Immunoperoxidase for the detection for the detection of antibodies in cerebrospinal fluid in neurocysticercosis: use of Cysticercus cellulosae and Cysticercus longicollis particles fixed on microscopy slides

Imunoperoxidase para detecção de anticorpos em líquido cefalorraquiano na neurocisticercose: emprego de partículas de Cysticercus cellulosae e Cysticercus longicollis fixadas a lâminas de microscopia

PARASITOLOGY

Immunoperoxidase for the detection for the detection of antibodies in cerebrospinal fluid in neurocysticercosis: use of Cysticercus cellulosae and Cysticercus longicollis particles fixed on microscopy slides

Imunoperoxidase para detecção de anticorpos em líquido cefalorraquiano na neurocisticercose: emprego de partículas de Cysticercus cellulosae e Cysticercus longicollis fixadas a lâminas de microscopia

Ana Paula Franco de Andrade^I,1; Adelaide Jose Vaz^I; Paulo Mutuko Nakamura^II; Viviana Silvia E. Boccardi Palou^III; Regina Ayr Florio da Cunha^I; Antonio Walter Ferreira^IV

^IFaculdade de Ciências Farmacêuticas da Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil

^IIInstituto Adolfo Lutz, São Paulo, SP, Brasil

^IIIFaculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil

^IVInstituto de Medicina Tropical de São Paulo, São Paulo, SP, Brasil

^{Correspondence to}

SUMMARY

The ORF strain of Cysticercus longicollis represents an important model for the study of heterologous antigens in the immunodiagnosis of neurocysticercosis (NC). The immunoperoxidase (IP) technique was standardized using a particulate antigen suspension of Cysticercus longicollis (Cl) and Cysticercus cellulosae (Cc). Cerebrospinal fluid (CSF) samples were incubated on the antigen fixed to microscopy slides; the conjugate employed was anti-IgG-peroxidase and the enzymatic reaction was started by covering the slides with chromogen solution (diaminobenzidine/H₂O₂). After washing with distilled water, the slide was stained with 2% malachite green in water. Of the CSF samples from 21 patients with NC, 19 (90.5%) were positive, whereas the 8 CSF samples from the control group (100%) were negative. The results of the IP-Cl test applied to 127 CSF samples from patients with suspected NC showed 28.3% reactivity as opposed to 29.1 % for the IP-Cc test. The agreement index for the IP test (Cl x Cc) was 94.2%, with no significant difference between the two antigens.

Keywords: Immunoperoxidase; Neurocysticercosis; Cysticercus cellulosae; Cysticercus longicollis; Cerebrospinal fluid.

RESUMO

A cepa ORF de Cysticercus longicollis (Cl) representa importante modelo para estudo de antígenos heterólogos no imunodiagnóstico da neurocisticercose (NC). Foi padronizada a técnica de imunoperoxidase (IP) empregando suspensão antigênica particulada. Amostras de líquido cefalorraquiano (LCR) foram incubadas sobre o antígeno fixado em lâminas de microscopia, o conjugado empregado foi anti-IgG-Peroxidase, a reação enzimática iniciou-se ao cobrirem-se as lâminas com solução cromógena (Diaminobenzidina/H₂O₂). Após lavagens em água destilada, a lâmina foi corada com verde malaquita a 2% em água. De 21 LCR de pacientes com NC, 19 (90,5%) foram reativos e 8 (100%) LCR do grupo controle foram não reativos. Os resultados do teste IP-Cl ensaiando 127 LCR dc pacientes com suspeita de NC mostrou 89,7% de concordância com o teste ELISA empregando extrato salino de Cysticercus cellulosae (Cc) e 94,2% de concordância com o teste IP-Cc.

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ACKNOWLEDGEMENTS

We wish to thank Dr. Carlos Larralde, Universidad Autónoma do Mexico, for the ORF strain of Cysticercus longicollis, Drs. Antonio Spina-França, José A. Livramento, Luis R. Machado and Aluízio B.B. Machado, University of São Paulo, for the CSF samples, and Dr. Mário E. Camargo, Biolab Diagnóstica S/A, for permitting the use of the animal house. We are also indebted to Mr. Calixto Correia da Silva for technical assistance in the animal house.

Recebido para publicação em 03/05/1996

Aceito para publicação em 25/06/1996

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Correspondence to:

Adelaide Jose Vaz

Faculdade de Ciências Farmacêuticas da Universidade de São Paulo

Av. Prof. Lineu Prestes, 580, Bloco 17

05508-900 São Paulo, SP, Brasil

Telelone: 5511-818-3638, FAX: [phone]

1

Supported by: CNPq-PIBIC/FCF/USP - 1994/95.

Publication Dates

• Publication in this collection
  22 Sept 2006
• Date of issue
  Aug 1996

History

• Received
  03 May 1996
• Accepted
  25 June 1996