A Obesidade Preserva a Função do Miocárdio Durante o Bloqueio da Via Glicolítica

Resumos

Fundamento:

A obesidade é definida por um acúmulo excessivo do tecido adiposo em relação a massa magra tecidual. Estudos realizados nos últimos anos sugerem que a função cardíaca em animais obesos pode se encontrar preservada, aumentada ou reduzida.

Objetivo:

Estudar o balanço energético do miocárdio com a hipótese de que o aumento na oxidação de ácidos graxos e redução de glicose levam à disfunção cardíaca na obesidade.

Métodos:

Ratos Wistar machos com 30 dias de idade foram alimentados com uma dieta padrão ou hipercalórica durante 30 semanas. A função e morfologia cardíacas foram analisadas. Neste trabalho foram estudadas as características gerais e comorbidades associadas com a obesidade. A estrutura cardíaca foi determinada pelo peso do coração e do ventrículo esquerdo (VE). A função do miocárdio foi avaliada pela análise de músculos papilares isolados do VE, na condição basal e depois de manobras inotrópicas e lusitrópicas: rigidez do miocárdio, contração pós-pausa, aumento da concentração extracelular de Ca2+, mudança na frequência de estímulos e inibição da via glicolítica.

Resultados:

Os ratos obesos tiveram um aumento de tecido adiposo e comorbidades associadas à obesidade em relação aos ratos do grupo controle. A análise funcional após o bloqueio pelo iodoacetato não mostrou diferença na regressão linear da tensão desenvolvida (TD), entretanto, a tensão de repouso (TR) apresentou uma diferença estatística significativa entre o grupo controle e o grupo obeso, mais notadamente na inclinação da curva no grupo C.

Conclusão:

O desequilíbrio energético na obesidade não promoveu disfunção cardíaca. Pelo contrário, a priorização na utilização de ácidos graxos promoveu uma proteção do músculo cardíaco durante a inibição da glicólise, sugerindo que esta via é menos utilizada pelo músculo cardíaco obeso.

Obesidade; Ratos; Miocárdio; Metabolismo; Ácidos Graxos

Background:

Obesity is defined by excessive accumulation of body fat relative to lean tissue. Studies during the last few years indicate that cardiac function in obese animals may be preserved, increased or diminished.

Objective:

Study the energy balance of the myocardium with the hypothesis that the increase in fatty acid oxidation and reduced glucose leads to cardiac dysfunction in obesity.

Methods:

30-day-old male Wistar rats were fed standard and hypercaloric diet for 30 weeks. Cardiac function and morphology were assessed. In this paper was viewed the general characteristics and comorbities associated to obesity. The structure cardiac was determined by weights of the heart and left ventricle (LV). Myocardial function was evaluated by studying isolated papillary muscles from the LV, under the baseline condition and after inotropic and lusitropic maneuvers: myocardial stiffness; postrest contraction; increase in extracellular Ca2+ concentration; change in heart rate and inhibitor of glycolytic pathway.

Results:

Compared with control group, the obese rats had increased body fat and co-morbities associated with obesity. Functional assessment after blocking iodoacetate shows no difference in the linear regression of DT, however, the RT showed a statistically significant difference in behavior between the control and the obese group, most notable being the slope in group C.

Conclusion:

The energy imbalance on obesity did not cause cardiac dysfunction. On the contrary, the prioritization of fatty acids utilization provides protection to cardiac muscle during the inhibition of glycolysis, suggesting that this pathway is fewer used by obese cardiac muscle.

Obesity; Rats; Myocardial; Metabolism; Fatty Acid

Introdução

A obesidade é uma doença metabólica crônica definida por um acúmulo excessivo de tecido adiposo em relação a massa magra tecidual¹. De acordo com a Organização Mundial da Saúde, em 2015, aproximadamente 2,3 bilhões de adultos vão estar com sobrepeso e destes, pelo menos 700 milhões serão considerados obesos (Índice de Massa Corporal [IMC] > 30 kg/m²) ¹. A maior disponibilidade e consumo de dietas altamente energéticas e palatáveis tem acarretado elevação do peso corporal na população^2-4. Desta forma, obesidade induzida por dieta é o modelo mais apropriado para estudar as consequências dessa patologia^2-4.

