Parâmetros de qualidade físico-químicos e avaliação da atividade antioxidante de folhas de Plectranthus barbatus Andr. (Lamiaceae) submetidas a diferentes processos de secagem

Quality of the leaves of Plectranthus barbatus Andr. (Lamiaceae) dried in solar dryer and oven

RESUMO

O presente trabalho descreve a composição físico-química, a avaliação da atividade antioxidante pelo método de sequestro de radicais livres DPPH, determinação de flavonoides e de fenóis totais dos extratos etanol, acetona e aquoso de Plectranthus barbatus Andr. (Lamiaceae), desidratadas em secador solar e em estufa de circulação de ar a 60 ^oC. Os valores de atividade de água encontrados para as duas secagens foram inferiores ao mínimo necessário para o crescimento e produção de toxina de patógenos de importância alimentar. Os resultados das análises físico-químicas demonstraram que ambos os processos mostraram-se eficientes na desidratação de P. barbatus. Os resultados demonstraram que os extratos acetona (estufa) e etanol (estufa e secador solar) foram os que apresentaram maior conteúdo de fenóis totais. O extrato etanólico (estufa) apresentou maior quantidade de flavonoides e melhor potencial antioxidante (IC₅₀ = 75,71 ± 10,57 µg mL^-1).

Palavras-chave
Boldo; Coleus barbatus; atividade antioxidante; secagem

ABSTRACT

This paper describes the physicochemical composition, the evaluation of the antioxidant activity by free DPPH radicals using the scavenging method, the determination of flavonoids and total phenolic compounds of ethanol, acetone and aqueous extracts of the medicinal plant Plectranthus barbatus Andr. (Lamiaceae), dehydrated in solar dryer and circulation oven at 60 °C. Water activity rates for two drying methods were below the minimum necessary for growth and toxin production of important food pathogens. Physicochemical results showed that both processes were effective in the dehydration of P. barbatus. The results demonstrated that the acetone (over) and ethanol (over and solar dryer) extracts showed the highest content of total phenols. The ethanol extract (over) showed the highest amount of flavonoids and better antioxidant activity (75.71 ± 10.57 µg L^-1).

Keywords
Boldo; Coleus barbatus; antioxidant activity; drying

INTRODUÇÃO

A espécie Plectranthus barbatus Andrews pertence à família Lamiaceae (sin. Labiatae) popularmente conhecida como “falso boldo” ou “boldo brasileiro”. Possui um grande número de sinonímias: Coleus barbatus Benth, Plectranthus forskohlii Briq, Plectranthus forskalaei Willd, Plectranthus kilimandschari (Gűrke) H.L. Maass., Plectranthus grandis (Cramer) R.H. Willemse, Coleus kilimandschari Gűrke ex Engl, Coleus comosus A. Rich, Coleus coerulscens Gűrke e Coleus forskohlii Briq. (Pulliah, 2006). É utilizada na medicina popular para tratar distúrbios do sistema digestivo e nervoso, doenças hepáticas e dentárias (Lukhoba et al., 2006). Outros estudos reportaram sua atividade anti-inflamatória, antifúngica, antibacteriana (Kapewangolo et al., 2013; Matu & Van Staden, 2003), antioxidante, inibição de enzimas do HIV-1 (Kapewangolo et al., 2013; Maioli et al., 2010; Tamasiro et al., 1998), citotóxica (Costa & Nascimento, 2003), redução da gordura total do sangue (Badmaev et al., 2015), e no tratamento de asmas, bronquites, pneumonias e outras doenças respiratórias (Lukhoba et al., 2006; Yang et al., 2006). Seu estudo fitoquímico revelou a presença de diversos diterpenos (Albuquerque et al., 2007; Bhat et al., 1977; Kelecom, 1984; Kelecom et al., 1987; Tandon et al., 1977; Wang et al., 1973; Zelnik et al., 1977), além de derivados fenólicos, tais como nepetoidinas A e B (Grayer et al., 2003) e o ácido rosmarínico (Falé et al., 2009). Estudos mais recentes têm reportado seu uso como um ingrediente de alimentos funcionais e suplementos alimentares para perda e controle de peso, tendo a forskolina como principal componente (Henderson et al., 2005; Kamohara & Noparatanawong, 2013; Kamohara et al., 2015). A espécie faz parte da Relação Nacional de Plantas Medicinais de Interesse ao SUS (Renisus, 2015), constituída de espécies vegetais com potencial de avançar nas etapas da cadeia produtiva e de gerar produtos de interesse do Ministério da Saúde do Brasil.

