Microimmunodiffusion test for the serodiagnosis of paracoccidioidomycosis

Silva, Maria Isabel Correa da; Chamma, Luiz Gastão; Franco, Marcello

doi:10.1590/S0036-46651989000100008

Abstracts

We used the micro- and macroimmunodiffusion test for the qualitative and quantitative measurement of anti - P. brasiliensis antibodies in serum of patients with paracoccidioidomycosis. All 103 paracoccidioidomycosis sera (100%) were positive in the micro test versus 87% positivity index in the macrotest. All 83 control sera from patients with other diseases were negative in both tests. Titers of the positive sera tended to be higher in the microtest, which revealed sharper and easier to read precipiting bands. Microimmunodiffusion is simple to be performed, requires a minimum amount of reagents and allows the simultaneous testing of 102 sera. It may replace the macrotest specially in laboratories dealing with great serologic routine.

Utilizou-se técnica de microimunodifusão dupla em gel de ágar para a medida quali e quantitativa de anticorpos circulantes anti - P. brasiliensis, comparando-se os resultados com o macrométodo. Todos os 103 soros de pacientes portadores de paracoccidioidomicose foram positivos no micrométodo contra 87% de positividade no macrométodo. Os 83 soros de pacientes sem paracoccidioidomicose foram negativos em ambas as reações. Os títulos dos soros positivos tenderam a ser mais elevados no micrométodo, que forneceu bandas de precipitação mais nítidas e fáceis de serem lidas. O micrométodo é de realização simples, utiliza pequena quantidade de material e possibilita o teste simultâneo de 102 soros. Acreditamos que ele poderá substituir o macrométodo, especialmente em laboratórios de grande rotina sorológica.

Paracoccidioidomicose; Microimunodifusão

SOROLOGIA

Reação de microimunodifusão em gel de ágar no diagnóstico sorológico da paracoccidioidomicose

Microimmunodiffusion test for the serodiagnosis of paracoccidioidomycosis

Maria Isabel Correa da Silva; Luiz Gastão Chamma; Marcello Franco

Departamento de Patologia, Faculdade de Medicina - UNESP, Botucatu, São Paulo, Brasil

^{Endereço para correspondência} Endereço para correspondência: Dr. Marcello Franco Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina de Botucatu CEP 18610 Botucatu, São Paulo, Brasil

RESUMO

Utilizou-se técnica de microimunodifusão dupla em gel de ágar para a medida quali e quantitativa de anticorpos circulantes anti - P. brasiliensis, comparando-se os resultados com o macrométodo. Todos os 103 soros de pacientes portadores de paracoccidioidomicose foram positivos no micrométodo contra 87% de positividade no macrométodo. Os 83 soros de pacientes sem paracoccidioidomicose foram negativos em ambas as reações. Os títulos dos soros positivos tenderam a ser mais elevados no micrométodo, que forneceu bandas de precipitação mais nítidas e fáceis de serem lidas. O micrométodo é de realização simples, utiliza pequena quantidade de material e possibilita o teste simultâneo de 102 soros. Acreditamos que ele poderá substituir o macrométodo, especialmente em laboratórios de grande rotina sorológica.

Unitermos: Paracoccidioidomicose; Microimunodifusão.

SUMMARY

We used the micro- and macroimmunodiffusion test for the qualitative and quantitative measurement of anti - P. brasiliensis antibodies in serum of patients with paracoccidioidomycosis. All 103 paracoccidioidomycosis sera (100%) were positive in the micro test versus 87% positivity index in the macrotest. All 83 control sera from patients with other diseases were negative in both tests. Titers of the positive sera tended to be higher in the microtest, which revealed sharper and easier to read precipiting bands. Microimmunodiffusion is simple to be performed, requires a minimum amount of reagents and allows the simultaneous testing of 102 sera. It may replace the macrotest specially in laboratories dealing with great serologic routine.

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AGRADECIMENTOS

Os autores agradecem o auxílio técnico de Marino Alves da Cunha e Claudinei Jurandir Figueira, e ao Dr. Paul Standard, do CDC, Atlanta, pela doação das matrizes para os testes. Trabalho parcialmente financiado por bolsa FINEP Nº 42.87.0395.00.

Recebido para publicação em 6/6/1988.