A obesidade está associada ao aumento da mortalidade, redução da expectativa de vida^5,6 e doenças cardiovasculares^7,8. Estudos clínicos mostram que a obesidade promove redução da função cardíaca e os mecanismos patofisiológicos responsáveis por essa alteração não são completamente esclarecidos⁹. Em condições aeróbicas normais, aproximadamente 70% da energia produzida pelo miocárdio deriva do metabolismo de ácidos graxos e 30% é derivada da via glicolítica^10-13. Na obesidade, o aumento na captação e oxidação de ácidos graxos está associado ao decréscimo na utilização de glicose pelo miocárdio^2,12,14-16. Estas alterações dos substratos energéticos podem ser responsáveis pela disfunção cardíaca observada em indivíduos obesos^2,9,17-21. Em camundongos obesos e diabéticos db/db, a normalização do metabolismo energético com o aumento na utilização de glicose reverteram a disfunção contrátil cardíaca^20,21. Estes achados corroboram trabalhos que sugerem que o ATP gerado pela oxidação da glicose é utilizado preferencialmente pela bomba de cálcio (Ca²⁺) do retículo sarcoplasmático (SERCA2)^12,13,22-24, proteína responsável pela recaptação do cálcio citosólico. Este trabalho objetivou estudar o balanço energético do miocárdio com a hipótese de que o aumento na oxidação de ácidos graxos e redução na oxidação de glicose levam à disfunção cardíaca resultante de um déficit de ATP para a SERCA2. Esta premissa foi testada com a inibição da via da glicólise através da administração de iodoacetato (AIA) no miocárdio., droga que inibe a atividade da enzima gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase²⁵. A inibição da glicólise aumenta a disfunção cardíaca de camundongos obesos.

Métodos

Modelo Animal e Protocolo Experimental

Ratos Wistar machos com 30 dias de idade foram distribuídos de forma aleatória em dois grupos: controle (C, n = 12) e obeso (Ob, n = 12). O grupo controle foi alimentado com uma ração padrão contendo 11,2 % de lipídeos, 55,5 % de carboidratos e 33,3 % de proteínas. O grupo obeso recebeu uma ração rica em lipídeos contendo 45,2% de lipídeos, 28,6% de carboidratos e 26,2% de proteínas. Os grupos receberam as dietas por 30 semanas consecutivas. A dieta rica em lipídeos foi formulada em nosso laboratório e continha ração em pó para ratos da Agroceres (Agroceres^®, Rio Claro, SP, Brasil), alimentos industrializados, suplemento proteico, vitaminas e minerais. A dieta rica em lipídeos possuía maior densidade calórica (3,65 kcal/g) em relação à dieta padrão (2,95 kcal/g) devido à maior quantidade de lipídeos, consistindo de ácidos graxos saturados (20,2 %) e insaturados (79,8 %). Todos os ratos foram alojados em gaiolas individuais em uma sala com controle ambiental com temperatura de 23 ± 3 ºC, ciclo de 12 h claro/escuro e humidade relativa de 60 ± 5 %. O consumo alimentar foi medido diariamente e a água fornecida ad libitum. O peso corporal inicial e final (PCI e PCF, respectivamente) foram aferidos. O consumo calórico semanal foi calculado como a média de consumo da semana x o valor calórico de cada dieta. A eficiência alimentar, capacidade de transformar colorias consumidas em peso corporal, também foi analisada.

Todos os experimentos e procedimentos foram realizados de acordo com o Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, publicado pelo U.S. National Institutes of Health²⁶, e também foram aprovados pelo Comitê de Ética da Escola de Medicina de Botucatu (UNESP, Botucatu, Brasil).

