Microbiota indígena do meato acústico externo de gatos hígidos

Normal microflora of the ear canal in healthy cats

MICROBIOTA INDÍGENA DO MEATO ACÚSTICO EXTERNO DE GATOS HÍGIDOS

NORMAL MICROFLORA OF THE EAR CANAL IN HEALTHY CATS

Ricardo Coutinho do Amaral¹ José Fernando Ibañez² Elsa Masae Mamizuka³ Walderez Gambale⁴ Claudete Rodrigues de Paula⁵ Carlos Eduardo Larsson⁶

RESUMO

Cinqüenta felinos hígidos, adultos - vinte e seis machos e vinte e quatro fêmeas - sem definição racial, com distintas idades, reunidos em dois grupos (GRUPO 1- animais domiciliados e GRUPO 2 - animais que rendados) de vinte e cinco animais cada. Após anamnese e prévia sedação, os gatos foram submetidos a exame físico e à otoscopia, comprovando-se a ausência de lesões meatais e timpânicas, com cureta de Buck e wragatoas estéreis, foi colhido material meatal, que foi então submetido a exames bacteriológico e micológico. No Grupo 1, foi evidenciado presença de Otodectes cynotis (4% das amostras), em 72% dos casos de bolores e leveduras (Cladosporium sp 66,6%, Malassezia sp 40%, Penicillium sp 33%, Aspergillus sp 33,3%, Rhodotorula sp 20,0%, Mycelia sp 13,3% e Alternaria sp, Aureobasidium sp, Ryzopus sp, Trichosporon sp, todos com 6,6%) e, finalmente, em 64% da amostragem, bactérias dos gêneros Staphylococcus spp (81,2%), Pseudomonas sp (12,5%), Klebsiella sp (12,5%), Acinetobacter sp, Bacilos difteróides, Enterobacter sp, Lactobacillus spp (todos com 6,2%). No Grupo 2, o Otodectes sp foi identificado em 36% das amostras, em 96% daquelas isolaram-se fungos dos gêneros: Malassezia sp - 54,1%, Aspergillus e Penicillium sp, ambos com 33,3%, Microsporum sp - 29,1%, Cladosporium sp - 16,6%, Trichoderma sp - 12,5%, Alternaria e Phoma sp, ambos com 8,3% e Epicoccum sp, Neurospora sp. Mycelia sp, Rhodotorula sp, todos com 4,1% e, por fim, em 20 das 25 amostras (80%) isolaram-se pelo menos uma cepa bacteriana (Staphylococcus spp 75%, Klebsiella sp 20,8%, Bacilos difteróides 12,5%, Pseudomonas sp, 8,3%) e Acinetobacter sp, Enterobacter sp e Escherichia sp, todos com 4,1% cada um em cultivo monoespecífico ou em associação.

Palavras-chave: microbiota, orelha, gatos, felinos.

SUMMARY

The study aimed to find out the frequency of microrganisms in the external ear canal in healthy cats. Fifty adult male (26) and female (24) short hair cats were utilized for the purpose, and they were divided according to living enviroment (Group l - indoor and Group 2 - outdoor). All animals were submitted to sedation prior to physical and otoscopic examinations in order to confirm to be healthy. Samples were obtained from ear canal by use of Buck curetes and sterile cotton sticks for microbiological investigation. In cats of Group 1, Otodects cynotis were observed in 4%. In 72% of the animals yeasts and molds were found (Cladosporium sp 66.6%, Malassezia sp 40%, Penicillium sp 33%, Aspergillus sp 33.3%, Rhodotorula sp 20%, Mycelia sp 13.3%, and 6.6% for Alternaria sp, Aureobasidium sp, Ryzopus sp and Trichosporon sp), finally, m 64% of the samples, was detected Staphylococcus spp (81.2%), Pseudomonas sp (12.5%), Klebsiella sp (12.5%), and 6,2% for Acinetobacter sp. Bacilos difteroides, Enterobacter sp, Lactobacillus spp. In Group 2, O. cynotis was isolated in 36% of cats, and in 96% of the animals wasfound Malassezia sp (54.1%), Aspergillus sp (33.3%), Penicillium (33.3%), Microsporum sp (29.1%), Cladosporium sp (16.6%), Trichoderma sp (12.5%) Alternaria sp (8.3%), Phoma sp (8.3%), Epicoccum sp (4.1%), Neurospora sp (4.1%), Mycelia sp (4.3%), Rhodotorula sp (4.1%). In 20 out of 25 (80%), at least one bacterial microrganism was isolated (Staphylococcus sp 75%, Klebsiela sp 20.8%, Bacilos difteroides 12.5%, Pseudomonas sp 8.3%, and 4.1% for Acynetobacter sp, Enterobacter and Escherichia sp).

