Metil-formamida na criopreservação de sêmen ovino

Graças, Carlos Pereira das; Lim, Alexandre In Piao Gomes; Fidelis, Andrei Antonioni Guedes; Cardoso, Júlio Roquete; Blume, Hélio; Mondadori, Rafael Gianella

doi:10.5216/cab.v14I4.17835

Resumos

Objetivou-se avaliar a eficácia da metil-formamida na criopreservação do sêmen ovino. O pool de sêmen utilizado no experimento foi obtido a partir da coleta, com vagina artificial, do sêmen de quatro carneiros mestiços Santa Inês, com idade aproximada de quatro anos. As coletas foram realizadas uma vez por semana, por seis semanas consecutivas, correspondendo, cada semana, a uma repetição do experimento. As frações do pool foram diluídas em cinco diferentes meios de congelação: (1) tris-gema com 5,3% de glicerol (TG5,3G); (2) tris-gema com 3% de metil-formamida (TG3MF); (3) tris-gema com 5% de metilformamida (TG5MF); (4) tris-gema com 7% de metil-formamida (TG7MF); (5) tris-gema com 9% de metil-formamida (TG9MF). Foram avaliadas a motilidade progressiva e o vigor das células espermáticas e realizado o teste de termorresistência pós-descongelação. O tratamento que obteve maior motilidade foi o TG5,3G (50%), seguido do TG3MF (38%) e os tratamentos que apresentaram menor motilidade progressiva foram TG5MF (29%), TG7MF (1,0%), TG9MF (6,0%). Os meios contendo metil-formamida apresentaram resultados inferiores ao meio controle para preservar a integridade morfológica dos espermatozoides, sendo que nos meios TG7MF e TG9MF menos de 60% de espermatozóides apresentaram-se morfologicamente normais. Os espermatozoides do meio TG5,3G apresentaram motilidade (15%) e vigor (2,8) similares aos do meio TG3MF (15% e 2,6, respectivamente) no teste de termorresistência, mas o meio TG5,3G preservou melhor a integridade funcional da membrana plasmática. O glicerol foi mais eficiente como crioprotetor do que a metil-formamida na criopreservação de sêmen ovino.

Amidas; carneiros; glicerol; tris-gema

The aim of this study was to evaluate the efficacy of methyl-formamide in ram semen cryopreservation. The semen pool used in this experiment was obtained by artificial vagina collection from four mixed breed Santa Inês rams, around four years of age. Semen collection was performed once a week, during six weeks. Each week corresponded to one experiment replication. The semen pool was divided in five fractions in order to be diluted in one of the following freezing media: (1) tris-egg yolk with 5.3% of glycerol (TG5.3G); (2) tris-egg yolk with 3% of methyl-formamide (TG3MF); tris-egg yolk with 5% of methyl-formamide (TG5MF); tris-egg yolk with 7% of methyl-formamide (TG7MF); tris-egg yolk with 9% of methyl-formamide (TG9MF). Semen progressive motility, vigor and thermoresistance were evaluated. The treatments TG5.3G (50%) and TG3MF (38%) showed higher progressive motility after thawing, while TG5MF (29%), TG7MF (1%) and TG9MF (6%) showerd lower motility. Freezing media containing methyl-formamide were less effective in preserving spermatozoa membrane integrity and morphology than control media. In TG7MF and TG9MF extenders, less than 60% spermatozoa showed normal morphology. After thermoresistance test, semen cryopreserved in TG3MF showed vigor (2.6) and motility (15%) statistically similar to TG5.3G media (15% and 2.8, respectively); however, the extender TG5.3G was more effective in preserving plasma membrane functional integrity. In conclusion, in the experimental conditions used, glycerol showed more cryoprotectant potential than methyl-formamide.