Composição das Dietas Experimentais

As dietas experimentais supriram quantidades suficientes de proteínas, vitaminas e minerais de acordo com o Nutrient Requirements of Laboratory Animals (1995). A dieta padrão e as quatro dietas ricas em lipídeos foram formuladas pela Agroceres (Rio Claro, SP, Brazil). Os ingredientes foram inicialmente triturados e em seguida misturados com vitaminas e minerais. A mistura foi peletizada, secada em um secador ventilado a 55 ± 5ºC e em seguida estocada a -20ºC. A dieta padrão (RC Focus 1765) continha óleo de soja, milho integral, farelo de trigo, farelo de soja, fosfato dicálcico, cloreto de sódio, farinha de carne e peixe, aditivo antioxidante, e mistura de vitaminas e minerais. Enquanto os ingredientes usados para preparar as dietas ricas em lipídeos foram cloreto de sódio, caseína, leite em pó, proteína concentrada de soja, milho integral, farinha de biscoito, fosfato dicálcico, carbonato de Ca²⁺ , aditivo emulsificante, antioxidantes, sabores artificiais (queijo, baunilha, chocolate e bacon) e mistura de vitaminas e minerais. A composição da dieta rica em lipídeos consistiu de ácidos graxos saturados e insaturados que proveram 20% e 80% das calorias derivadas de gordura, respectivamente^9,26.

Determinação de Obesidade

Um critério baseado no índice de adiposidade foi utilizado para determinar a obesidade de acordo com diversos autores^9,26-28. Após a anestesia (pentobarbital sódico 50 mg/kg por via intraperitoneal [i.p.]), os animais foram decapitados, toracotomizados e tiveram os depósitos de tecido adipose dissecados e pesados. O índice de adiposidade foi calculado pela seguinte fórmula: índice de adiposidade = (gordura corporal total (GC)/peso corporal final) x 100. A GC foi calculada pela soma do peso individual de cada depósito de tecido adiposo: GC = gordura epididimal + gordura retroperitoneal + gordura visceral^9,26.

Comorbidades Associadas à Obesidade

Os modelos experimentais de obesidade induzida em ratos podem apresentar características semelhantes à obesidade humana tais como hipertensão, intolerância à glicose, resistência à insulina, dislipidemia, hiperinsulinemia e hiperleptinemia. Desta forma ambos os grupos foram submetidos a diversas análises, sendo os testes bioquímicos realizados em dez animais de cada grupo.

Pressão Arterial Sistólica

Na fase final dos experimentos, a pressão arterial sistólica foi medida na cauda dos ratos usando um método não invasivo²⁷ com um eletro-esfignomanômetro da Narco BioSystems^® (International Biomedical, Austin, TX, EUA). A média de duas medições foi registrada para cada animal.

Teste Oral de Tolerância à Glicose

Ao fim do período de 30 semanas de alimentação, um teste oral de tolerância à glicose foi realizado. Os ratos pernoitaram em jejum (12-15h) e amostras de sangue foram extraídas da extremidade da cauda. A glicose sanguínea foi obtida em condições basais e depois da administração intraperitoneal [i.p.] de uma dose de glicose de 2 g/kg⁹. Amostras de sangue foram coletadas em 0, 15, 30, 60, 90 e 120 minutos após, e foram analisadas com um glicômetro (Accu-Check Go Kit; Roche Diagnóstica Brasil Ltda, SP, Brasil).

Análise Plasmática de Hormônios

Ao fim dos tratamentos, os animais foram submetidos a 12-15 h de jejum, anestesiados com pentobarbital sódico (50 mg/kg intraperitoneal) e eutanasiados por decapitação. O sangue foi coletado em tubos heparinizados, em seguida foram centrifugados a 3000 x g por 15 minutos a 4ºC, e estocados a -80ºC. As concentrações plasmáticas de leptina e insulina foram determinadas por ELISA⁹ usando kits comerciais específicos (Linco Research Inc., St. Louis, MO, EUA).