Os antioxidantes podem ser definidos como substâncias capazes de retardar ou inibir a oxidação de substratos oxidáveis, podendo ser enzimático ou não enzimático, tais como que α-tocoferol (vitamina E), β-caroteno, ácido ascórbico (vitamina C) e os compostos fenólicos (Halliwell & Gutteridge, 2007). Quando ocorre aumento das espécies reativas de carbono, enxofre, nitrogênio e oxigênio produzidas pelo nosso organismo e/ou decréscimo da atividade antioxidante celular, o estresse oxidativo é gerado, podendo lesar diferentes moléculas. O estresse oxidativo está associado a inúmeras doenças, entre elas: diabetes, doença de Parkinson e de Alzheimer, esclerose múltipla, distrofia muscular, catarata e retinopatias, aterosclerose, infarto do miocárdio, cirrose hepática e vários tipos de câncer (Godon et al., 1998; Halliwell & Gutteridge, 2007). O consumo de antioxidantes naturais, como os compostos fenólicos presentes na maioria das frutas e plantas que inibem a formação de radicais livres, tem sido associado a uma menor incidência de doenças relacionadas com o estresse oxidativo (Droge, 2002). Além disso, a substituição dos antioxidantes sintéticos pelos naturais para retardar a peroxidação lipídica em alimentos tem sido investigada, visto que estudos em animais evidenciaram que a exposição aguda e prolongada aos antioxidantes sintéticos levou ao desenvolvimento de diversas doenças (Ito et al., 1982).

Diferentes tipos de solventes têm sido utilizados para extrair compostos com propriedades antioxidantes das plantas. Misturas aquosas de etanol, metanol e acetona são comuns (Sun & Ho, 2005). O tipo e a polaridade do solvente podem afetar a transferência de elétrons e de átomos de hidrogênio, que é aspecto-chave na medida do potencial antioxidante. A presença de compostos não antioxidantes nas soluções testadas também pode afetar os resultados (Pérez-Jiménez & Saura-Calixto, 2006).

A composição química das frutas e plantas depende de vários fatores, como solo, clima e processamento pós-colheita aos quais são submetidas. Neste último quesito, o que mais interfere no teor e na manutenção desta composição é a secagem (Corrêa Junior et al., 2006). A secagem retira a água livre presente nos tecidos vegetais, impedindo que ocorra degradação enzimática, mantendo a qualidade do material. Além disso, a redução da quantidade de água aumenta a quantidade de princípios ativos em relação à massa seca (Hii et al., 2012). As plantas medicinais são sensíveis ao processo de secagem e as temperaturas a que são submetidas podem causar alterações na quantidade e qualidade dos princípios ativos, porém no geral, temperaturas entre 40°C e 60°C são as mais indicadas independentes do método de secagem (Melo et al., 2004).

A utilização da energia solar para a secagem de alimentos constitui uma boa alternativa para a elaboração de alimentos com qualidade e baixo custo, além de ser uma fonte de energia ecologicamente correta (Patrocinio & Murakami Iha, 2010). O uso de secadores solares pode ser utilizado como uma forma de minimizar a presença de fontes contaminantes, podendo atingir a temperatura de 70ºC, suficiente para secar os alimentos e eliminar microrganismos patogênicos (Oetterer et al., 2006).

O presente trabalho teve como objetivo verificar a possível influência do método de secagem nas propriedades físico-químicas, atividade antioxidante, conteúdo de compostos fenólicos totais e flavonoides das folhas de P. barbatus, bem como a atuação do solvente extrator para as três últimas propriedades.

MATERIAL E MÉTODO

Coleta do material vegetal

As folhas de P. barbatus Andr. (“falso boldo” ou “boldo brasileiro”), pertencente à família Lamiaceae, foram coletadas em Londrina, Paraná, Brasil em Março de 2012. Uma exsicata está depositada sob o número UNIFIL-2426, no herbário do Centro Universitário Filadélfia (UniFil).