Amide; glycerol; ram; tris-egg yolk

ALVARENGA, M.A.; LEÃO, K.M.; PAPA, F.O. Improvement of stallion semen post-thaw motility with utilization of dimethylformamide as cryoprotector. Theriogenology, v.57, n.1, p.459, 2002.
ALVARENGA, M.A.; PAPA, F.O.; LANDIM-ALVARENGA, F.C.; MEDEIROS, A.SL. Amides as cryoprotectants for freezing stallion semen: A review. Animal Reproduction Science, v.89, n.1-4, p.105-113, 2005.
BEZERRA, F. S. B.; CASTELO, T. S.; ALVES, H. M.; OLIVEIRA, I.R.S.; LIMA, GL.; PEIXOTO, G. C. X.; BEZERRA, A. C. S. D; SILVA, A. R. Objective assessment of the cryoprotective effects of dimethylformamide for freezing goat semen. Cryobiology, v. 63, p. 263 - 266, 2011.
BURANAAMNUAY, K.; GROSSFELD, R.; STRUCKMANN, C.; RATH, D. Influence of cryoprotectants glycerol and amides, combined with antioxidants on quality of frozen-thawed boar sperm. Animal Reproduction Science, v. 127, n. 1-2, p. 56-61, 2011.
CÂMARA, D. R.; GUERRA, M. M. P. Refrigeração e criopreservação do sêmen ovino: danos inerentes à técnica e influência da suplementação do meio com antioxidantes sobre a qualidade espermática. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.35, n.1, p.33-40, 2011.
CBRA - COLEGIO BRASILEIRO DE REPRODUÇÃO ANIMAL, Manual para Exame Andrológico e Avaliação de sêmen Animal (2ed.). Belo Horizonte, CBRA, 1998, 49p. Disponível em http://pt.scribd.com/doc/151892128/Manual-para-Exame-Andrologico-e-Avaliacao-de-Semen-Animal, Acesso em 21 Out 2013.
SALAMON, S.; MAXWELL, W.M.C. Storage of ram semen. Animal Reproduction Science v. 62, n. 1 - 3, p. 77 - 111, 2000.
FUTINO, D.O.; MENDES, M.C.B.; MATOS, W.N.L.; MONDADORI, R.G.; LUCCI, C.M. Glycerol, Methyl-Formamide and Dimethyl-Formamide in Canine Semen Cryopreservation. Reproduction in Domestic Animals v.45, n. 2, p. 214 - 220, 2010.
GOMES, G.M.; JACOB, J.F.C.; MEDEIROS, A.S.L. Improvement of stallion spermatozoa preservation with alternative cryoprotectans for the Mangalarga Marchador breed. Theriogenology, v. 58, p. 277-279, 2002.
JEYENDRAN, R.S.; VANDER-VEN, H.H.; PEREZ-PELAEZ, M.; CRABO, B.G.; L. ZANEVLD, J.D. Development of an assay to assess the functional integrity of the human sperm membrane and its relationship to other semen characters. Journal of Reproduction and Fertility, v. 70, p. 219-228, 1984.
LOPES, K.R.; COSTA, L.L.; LIMA, G.L.; SOUZA, A.L.; SILVA, A.R. Dimethylformamide is no better than glycerol for cryopreservation of canine semen. Theriogenology, v. 72, n. 5, p.650-4, 2009.
MALO, C.; GIL, L.; CANO, R.; MARTÍNEZ, F.; GARCÍA, A.; JEREZ, R. A. Dimethylformamide is not better than glycerol for cryopreservation of boar semen. Andrologia, v.44, Suppl 1, p. 605-10, 2012
MEDEIROS, A.S.L.; GOMES, G.M.; CARMO, M.T.; PAPA, F.O.; ALVARENGA, M.A. Cryopreservation of stallion sperm using different amides. Theriogenology, v.58, p.273-276, 2002.
MORAES, C.N.; NEVES, J.P.; GONÇALVES, P.B.D.; OLIVEIRA, J.F.C.; SCHWEITZER, C.M. Criopreservação do sêmen ovino em Pellets com etileno glycol. Ciência Rural, v.28, n.2,p.287-292 1998.
MOTA FILHO, A.C.; TELES, C.H.; JUCÁ, R.P.; CARDOSO, J.F.; UCHOA, D.C.; CAMPELLO, C.C.; SILVA, A.R.; SILVA, L.D. Dimethylformamide as a cryoprotectant for canine semen diluted and frozen in ACP-106C. Theriogenology v.76, n.7, p.1367-72, 2011.
MOUSTACAS, V.S.; CRUZ, B.C.; VARAGO, F.C.; MIRANDA, D.A.; LAGE, P.G.; HENRY, M. Extenders containing dimethylformamide associated or not with glycerol are ineffective for ovine sperm cryopreservation. Reproduction in Domestic Animals, v.46, p.924 - 925, 2011.
O'HARA, L., HANRAHAN, J.P., RICHARDSON, L., DONOVAN, A., FAIR, S., EVANS, A.C.O., LONERGAN, P. Effect of storage duration, storage temperature, and diluent on the viability and fertility of fresh ram sperm. Theriogenology, v.73, p.541-549, 2010.
OKUDA, Y.; SEITA, Y.; HISAMATSU, S.; SONOKI, S.; SHINO, M.; MASAOKA, T.; INOMATA, T.; KAMIJO, S.I.; KASHIWAZAKI, N. Fertility of spermatozoa cryopreserved with 2% acetamide or glycerol through artificial insemination in the Japanese White Rabbit, Experimental Animals, v.56, p.29 - 34, 2007.
SILVA, A.F.; COSTA, E.P.; OLIVEIRA, F.A.; TORRES, C.A.A.; HASS, G.T.S.; NASCIMENTO, V. A. Uso de dimetil-formamida associada ou não ao glicerol na criopreservacao de semen caprino. Revista Brasileira de Zootecnia, v.35, p.452 - 456, 2006.
SQUIRES, E.L.; KEITH S.L.; GRAHAM, J.K. Evaluation of alternative cryoprotectants for preserving stallion spermatozoa. Theriogenology, v.62, n.6, p.1056-65, 2004.
VIDAMENT, M.; DAIRE, J.M.; YVON, J.M.; DOLIGEZ, P.; BRUNEAU, B.; MAGISTRINI, M.; ECOT, P. Motility and fertility of stallion semen frozen with glycerol and/or dimethyl formamide. Theriogenology, v.58, p.1 - 3, 2002.
ZIMMERMANN, M; SANTOS, T.E.; FIDELIS, A.A.G.; BLUME, H.; MONDADORI, R.G. Uso de dimetil-formamida e água de coco na criopreservação de sêmen canino. Bioscience Journal, v.23, n.1, p. 96-100, 2007.