Colesterol, Triglicerol, Ácidos Graxos não Esterificados, Insulina e Leptina

Ao fim do experimento, os animais foram submetidos a um jejum de 12-15 h, anestesiados com pentobarbital sódico (50 mg/kg i.p.) e eutanasiados por decapitação. Amostras de sangue foram coletadas em tubos heparinizados, o soro foi separado por centrifugação a 3000 x g por 15 minutos a 4ºC, e em seguida foram estocados a -80ºC até análises adicionais. O soro foi analisado para os níveis de glicose (GL), triglicerídeos (TG), colesterol total (CT), ácidos graxos não esterificados (AGNE) e hormônios (insulina e leptina). As concentrações séricas de GL, TG e CT foram medidas com um sistema de análise enzimático automático (Technicon, RA-XTTM System, Global Medical Instrumentation, Minnesota, EUA). Os níveis de AGNEs foram determinados pelo método de Johnson e Peters (1993) usando kits de colorimétricos (WAKO NEFA-C, Wako Pure Chemical Industries, Osaka, Japão). Os níveis de leptina e insulina foram determinados por ELISA usando kits comerciais específicos (Linco Research Inc., St. Louis, MO, USA).

Análise da Gordura Corporal

Após anestesia (pentobarbital sódico 50 mg/kg i.p.), decapitação e toracotomia, os depósitos de tecido adiposo foram dissecados e pesados. O peso de tecido adiposo total foi calculado como a soma do peso de cada depósito de gordura individual: gordura epididimal + gordura retroperitoneal + gordura visceral. O índice de adiposidade foi calculado como: (gordura corporal total/peso corporal final) x 100 ^9,26.

Estrutura e Função Cardíaca

Os pesos do coração e ventrículo esquerdo (VE) foram determinados como índices de estrutura cardíaca depois de seus valores absolutos serem normalizados pelo comprimento da tíbia.

A função do miocárdio foi analisada pelo estudo de músculos papilares isolados do VE. Este procedimento tem sido usado por diversos pesquisadores^9,17,29. Esta técnica permite a mensuração da capacidade do músculo cardíaco de contrair e realizar força independente de influências in vivo que podem alterar a performance mecânica do miocárdio, tais como a frequência dos batimentos, pré-carga e pós-carga. Resumidamente, no experimento os ratos foram anestesiados com pentobarbital sódico (50 mg/kg i.p.) e eutanasiados por decapitação. Os corações foram removidos rapidamente e colocados em uma solução de Krebs-Henseleit oxigenada a 28ºC. Os músculos papilares dos ratos C (n = 12) e ratos Ob (n = 12) foram dissecados, e presos entre dois clipes de mola e colocados verticalmente em uma câmara contendo a solução de Krebs-Henseleit (118,5 mM NaCl; 4,69 mM KCl; 2,5 mM CaCl2; 1,16 mM MgSO4; 1,18 mM KH2PO4; 5,50 mM GL e 24,88 mM NaCO3) mantida a 28ºC por um circulador de água termostatizado. A solução de banho foi borbulhada com oxigênio 95% e dióxido de carbono 5%, com pH de 7,4. O clipe de mola inferior foi ligado a um transdutor de força 120T-20B (Kyowa, Tóquio, Japão) por um fino fio de aço (1/15.000 polegada) que passou através do selo de mercúrio no fundo da câmara. O clipe de mola superior foi conectado a um fino fio de aço ligado a um braço alavancado rígido sobre o qual havia um parafuso micrométrico para o ajuste do comprimento do músculo. A preparação do músculo foi colocada entre dois eletrodos de platina (Grass E8, GRASS Technologies, An Astro-Med, Inc. Product Group, West Warwick, RI, EUA) e estimulado a uma frequência de 0,2 Hz (12 pulsos/min) usando pulsos de ondas quadradas de 5 ms de duração. A voltagem foi regulada para um valor 10% maior que o mínimo necessário para produzir a resposta mecânica máxima.