Secagem do material vegetal

As folhas foram secas em estufa de circulação de ar e secador solar, até a verificação de massa constante das amostras. Em estufa a temperatura de secagem foi 60ºC. Em secador solar, a temperatura interna variou de 36,6°C a 58,6ºC. Foi monitorada ainda, a temperatura externa ao secador e a umidade relativa do ar. A perda de massa das folhas de P. barbatus foi monitorada a cada 15 minutos.

Secador solar

O secador solar empregado neste estudo foi constituído por uma caixa de madeira com laminado de cor escura, por absorver mais calor, e uma grade feita com material de aço inox, devido à resistência a corrosão. A grade foi fixada ao centro da caixa, onde foram distribuídas as folhas de P. barbatus. Na parte superior do secador havia uma lamina de vidro móvel, que facilitava o manuseio das folhas e aprisionava o calor dentro do secador.

Determinação da atividade de água e propriedades físico-químicas

A atividade de água foi analisada, a 25 ºC, em aparelho AquaLab Dew Point Water Activity Meter 4TE. O teor de umidade e cinzas das amostras foi determinado conforme o método descrito pela AOAC (1998), e o teor de proteína bruta segundo o método Kjedahl utilizando o fator de correção igual a 6,25 (Instituto Adolfo Lutz, 2008). Os lipídios totais foram extraídos com uma mistura de clorofórmio e metanol (1:2 v/v) segundo Bligh & Dyer (1959). Os carboidratos foram calculados pela diferença: 100 – (% umidade + % cinzas + % proteína bruta + % lipídios totais). Todas as análises físico-químicas foram procedidas em triplicata.

Preparação dos extratos

As folhas secas de P. barbatus foram exaustivamente extraídas por maceração em etanol P.A. e acetona P.A. à temperatura ambiente até completo esgotamento. Após evaporação total do solvente em rota-evaporador, à temperatura de 40 ºC foram obtidos os extratos etanólico e acetona. Os extratos aquosos foram preparados, por infusão, usando-se 1,0 g das folhas secas em 100 mL de água destilada (equivalente a uma xícara de chá) a aproximadamente 100 ºC por 10 minutos, em recipiente coberto com vidro relógio. As amostras foram filtradas e estocadas sob refrigeração por até 24 horas. O tempo de infusão e a temperatura usada neste trabalho têm sido descrito por vários autores como condições eficientes para extrair compostos fenólicos de plantas (Katalinic et al., 2006; Lima et al., 2004; Sue et al., 2006).

Determinação do teor de fenólicos totais

O teor de fenólicos totais dos extratos etanólico, acetona e aquoso foi determinado pelo método espectrofotométrico (UV-VIS, Lambda 750, Perkin Elmer), utilizando o reagente Folin-Ciocalteu (Singleton & Rossi, 1965) e curva padrão de ácido gálico (y = 0,0119x + 0,0205). Os resultados foram expressos em mg equivalente de ácido gálico por grama do extrato e por grama da planta seca (mg EAG g^-1). Todas as determinações foram realizadas em triplicata.

Determinação do teor de flavonoides

O doseamento de flavonoides foi realizado segundo metodologia descrita por Peixoto Sobrinho et al. (2010) com adaptações. Foram preparadas soluções de concentração 1000 µg mL^-1 dos extratos orgânicos e 10000 µg mL^-1 dos extratos aquosos. Foram transferidos 1,0 mL destas soluções para balões volumétricos de 10 mL, ao qual foram acrescentados 0,24 mL de ácido acético glacial, 4,0 mL de solução aquosa de piridina a 20% e 1,0 mL do reagente de cloreto de alumínio em metanol (50 mg mL^-1), completando-se o volume com água destilada. Após 30 minutos as leituras foram realizadas a 420 nm em espectrofotômetro (UV-VIS, Lambda 750, Perkin Elmer). Antes da leitura de cada extrato, o aparelho foi zerado com solução contendo todos os reagentes menos a solução de cloreto de alumínio. Para a construção da curva de calibração, foi preparado uma solução metanólica de rutina a 0,5 mg mL^-1. Desta solução foram retiradas 6 alíquotas para balões volumétricos de 10 mL e adicionadas em cada balão as mesmas quantidades de ácido acético glacial, solução aquosa de piridina e cloreto de alumínio em metanol, completando-se o volume com água destilada. Após 30 minutos as leituras foram realizadas a 420 nm. Os resultados foram expressos em mg de rutina por grama de extrato e em porcentagem.

