Establishment of a semi-selective method for the detection of Sclerotinia sclerotiorum in dry bean and soybean seeds

Estabelecimento de um método semi-seletivo para detecção de Sclerotinia sclerotiorum em sementes de feijão e soja

Abstracts

The objective in this work was to improve the existing methodology for the detection of Sclerotinia sclerotiorum in dry bean and soybean seeds through the use of water restrictors in place of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, in PDA substrate containing bromophenol blue and antibiotics (Neon-S). Firstly, the effects of the water restrictors mannitol, sodium chloride, and polyethyleneglycol (PEG6000) at different osmotic potentials were evaluated on the mycelial growth of S. sclerotiorum isolates and on the radicle protrusion of seeds of the species studied. The use of water restrictors with osmotic potentials of up to -0.5 MPa for PEG and -1.0 MPa for mannitol and sodium chloride did not affect the mycelial growth of the isolates tested, and proved to be satisfactory to inhibit the radicle protrusion of the seeds tested. In the second stage of this work, alternating light and continuous darkness were tested in the detection of fungus in the seeds of both species by the modified Neon method. The methodology composed by solid medium PDA, bromophenol blue (100 ppm), chloramphenicol (50 ppm) and water restrictor mannitol (-1.0 MPa) at a temperature of 20 °C with incubation in darkness, proved to be effective and reliable in the detection of that pathogen in routine analysis laboratory.

seed pathology; seed health tests; white mold; Phaseolus vulgaris; Glycine max

O objetivo neste trabalho foi definir uma metodologia de detecção de Sclerotinia sclerotiorum em sementes de feijão e soja por meio da utilização de restritores hídricos, em substituição ao uso de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, em substrato agar sólido contendo azul de bromofenol e antibióticos (Neon-S). Primeiramente, foram avaliados os efeitos dos restritores hídricos manitol, cloreto de sódio e polietilenoglicol, em diferentes potenciais osmóticos, no crescimento micelial de isolados de Sclerotinia sclerotiorum e na protrusão das radículas das sementes em estudo. O emprego de restritores hídricos com potenciais osmóticos acima de -0.5 MPa para PEG e de -1.0 MPa para manitol e cloreto de sódio não afetou o crescimento micelial dos isolados testados e proporcionou inibição satisfatória da protrusão radicular das sementes em estudo. Na segunda etapa deste trabalho, os regimes alternância de luz e escuro contínuo foram testados na detecção do referido fungo nas sementes em estudo. A metodologia de detecção semi seletiva de S. sclerotiorum com substrato BDA, azul de bromofenol (100ppm), cloranfenicol (50 ppm) e o restritor hídrico manitol (-1.0 MPa), sob temperatura de 20 °C, incubação na ausência de luz, revelou-se mais eficaz e seguro para a detecção do referido patógeno em análises de sanidade de rotina.

patologia de sementes; teste de sanidade; mofo branco; Phaseolus vulgaris; Glycine max

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Publication Dates

• Publication in this collection
  20 Jan 2014
• Date of issue
  2013

History

• Received
  12 Apr 2012
• Accepted
  08 Jan 2013