Os músculos foram contraídos isotonicamente com cargas leves por 60 min e depois carregados (50g) para contrair isometricamente e esticarem até o máximo das curvas de comprimento-tensão. Após um período de 5 min durante o qual as preparações passaram por contrações isotônicas, os músculos foram submetidos de novo a condições isométricas e o pico da curva de comprimento-tensão (Lmax) foi cuidadosamente medido. Um período de 15 min de contração isométrica estável foi aplicado antes do período experimental e durante o qual uma contração isomérica foi registrada.

Os seguintes parâmetros foram medidos para a contração isométrica na Lmax: pico de tensão desenvolvida (TD [g/mm²]), tensão em repouso (TR [g/mm²]), taxa máxima de desenvolvimento da tensão (+dT/dt [g/mm²/s]), taxa máxima de redução da tensão (-dT/dt [g/mm²/s]) normalizadas pela área da seção transversal (AST). A rigidez miocárdica foi determinada pela razão entre a variação de comprimento do músculo e a tensão em repouso. A tensão em repouso foi analisada com o comprimento do músculo correspondendo a 90, 92, 94, 96, 98, e 100% da Lmax. A curva de comprimento-tensão em repouso foi obtida usando uma análise de regressão exponencial: log (TR) = -51,1118 + 25,5425 log(L_max) para o grupo C e log (TR) = -58,1992 + 29,1455 log(L_max) para o grupo Ob.

Os parâmetros usados para caracterizar o músculo papilar foram o comprimento (mm), peso (mg), e AST (mm²). Ao fim do experimento, o comprimento do músculo em Lmax foi medido com um catetômetro (Gartner Scientific Corporation, Chicago, IL, EUA) e o músculo entre os dois clipes foi secado e pesado. A área de seção transversal foi calculada com o peso do músculo e o comprimento, assumindo a uniformidade e a gravidade específica de 1,0. Todos os dados de força foram normalizados pela área da seção transversal.

Para determinar o mecanismo pelo qual a obesidade induz efeitos inotrópicos negativos sobre a função contrátil, os músculos papilares foram avaliados sob condições basais de 2,5 nmol/L de Ca2+ e depois de manobras inotrópicas e lusitrópicas. Estas manobras foram: contração pós-repouso de 10, 30 e 60 segundos; aumento extracelular da concentração de Ca2+ de 0,5 para 2,5 nmol/L; mudança da frequência cardíaca de 0,1 para 2,0 Hz; adição de iodoacetato. A avaliação da via glicolítica foi realizada utilizando um inibidor específico, ácido iodoacético 10^-3 mM/L. A função miocárdica foi registrada aos 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 e 45 min depois da adição de ácido iodoacético na solução nutriente. O comportamento da TD e da TR depois da administração do inibidor da rota glicolítica foi acompanhado para a construção do modelo da regressão linear.

Análise estatística

Parâmetros nutricionais, hormonais, morfológicos e análises da função cardíaca foram apresentados como médias ± desvio padrão e a comparação entre os grupos foi realizada com o teste t de Student para amostras independentes. O perfil de glicose dos grupos foi comparado por uma ANOVA de medidas repetidas. Quando diferenças significativas foram encontradas (p < 0,05), o teste de Bonferroni post hoc para comparações múltiplas foi realizado. As curvas de regressão do bloqueio da via glicolítica e rigidez miocárdica foram comparadas pelo teste do coeficiente angular e regressão linear. A análise estatística foi realizada com o programa Sigma Plot 3.5 para Windows (Systat Software Inc., San Jose, CA, EUA). A normalidade das variáveis foi analisada pelo teste de Kolmogorov-Smirnov. O nível de significância foi de 5%.

Resultados

Características gerais e comorbidades associadas à obesidade

As características gerais e comorbidades associadas à obesidade estão apresentadas na Tabela 1. O peso final corporal, gordura corporal total, índice de adiposidade e glicose, leptina e níveis de insulina foram maiores no grupo Ob em relação ao grupo C. Não houve diferença significativa entre os grupos em relação aos níveis de proteínas e lipídeos. Os resultados do teste de tolerância à glicose estão apresentados na Figura 1. Os níveis basais de glicose foram similares entre os grupos. Após a administração intravenosa de glicose, a taxa sanguínea desta foi maior para o grupo Ob em todos os períodos avaliados.