Determinação do potencial antioxidante

A capacidade de sequestro de radicais livres dos extratos etanólico, acetona e aquoso de P. barbatus foi determinada, utilizando o método da capacidade de sequestrar o radical livre 1,1-difenil-2-picril-hidrazila (DPPH^.), descrito por Brand-Williamns et al. (1995) com pequenas modificações. Foram preparadas várias concentrações dos extratos e do padrão BHT (butil hidroxitolueno) em metanol. Uma alíquota de 1,0 mL das amostras testadas foram misturadas com 2,0 mL de uma solução de 40 µg mL^-1 de DPPH^. em metanol. A mistura foi agitada e após 30 minutos de incubação, a absorbância foi determinada em espectrofotômetro (UV-VIS, Lambda 750, Perkin Elmer) a 515 nm. A atividade antioxidante foi expressa como porcentagem de inibição em relação ao controle (DPPH sem antioxidante) de acordo com a equação (Yen & Duh, 1994):

sequestro DPPH = % Inibição = [(A₀ – A)/A₀] x 100

A₀ = absorbância do DPPH sem antioxidante (solvente extrator + solução DPPH)

A = absorbância da amostra em DPPH após 30 minutos de reação

A determinação da IC₅₀, ou seja, a concentração da amostra ou padrão que causa 50% de inibição da concentração inicial de DPPH^. foi obtida por regressão linear dos pontos plotados graficamente (concentração versus porcentagem de inibição). Todas as determinações foram realizadas em triplicata.

Análise estatística

Os resultados apresentados neste estudo correspondem à média de três repetições ± desvio padrão da média. Foram considerados estatisticamente diferentes os resultados que apresentaram probabilidade de ocorrência da hipótese de nulidade menor que 5% (p<0.05) aplicando-se ANOVA, seguido de comparações múltiplas pelo teste de Tukey. As análises estatísticas foram realizadas utilizando-se o software Statistica versão 8.0.

RESULTADO E DISCUSSÃO

Na Figura 1 são apresentadas as curvas de secagem obtidas para P. barbatus submetido à secagem em estufa e em secador solar, verificando-se que ambos os processos apresentam dinâmicas de secagem semelhantes, no que diz respeito à perda significativa de massa logo no início do processo de secagem, tornando-se menos significativa com o tempo. O tempo de secagem foi determinado a partir do ponto que a perda de massa tornou-se praticamente constante, sendo que a secagem em estufa foi de 4,5 horas em uma temperatura constante de 60 ^oC, enquanto no secador solar as folhas permaneceram por 2 horas e a temperatura variou de 36,6 à 58,6 ºC.

FIGURA 1
Curvas de secagem para P. barbatus desidratado em estufa (60 ºC) e em secador solar (variação de temperatura).

Na Tabela 1 estão apresentados os dados de monitoramento da temperatura ambiente, umidade relativa do ar e de temperatura no interior do secador solar, durante o processo de secagem do boldo.

TABELA 1
Temperatura ambiente (TA), umidade relativa (UR) e temperatura interna do secador solar (TI) monitoradas as cada 15 minutos, durante o processo de secagem de P. barbatus em secador solar

Tempo (min)		TA (° C)		UR (%)		TI (° C)
0		31,3		28		36,6
15		33,5		18		40,3
30		33,1		17		43,8
45		33,4		16		46,6
60		32,7		16		53,5
75		32,0		16		54,9
90		32,0		16		55,0
105		31,5		16		58,6
120		30,2		17		58,4

Os resultados de atividade de água, apresentados na Tabela 2, revelam que houve diferenças significativas (p<0,05) entre os dois processos de secagem. A amostra submetida à secagem em estufa apresentou menor atividade de água que aquela submetida à secagem em secador solar. Os valores de atividade de água encontrados para P. barbatus, contudo, são inferiores ao mínimo necessário para o crescimento e produção de toxina de patógenos de importância alimentar. Segundo Beauchat (1981), o limite mínino de atividade de água para o crescimento dos micro-organismos é de 0,60 a_w enquanto, para a produção de toxinas, o limite é de 0,83 a_w.

