present study investigated Salmonella spp. in the feces of 200 foals up to one year of age (100 with clinical signs of diarrhea and 100 without clinical signs of diarrhea). Bacteriological culture, serotyping, antimicrobial susceptibility, and real-time PCR (qPCR SYBR® Green or a TaqMan®) for detecting the invA gene (with and without a selective pre-enrichment step in tetrathionate broth) were performed. Bacterial culture revealed 15% (n=30) of positive animals (21 animals with diarrhea and nine without diarrhea). Among the 30 isolates, 13 different serovars were identified: S. Infantis, S. Minnesota, S. I.4,5,12:i:-; S. Anatum, S. Cerro, S. Oranienburg, S. Braenderup, S. Give, S. Newport, S. IIIb 61:c:z35, S. 109:-:1.5, S. I.4.12:d:-, S. I.6.8:-:-. Multidrug resistance was found in 43.33% (n=13) of the isolates, with one isolate obtained from animals without diarrhea and 12 isolates from animals with diarrhea. All qPCR techniques used in the study classified more samples as positive for Salmonella spp. than the bacterial culture of feces. In addition, all qPCR techniques detected more positive animals in the diarrhea group than in the diarrhea-free group. The results confirm the utility of the qPCR method without the pre-enrichment step in tetrathionate as a rapid test for Salmonella spp. in carrier animals. In animals with clinical signs of diarrhea, it can be combined with bacterial culture (antimicrobial susceptibility testing and serotyping). The isolation of Salmonella spp. in nine animals without diarrhea confirms the importance of asymptomatic carrier animals in the epidemiology of the disease. The multidrug resistance observed highlights the importance of rational antimicrobial use in horses and adopting biosecurity protocols that are efficacious in controlling the spread of infections between animals and zoonotic transmission in farms.

RESUMO: O presente estudo investigou a ocorrência de Salmonella spp. em fezes de 200 potros com até um ano de idade (100 com sinais clínicos de diarreia e 100 sem sinais clínicos de diarreia), utilizando as técnicas de cultivo bacteriológico e PCR em tempo real (qPCR) pelos métodos de corante fluorescente (SYBR® Green) e sonda específica (Taqman®) para a detecção do gene invA com e sem etapa de pré-enriquecimento seletivo em caldo de tetrationato. O cultivo bacteriológico revelou 15% (n=30) de animais positivos (21 animais com diarreia e nove animais sem diarreia). Dentre esses 30 isolados, 13 sorovares diferentes foram identificados: S. Infantis, S. Minnesota, S. I.4,5,12:i:-; S. Anatum, S. Cerro, S. Oranienburg, S. Braenderup, S. Give, S. Newport, S. IIIb 61:c:z35, S. 109:-:1.5, S. I.4.12:d:-, S. I.6.8:-:-. Multirresistência foi constatada em 43,33% (n=13) dos isolados, sendo um isolado obtido de animal sem diarreia e 12 isolados de animais com diarreia. Todas as técnicas de qPCR empregadas no estudo apresentaram maior número de amostras classificadas como positivas para Salmonella spp. comparadas ao cultivo bacteriológico de fezes. Adicionalmente, em todas as técnicas de qPCR houve maior número de animais detectados como positivos no grupo de animais com diarreia em relação aos animais sem diarreia. Os resultados confirmaram a utilidade do método qPCR sem a etapa de pré-enriquecimento em tetrationato, como um teste rápido para detecção de Salmonella spp. em animais portadores ou em animais com sinais clínicos de diarreia. O cultivo bacteriológico deve ser associado para a realização do teste de sensibilidade aos antimicrobianos e sorotipificação. O isolamento de Salmonella spp. em nove animais sem diarreia, confirma a importância dos animais portadores assintomáticos na epidemiologia da doença. A multirresistência observada evidencia a importância do uso racional de antimicrobianos em equinos e a importância da adoção de protocolos de biossegurança que sejam eficazes para controlar a disseminação de infecções entre animais e a transmissão zoonótica nas fazendas.