Tabela 1
Características gerais e comorbidades associadas a obesidade

Variáveis	Grupos		Valor de p
	C (n = 12)	Ob (n = 12)
PCF (g)	498 ± 25	562 ± 36*	0,03467
Índice de adiposidade (%)	4,28 ± 1,65	5,96 ± 1,54*	0,02872
Glicose (mg/dL)	107 ± 22	126 ± 19*	0,00548
Triglicérides (mg/dL)	60,1 ± 15,2	66,1 ± 24,4	0,30161
Colesterol (mg/dL)	58,3 ± 10,5	59,0 ± 8,1	0,78859
HDL (mg/dL)	24,8 ± 4,3	27,1 ± 4,9	0,10570
LDL (mg/dL)	14,0 ± 3,3	12,2 ± 2,8	0,13769
NEFA (mmol/L)	0,27 ± 0,05	0,28 ± 0,06	0,66658
Leptina (ng/dL)	2,40 ± 0,36	7,60 ± 0,81*	0,00005
Insulina (ng/dL)	0,23 ± 0,08	0,54 ± 0,07*	0,00067
PAS (mmHg)	127 ± 12	129 ± 13	0,87912

• Valores expressos em média ± desvio padrão. C: controle; Ob: obeso; PCF: peso corporal final; HDL: lipoproteina de alta densidade; LDL: lipoproteina de baixa densidade; NEFA: ácidos graxos não esterificados; PAS: pressão arterial sistólica. Teste t de Student’s para amostras independentes.

Figura 1
Teste oral de tolerância à glicose nos animais do grupo controle (C, n = 12) e animais do grupo obeso (Ob, n = 12). Os valores são expressos como média ± desvio padrão. ANOVA e teste de Bonferroni. * p < 0,05 vs. C.

Estrutura e função cardíaca

A estrutura cardíaca macroscópica está apresentada na Tabela 2. Os resultados indicam que não houve diferença significativa entre os dois grupos. A função basal dos músculos papilares cardíacos está apresentada na Tabela 3 e os dados mostraram que não houve diferença significativa nas medidas mecânicas. Além disso, ambos os grupos apresentaram o mesmo comportamento nas estimulações inotrópicas. A influência da variação do comprimento do músculo papilar sobre a tensão em repouso é apresentada na Figura 2, não havendo diferenças significativas entre os dois grupos. Os resultados indicam que a obesidade não aumentou a rigidez do miocárdio. A avaliação funcional após o bloqueio com iodoacetato é apresentada nas Figuras 3A e 3B. Não houve diferença na regressão linear da TD entre os grupos (Figura 3A), já para a TR houve diferença estatística entre o comportamento do grupo controle e o grupo obeso, sendo a inclinação da curva do grupo C mais marcante (Figura 3B).

Tabela 2
Estrutura macroscópica cardíaca

Variáveis	Grupos		Valor de p
	C (n = 12)	Ob (n = 12)
VE (g)	0,18 ± 0,02	0,20 ± 0,02	0,82766
Coração (g)	0,055 ± 0,01	0,060 ± 0,01	0,06416
VE/TI (g/mm)	0,021 ± 0,003	0,023 ± 0,002	0,12565
Coração/TI (g/mm)	0,29 ± 0,02	0,32 ± 0,02	0,32872

• Valores expressos em média ± desvio padrão. C: controle; Ob: obeso; VE: ventrículo esquerdo; TI: tíbia. Teste t de Student's para amostras independentes.