TABELA 2
Resultados das análises de atividade de água de P. barbatus submetido a dois processos de secagem

Secagem		Atividade		Temperatura
		de água		(°C)
Estufa		0,324 ± 0,010b		25,03
Secador Solar		0,570 ± 0,022a		25,11

• Resultados expressos como média ± desvio padrão (n=3). Letras diferentes na mesma coluna indicam diferenças significativas (p<0,05) pelo teste de Tukey.

Nos resultados das análises físico-químicos realizadas para P. barbatus (Tabela 3), observaram-se diferenças significativas (p<0,05) entre as amostras submetidas aos dois processos de secagem, no que se refere ao teor de umidade, teor de lipídios totais e de carboidratos. O boldo desidratado em secador solar apresentou o maior percentual em umidade, possivelmente decorrente de uma menor eficiência no processo de desidratação, o que poderia ser melhorado deixando as folhas no secador por um período de tempo maior do que duas horas. O teor de lipídios foi superior para o boldo desidratado em secador solar, enquanto que o teor de carboidratos foi superior para o boldo desidratado em estufa. Os resultados demonstram que ambos os processos de secagem são eficientes na desidratação de P. barbatus quando analisadas suas propriedades físico-químicas.

TABELA 3
Resultados das análises físico-químicas de P. barbatus submetido a dois processos de secagem

Análise		Estufa (% m/m)		Secador Solar (% m/m)
Umidade		6,64 ± 0,12b		9,53 ± 0,15a
Cinzas		9,47 ± 0,33a		9,06 ± 0,08a
Proteínas		14,40 ± 2,35a		16,62 ± 0,62a
Lipídios		11,93 ± 1,68b		16,26 ± 1,38a
Carboidratos		57,56 ± 2,11a		48,53 ± 2,04b

• Resultados expressos como média ± desvio padrão (n=3). Letras iguais na mesma linha indicam que não há diferenças significativas (p<0,05) pelo teste de Tukey.

O teor de cinzas, que representam os minerais contidos nos alimentos, encontrado para P. barbatus foi superior ao reportado por Borges et al. (2012) para espécies da mesma família: Ocinum gratissimum - alfavaca (8,12%), Origanum vulgaris - orégano (6,36%) e Thymus vulgaris - tomilho (6,33%) e próximo ao valor máximo relatado para verduras, hortaliças e derivados na TACO (NEPA-UNICAMP, 2012), que é de 10,20% para as folhas de coentro desidratadas.

A identificação de espécies vegetais ricas em proteínas e incentivos de cultivo e consumo destas espécies podem contribuir para diminuir as deficiências nutricionais de populações de baixo poder aquisitivo, que têm acesso limitado a proteínas animais, além de fornecer alternativas nutricionais para a população em geral (Aletor & Adeogum, 1995). Os valores de proteínas encontrados para a espécie de boldo em estudo foram superiores aqueles reportados por Kinupp & Barros (2008) para as espécies da mesma família: Salvia guaranitica (6,9%) e Vitex megapotamica (2,07%) e similares aqueles reportados por Borges et al. (2012) para a alfavaca (17,37%), orégano (13,36%) e tomilho (15,54%), podendo esta ser considerada uma boa fonte de proteína vegetal, estando acima do valor médio relatado pela TACO (NEPA-UNICAMP, 2012), que é de 9,70%.

Os valores de lipídios encontrados neste trabalho (11,93% para boldo seco em estufa e 16,26% para boldo seco em secador solar) foram superiores aqueles relatados por Borges et al. (2012) para espécies da mesma família: alfavaca (2,80%), orégano (6,40%) e tomilho (9,30%).

Os valores de fenóis totais, flavonoides e atividade antioxidante, expresso em IC₅₀, para os extratos acetona, etanólico e aquoso estão apresentados na Tabela 4.