Key words: microflora, ear, cat, feline.

INTRODUÇÃO

Os quadros de otopatias em carnívoros domésticos são considerados um dos achados mais comuns na clínica de pequenos animais (LARSSON, 1988; USHIDA et al., 1990a; USHIDA et al., 1990b), entretanto, há vários anos, pesquisadores como BAXTER & LAWLER (1972), DICKSON & LOVE (1983), HIGGINS & GOTTSCHALK (1991) e CARLOTTI (1991), têm se dedicado a levantar dados relativos à prevalência dos agentes mais comumente encontrados no meato acústico externo de animais portadores de otopatias; porém, poucos foram até hoje os relatos sobre o que se encontra em termos de microbiota nos meatos acústicos externos de gatos assintomáticos.

Nos trabalhos inerentes ao estudo de otopatias, ou autores que se detiveram no assunto tiveram a oportunidade de isolar distintas formas bacterianas, fúngicas e acarianas, assim sendo, no que diz respeito aos agentes bacterianos, DEVRISE et al. (1984), apontam em seu trabalho como gênero mais freqüente o Staphylococcus (60%), enquanto que outros pesquisadores, como BAXTER & LAWLER (1972), relatam a presença de Staphylococcus aureus em 54% dos animais por eles examinados.

Nas otites micóticas, pode-se verificar que os fungos mais comumente encontrados são o Tricophyton mentagrophytes, Microsporum gypseum, Tricophyton rubrum, Microsporum canis e Candida albicans (ROSE, 1976), porém, estes dados foram contestados anos mais tarde, quando não se constatou a presença de Microsporum canis em nenhum dos animais, numa amostragem de 172 gatos (MORIELLO & De BOER, 1991).

Ao se adrentrar no campo das leveduras parece haver um consenso entre os poucos autores que se dedicaram ao assunto, porém todos são unânimes em afirmar a presença de Malassezia pachidermatis tanto em animais sadios como naqueles portadores de otites, com uma prevalência variando de 0,2% (BAXTER & LAWLER, 1972) a 8% (HAJSIG et al., 1990) dos casos.

Ácaros do gênero Otodectes cynotis também parecem ser um achado freqüente nos meatos acústicos externos de animais doentes e sadios (CHANDLER et al., 1988). Autores, como CARLOTTI (1991), chegam a sugerir que tais ácaros sejam os responsáveis por até 50% dos casos de otite em gatos, porém, TACAL & SISON, 1969, observaram a presença de Otodectes cynotis em apenas 7,6% dos animais por eles examinados.

Até o presente, poucos foram os autores que se dedicaram ao estudo da microbiota indígena do meato acústico externo de gatos hígidos, porém, nos poucos relatos encontrados, é citada a presença de várias bactérias do gênero Staphylococcus (CARLOTTI, 1991). USHIDA et al., em 1990a, descreveram a presença de Staphylococcus hycus, subespécie cromógenes, em 74% dos isolamentos por ele realizados.e a ausência de fungos ou bactérias em 38% de suas tentativas de isolamentos.

É fato comprovado que patologias óticas, como de outros sistemas, podem se instalar a partir de um desequilíbrio de algum agente da microbiota natural em relação aos outros, proliferando-se em demasia (TACAL & SISON, 1969; LARSSON, 1988; USHIDA et al., 1990a,b).

Decidiu-se, assim, pelo presente, verificar se os agentes mais freqüentemente encontrados nos meatos acústicos externos de animais sadios se assemelham àqueles encontrados por outros pesquisadores, bem como se estes agentes se enquadram nesta hipótese, participando do rol daqueles encontrados por alguns autores em meatos de animais portadores de otites.