Tabela 3
Contração isométrica basal

Variáveis	Grupos		Valor de p
	C (n = 12)	Ob (n = 12)
TD (g/mm2)	7,14 ± 1,77	6,89 ± 1,54	0,22756
TR (g/mm2)	0,68 ± 0,24	0,67 ± 0,20	0,61639
+dT/dt (g/mm2/s)	69,4 ± 18,1	62,9 ± 14,6	0,19907
-dT/dt (g/mm2/s)	22,1 ± 5,9	21,6 ± 4,9	0,52313
AS (mm2)	0,97 ± 0,24	0,98 ± 0,27	0,38607

• Valores expressos em média ± desvio padrão. C: controle; Ob: obeso; TD: tensão desenvolvida; TR: tensão de repouso; +dT/dt: velocidade máxima de elevação da tensão desenvolvida; -dT/dt: velocidade máxima de decrécimo da tensão desenvolvida; AS: area seccional. Teste t de Student's para amostras independentes.

Figura 2
A influência da variação do comprimento do músculo sobre a tensão em repouso dos animais do grupo controle (C, n = 12) e animais do grupo obeso (Ob, n = 012). Regressão linear.

Figura 3
Efeitos do bloqueio da gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase pelo iodoacetado no miocárdio de ratos através do modelo de regressão linear nos animais do grupo controle (C, n = 12) e animais do grupo obeso (Ob, n = 12). A) TD: pico da tensão desenvolvida; B) TR: tensão em repouso. Regressão linear. * p < 0,05 vs. Ob.

Discussão

A dieta foi capaz de levar os animais à obesidade tendo em vista que o índice de adiposidade foi 39,2% superior ao controle. Os dados desta pesquisa são compatíveis com os resultados de pesquisas realizadas em nosso laboratório usando a mesma metodologia^9,17,26. Nesta pesquisa foram observadas comorbidades associadas à obesidade experimental como a intolerância à glicose, hiperinsulinemia e hiperleptinemia. Os resultados revelaram que o nosso modelo experimental promoveu alterações em parâmetros metabólicos e hormonais que estão de acordo com os achados de vários pesquisadores ^9,30,31.

A obesidade não causou remodelações estruturais na frequência cardíaca ou pressão arterial sistólica. Os dados diferem de estudos que observaram que a obesidade induzida por dieta rica em lipídeos causa hipertrofia cardíaca^9,26,32,33 e aumento da pressão arterial³⁴. A alteração nessas variáveis não sugere que e a obesidade não causou mudanças significativas em neuro-hormônios capazes de promover a proliferação celular, vasoconstrição e retenção hidrossalina.

Neste estudo a função miocárdica foi avaliada in vitro com o uso de músculos papilares isolados do VE. Preparações de músculos papilares permitem a mensuração da capacidade do músculo cardíaco de contrair e relaxar independente de influências in vivo que podem alterar a performance mecânica do miocárdio, tais como mudanças de frequência e carga cardíaca. A estimulação inotrópica permite a identificação de alterações nas fases de contração e relaxamento que não podem ser detectadas em condições basais e isso ajuda na compreensão dos mecanismos envolvidos nas alterações da função miocárdica. Os animais utilizados em ambos os grupos possuíam a área seccional transversa semelhantes e isto permite evitar a influência da área seccional transversa sobre os resultados³⁵. Os resultados demonstraram que a obesidade não causou a deterioração da função cardíaca nem da rigidez do miocárdio, tanto em condições basais como com a estimulação inotrópica. Este comportamento é similar ao encontrado por outros autores que utilizaram corações isolados de coelhos com 12 semanas de idade³⁶ e miócitos isolados de camundongos obesos com 14 semanas de idade³⁷. Entretanto, outros pesquisadores encontraram resultados divergentes onde foi encontrada uma redução da função mecânica de miócitos isolados de camundongos com 12 semanas³⁸, estes autores também observaram uma elevação da performance contrátil basal do músculo papilar nos camundongos obesos com 7 semanas. Leopoldo e cols.⁹ não observaram alterações na função miocárdica basal de ratos com 15 semanas, entretanto estes autores encontraram diferenças entre o grupo controle e o grupo obeso após a utilização de bloqueadores para SERCA2 e canal de Ca²⁺ tipo L.