1. BUSEY, J. F. & HINTON, P. F. - Precipitins in histoplasmosis. Amer. Rev. resp. Dis., 92: 637-639, 1965.
2. HUPPERT. M. - Macroprueba de inmunodifusion en gel de agar. In: Manual de procedimentos estandarizados para el serodiagnóstico de las micosis sistêmicas Parte I. Pruebas de inmunodifusion en agar. Washington, Orga nizacion Panamericana de la Salud, 1972. p. 3-9.
3. KAUFMAN. L. - Micropruebas de inmunodifusion en gel de agar. In: Manual de procedimientos estandarizados para el serodiagnóstico de las micosis sistêmicas Parte I: Pruebas de inmunodifusion en agar. Washington, Organización Panamerican de la Salud, 1972. p. 10-16.
4. LOWRY, O. H.; ROSEBROUGH, N. J.; FARR, A. L. & RANDALL, R. J. - Protein measurement with the folin phenol reagent. J. biol. Chem., 193: 265-275, 1951.
5. MISTRETA, T.; SOUZA, M. S.; CHAMMA, L. G.; PINHO, S. Z. & FRANCO, M. - Serology of paracoccidioidomycosis. I. Evaluation of the indirect immunofluorescent test. Mycopathologia (Den Haag), 89: 13-17,1985.
6. PERAÇOLI, M. T. S.; MOTA, N. G. S. & MONTENEGRO, M. R. -.Experimental paracoccidioidomycosis in the Syrian hamster. Morphology and correlation of lesions with humoral and cell-mediated immunity. Mycopathologia (Den Haag), 79: 7-17, 1982.
7. STANDARD, P. G.; KAUFMAN, L. & WHALEY, S. D. - Exoantigen test Rapid identificación of pathogenic mould isolates by immunodiffusion. Procedure guide. Atlanta, Centers for Disease Control, 1985. p. 29-39. (Immunology Series, no. 11).
8. YARZABAL, L. A.; ALBORNOZ, M. B.; CABRAL, N. A. & SANTIAGO, A. R. - Specific double diffusion microtechnique for the diagnosis of aspergillosis and paracoccidioidomycosis using monospecific antisera. Sabouraudia, 16: 55-62, 1978.

Endereço para correspondência:

Dr. Marcello Franco

Departamento de Patologia da Faculdade de Medicina de Botucatu

CEP 18610 Botucatu, São Paulo, Brasil

Publication Dates

Publication in this collection
18 Feb 2011
Date of issue
Feb 1989

History

Received
06 June 1988

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[1] 1. BUSEY, J. F. & HINTON, P. F. - Precipitins in histoplasmosis. Amer. Rev. resp. Dis., 92: 637-639, 1965.

[2] 2. HUPPERT. M. - Macroprueba de inmunodifusion en gel de agar. In: Manual de procedimentos estandarizados para el serodiagnóstico de las micosis sistêmicas Parte I. Pruebas de inmunodifusion en agar. Washington, Orga nizacion Panamericana de la Salud, 1972. p. 3-9.

[3] 3. KAUFMAN. L. - Micropruebas de inmunodifusion en gel de agar. In: Manual de procedimientos estandarizados para el serodiagnóstico de las micosis sistêmicas Parte I: Pruebas de inmunodifusion en agar. Washington, Organización Panamerican de la Salud, 1972. p. 10-16.

[4] 4. LOWRY, O. H.; ROSEBROUGH, N. J.; FARR, A. L. & RANDALL, R. J. - Protein measurement with the folin phenol reagent. J. biol. Chem., 193: 265-275, 1951.

[5] 5. MISTRETA, T.; SOUZA, M. S.; CHAMMA, L. G.; PINHO, S. Z. & FRANCO, M. - Serology of paracoccidioidomycosis. I. Evaluation of the indirect immunofluorescent test. Mycopathologia (Den Haag), 89: 13-17,1985.

[6] 6. PERAÇOLI, M. T. S.; MOTA, N. G. S. & MONTENEGRO, M. R. -.Experimental paracoccidioidomycosis in the Syrian hamster. Morphology and correlation of lesions with humoral and cell-mediated immunity. Mycopathologia (Den Haag), 79: 7-17, 1982.

[7] 7. STANDARD, P. G.; KAUFMAN, L. & WHALEY, S. D. - Exoantigen test Rapid identificación of pathogenic mould isolates by immunodiffusion. Procedure guide. Atlanta, Centers for Disease Control, 1985. p. 29-39. (Immunology Series, no. 11).

[8] 8. YARZABAL, L. A.; ALBORNOZ, M. B.; CABRAL, N. A. & SANTIAGO, A. R. - Specific double diffusion microtechnique for the diagnosis of aspergillosis and paracoccidioidomycosis using monospecific antisera. Sabouraudia, 16: 55-62, 1978.