TABELA 4
Conteúdo de fenóis totais (FT), flavonoides (FLV) e atividade antioxidante (IC₅₀) de P. barbatus submetido a dois processos de secagem

Solvente extrator		Secagem		FT (mg EAG g-1)		FLV (mg rutina g-1)		FLV (%)		IC50 (µg mL-1)
Acetona		Estufa		1053,08 ± 22,32a		10,89 ± 1,49c		1,09		318,83 ± 21,02a
Etanol		Estufa		920,59 ± 46,17b		66,75 ± 0,63a		6,67		75,71 ± 10,57d
Aquoso		Estufa		737,12 ± 3,50c		1,14 ± 0,18d		0,11		198,14 ± 5,45b
Acetona		Secador Solar		1017,23 ± 6,72a		9,46 ± 1,41c		0,95		235,58 ± 25,29b
Etanol		Secador Solar		1030,95 ± 5,40a		26,05 ± 1,27b		2,60		133,44 ± 6,32c
Aquoso		Secador Solar		736,84 ± 1,75c		1,21 ± 0,26d		0,12		288,04 ± 15,63a
BHT*		-		-		-		-		20,89 ± 0,69

• Resultados expressos como média ± desvio padrão (n=3). Letras iguais na mesma coluna indicam que não há diferenças significativas (p<0,05) pelo teste de Tukey.
• ^*
  BHT - butil hidroxitolueno - antioxidante sintético.

Os polifenóis atuam como sequestradores de radicais livres e têm despertado grandes interesses por possuírem a propriedade de impedir ou minimizar o estresse oxidativo causados pelos radicais livres (Morais et al., 2009). Os resultados obtidos para a determinação de fenólicos totais pelo método Folin-Ciocalteu, para P. barbatus, demonstrou que o tipo de secagem interferiu na quantidade de fenóis totais do extrato etanólico, havendo uma perda de 10,70% de compostos fenólicos quando da secagem em estufa. Esta perda pode ser resultado da ligação dos compostos fenólicos com outros componentes, tais como as proteínas, ou devido a uma alteração na estrutura química causada pela secagem (Qu et al., 2010). Nossos resultados estão de acordo com Dixon & Paiva (1995), que sugerem que as plantas respondem a lesões, aumentando seu conteúdo de compostos fenólicos para reparar o tecido danificado. Isto pode ter sido causada pela incidência dos raios solares na secagem solar.

A solubilidade dos compostos fenólicos varia de acordo com a polaridade do solvente utilizado, o grau de polimerização dos fenólicos e suas interações com outros constituintes da planta (Naczk & Shahidi, 2004). Os diferentes solventes de extração apresentaram diferenças significativas (p<0,05) para a secagem em estufa, sendo a acetona o solvente mais eficiente na extração dos compostos fenólicos totais (1053,08 ± 22,32 mg EAG g^-1 extrato). A análise dos dados para a secagem em secador solar demonstrou que apenas o extrato aquoso (736,84 ± 1,75 mg EAG g^-1) apresentou extração significativamente menor do que os extratos etanólico (1030,95 ± 5,40 mg EAG g^-1) e de acetona (1017,23 ± 6,72 mg EAG g^-1), os quais apresentaram eficiência de extração significativamente semelhante. O extrato aquoso foi o menos eficiente na extração dos compostos fenólicos para ambas as secagens, não apresentando diferença significativa entre a estufa (737,12 ± 3,50 mg EAG g^-1) e o secador solar (736,84 ± 1,75 mg EAG g^-1).

O método espectrofotométrico utilizado para determinação de fenóis totais, não é um método específico, pois detecta todos os grupos fenólicos presentes no extrato, incluindo proteínas extraíveis, além de reduzir substâncias como o ácido ascórbico (Naczk & Shahidi, 2004). Levando-se em conta esta informação, determinou-se o teor de flavonoides presentes nos extratos preparados. A estrutura dos flavonoides garante a estes compostos alta atividade antioxidante (Rice-Evans et al., 1996). O teor de flavonoides apontou diferenças significativas (p<0,05) quando comparado os solventes extratores utilizados em um mesmo tipo de secagem, indicando o etanol como o solvente mais eficiente para ambos os sistemas de secagem (66,75 ± 0,63 mg g^-1 para secagem em estufa e 26,05 ± 1,27 mg g^-1 para secagem em secador solar). Observa-se ainda, que o extrato etanólico proveniente das folhas de boldo secas em estufa apresentou um percentual 61,0% maior de flavonoides quando comparado com o extrato etanólico proveniente das mesmas folhas secas em secador solar, sugerindo que o tipo de secagem aplicado no processo exerce grande influência no rendimento final dos compostos presentes nesta planta.