O bloqueio da via glicolítica com o iodoacetado sobre a função miocárdica mostrou que a inclinação da curva de tensão desenvolvida em animais obesos foi similar ao grupo controle, entretanto esta inclinação na curva de tensão de repouso dos animais obesos foi significativamente menor do que no controle. Contrário às expectativas, estes resultados sugerem que os ratos do grupo controle possuem maior rigidez miocárdica do que os ratos obesos. Este comportamento pode estar relacionado a uma maior elevação do cálcio citoplasmático resultante possivelmente de uma menor recaptura pela SERCA2 e ou maior afinidade entre o cálcio e a troponina C. A menor contratura observada em ratos obesos sugere que a priorização pelo miocárdio por ácidos graxos em relação à glicose aumentou a disponibilidade de energia para a SERCA2 e promoveu uma proteção ao miocárdio durante o bloqueio da via glicolítica. Isto indica que em situações em que ocorre o aumento nas concentrações de ácidos graxos, a SERCA2 também utiliza energia proveniente da beta-oxidação. Desta forma, neste experimento, a obesidade promoveu alterações metabólicas que resultaram em uma proteção miocárdica.

A TR e a TD apresentaram comportamentos distintos, sendo que o fato da TD ter sido igual entre os grupos pode estar relacionado à taxa da quantidade de cálcio que se difunde em relação a que é removida do citosol durante um ciclo cardíaco. De acordo com Katz³⁹, a razão é de aproximadamente 150, o que mostra que a quantidade de cálcio que é removida é menor em relação a que se difunde para o interior da célula³⁹. A SERCA2 é a maior responsável pela recaptação dos íons de cálcio nos roedores⁴⁰ e utiliza ATP para a sua atividade, assim um déficit de energia para essa estrutura poderia causar consequências mais deletérias para a diástole do que para a sístole⁴⁰.

Conclusão

O desequilíbrio energético na obesidade não acarreta disfunção cardíaca. Ao contrário, a priorização da utilização de ácidos graxos proporciona proteção ao músculo cardíaco durante o bloqueio da glicólise, sugerindo que esta via metabólica é menos utilizada pelo miócito nos animais obesos.

Estes resultados sugerem que o uso de ácidos graxos pelo miocárdio, em determinadas situações, pode gerar efeitos benéficos; assim, poderia desempenhar um papel em modelos de remodelagem cardíaca como uma terapia de baixo custo e fácil implementação.

• Contribuição dos autores
  Concepção e desenho de pesquisa: Campos DHS, Nascimento AF, Cicogna AC; Obtenção de dados: Campos DHS, Leopoldo AS, Lima-Leopoldo AP, Nascimento AF, Oliveira-Júnior AS, SILVA DCT; Análise e interpretação dos dados: Campos DHS, Leopoldo AS, Lima-Leopoldo AP, Oliveira-Júnior AS, Sugizaki MM, Cicogna AC; Análise estatística: Campos DHS, Leopoldo AS, Padovani CR; Obtenção de financiamento: Campos DHS, Cicogna AC; Redação do manuscrito: Campos DHS, Cicogna AC; Revisão crítica do manuscrito quanto ao conteúdo intelectual: Campos DHS, Sugizaki MM, Cicogna AC.
• Fontes de financiamento
  O presente estudo foi financiado pela FAPESP - processo nº 07/59747-7 e 07/46595-0.
• Vinculação acadêmica
  Este artigo é parte de Dissertação de Mestrado de Dijon Henrique Salomé de Campos pela Faculdade de Medicina de Botucatu - UNESP.

Agradecimentos

Agradecemos a José C. Georgette, Mário B. Bruno, Sandra A. Fabio, Camila R. C. Camacho e Corina J. Correa pela assistência técnica. O abstract foi revisado e editado por nativos da língua Inglesa com conhecimento na área biomédica da BioMed Proofreading (Cleveland, Ohio, EUA).

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  12 Set 2014
• Data do Fascículo
  Out 2014

Histórico

• Recebido
  06 Dez 2013
• Revisado
  14 Mar 2014
• Aceito
  19 Maio 2014