Datas de Publicação

Publicação nesta coleção
13 Jan 2014
Data do Fascículo
Dez 2013

Histórico

Recebido
11 Abr 2012
Aceito
09 Set 2013

This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.

[1] ALVARENGA, M.A.; LEÃO, K.M.; PAPA, F.O. Improvement of stallion semen post-thaw motility with utilization of dimethylformamide as cryoprotector. Theriogenology, v.57, n.1, p.459, 2002.

[2] ALVARENGA, M.A.; PAPA, F.O.; LANDIM-ALVARENGA, F.C.; MEDEIROS, A.SL. Amides as cryoprotectants for freezing stallion semen: A review. Animal Reproduction Science, v.89, n.1-4, p.105-113, 2005.

[3] BEZERRA, F. S. B.; CASTELO, T. S.; ALVES, H. M.; OLIVEIRA, I.R.S.; LIMA, GL.; PEIXOTO, G. C. X.; BEZERRA, A. C. S. D; SILVA, A. R. Objective assessment of the cryoprotective effects of dimethylformamide for freezing goat semen. Cryobiology, v. 63, p. 263 - 266, 2011.

[4] BURANAAMNUAY, K.; GROSSFELD, R.; STRUCKMANN, C.; RATH, D. Influence of cryoprotectants glycerol and amides, combined with antioxidants on quality of frozen-thawed boar sperm. Animal Reproduction Science, v. 127, n. 1-2, p. 56-61, 2011.

[5] CÂMARA, D. R.; GUERRA, M. M. P. Refrigeração e criopreservação do sêmen ovino: danos inerentes à técnica e influência da suplementação do meio com antioxidantes sobre a qualidade espermática. Revista Brasileira de Reprodução Animal, v.35, n.1, p.33-40, 2011.

[6] CBRA - COLEGIO BRASILEIRO DE REPRODUÇÃO ANIMAL, Manual para Exame Andrológico e Avaliação de sêmen Animal (2ed.). Belo Horizonte, CBRA, 1998, 49p. Disponível em http://pt.scribd.com/doc/151892128/Manual-para-Exame-Andrologico-e-Avaliacao-de-Semen-Animal, Acesso em 21 Out 2013.

[7] SALAMON, S.; MAXWELL, W.M.C. Storage of ram semen. Animal Reproduction Science v. 62, n. 1 - 3, p. 77 - 111, 2000.

[8] FUTINO, D.O.; MENDES, M.C.B.; MATOS, W.N.L.; MONDADORI, R.G.; LUCCI, C.M. Glycerol, Methyl-Formamide and Dimethyl-Formamide in Canine Semen Cryopreservation. Reproduction in Domestic Animals v.45, n. 2, p. 214 - 220, 2010.

[9] GOMES, G.M.; JACOB, J.F.C.; MEDEIROS, A.S.L. Improvement of stallion spermatozoa preservation with alternative cryoprotectans for the Mangalarga Marchador breed. Theriogenology, v. 58, p. 277-279, 2002.