Os testes para verificar as propriedades antioxidantes nas plantas são importantes para descobrir novas e promissoras fontes de antioxidantes naturais, alimentos funcionais e/ou com propriedades farmacêuticas. O método para determinar o potencial antioxidante utilizado neste trabalho, foi o do sequestro do radical livre DPPH^.. O teste consiste na redução do radical DPPH^., púrpura, que, ao receber um elétron ou um radical hidrogênio muda sua coloração para amarelo, por tornar-se estável, e o desaparecimento da absorção pode ser avaliado pelo decréscimo da absorbância. Quanto menor o valor de IC₅₀ apresentado pela amostra, maior é sua atividade antioxidante, pois será necessária uma quantidade menor da planta para reduzir 50% do radical livre DPPH^..

A análise dos resultados de atividade antioxidante para P. barbatus, expressos em IC₅₀, demonstrou que os diferentes métodos de extração apresentaram diferenças significativas (p<0,05) para os dois tipos de secagem. O extrato etanólico apresentou melhor atividade antioxidante para os dois tipos de secagens, seja em estufa (75,71 ± 10,57 µg mL^-1) ou em secador solar (133,44 ± 6,32 µg mL^-1), demonstrando sua melhor capacidade de extrair componentes bioativos, merecendo estudos mais avançados nesse sentido.

O tipo de secagem forneceu diferentes resultados para a atividade antioxidante para todos os extratos, sendo que a secagem em estufa ofereceu melhores resultados, demonstrando a influência negativa da incidência solar na preservação dos compostos antioxidantes do boldo. Nossos resultados estão de acordo com diversos autores que relataram a influência da temperatura de secagem na atividade antioxidante, como por exemplo, os estudos das folhas de Musa acuminata (Sagrin & Chong, 2013) e do fruto Solanum muricatum Ait (Di Scala et al., 2011). Hossain et al. (2010) relataram que as folhas secas por congelamento de plantas da família Lamiaceae forneceram extratos com menor potencial antioxidante que àquelas secas à temperatura ambiente. Os valores mais elevados de antioxidantes podem estar associados com a indução de mecanismos antioxidantes nestas ervas em resposta ao stress no início do processo.

O valor de IC₅₀ do extrato etanólico (desidratado em estufa) foi apenas 3,6 vezes maior que a do antioxidante sintético BHT, demonstrando que o bom poder antioxidante desta planta pode ser explicado pela presença de substâncias capazes de inibir os radicais livres. Os flavonoides e outros compostos fenólicos presentes em plantas superiores são conhecidos por apresentarem potencial efeito antioxidante (Oh et al., 2001; Lima et al., 2006). Pode-se observar que o extrato que apresentou maior quantidade de flavonoides foi aquele que apresentou maior potencial antioxidante, sugerindo que a presença destes compostos pode influenciar diretamente nesta atividade. O valor de IC₅₀ de 75,71 ± 10,57 µg mL^-1 obtido neste trabalho foi cinco vezes maior que o reportado por Kapewangolo et al. (2013) e duas vezes maior que o reportado por Maioli et al. (2010) para a mesma espécie. Estas diferenças nos resultados de atividade antioxidante podem ser influenciadas por diversos fatores, tais como práticas de cultivo, origem geográfica, estágio de crescimento, condições de colheita e processamento pós-colheita (Kim et al., 2003).

Assim, conclui-se que para se obter o extrato com maior propriedade antioxidante dever-se-á levar em conta o tipo de solvente e o método de secagem das folhas do boldo. Assim, no presente estudo, o etanol apresentou-se como o solvente mais indicado para a extratabilidade de compostos antioxidantes e o método de desidratação mais indicado foi a secagem em estufa à temperatura constante de 60 ºC. Ambos os processos de secagem foram eficientes na desidratação quando analisadas suas propriedades físico-químicas e a atividade de água. Nossos estudos colaboram para desenvolver formulações do boldo que levem a uma melhor utilização da sua biomassa, sendo este o primeiro relato referente às suas propriedades físico-químicas.

AGRADECIMENTO

UTFPR – Câmpus Apucarana e Londrina.

REFERÊNCIA

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Datas de Publicação

• Publicação nesta coleção
  Jan-Mar 2016

Histórico

• Recebido
  06 Fev 2015
• Aceito
  07 Ago 2015