ABSTRACT: Porcine enzootic pneumonia (PES), mainly caused by the bacteria Mycoplasma hyopneumoniae, is the main cause of respiratory problems in pigs. Infection by M. hyopneumoniae leads to production losses and the predisposition of affected animals to secondary infections, which may result in the condemnation of carcasses and organs due to lung lesions at the time of slaughter. The objective of the research was to evaluate the infection by M. hyopneumoniae in pigs submitted to slaughter in São Luís Island/MA, using molecular and histopathological diagnostic methods. One hundred fifty lung samples were collected from inspected (n=65) and non-inspected (n=85) slaughter pigs on São Luís Island, Maranhão, from July 2019 to August 2021. Of the 150 DNA samples collected, 121 showed an amplified product for Cyt B in the PCR assay. Thus, 121 samples were submitted to qPCR of M. hyopneumoniae, of which 44 (36.36%) showed positive results. The mean amount of bacterial load ranged from 1.20 × 101 to 7.20 × 104, with a mean of 1.73 × 104 copies. Of the reagent samples, 81.81% (36 samples) were obtained from non-inspected slaughter, while 18.18% (8 samples) were obtained from slaughterhouses. In the histopathological analysis, 44 positive qPCR samples were evaluated, of which 28 (63.63%) presented results compatible with the main inflammatory process associated with the presence of M. hyopneumoniae, that is, bronchial-associated lymphoid tissue hyperplasia (BALT). Three samples that showed the highest bacterial load (qPCR: 5.63 × 10³, 2.19 × 104 and 7.23 × 104) showed more evident lesions in this study. The microscopic findings associated with the quantifications indicated a relationship between the amount of bacterial load and the presence of microscopic lesions; higher bacterial load in lung tissue is associated with increased histopathologic staining for BALT hyperplasia. In conclusion, the results point to the circulation of the etiological agent in the sampled animals and the need for preventive measures on pig farms in Maranhão with the involvement of producers, sanitary defense and inspection agencies.

RESUMO: A pneumonia enzoótica suína (PES), causada principalmente pela bactéria Mycoplasma hyopneumoniae, é a principal causa de problemas respiratórios em suínos. A infecção por M. hyopneumoniae leva a perdas produtivas e a predisposição dos animais acometidos a infecções secundárias, o que pode resultar em condenação de carcaças e órgãos por lesões pulmonares no momento do abate. O objetivo da pesquisa foi avaliar a infecção por M. hyopneumoniae em suínos submetidos ao abate na Ilha de São Luís, por meio de métodos diagnósticos moleculares e histopatológicos. Para isso, foram coletadas 150 amostras de pulmão de suínos de abate inspecionado (n=65) e não inspecionado (n=85) na Ilha de São Luís/Maranhão, no período de julho de 2019 a agosto de 2021. Das 150 amostras de DNA coletadas, 121 apresentaram produto amplificado para Cyt B no ensaio de PCR. Assim, 121 amostras foram submetidas à qPCR de M. hyopneumoniae, das quais 44 (36,36%) apresentaram resultados positivos. A quantidade média de carga bacteriana variou de 1,20 × 101 a 7,20 × 104, com média de 1,73 × 104 cópias. Das amostras reagentes, 81,81% (36 amostras) foram obtidas de abate não inspecionado, enquanto 18,18% (8 amostras) foram obtidas em abatedouro. Na análise histopatológica, foram avaliadas 44 amostras positivas para qPCR, das quais 28 (63,63%) apresentaram resultados compatíveis com o principal processo inflamatório associado à presença de M. hyopneumoniae, ou seja, hiperplasia do tecido linfóide associado ao brônquio (BALT). Três amostras que apresentaram maior carga bacteriana (qPCR: 5,63 × 10³, 2,19 × 104 e 7,23 × 104) foram mais evidentes neste estudo. Os achados microscópicos associados às quantificações indicaram uma relação entre a quantidade de carga bacteriana e a presença de lesão microscópica; a maior carga bacteriana no tecido pulmonar está associada a maior alteração histopatológica para hiperplasia BALT. Em conclusão, os resultados obtidos sinalizam para a circulação do agente etiológico nos animais amostrados e a necessidade de medidas preventivas nas criações de suínos do estado do Maranhão com envolvimento dos produtores, órgãos de defesa sanitária e inspeção.