[10] JEYENDRAN, R.S.; VANDER-VEN, H.H.; PEREZ-PELAEZ, M.; CRABO, B.G.; L. ZANEVLD, J.D. Development of an assay to assess the functional integrity of the human sperm membrane and its relationship to other semen characters. Journal of Reproduction and Fertility, v. 70, p. 219-228, 1984.

[11] LOPES, K.R.; COSTA, L.L.; LIMA, G.L.; SOUZA, A.L.; SILVA, A.R. Dimethylformamide is no better than glycerol for cryopreservation of canine semen. Theriogenology, v. 72, n. 5, p.650-4, 2009.

[12] MALO, C.; GIL, L.; CANO, R.; MARTÍNEZ, F.; GARCÍA, A.; JEREZ, R. A. Dimethylformamide is not better than glycerol for cryopreservation of boar semen. Andrologia, v.44, Suppl 1, p. 605-10, 2012

[13] MEDEIROS, A.S.L.; GOMES, G.M.; CARMO, M.T.; PAPA, F.O.; ALVARENGA, M.A. Cryopreservation of stallion sperm using different amides. Theriogenology, v.58, p.273-276, 2002.

[14] MORAES, C.N.; NEVES, J.P.; GONÇALVES, P.B.D.; OLIVEIRA, J.F.C.; SCHWEITZER, C.M. Criopreservação do sêmen ovino em Pellets com etileno glycol. Ciência Rural, v.28, n.2,p.287-292 1998.

[15] MOTA FILHO, A.C.; TELES, C.H.; JUCÁ, R.P.; CARDOSO, J.F.; UCHOA, D.C.; CAMPELLO, C.C.; SILVA, A.R.; SILVA, L.D. Dimethylformamide as a cryoprotectant for canine semen diluted and frozen in ACP-106C. Theriogenology v.76, n.7, p.1367-72, 2011.

[16] MOUSTACAS, V.S.; CRUZ, B.C.; VARAGO, F.C.; MIRANDA, D.A.; LAGE, P.G.; HENRY, M. Extenders containing dimethylformamide associated or not with glycerol are ineffective for ovine sperm cryopreservation. Reproduction in Domestic Animals, v.46, p.924 - 925, 2011.

[17] O'HARA, L., HANRAHAN, J.P., RICHARDSON, L., DONOVAN, A., FAIR, S., EVANS, A.C.O., LONERGAN, P. Effect of storage duration, storage temperature, and diluent on the viability and fertility of fresh ram sperm. Theriogenology, v.73, p.541-549, 2010.

[18] OKUDA, Y.; SEITA, Y.; HISAMATSU, S.; SONOKI, S.; SHINO, M.; MASAOKA, T.; INOMATA, T.; KAMIJO, S.I.; KASHIWAZAKI, N. Fertility of spermatozoa cryopreserved with 2% acetamide or glycerol through artificial insemination in the Japanese White Rabbit, Experimental Animals, v.56, p.29 - 34, 2007.

[19] SILVA, A.F.; COSTA, E.P.; OLIVEIRA, F.A.; TORRES, C.A.A.; HASS, G.T.S.; NASCIMENTO, V. A. Uso de dimetil-formamida associada ou não ao glicerol na criopreservacao de semen caprino. Revista Brasileira de Zootecnia, v.35, p.452 - 456, 2006.

[20] SQUIRES, E.L.; KEITH S.L.; GRAHAM, J.K. Evaluation of alternative cryoprotectants for preserving stallion spermatozoa. Theriogenology, v.62, n.6, p.1056-65, 2004.

[21] VIDAMENT, M.; DAIRE, J.M.; YVON, J.M.; DOLIGEZ, P.; BRUNEAU, B.; MAGISTRINI, M.; ECOT, P. Motility and fertility of stallion semen frozen with glycerol and/or dimethyl formamide. Theriogenology, v.58, p.1 - 3, 2002.

[22] ZIMMERMANN, M; SANTOS, T.E.; FIDELIS, A.A.G.; BLUME, H.; MONDADORI, R.G. Uso de dimetil-formamida e água de coco na criopreservação de sêmen canino. Bioscience Journal, v.23, n.1, p. 96-100, 2007.

Brasil

Brasil

Metil-formamida na criopreservação de sêmen ovino

Methyl-formamide in ram semen cryopreservation

Resumos

Datas de Publicação

Histórico