MATERIAIS E MÉTODOS

Foram utilizados 50 animais domiciliados, querenciados e hígidos da espécie felina, divididos em dois grupos de 25 gatos cada, sem raça definida, todos adultos, com idade variando de 02 a 16 anos. O primeiro grupo constituiu-se de gatos que costumam permanecer numa mesma propriedade, sob os cuidados do proprietário. Os animais deste grupo foram obtidos junto ao Hospital Veterinário da Faculdade de Medicina e Veterinária da Universidade de São Paulo e junto a pessoas que possuíam gatos nestas condições e que se dispuseram a cedê-los para colheita de material. Neste grupo foram incluídos 15 fêmeas e 10 machos, com idade variando de 02 a 16 anos, considerados hígidos após anamnese e exame clínico.

Em um segundo grupo, incluíram-se animais que deambulam pelas ruas, sem residência fixa, sem cuidados específicos por parte de alguém, e que freqüentam um determinado local apenas para receber alimentação. Os gatos constituintes deste grupo proveram daqueles mantidos pela Comissão de Manutenção de Gatos do Conjunto Residencial da Universidade de São Paulo e daqueles, gentilmente, trazidos por indivíduos que habitualmente alimentam agrupamento de gatos que buscam arraçoamento em um determinado local (praças públicas, etc.).

A coleta do material era realizada em ambas as orelhas, o cerumem destinava-se a exame parasitológico, sendo que o material destinado ao cultivo micológico era enviado nas zaragatoas, mantidas em solução salina estéril, ao setor de micologia do Departamento de Microbiologia e Imunologia do Instituto de Ciências Biomédica da Universidade de São Paulo, onde era semeado em placas contendo ágar Sabouraud e em Mycosel, incubados a 25°C, durante 21 dias, para as tentativas de isolamento de bolores. O isolamento de leveduras era executado a partir de material semeado em tubos contendo ágar Sabouraud, incubados a 37°C durante três semanas.

A identificação dos bolores e das leveduras era executada a partir das características morfométricas, segundo RAPER & FEWELL (1965), ARX (1970), LODDER (1970), REBEL & TAPLIN (1970), BARRON (1971), ROSE (1976), Mc GINNIS (1980) e KREGER-VON (1984), enquanto que o cerumem destinado ao cultivo bacteriano era transportado, utilizando-se das zaragatoas embebidas em caldo Stuart, ao Laboratório de Análises Clínicas da Faculdade de Ciências Farmacêuticas da Universidade de São Paulo, sendo semeado em ágares Mc Conkey, Chocolate e Sangue e incubados à 25°C. A identificação das bactérias era realizada semeando o preconizado por HOLT & KRIEG (1981), EDWARDS & EWING (1986) e BALLOWS et al., (1991).

Finalmente, as amostras de cerumem que se destinavam ao exame parasitológico eram, imediatamente após a colheita, depositadas em lâminas, adicionando-se solução de potássio a 10%, visando à clarificação do material, recobertas por lamínula e submetidas a exame microscópico (100 e 400 aumentos), para a evidenciação e identificação de ácaros porventura existentes.

RESULTADOS

No grupo l (animais domiciliados), em apenas um (4%) dos 25 gatos deste grupo, pôde-se evidenciar a presença de ácaros da espécie Otodectes cynotes, enquanto que no isolamento de agentes fúngicos, identificou-se em 18 (72%) amostras o crescimento de bolores ou leveduras de distintos gêneros fúngicos (Tabela 1) e, relativamente ao isolamento de bactérias, verificou-se que em 16 (64%) das 25 amostras houve o crescimento de pelo menos uma espécie, englobando 10 gêneros bacterianos distintos (Tabela 2).

No grupo 2, constituído por 25 gatos querenciados, pôde-se evidenciar a presença de ácaros em 9 (36%) amostras, todas da família Sarcoptidae, gênero Otodectes, espécie Otodectes cynotis, muito embora que, em 24 (96%) das amostras, pôde-se identificar doze espécies fúngicas, tanto isoladamente como em associação de distintos gêneros de bolores e de leveduras (Tabela 1). Relativamente ao isolamento de cepas bacterianas, evidenciou-se o crescimento em 20 (80%) das amostras de pelo menos uma cepa bacteriana.

DISCUSSÃO

Ambos os grupos de animais domiciliados ou querenciados, a despeito de não apresentarem qualquer manifestação lesional típica de otopatia, pelo exame físico e pela otoscopia, apresentavam com diferentes magnitudes de percentual, crescimento de bolores ou leveduras (Grupo l - 71% e Grupo 2 - 96%), de bactérias (64% e 80%) e a presença de ácaros (4% e 36%), caracterizando a proliferação em condições de higidez da chamada microbiota fúngica e parasitária, saprobia. A despeito das diferenças de percentuais de positividade, verificou-se a semelhança do detectado em espécimes caninos no Brasil (LARSSON, 1988).

Os felinos podem se comportar como portadores sãos de Otodectes cynotis (JOSHUA, 1980), já que 4% de gatos domiciliados e 36% daqueles querenciados carreiam este ácaro patogênico, em potencial, sem manifestarem sinais e sem lesões evidentes, representando, portanto, fontes de infecção para contactantes humanos e animais. A diferença observada, na positividade do achado deste ácaro, em ambos os Grupos, provavelmente retrata as condições de vida, de manejo, de cuidados médico veterinários, etc., a que os animais dos dois grupos são submetidos.

Ao se analisar os resultados de cultivos positivos quanto ao crescimento fúngico, evidencia-se diferenças na magnitude percentual entre os 2 grupos, principalmente no que tange aos gêneros Cladosporium, muito mais freqüente entre os gatos domiciliados (66,5%), Malassezia mais incidente em gatos querenciados (54,1%) e Microsporum isolado apenas (30%) de gatos querenciados. O crescimento de Microsporum canis a partir de material colhido de meatos acústicos externos a despeito de já ter sido relatado (ROSE, 1976), não havia sido ainda descrito na bibliografia médico-veterinária brasileira especializada, quer em levantamentos de microbiota fúngica de animais hígidos, como de cães ou gatos acometidos por otites externas micóticas, já que a levedura anascosporada Malassezia pachydermatis sempre predomina como principal agente fúngico em orelhas sadias ou doentes (LARSSON, 1988).

A presença de Microsporum canis em animais hígidos tem sido relatada, tanto no Brasil como em outros países, a partir do isolamento desta espécie do manto piloso. Em São Paulo, pesquisadores, GAMBALE et al.,. (1993), descreveram que 25% dos 100 gatos examinados, sem lesões tegumentares, carregavam o Microsporum canis. Portanto, os 29% de isolamento ora obtidos, a partir do material meatal de gatos querenciados, permitem configurar tais animais como reservatórios do gênero Microsporum e como fontes de infecção para susceptíveis humanos e animais, enquanto que os gêneros Penicillium e Aspergillus foram isolados em idênticos percentuais (33%) em ambos os grupos.

Quanto aos cultivos bacterianos positivos, verificou-se o crescimento de 16 espécies bacterianas distintas. Considerando os dois grupos de animais, a espécie mais presente foi o Staphylococcus hycus, que, aliás, ao lado das espécies Staphylococcus aureus e Staphylococcus intermedius, é um dos principais agentes bacterianos identificados no tegumento de cães sadios ou acometidos por piodermites (SCOTT et al., 1995). O gênero Staphylococcus é habitualmente isolado de animais, mormente cães, com otites externas bacterianas. Portanto, o achado deste gênero em meatos ditos sadios, retrata a possibilidade de assestamento de otites externas em animais que tiveram a queda da higidez ótica por outras doenças de base. Já a espécie Staphylococcus aureus foi isolada apenas de dois felinos (4%) dentre os 50 ora examinados, contrastando com trabalhos como o de BAXTER & LAWLER (1972).

A despeito de inexistir citação de associação Staphylococcus-Malassezia desencadeando otite externa em gatos, como é usual entre os cães otopatas, os percentuais ora obtidos permitem a pressuposição da ocorrência deste tipo de otite face à magnitude dos isolamentos. Todavia, é mister que se ressalte que a levedura Malassezia pachydermatis somente tem sido incriminada como causadora de dermatites entre os gatos, a exemplo da acne felina e de quadros eritematosos (MASON, 1993).

² Bolsista de Aprimoramento, FUNDAP, Nível II.

³ Professora Doutora, Departamento de Análises Clínicas e Toxicológicas, Faculdade de Ciências Farmacêuticas, USP.

⁴ Professor Doutor, Departamento de Microbiologia, Instituto de Ciências Biomédicas, USP.

⁵ Professora Doutora, Departamento de Microbiologia, Instituto de Ciências Biomédicas, USP.

⁶ Professor Associado, Departamento de Clínica Médica, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia da USP.

Recebido para publicação em 24.09.97. Aprovado em 04.03.98

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  09 Out 2007
• Data do Fascículo
  Set 1998

Histórico

• Aceito
  04 Mar 1998
• Recebido
  24 Set 1997